Name: 인간 배아 줄기 세포에서 염색질의 Immunoprecipitation (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2008-07-22T00:31:00.000+00:00
Duration: 10 min 36 s
Description: 배우세요 인간 배아 줄기 세포에서 염색질 면역침전(ChIP) 기법을 활용한 분화 메커니즘 연구 방법. 이 기술은 단백질-DNA 상호작용 분석과 줄기세포 생물학 이해에 필수적입니다.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

제출 작품은 FS하는 재생 의료에 대한 캘리포니아 연구소 (CIRM)에서 부여 (RS1 - 00477-1)에 의해 지원됩니다

<ol><li>Evans, M. J., Kaufman, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Establishment+in+culture+of+pluripotential+cells+from+mouse+embryos%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Establishment in culture of pluripotential cells from mouse embryos.</a> Nature. 292, 154-156 (1981).</li>
<li>Boyer, L. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Polycomb+complexes+repress+developmental+regulators+in+murine+embryonic+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Polycomb complexes repress developmental regulators in murine embryonic stem cells.</a> Nature. 441, 349-353 (2006).</li>
<li>Lee, T. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Control+of+developmental+regulators+by+Polycomb+in+human+embryonic+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Control of developmental regulators by Polycomb in human embryonic stem cells.</a> Cell. 125, 301-313 (2006).</li>
<li>Kornberg, R. D., Lorch, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Twenty-five+years+of+the+nucleosome%2C+fundamental+particle+of+the+eukaryotic+chromosome%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Twenty-five years of the nucleosome, fundamental particle of the eukaryotic chromosome.</a> Cell. 98, 285-294 (1999).</li>
<li>Guenther, M. G., Jenner, R. G., Chevalier, B., Nakamura, T., Croce, C. M., Canaani, E., Young, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Global+and+Hox-specific+roles+for+the+MLL1+methyltransferase%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Natl.+Acad.+Sci.+U.+S.+A.%22%5BJournal%5D)">Global and Hox-specific roles for the MLL1 methyltransferase.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A.. 102, 8603-8608 (2005).</li>
<li>Lee, T. I., Johnstone, S. E., Young, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chromatin+immunoprecipitation+and+microarray-based+analysis+of+protein+location%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Protoc%22%5BJournal%5D)">Chromatin immunoprecipitation and microarray-based analysis of protein location.</a> Nat. Protoc. 1, 729-748 (2006).</li>
<li>Sanchez-Elsner, T., Gou, D., Kremmer, E., Sauer, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Noncoding+RNAs+of+trithorax+response+elements+recruit+Drosophila+Ash1+to+Ultrabithorax%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Noncoding RNAs of trithorax response elements recruit Drosophila Ash1 to Ultrabithorax.</a> Science. 311, 1118-1123 (2006).</li>
</ol>

염색질 immunoprecipitation (칩)은 세포 분화 동안 염색질 기반 프로세스의 해부에 대한 귀중한 기술을 제공합니다. 이 방법의 성공을위한 전제 조건은 좋은 항체와 관심의 항원이 부족 제어 세포 또는 조직에서 염색질의 가용성입니다. DNA microarray 기술, 정보의 방대한와 칩을 결합하여 얻을 수 있습니다. 칩 결과의 검증은 세포 개발하는 동안 생물 학적 프로세스의 실행과 동적 단백질 협회, 단백질 수정 및 / 또는 RNA를 연결할 수있는 적합한 테스트 시스템의 가용성에 따라 달라집니다.

<table><tbody><tr><td>Poteinase-K</td><td>시약</td><td>Roche Group</td><td>#EO0491</td><td></td></tr><tr><td>RNase-A</td><td>시약</td><td>Fermentas</td><td>#EN0531</td><td></td></tr><tr><td>formaldehyde 37%</td><td>시약</td><td>EMD Millipore</td><td>FX040-13</td><td></td></tr><tr><td>Chloroform</td><td>시약</td><td>EMD Millipore</td><td>3150</td><td></td></tr><tr><td>Ethanol </td><td>시약</td><td>Goldshield</td><td></td><td></td></tr><tr><td>phenol:chloroform:isoamyl alcohol</td><td>시약</td><td>Invitrogen</td><td>15593-031</td><td></td></tr><tr><td>SA, fraction V</td><td>시약</td><td>EMD Millipore</td><td>2930</td><td></td></tr><tr><td>Dubecco&amp;rsquo;s Phosphate Buffered Saline</td><td>시약</td><td>GIBCO, by Life Technologies</td><td>14190</td><td></td></tr><tr><td>HEPES</td><td>시약</td><td>EMD Millipore</td><td>5330</td><td></td></tr><tr><td>Sodium Chloride</td><td>시약</td><td>Fisher Scientific</td><td>S271-10</td><td></td></tr><tr><td>EDTA</td><td>시약</td><td>EMD Millipore</td><td>4050</td><td></td></tr><tr><td>Triton X-100 </td><td>시약</td><td>EMD Millipore</td><td>9410</td><td></td></tr><tr><td>Sodium Dodecyl Sulfate</td><td>시약</td><td>JT Baker</td><td>4095-02</td><td></td></tr><tr><td>Lithium chloride</td><td>시약</td><td>EMD Millipore</td><td>5910</td><td></td></tr><tr><td>Tris-HCl</td><td>시약</td><td>EMD Millipore</td><td>9230</td><td></td></tr><tr><td>NP-40</td><td>시약</td><td>Calbiochem</td><td>492015</td><td></td></tr><tr><td>Deoxycholic acid, sodium salt</td><td>시약</td><td>Fisher Scientific</td><td>BP349-100</td><td></td></tr><tr><td>Ammonium acetate</td><td>시약</td><td>Applichem</td><td>631-61-8</td><td></td></tr><tr><td>Glycine</td><td>시약</td><td>EMD Millipore</td><td>4840</td><td></td></tr><tr><td>Glycine</td><td>시약</td><td>EMD Millipore</td><td>4840</td><td></td></tr><tr><td>dynalbeads, protein A</td><td>시약</td><td>Invitrogen</td><td>100.02D</td><td></td></tr><tr><td>dynalbeads, protein G</td><td>시약</td><td>Invitrogen</td><td>100.04D</td><td></td></tr><tr><td>1.5ml Low Retention Microtubes, Xtreme</td><td>기타</td><td>Phenix Research Products</td><td>MAX-815S</td><td></td></tr><tr><td>Phase Lock Gel Light, 2.0 ml</td><td>시약</td><td>Eppendorf</td><td>955154037</td><td></td></tr></tbody></table>

인간 배아 줄기 세포에서 염색질의 immunoprecipitation

Chromatin Immunoprecipitation from Human Embryonic Stem Cells

metazoan 생물의 세포의 무수한의 기능 및 구조 복잡도는 줄기 세포의 소수에서 발생한다. 자기 갱신과 줄기 세포는 거의 모든 세포 1을 입력한 다음으로 차별화 수 있습니다 multipotency : 줄기 세포는 두 근본적인 속성을 특징으로하고 있습니다. 차별화된 세포에 진행의 줄기 세포가 활동을 설정하고 셀 타입 특정 유전자 발현 패턴을 유지 multipotency 구조 및 형태학의 변화와 전사 요소의 hierarchic 활동 및 신호 분자의 손실이 특징입니다. 분자 수준에서 세포 분화는 염색질의 구조와 조성의 역동적인 변화를 포함하고 이러한 역동적인 변화의 검출은 줄기 세포 및 세포 분화 과정 2,3의 기능 특징에 귀중한 통찰력을 제공할 수 있습니다. 염색질은 양식 고도로 압축된 DNA - 단백질 복합 때 단백질과 세포 패키지 염색체 DNA, histones 주로 4. Stemcellness 및 세포 분화는 이러한 epigenetic 요인, 히스톤 변형, 그리고 전사 요소 2,3,5와 같은 규제 단백질의 특정 배열의 존재와 상관되었습니다. 염색질 immunoprecipitation (칩)은 RNA의 존재, 단백질 및 염색질 6,7의 단백질 수정을 모니터하는 중요한 방법을 제공합니다. 다른 세포 유형에서 염색질의 비교는 세포 차별화하는 동안 발생하는 단백질 염색질 협회의 역동적인 변화를 명료하게하다 수 있습니다. 염색질 immunoprecipitation는 생체내 교차 연결된 염색질에의 정화를 포함한다. 절연 염색질은 효소 소화 또는 기계적 강제로 작은 조각으로 줄어 듭니다. 염색질 조각은 단백질 또는 단백질과 DNA의 수정을 대상으로 특정 항체를 사용하여 시켰던 있습니다. DNA 또는 RNA 시켰던은 정화와 PCR이나 DNA microarray 기반 assays에 대한 템플릿으로 사용됩니다. 성공을위한 전제 조건 칩 원하는 항원 및 대상 분자를 표현하지 컨트롤 세포에서 염색질의 가용성에 고품질의 항체입니다. 칩은 단백질, 단백질과 RNA 수정하고, 특정 타겟 DNA와 RNA의 존재를 상관 관계, 그리고 outread 도구의 선택에 따라 특정 타겟 유전자 또는 전체 게놈의 맥락에서 대상 분자의 연결을 감지하실 수 있습니다. 차별 세포의 염색질에 단백질의 분포의 비교는 세포 혈통을 따라 세포의 진행과 일치 염색질 구성의 역동적인 변화를 명료하게하다 수 있습니다.

ESC의 차별은 셀 타입의 특정 구조의 변화와 염색질의 구성과 일치한다. 이러한 변화의 감지는 stemcellness 및 세포 분화를 정의하는 메커니즘에 중요한 통찰력을 제공합니다. 염색질 immunoprecipitation (칩)은 줄기 세포 분화를 기본 분자 메커니즘을 해부하다하는 소중한 방법을 나타냅니다.

인간 배아 줄기 세포에서 염색질의 Immunoprecipitation

후생동물 유기체의 수많은 세포가 가진 기능적 및 구조적 복잡성은 소수의 줄기세포로부터 기인합니다. 줄기세포는 ...

안녕하세요, 저는 캘리포니아 대학교 리버사이드 캠퍼스 생화학과의 Frank Zawa 박사님 연구실 소속 Stefan Burani입니다. 오늘은 염색질 면역침전법 절차를 보여드리겠습니다. 그럼 시작하겠습니다.본 절차는 인간 배아 줄기세포의 포름알데히드 가교 결합으로 시작됩니다. 가교 결합 전, 인간 배아 줄기세포를 액체 질소에서 37 °C로 5분 동안 해동한 후 배지로 세척합니다. 그 다음, 세포를 젤라틴이 코팅된 6-웰 플레이트에 분주하고 2~3일 동안 증식시킵니다.각 면역침전 반응을 위해 5,000만에서 1억 개의 세포로 시작해야 합니다. 먼저 세포를 분해하여 현탁액 상태로 수집합니다. 각 세포 현탁액에 1% 농도의 신선한 aldehyde를 첨가하고 실온에서 10분 동안 배양합니다.다음으로, 포름알데히드를 중화시키기 위해 1.25 M 글리신을 전체 부피의 1/10만큼 첨가하고 10분 동안 배양합니다. 10 mL의 PBS로 세포를 두 번 가볍게 섞어준 후, 50 mL 원추형 튜브에 옮깁니다. 세포를 펠릿 형태로 수집하기 위해 원심분리기를 사용하여 4 °C에서 1000 RPM으로 5분 동안 원심분리합니다.원심분리 후 상층액을 제거하고 펠릿을 1.5 milliliters의 lyce buffer에 재현탁합니다. 마지막으로 세포를 1.5 milliliter 마이크로 원심분리 튜브로 옮깁니다. 세포 이동이 완료되면 액체 질소에서 세 번 급속 냉동시킨 후, 조직 분쇄기를 사용하여 세포를 파쇄합니다.세포 가교 결합이 완료되면 면역침전법을 수행하거나 -80 °C에서 무기한 냉동 보관할 수 있습니다. 세포 가교 결합 후에는 이를 수행하기 위해 자성 비드를 준비해야 합니다. 1.5 mL 저흡착 마이크로 튜브에 DI 비드 50 µL를 넣어 면역침전법 1회당 비드 튜브 1개를 준비하십시오.그 다음 블록 용액 1 mL를 추가합니다. 이제 dyal MPC를 사용하여 dyal 비드를 수집합니다. 튜브를 마그네틱 랙에 넣습니다.비드가 튜브 측면에 모이도록 합니다. 약 15초 정도 소요됩니다. 비드가 잘 모이도록 랙을 두 번 뒤집어도 좋습니다.비드를 수집한 후, 피펫으로 상층액을 제거합니다. 상층액을 제거한 후, 블로킹 용액 1 mL를 첨가하고 랙에서 마그네틱 스트립을 분리한 뒤 랙을 뒤집어 비드를 부드럽게 재부유시킵니다. 튜브를 고정한 상태로 이 과정을 10~20회 또는 비드가 균일하게 섞일 때까지 반복합니다.이전과 동일한 방법으로 비드를 재현탁하여 수집하십시오. 수집이 완료되면 피펫으로 상층액을 제거합니다. 1.5 milliliters의 블로킹 용액을 사용하여 이 세척 과정을 반복하십시오.두 번째 세척 후, 750 µL의 블로킹 용액으로 비드를 재현탁한 다음 10 µg의 항체를 추가합니다. 본 연구에서는 MLL 단백질에 대한 항체를 사용하여 혼합물을 4 °C에서 최소 6시간 또는 오버나이트로 로테이터에서 배양합니다. 이 배양 과정 동안 크로스링크된 염색질을 초음파 처리할 수 있으며, 이에 대해서는 오버나이트 배양 직후에 시연하겠습니다.항체 용액을 제거한 후 비드를 3회 세척하십시오. 이전과 동일하게 1 mL의 lyase 버퍼를 사용하고, 자석 랙을 이용하여 비드를 수집합니다. 세척이 완료되면 포화된 크로마틴을 추가할 준비가 된 것입니다.초음파 처리를 시작하기 전, 먼저 -80°C에서 냉동된 세포 펠릿을 꺼내 해동시킵니다. 초음파 처리를 위해 15mL 원추형 튜브를 준비합니다. 이는 튜브의 5mL 표시 지점에서 두 조각으로 자른 후 윗부분을 버려 준비합니다.튜브는 파라필름이나 튜브 캡으로 덮을 수 있습니다. 준비 과정에서 튜브 랙을 사용하여 ator 프로브가 튜브 바닥에서 약 0.5에서 1cm 위에 위치하도록 튜브를 배치하십시오.용액의 거품 발생을 방지하기 위해 프로브가 중앙에 위치하고 튜브 벽면에 닿지 않도록 주의하십시오. 이제 현탁액을 20초씩 6회 초음파 처리하십시오. 거품 발생을 줄이기 위해 각 샘플은 초음파 처리 회차 사이에 얼음물 배스에 보관해야 합니다.처음에는 출력 전력을 0으로 설정한 다음, 첫 번째 버스트(burst) 동안 최종 전력까지 수동으로 증가시킵니다. 일정 시간 후, 시료를 1.5 mL 튜브로 옮기고 4 °C에서 13,000 RPM으로 10분 동안 원심분리합니다. 이는 잔해물을 침전시키고 상층액을 수집하기 위함입니다.SINA를 새로운 1.5 milliliter 튜브로 옮깁니다. 각 샘플의 세포 용해물 50 microliters를 input DNA로 보관하십시오. 이는 나중에 공유 염색질의 크기를 확인하는 데 사용됩니다.이는 영하 20°C에서 보관할 수 있습니다. 초음파 처리된 용해물 배치당 최소 하나 이상의 입력 DNA 분주액을 보관해야 합니다. 이제 크로마틴을 면역침강시킬 준비가 되었습니다.먼저, 이전 단계에서 수집한 5,000만에서 1억 개의 세포에 해당하는 염색질을 앞서 준비한 50 µL의 항체 자성 비드 혼합물에 넣고 최종 부피가 1 mL가 되도록 합니다. 필요한 경우, lysis 버퍼를 사용하여 이 부피를 조절한 후, 비드를 재현탁시키기 위해 뒤집어 섞어줍니다. 이 혼합물을 4 °C의 냉장고에서 하룻밤 동안 배양합니다.인큐베이션 후, dyl MPC를 사용하여 비즈를 수집하고 튜브를 랙에 배치하여 비즈가 튜브 측면에 모이도록 합니다. 이 과정은 약 20초 정도 소요됩니다. 모든 비즈가 잘 수집될 수 있도록 랙을 두 번 흔들어 줍니다.그 다음, 샘플 간에 팁을 교체하며 피펫으로 상층액을 제거합니다. 이어서 비드를 세척해야 합니다. 이를 위해 각 튜브에 1 mL의 lyase buffer를 넣고 비드를 부드럽게 재현탁합니다.이는 랙에서 마그네틱 스트립을 제거하고, 튜브가 꽂힌 상태로 랙을 10~20회 정도 또는 비드가 균일하게 재현탁될 때까지 뒤집어 수행할 수 있습니다. 그 후, 마그네틱 스트립을 다시 배치하여 비드를 수집합니다. 파이펫으로 상층액을 제거합니다.이 세척 과정을 3~5회 더 반복하십시오. 세척 단계마다 팁을 교체해야 함을 유의하십시오. 다음으로, 앞서 설명한 것과 동일한 방법으로 IP one buffer 1 mL를 사용하여 비드를 4~6회 세척하십시오.그다음 동일한 방식으로, IP two buffer 1 mL로 비드를 4~6회 세척합니다. 마지막으로, 다른 세척 과정과 마찬가지로 pH 8.0의 TE buffer 1 mL로 비드를 4~6회 세척합니다. 최종 세척 후 TE를 제거합니다.이제 4°C에서 3000 RPM으로 3분 동안 원심분리하여 잔류 TE 버퍼를 제거합니다. 이제 비즈에서 크로마틴을 용출할 준비가 되었습니다. 먼저, 용출 버퍼 210 µL를 추가하고, 튜브를 65°C의 서멀 믹서에서 800 RPM으로 15분 동안, 또는 용출액의 회수율을 높이려면 최대 30분까지 배양하여 비즈로부터 물질을 용출시킵니다.비드를 13,000 RPM에서 1분 동안 원심분리합니다. 원심분리 후, 상층액 200 µL를 제거하여 새 튜브로 옮긴 다음, TE buffer 200 µL를 첨가합니다. 이제 시료는 침전된 DNA의 가교를 해제하는 역가교(reverse crosslink) 단계를 진행할 준비가 되었습니다.상층액을 65 °C 항온수조에서 최소 6시간에서 최대 15시간 동안 배양합니다. 응결 현상을 최소화하기 위해 항온수조에서 배양을 진행할 수 있습니다. 그다음, 50 µL의 입력 DNA 단계를 따릅니다.용출물과 마찬가지로 65°C에서 배양하여 초음파 처리 후 역교차 길이를 가진 입력 DNA를 회수하였습니다. 이제 DNA를 정제할 준비가 되었습니다. 그 후 페놀-클로로포름 추출과 에탄올 침전법을 사용하여 DNA를 정제하고 침전시킵니다.침전된 DNA 펠릿을 물에 재현탁한 후 -20 °C에서 보관할 수 있습니다. 향후 사용을 위해, 정제된 입력 DNA를 아가로스 겔 전기영동하여 전단된 크로마틴의 크기를 확인할 수 있습니다. 이상적으로 염색체 조각은 250에서 750 bases 사이여야 합니다.지금까지 인간 배아줄기세포를 이용한 크로마틴 면역침강법 수행 방법을 살펴보았습니다. 이 실험을 수행할 때는 고친화도 항체와 적절한 크기 범위의 크로마틴을 사용하고, 고엄격성 세척 단계를 거치는 것이 중요합니다. 이것으로 모든 설명을 마치겠습니다.시청해 주셔서 감사하며, 귀하의 실험에 좋은 결과가 있기를 바랍니다.

chromatin-immunoprecipitation-from-human-embryonic-stem-cells

Research

연구

JoVE Journal

Biology

생물학

우리는 마우스 배아 조직에서 조직 특정 유전자 발현의 시작하는 동안이나 이후에 조직 특정 유전자의 상호 작용 요소를 식별하는 방법은 염색질의 immunoprecipitation (칩)을 보여줍니다. 그것이 정상적인 배아 발달 동안 발생으로이 프로토콜은 조직 특정 유전자 활성화의 연구에 대해 광범위하게 적용되어야합니다.

초기 마우스 배아를 사용하는 조직 특정 유전자에 대한 염색질의 Immunoprecipitation 분석

방법 염색질 규제 및 염색질 상태의 문제는 생체 내에서 유전자가 세포 운명 결정이 배아에서 어떻게 만들어 지는지 초기에 대한 우리의 이해의 열쇠입니다 영향을 미칩니다. 칩 서열 번호 - 글로벌 수준입니다 Xenopus의 배아 여기 설명에서 크로 마틴의 기능을 조사하기 가장 인기있는 방법.

염색질 레귤레이터 및 미국에서의 게놈 전체의 스냅 샷<em&gt; 아프리카 발톱 개구리</em칩 서열 번호&gt; 태아

유전자 전사의 미세 조정 규정은 배아 세포 운명 결정의 기초가. 여기서, 우리는 줄기 세포와 마우스 배아 심장 개발 모두 심장 분화의 후생 유전 학적 조절을 조사하기 위해 사용 염색질 면역 침전 분석법을 설명한다.

배아 줄기 세포와 조직의 심장 차별화의 성적인 규정

여기, 우리는 chromatin immunoprecipitation (칩) 및 칩 seq 라이브러리 준비 프로토콜 낮은 풍부한 닭 배아 샘플에서 글로벌 epigenomic 프로 파일 생성을 설명 합니다.

낮은 풍부 배아 샘플 chromatin Immunoprecipitation (칩) 프로토콜

여기, 우리는 최적화 된 높은 처리량 칩 시퀀싱 프로토콜 및 냉동된 종양 조직 및 세포에서 게놈 넓은 chromatin 상태 패턴의 결정에 대 한 전산 분석 파이프라인을 설명합니다.

종양 조직에 높은 처리량 칩 시퀀스를 사용 하 여 Chromatin의 게놈 넓은 매핑 위한 통합된 플랫폼

여기, 우리는 칩 Seq를 수행 하는 방법을 설명 및 CARIP-Seq, 다음-세대 시퀀싱, 라이브러리 준비 등 글로벌 epigenomic 및 chromatin 관련 RNA 생성 하 ES 세포에 지도.

CARIP-Seq와 칩 Seq: Chromatin 관련 된 RNAs 및 배아 줄기 세포에 단백질 DNA 상호 작용을 식별 하는 방법

Chromatin 환경 규칙은 적절 한 유전자 발현에 필요한 필수적인 과정 이다. 우리가 chromatin 수정의 채용을 통해 유전자 발현을 제어 하기 위한 메서드를 설명 하는 여기, 유전자 및 가역 방식 기계.

세포질 기계 화학 Epigenetic 한정자를 리디렉션하여 억압 유전자 전사

이 방법은 세포주에서 PRC2 매개 염색질 도메인의 형성을 따르도록 설계되었으며, 이 방법은 다른 많은 시스템에 적응될 수 있다.

크로마틴 도메인의 드 노보 형성을 연구하는 방법

이 프로토콜은 스냅 냉동 조직의 염색질 준비에 중점을 두고 있으며 X-ChIP(Crosslinking Chromatin Immunoprecipitation)에 이어 정량적 PCR 분석(X-ChIP-qPCR) 또는 차세대 시퀀싱 접근법(X-ChIP-seq)에 적합합니다.

염색질 면역침전 분석을 위한 냉동 키메라 간 조직에서 염색질 추출

이 프로토콜은 위상 연관 도메인(TAD)의 경계 및 조절 및 기타 DNA 서열 요소 간의 장거리 염색질 상호 작용을 포함하여 고해상도에서 메가 기반 크기의 표적 게놈 영역의 3D 조직을 특성화하는 데 사용되는 Capture Hi-C 방법을 설명합니다.

Capture Hi-C를 통한 고분해능 3D 염색질 조직 해독

배우세요 인간 배아 줄기 세포에서 염색질 면역침전(ChIP) 기법을 활용한 분화 메커니즘 연구 방법. 이 기술은 단백질-DNA 상호작용 분석과 줄기세포 생물학 이해에 필수적입니다.

인간 배아 줄기 세포에서 염색질의 Immunoprecipitation

더 많은 동영상 탐색