Name: 마우스 피질의 심층 경두개골 영상을 위한 헤드 마운트 광학 투명 두개골(HOTS) 창 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-06-05T15:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 44 s
Description: 배우세요 HOTS 창을 이용한 마우스 피질 심층 투광 영상법을. 두단계 투명화 용액으로 800µm 깊이까지 신경 구조와 기능을 실시간 관찰할 수 있습니다.

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	<li>Lee, J., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Longitudinal+intravital+imaging+of+cerebral+microinfarction+reveals+a+dynamic+astrocyte+reaction+leading+to+glial+scar+formation.">Longitudinal intravital imaging of cerebral microinfarction reveals a dynamic astrocyte reaction leading to glial scar formation.</a> Glia. 70 (5), 975-988 (2022).</li><li>Hierro-Bujalance, C., Bacskai, B. J., Garcia-Alloza, M. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+imaging+of+microglia+with+multiphoton+microscopy.">In vivo imaging of microglia with multiphoton microscopy.</a> Front Aging Neurosci. 10, 218 (2018).</li><li>Fan, J. L., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-speed+volumetric+two-photon+fluorescence+imaging+of+neurovascular+dynamics.">High-speed volumetric two-photon fluorescence imaging of neurovascular dynamics.</a> Nat Commun. 11 (1), 6020 (2020).</li><li>Fan, X., Zheng, W., Singh, D. J. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Light+scattering+and+surface+plasmons+on+small+spherical+particles.">Light scattering and surface plasmons on small spherical particles.</a> Light Sci Appl. 3 (6), e179 (2014).</li><li>Kneipp, M., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+the+murine+skull+in+optoacoustic+brain+microscopy.">Effects of the murine skull in optoacoustic brain microscopy.</a> J Biophotonics. 9 (1-2), 117-123 (2016).</li><li>Holtmaat, A., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long-term,+high-resolution+imaging+in+the+mouse+neocortex+through+a+chronic+cranial+window.">Long-term, high-resolution imaging in the mouse neocortex through a chronic cranial window.</a> Nat Protoc. 4 (8), 1128-1144 (2009).</li><li>Drew, P. J., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+optical+access+through+a+polished+and+reinforced+thinned+skull.">Chronic optical access through a polished and reinforced thinned skull.</a> Nat Methods. 7 (12), 981-984 (2010).</li><li>Yang, G., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thinned-skull+cranial+window+technique+for+long-term+imaging+of+the+cortex+in+live+mice.">Thinned-skull cranial window technique for long-term imaging of the cortex in live mice.</a> Nat Protoc. 5 (2), 201-208 (2010).</li><li>Xu, H. T., Pan, F., Yang, G., Gan, W. B. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Choice+of+cranial+window+type+for+in+vivo+imaging+affects+dendritic+spine+turnover+in+the+cortex.">Choice of cranial window type for in vivo imaging affects dendritic spine turnover in the cortex.</a> Nat Neurosci. 10 (5), 549-551 (2007).</li><li>Roth, T. L., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transcranial+amelioration+of+inflammation+and+cell+death+after+brain+injury.">Transcranial amelioration of inflammation and cell death after brain injury.</a> Nature. 505 (7482), 223-228 (2014).</li><li>Dorand, R. D., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+intravital+thinned+skull+and+cranial+window+approaches+to+study+CNS+immunobiology+in+the+mouse+cortex.">Comparison of intravital thinned skull and cranial window approaches to study CNS immunobiology in the mouse cortex.</a> Intravital. 3 (2), e29728 (2014).</li><li>Zhang, C., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+large,+switchable+optical+clearing+skull+window+for+cerebrovascular+imaging.">A large, switchable optical clearing skull window for cerebrovascular imaging.</a> Theranostics. 8 (10), 2696-2708 (2018).</li><li>Zhao, Y. J., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Skull+optical+clearing+window+for+in+vivo+imaging+of+the+mouse+cortex+at+synaptic+resolution.">Skull optical clearing window for in vivo imaging of the mouse cortex at synaptic resolution.</a> Light Sci Appl. 7, 17153 (2018).</li><li>Li, D. Y., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+through-intact-skull+(TIS)+chronic+window+technique+for+cortical+structure+and+function+observation+in+mice.">A through-intact-skull (TIS) chronic window technique for cortical structure and function observation in mice.</a> eLight. 2 (1), 15 (2022).</li><li>Liu, X., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=SeeThrough:+a+rationally+designed+skull+clearing+technique+for+in+vivo+brain+imaging.">SeeThrough: a rationally designed skull clearing technique for in vivo brain imaging.</a> Nat Commun. 16 (1), 7584 (2025).</li><li>Liu, L. N., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Structural+and+functional+mouse+brain+imaging+facilitated+by+a+head-mounted+optically+transparent+skull+(HOTS)+window+allowing+offline+clearing.">Structural and functional mouse brain imaging facilitated by a head-mounted optically transparent skull (HOTS) window allowing offline clearing.</a> Optica. 12 (12), 1946-1960 (2025).</li><li>Li, H., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multidimensional+dynamic+optical+imaging+unveils+anesthetic-driven+hemispheric+lateralization+in+blood-brain+barrier+homeostasis.">Multidimensional dynamic optical imaging unveils anesthetic-driven hemispheric lateralization in blood-brain barrier homeostasis.</a> Sci Adv. 11 (49), eady6275 (2025).</li><li>Qin, W., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Amphiphilic+hemicyanine+molecular+probes+crossing+the+blood-brain+barrier+for+intracranial+optical+imaging+of+glioblastoma.">Amphiphilic hemicyanine molecular probes crossing the blood-brain barrier for intracranial optical imaging of glioblastoma.</a> Sci Adv. 11 (3), eadq5816 (2025).</li><li>Pang, W., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Direct+monitoring+of+whole-brain+electrodynamics+via+high-spatiotemporal-resolution+photoacoustics+with+voltage-sensitive+dye.">Direct monitoring of whole-brain electrodynamics via high-spatiotemporal-resolution photoacoustics with voltage-sensitive dye.</a> Laser Photonics Rev. 18 (10), 2400165 (2024).</li><li>Paoletti, P., Ellis-Davies, G. C. R., Mourot, A. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optical+control+of+neuronal+ion+channels+and+receptors.">Optical control of neuronal ion channels and receptors.</a> Nat Rev Neurosci. 20 (9), 514-532 (2019).</li><li>Deisseroth, K. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optogenetics:+10+years+of+microbial+opsins+in+neuroscience.">Optogenetics: 10 years of microbial opsins in neuroscience.</a> Nat Neurosci. 18 (9), 1213-1225 (2015).</li></ol>

<table><tbody><tr><td>1mL 일회용 피펫</td><td>베이징 바이오탑 및 nbsp; 과학 &nbsp; & 기술&nbsp; 주식회사</td><td>해당 없음</td><td></td></tr><tr><td>덴탈 시멘트</td><td>상하이 롱샹 치과재료 유한회사.</td><td>해당 없음</td><td></td></tr><tr><td>D-만노스</td><td>맥클린</td><td>D813082</td><td></td></tr><tr><td>EDTA</td><td>알라딘</td><td>엘 16428</td><td></td></tr><tr><td>이소플루란</td><td>후륜구동</td><td>해당 없음</td><td></td></tr><tr><td>퀵-캐스트</td><td>WPI</td><td>해당 없음</td><td>생체 적합성 있는 실란트</td></tr><tr><td>나오</td><td>맥클린</td><td>S832169</td><td></td></tr><tr><td>자가 경화&nbsp; 그리고 nbsp; 그리고 nbsp; 그리고 nbsp; 치과&nbsp; 그리고 nbsp; 그리고 nbsp; 그리고 nbsp; 그리고 nbsp; 부드러운 라이너 재질</td><td>양마후 바이오테크놀로지(헤비) 유한회사.</td><td>해당 없음</td><td></td></tr><tr><td>펜토바르비탈 나트륨</td><td>바이오파이크</td><td>해당 없음</td><td></td></tr><tr><td>입체 이동 장치</td><td>후륜구동</td><td>해당 없음</td><td></td></tr><tr><td>멸균 일회용 주사기</td><td>미난크</td><td>해당 없음</td><td>1 mL; 26G 바늘</td></tr><tr><td>설폴란</td><td>맥클린</td><td>S817950</td><td></td></tr><tr><td>Thy1-GFP-M 마우스</td><td></td><td>해당 없음</td><td>제공됨; 양잔 교수 작성</td></tr><tr><td>Thyl-GCaMP6s&nbsp; 쥐들</td><td>잭슨 연구소</td><td></td><td></td></tr><tr><td>트윈 20세</td><td>시그마-베텍</td><td>V900548</td><td></td></tr><tr><td>수중 침수 목표 &nbsp;</td><td>니콘</td><td>N25X-APO-MP</td><td>25&times;/NA 1.1 목표&nbsp;</td></tr><tr><td>수중 침수 목표 &nbsp;</td><td>니콘</td><td>N16XLWD-PF</td><td>16&times;/NA 0.8 objective&nbsp;</td></tr></tbody></table>

마우스 피질의 심층 경두개골 영상을 위한 헤드 마운트 광학 투명 두개골(hots) 창

A Head-Mounted Optically Transparent Skull (HOTS) Window For Deep Transcranial Imaging of the Mouse Cortex

마우스 피질의 심층 경두개골 영상을 위한 헤드 마운트 광학 투명 두개골(HOTS) 창

High-resolution two-photon imaging of the adult mouse cerebral cortex is severely limited by light scattering from the skull, which attenuates signals and ...

본 연구는 비침습적 신피질 영상화를 위한 투명 스캔 방법을 개발하여, 생체 내(in vivo)에서 뇌 구조와 기능을 장기간 시각화할 수 있도록 합니다. 기존의 두개골 영상 기법은 흔히 침습적이며 구속된 동물로 제한되는 경우가 많습니다. 본 프로토콜은 자유롭게 움직이는 마우스의 투명 두개골 영상화를 가능하게 하여, 투명도를 개선하고 관찰 시간을 연장합니다.먼저, 제조업체의 지침에 따라 치과용 시멘트를 준비합니다. 마취된 마우스의 노출된 두개골 표면과 주변 조직에 시멘트를 얇게 도포하여 보호하되, 투명창(clearing window)을 만들 지정 구역은 도포하지 않고 남겨둡니다. 치과용 시멘트를 사용하여 작은 티타늄 헤드 플레이트를 두개골에 고정합니다.치과용 시멘트가 약 5분 동안 경화되면, 투명 창 영역을 제외한 부분에 자가 경화형 치과용 소프트 라이너를 얇게 덮어 두개골 전체에 연속적인 밀봉 층을 형성합니다. 그런 다음, 계획된 투명 창 가장자리를 따라 자가 경화형 치과용 소프트 라이너 재료를 매끄럽게 성형하여 캡을 위한 평평한 밀봉 표면을 만듭니다. 일회용 플라스틱 피펫의 머리 부분을 잘라 윗부분은 막혀 있고 아랫부분은 열려 있는 작은 원통형 캡을 만듭니다. 이 캡을 지정된 투명화 영역 위에 놓고 소프트 라이너 재료 속으로 가볍게 누릅니다. 캡 하단 주변에 소프트 라이너 재료를 추가로 도포하여 캡을 고정합니다. 이때 캡과 두개골 사이의 접합부가 완전히 밀봉되었는지 확인하십시오. 26-gauge 바늘이 장착된 1-milliliter 주사기를 사용하여 캡 벽에 하나 이상의 작은 구멍을 뚫어 투명화 용액을 주입하고 회수할 수 있는 포트를 만듭니다. 소프트 라이너 재료가 완전히 경화되도록 두고, 인터페이스에 눈에 보이는 틈이 없이 캡이 단단히 부착되었는지 확인합니다. 그 후, 마우스를 정위 고정 장치(stereotactic frame)에서 분리하고 회복하도록 둡니다.마우스를 짧게 마취한 후, 가볍게 고정하고 손으로 머리 장착형 캡을 안정화합니다. 26게이지 바늘이 달린 1밀리리터 시린지를 사용하여, 약 1밀리리터의 S1을 머리 장착형 캡 내에 천천히 주입합니다. 마우스를 홈 케이지로 옮기고, S1이 두 시간 동안 두개골에 작용하도록 둡니다. 짧은 마취 후, 캡에서 S1을 흡입하여 제거하고 새로운 S1로 다시 채운 다음, 마우스를 케이지로 돌려보내 S1이 다시 두 시간 동안 작용하도록 합니다. 이 절차를 한 번 더 반

a-head-mounted-optically-transparent-skull-hots-window-for-deep

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연구

JoVE Journal

Neuroscience

신경과학

이 비디오 및 보충 자료에서 우리는 만성에 대한 프로토콜을...

Thinned - 해골 준비를 사용하여 마우스 시각 피질의 만성 이미징

우리는 mm에 걸쳐하고 뇌의 염증없이 몇 달 동안 안정 마우스 두개골에 이미지 창을 형성하는 방법을 제시한다. 이 방법은 잘 두 광자 현미경을 사용하여 혈류, 세포 역학 및 세포 / 혈관 구조의 종방향 연구에 가장 적합합니다.

마우스 뇌의 장기 이미징을위한 세련된와 철근 Thinned-해골 창

이 비디오는 뇌의 다른 영역에 대한 안정적인 광학 접근을 위해 마우스 모델에 두개골 창을 이식하는 수술 절차를 보여줍니다.

마우스 모델에 두개골 이미징 창 이식: 쥐 뇌 영역에 대한 안정적인 광학적 접근을 위해 유리 기반 커버슬립을 이식하는 수술 절차

이 비디오는 형질전환 마우스의 광학 창을 통해 뇌의 신경 활동을 기록하는 것을 보여줍니다. 쥐는 신경 활동을 감지할 수 있는 형광 단백질을 발현합니다. 두개골의 작은 부분을 조심스럽게 제거하여 광학 창을 설치하고, 두개골을 검은색 시멘트로 덮어 이미징 전에 빛을 차단합니다.

신경 활동을 이미지화하기 위해 형질전환 마우스의 뇌에 광학 창 설치

우리는을위한 마우스 모델에서 얇게 - 두개골 대뇌 피질의 창 (TSCW)를 생성하는 방법을...

에 얇게 - 두개골 두피 창 기술<em&gt; 생체 내</em&gt; 광 결맞음 단층 촬영 영상

이 원고는 세로 두 광자 현미경을 사용하여 생체 내에서 아밀로이드 플라크 축적 동안 cerebrovasculature의 리모델링을 추적하는 절차를 설명합니다. 얇아진 두개골 제제는 알츠하이머 질환의 마우스 모델에서 뇌 손상의 진행을 평가하기 위해, 형광 염료의 시각화를 가능하게한다.

종<em&gt; 생체</em&gt;은 Cerebrovasculature의 이미징 : CNS 질환에 관련성

양국 주 somatosensory corticies (S1) Thy1에서 위의 듀얼 광 창을 통해 신경 활동을 측정 하기 위한 실험 절차 설명-GCaMP6s 유전자 변형 쥐 2 광자 (2 P) 현미경에서 vivo에서를 사용 하 여.

Thy1를 사용 하 여 기본 Somatosensory 피 질에서 신경 활동을 이미징-GCaMP6s 유전자 변형 쥐

여기에 제시된 것은 깨어 있고 머리가 억제 된 마우스에서 뇌 세포의 종방향 이미징을위한 만성 두개골 창을 이식하기위한 프로토콜입니다.

깨어있는 마우스 에서 반복되는 생체 내 이미징을위한 두개골 창 이식

여기에서 우리는 깨어 있는 마우스에서 소교세포 역학과 신경 활동의 동시 이미징을 위해 아데노 관련 바이러스 주입과 두개골 창 이식을 결합한 프로토콜을 설명합니다.

깨어 있는 생쥐의 소교세포 역학 및 신경 활동의 동시 이미징

본 프로토콜은 식품 랩, 투명 실리콘 및 커버 유리를 사용하여 큰(6 x 3 mm2) 두개골 창을 만드는 방법을 설명합니다. 이 두개골 창은 동일한 마우스에서 생체 내 광시야 및 2광자 칼슘 이미징 실험을 허용합니다.

생체 내 큰 두개골 창을 사용한 마우스의 광시야 및 2광자 칼슘 이미징

배우세요 HOTS 창을 이용한 마우스 피질 심층 투광 영상법을. 두단계 투명화 용액으로 800µm 깊이까지 신경 구조와 기능을 실시간 관찰할 수 있습니다.

마우스 피질의 심층 경두개골 영상을 위한 헤드 마운트 광학 투명 두개골(HOTS) 창

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