Name: , 동결 해동 및 운송을위한 포장 셀 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2008-07-02T15:30:00.000+00:00
Duration: 7 min 32 s
Description: 배우세요 포유류 세포의 동결 및 해동 기술을 세포 생물학 연구를 위해. 단층 및 현탁 세포를 액체 질소에 저장하고 복원하는 실용적인 방법을 익혀 실험의 재현성을 높이세요.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

이 실험 방법에 대한 전체 텍스트 프로토콜에서 사용할 수 있습니다 <a class="jove_content" href="http://www.mrw.interscience.wiley.com/emrw/9780471143031/cp/cpcb/article/cb0101/current/abstract">셀 생물학의 현재 프로토콜.</a>

저자들은 공개할 사항이 없습니다.

, 동결 해동 및 운송을위한 포장 셀

Freezing, Thawing, and Packaging Cells for Transport

교양 포유 동물 세포는 세포 생물학 연구에서 광범위하게 사용됩니다. 이것은 구조, 기능, 행동, 문화에있는 세포의 생물을 보존하기 위해서는 특별한 기술의 번호를 필요로합니다. 이 동영상은 세포 및 냉동 주식을 복구할을 동결하고 저장하는 데 필요한 기본 기술을 설명합니다.

교양 포유 동물 세포는 세포 생물학 연구에서 광범위하게 사용됩니다. 이 동영상은 세포 및 냉동 주식을 복구할을 동결하고 저장하는 데 필요한 기본 기술을 설명합니다.

배양된 포유류 세포는 세포 생물학 연구에서 광범위하게 사용됩니다. 이를 보존하기 위해서는 여러 가지 특수한 기술이 필요합니다.

세포 배양은 매우 다양한 연구 및 진단 응용 분야에서 활용됩니다. 세포를 보존하고, 노화를 방지하며, 오염 위험을 줄이고, 유전적 드리프트의 영향을 최소화하기 위해 향후 작업을 위해 세포주를 저장하는 것이 바람직할 때가 있습니다. 세포주는 장기 보관을 위해 냉동될 수 있습니다.이 영상에서는 단층 및 부유 배양으로 성장시킨 세포를 동결하는 방법과 다시 성장시키기 위해 해동하는 방법을 보여드립니다. 안녕하세요, 저는 이스트 테네시의 Molecular Pathology Laboratories Network 내 Dr.LAN 실험실의 Ricky입니다. 오늘은 장기 보관을 위해 세포를 동결하는 방법과 액체 질소에서 세포를 해동하는 방법을 보여드리겠습니다.인체 부착 세포를 동결하려면, 우선 세포를 패키징할 때와 마찬가지로 플레이트에서 떼어내는 것부터 시작합니다. 동결 보존을 위해서는 세포가 대수 성장기(log phase)에 있을 때 사용하는 것이 가장 좋다는 점에 유의하십시오. 세포가 분리되고 혈청 또는 혈청 함유 배지를 첨가하여 트립신 반응을 중단시킨 후, 세포 현탁액을 멸균된 원심 분리 튜브로 옮기고 2mL를 추가합니다.동일한 기원의 동일한 계대 배양에서 얻은 3개 이상의 디쉬에 담긴 혈청 포함 완전 배지 내 세포들을 하나의 튜브에 합칠 수 있습니다. 상온에서 300 내지 350 Gs로 5분 동안 세포를 원심분리합니다. 원심분리 후, 상층액을 제거하고 펠렛을 4 °C의 10 mL에 재부유합니다.완전 배지에 4°C의 동결 배지를 동일한 부피로 첨가하고, 세포를 충분히 혼합한 후 튜브를 얼음에 박아 세포 수를 측정합니다. 헤모사이토미터를 사용하여, 거의 confluence 상태에 도달한 25 cm² 플라스크의 세포를 동결하기 위해 최종 세포 농도가 mL당 100만 개 또는 1,000만 개가 되도록 동결 배지로 현탁액을 더 희석합니다. 약 3 mL의 동결 배지에 다시 현탁하고, 세포 현탁액 1 mL씩을 라벨이 부착된 2 mL 크라이오 바이알에 분주합니다.바이알의 캡을 확실히 조여주십시오. 바이알을 -80°C 냉동고에 1시간에서 하룻밤 동안 보관한 후, 액체 질소 저장 냉동고로 옮깁니다. 부유 배양 세포를 동결하는 원리는 단층 배양 세포를 동결하는 것과 유사합니다.주요 차이점은 부유 배양의 경우 먼저 트립신 처리(trypsinization)를 할 필요가 없다는 점입니다. 세포 현탁액을 원심분리 튜브로 옮긴 후 실온에서 300~

freezing-thawing-and-packaging-cells-for-transport

Research

연구

JoVE Journal

Biology

생물학

여기 우리 연구소 색채 인간의 배아 줄기 세포 라인을 멈추 방법을 보여줍니다.

냉동 인간 ES 세포

제임스 톰슨 외 문화에 hES을 분리하고 성장 1998 년 기술을 개발 때문에, 나중에 사용하기 위해 및 냉동 주식에서 세포를 해동 및 확대 냉동 세포는 일상 hES 세포 배양에서 수행한 중요한 절차가있다. hES 세포는 동결 융해의 스트레스에 민감하고 있으므로 특별한주의가 있어야합니다. 여기 우리는 신속하게, 액체 질소 주식에서 hES 세포를 해동 마우스 배아 피더 세포를 도금하고, 천천히 장기 저장을 위해 그들을 오해해서 적절한 방법을 보여줍니다.

인간 배아 줄기 세포를 동결 융해

가까운 원시 상태에서 세균 세포의 ultrastructure 연구를 전자 cryotomography (요법)를 사용하는 방법을 우리는 "macromolecular"(~ 4 NM) 해상도, 여기를 보여줍니다.

세균성 세포의 전자 Cryotomography

마우스 배아의 에틸렌 글리콜 기반 vitrification 방법이 설명되어 있습니다. 그것은 단순하고 낮은 배아 독성의 다른 방법에 유리하고, 따라서 근친과 유전자 - 수정된 생쥐를 포함하여 마우스의 여러 변종에 광범위하게 적용하실 수 있습니다.

에틸렌 글리콜 기반 Vitrification에 의한 마우스 태아의 Cryopreservation

동결 건조는 종종 실행 가능한 세균 세포의 건조 제품을 얻을 수있는 쉽고 편리한 방법입니다. 프로세스의 문제는 세포의 생존이다. 여기에 우리가 세부 동결 건조하는 동안 세포의 생존을 사용 제형의 특성에 의해 영향을하는 방법을 조사하는 절차입니다.

세포 생존에 박테리아와 그 영향의 동결 건조 공법

이 논문은 투과형 전자 현미경으로 현탁 세포를 시각화하기위한 사용하기 쉽고 저렴한 cryofixation 방법을 설명한다.

플 런지 프리즈 : 투과 전자 현미경에서 서스펜션 세포의 초 구조 및 면역 로컬 ​​라이 제이션 연구를위한 도구

Drosophila 셀 라인은 기본 및 생물 의학 연구를 위한 중요 한 시 약. 이 문서는 녹고, subculturing, 및 그들의 연구에서이 약의 사용을 통합 연구원을 지원 하기 위해 일반적으로 사용 되 초파리 셀 라인의 cryopreservation 프로토콜을 제공 합니다.

녹고, 경작, 그리고 초파리 셀 라인 Cryopreserving

여기서, 25 nm 하프 피치의 해상도로 전체 냉동 보존된 세포의 초구조를 이미지화하기 위해 냉동 소프트 X선 단층촬영(SXT)에 필요한 샘플 준비 및 데이터 수집 단계를 기술하는 프로토콜이 제시된다.

Cryo Soft X선 단층 촬영에 의한 세포의 3D Cartographic 설명

여기서 우리는 박테리아, 효모, 배양 세포, 분리 된 세포, 동물 및 인간 조직 및 바이러스를 포함한 생물학적 표본의 신속한 동결을 위해 샌드위치 동결 장치를 사용하는 방법을 보여줍니다. 우리는 또한 급속한 동결 후에 초박단면도를 위한 견본을 준비하는 방법을 보여줍니다.

전자 현미경 검사에서 생물학적 표본의 좋은 초구조 보존을 위한 샌드위치 동결 장치를 사용하여 급속한 동결

이 비디오 프로토콜은 바이러스 표본의 주사 투과 전자 현미경 단층 촬영을 수행하는 방법을 보여줍니다. 최적의 결과를 위해 샘플은 고압 냉동 및 후속 동결 대체를 통해 준비됩니다.

바이러스학의 주사 투과 전자 현미경 단층 촬영: 고압 냉동, 동결 치환 샘플의 3D 이미징

배우세요 포유류 세포의 동결 및 해동 기술을 세포 생물학 연구를 위해. 단층 및 현탁 세포를 액체 질소에 저장하고 복원하는 실용적인 방법을 익혀 실험의 재현성을 높이세요.

, 동결 해동 및 운송을위한 포장 셀

더 많은 동영상 탐색