Name: 카운팅 및 교양 세포의 생존을 결정 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2008-06-23T15:41:00.000+00:00
Duration: 5 min 47 s
Description: 학습하세요 헤마사이토미터를 이용한 세포 계수 및 트리판 블루를 활용한 생존율 평가 방법을. 이 기술은 세포 배양의 표준화와 정량 실험에 필수적인 세포생물학 연구에 활용됩니다.

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이 실험 방법에 대한 전체 텍스트 프로토콜에서 사용할 수 있습니다 <a href="http://www.mrw.interscience.wiley.com/emrw/9780471143031/cp/cpcb/article/cb0101/current/abstract" target="_blank">셀 생물학의 현재 프로토콜</a> .

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카운팅 및 교양 세포의 생존을 결정

Counting and Determining the Viability of Cultured Cells

문화 세포의 수를 결정하는 것은 문화 조건을 표준화하고 정확한 quantitation 실험을 수행 중요합니다. hemacytometer가 카운팅 챔버로 설계된 중앙 지역에있는 두꺼운 유리 슬라이드입니다. 세포 현탁액이 정의된 영역에 적용 세포 밀도가 계산 수 있도록 계산됩니다.

문화 세포의 수를 결정하는 것은 문화 조건을 표준화하고 정확한 quantitation 실험을 수행 중요합니다. 이 비디오에서는, 우리는 세포가 hemacytometer를 사용하여 계산하는 방법을 보여줍니다.

배양 세포 수를 결정하는 것은 배양 조건의 표준화와 정확한 정량 실험을 수행하는 데 있어 중요합니다. A ...

세포 수와 배양 상태를 결정하는 것은 배양 조건의 표준화 및 정확한 세포 수가 필요한 실험을 수행할 때 중요합니다. 여기서는 헤모사이토미터(hemocytometer)를 사용하여 세포 수를 세고, 부유액에 존재하는 세포 농도를 계산하는 방법을 보여드리겠습니다. 또한, Trypan Blue 생존능 분석법(Viability Assay)을 통해 배양액 내에 존재하는 생존 세포 수를 결정하는 방법도 함께 보여드리겠습니다.안녕하세요, 저는 동부 테네시의 Molecular Pathology Laboratories Network 내 Dr.LAN's Laboratory에 있는 Ricky입니다. 오늘은 현탁액 내의 세포 수를 측정하고 세포 생존율을 결정하는 방법을 보여드리겠습니다. 세포 계수를 위해 헤모사이토미터(hemocytometer)를 준비하려면, 먼저 기기의 표면과 함께 제공되는 커버슬립을 70% ethanol로 세척해야 합니다.커버 슬립과 슬라이드는 깨끗하고 건조해야 하며, 보풀, 지문 및 물자국이 없어야 합니다. 다음으로, 혈구계수기(hemo cytometer)의 가장자리를 수돗물로 살짝 적신 후 그 위에 커버 슬립을 눌러 덮습니다. 커버 슬립은 은색 계수 영역 위에 고르게 놓여야 합니다.이제 세포 수를 측정하기 위한 세포 현탁액을 준비하겠습니다. 먼저, 세포가 단층 배양으로 성장한 경우, 비디오의 세포 부착 과정에서 보여준 것과 같이 트립신을 사용하여 플레이트 표면에서 세포를 떼어냅니다. 세포가 플레이트에서 분리되면, 균일한 현탁액을 얻기 위해 필요에 따라 희석합니다.헤모사이토미터를 사용할 때는 현탁액 내의 응집된 세포 덩어리를 반드시 분산시켜야 합니다. 1mm²당 최대 20~50개의 세포 수가 권장됩니다. 세포 시료를 헤모사이토미터에 로딩할 준비가 되면, 마이크로피펫을 사용하여 세포 현탁액을 헤모사이토미터 계수실의 가장자리로 옮기십시오.피펫 팁을 커버슬립 아래에 대고 현탁액 한 방울을 분주합니다. 모세관 현상에 의해 현탁액이 커버슬립 아래로 빨려 들어갑니다. 첫 번째 챔버를 채운 후, 두 번째 계수 챔버를 채우면 세포 계수를 시작할 준비가 완료됩니다.세포가 가라앉을 때까지 몇 분 동안 기다립니다. 세포가 가라앉은 후 과잉 액체를 닦아내면 도움이 됩니다. 현미경의 100배 배율로 슬라이드를 관찰할 수 있습니다.세 개의 평행선으로 둘러싸인 그리드의 커다란 중앙 영역이 보여야 합니다. 중앙 영역 내의 세분화된 구역들 또

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연구

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Biology

생물학

가능한 세포의 정확한 수를 지식은 많은 조직 문화 조작이 필요합니다. 이 프로토콜은 살고 죽은 세포 사이의 차별과 hemacytometer를 사용하여 세포를 계량하는 방법에 대해 설명합니다. 그것이 인간의 신경 줄기 / 전구체 세포 (hNSPCs)를 계산 설명하지만, 그것은 다른 세포 유형에 사용할 수 있습니다.

인간 신경 줄기 세포를 계산

샙터 셀 카운터, 세포를 카운트 세포 직경과 볼륨을 모니터링 한 문화에서 다음 세포 인구의 건강과 품질을 검사하는 데 사용하는 데 사용할 수있는 휴대용 자동 장치입니다.

샙터 셀 카운터를 사용하여 세포 배양 동안 휴대폰 번호를 결정

생식 가능성을 평가하기위한 clonogenic 분석의 응용은 이상의 50 년 동안 설립되었습니다. 여기 자기편 세포와 clonogenic 분석을 수행하기위한 일반적인 절차를 보여줍니다.

Clonogenic 분석 : 자기편 셀

Moxi Z 초소형 자동 세포 계수기는 특허 박막 센서 기술과 사이징을 수행하는 독점적인 소프트웨어 알고리즘과 입자의 넓은 크기의 범위를 계산뿐만 아니라 monodisperse의 전반적인 건강을 결정하는 보습 바로 앞에 달린 풀베는 날 원리를 결합한 소설 악기 포유 동물 세포 배양. 이 프로토콜은 세포 배양의 건강을 계산하고 평가하는이 악기의 사용을 설명합니다.

Moxi Z 미니 자동 셀 카운터를 사용하여 포유류 세포 계산, 세포 크기와 세포 건강의 결정

치료 화합물은 종종 첫 번째 생존 분석과 시험 관내에서 검사합니다. 인간의 관찰자에 의해 블라인드 세포 수는 세포 수의 작은 변화에 매우 민감 할 수 있지만 기능을 평가하지 않습니다. 컴퓨터 생존 분석, 여기에 설명 된대로 객관적인 구조와 기능을 모두 평가할 수 있습니다.

문화의 세포에 대한 생존 분석 실험

이 프로토콜은 유방암 세포주에서 세포 증식을 분석하기 위한 세 가지 다른 방법의 사용을 설명합니다. 여기에는 기존 세포 계수, 발광 기반 세포 생존율 및 세포 이미저 사용을 통한 세포 계수의 사용이 포함됩니다. 각각은 세포 증식의 재현 가능한 측정에 이점을 제공합니다.

유방암 세포주에서 세포 증식을 결정하기위한 세 가지 방법 비교

이 논문은 두 개의 새로운 오픈 소스 ImageJ 플러그인인 Cell Concentration Calculator 및 Migration Assay Counter를 통해 혈구계 및 이동/침입 현미경 사진의 정량화에 대해 설명합니다.  또한 이미지 획득 및 보정 프로토콜에 대해 설명하고 플러그인의 입력 요구 사항에 대해 자세히 설명합니다.

ImageJ에 플러그인을 사용하여 셀 카운팅 절차의 자동화 된 정량 및 분석

배양 된 세포에 화합물 세트의 잠재적 인 세포 독성을 평가하는 것이 종종 필요합니다. 여기서, 우리는 96 웰 형식으로 독성 화합물을 안정적으로 선별하는 전략을 설명합니다.

낮은 중간 처리량에서 배양 포유류 세포에서 세포 성장 및 생존에 영향을 미치는 화합물을 식별하는 전략

이 프로토콜은 광독립영양 설탕 분비 시아노박테리아 및 종속영양 효모를 포함한 공동 배양의 설정 및 정량적 모니터링을 위한 포괄적인 지침을 제공합니다.

Assembly and Quantification of Co-Cultures Combining Heterotrophic Yeast with Phototrophic Sugar-Secreting Cyanobacteria(종속영양 효모와 광영양성 설탕 분비 시아노박테리아를 결합한 공동 배양의 조립 및 정량화)

여기에서는 효모 샘플에서 스트레스 후 생존을 정량화하기 위한 프로토콜을 제시합니다. 이 분석은 원형질막 무결성을 정량화하기 위해 SYTO 9와 요오드화 프로피듐(PI)이라는 두 가지 형광 염료를 사용합니다. 유세포 분석을 사용하여 산화 후 스트레스 샘플에 대한 살아있는 세포, 죽은 세포 및 손상된 세포 분획에 대한 정량적이고 재현 가능한 추정치를 제공합니다.

효모 세포의 스트레스 후 생존을 정량화하기 위한 유세포 분석법과 결합된 최적화된 LIVE/DEAD 분석

학습하세요 헤마사이토미터를 이용한 세포 계수 및 트리판 블루를 활용한 생존율 평가 방법을. 이 기술은 세포 배양의 표준화와 정량 실험에 필수적인 세포생물학 연구에 활용됩니다.

카운팅 및 교양 세포의 생존을 결정

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