Cellulaire ademhaling

ConceptenDocentenvoorbereidingStudentenprotocol
0 weergaven05:00 min
Print Procedure Steps
Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Quantificering van ademhaling met behulp van microrespirometers
    • LET OP: In dit experiment meet je de snelheid van cellulaire ademhaling voor ontkiemende zaden door de snelheid van zuurstofuitwisseling te meten. Terwijl zuurstof wordt geconsumeerd om energie te leveren, geven ontkiemende zaden koolstofdioxide af. Deze koolstofdioxide wordt geabsorbeerd door kaliumcarbonaat en dus zal de algehele gasdruk van het respirometer worden verminderd. HYPOTHESEN: De experimentele hypothese is dat ontkiemende zaden een hogere ademhalingssnelheid zullen vertonen dan controleglaskralen. Bovendien dat bij hogere temperaturen de snelheid van cellulaire ademhaling in de zaden zal toenemen. De nulhypothesen zijn dat zowel glaskralen als ontkiemende zaden een vergelijkbare snelheid van cellulaire ademhaling zullen vertonen en dat temperatuur geen effect heeft op de ademhaling.
    • Om de controle op te zetten, verwijdert u eerst de zuiger uit een voorbereide microrespirometer en labelt u deze met een “CR” of “CH”, afhankelijk van of het de controlekamertemperatuur of de verwarmde behandeling is.
    • Voeg de glazen microkralen toe aan elk van de microrespirometers tot de 0,5 mL markering en duw de zuiger in de spuit naar de 1 mL markering.
    • Plaats 3 - 4 wasmiddelen op het uitlopende uiteinde van elke microrespirometer om ze te verzwaren terwijl ze in het waterbad zitten. NOTITIE: De microrespirometer zal met het capillaire buisje naar boven zitten.
    • Zet de controleapparaten opzij.
    • Om de experimentele zittende respirometers op te zetten, verwijdert u de zuiger van een voorbereide microrespirometer en labelt u deze met “ER” of “EH”, afhankelijk van of het de experimentele kamertemperatuur of de verwarmde behandeling is.
    • Meet 0,5 mL ontkiemende zaden in de tuberculine-spuit van de microrespirometer.
    • Duw vervolgens de spuit naar de 1 mL markering.
    • Plaats 3 - 4 wasmiddelen op het uitlopende uiteinde van elke microrespirometer om ze te verzwaren terwijl ze in het waterbad zitten.
    • Om de microrespirometers te gebruiken, drukt u voorzichtig de “CR” en “ER” microrespirometers in het waterbad op kamertemperatuur. De hele spuit moet ondergedompeld zijn, maar de capillaire buisjes moeten volledig blootliggen. Verwijder water uit het bad tot deze positie is bereikt. Zorg ervoor dat de bovenkant van het capillaire buisje open is.
    • Voer dezelfde procedure (stap 9) uit voor de “CH” en “EH” microrespirometers om de experimentele groep met hogere temperatuur op te zetten.
    • Wacht 5 minuten voordat u verdergaat om de temperatuur in de microrespirometers gelijk te laten lopen met de temperatuur van het waterbad.
    • Voeg een enkele druppel manometervloeistof toe aan de bovenkant van elk van de vier capillaire buisjes die de microrespirometerkamers afdichten. NOTITIE: Als de kamers goed werken, zal de manometervloeistof in de capillaire kamer worden gezogen.
    • Gebruik de in het bad ingestelde zuiger om de manometervloeistof in de capillaire buis te zuigen. Stop wanneer de vloeistof ongeveer halverwege de capillaire buis zit. BELANGRIJK: De microrespirometers mogen niet worden verstoord zodra ze in het bad zijn toegevoegd. Schok de tafel niet of plaats of verwijder iets in of uit het waterbad nadat de kamers zijn afgesloten en geëgaliseerd.
    • Markeer de onderkant van de manometervloeistof die dichter bij de kamer staat. Dit vertegenwoordigt tijdstip nul.
    • Stel een timer in om over 5 minuten te rinkelen.
    • Maak na 5 minuten een nieuwe markering waar de manometervloeistof zich op elke microrespirometer bevindt. Herhaal dit elke 5 minuten tot 25 minuten is verstreken of totdat de manometervloeistof de volledige lengte van de capillaire buis heeft afgelegd.
    • Verwijder vervolgens de respirometers uit de waterbaden.
    • Meet de afstand tussen elk van de markeringen en noteer ze in Tabel 1 naast het juiste tijdstip. Klik hier om Tabel 1 te downloaden
    • Tijdens het opruimen moeten manometers worden gedemonteerd om opnieuw te worden gebruikt of in de prullenbak worden gegooid.
  2. Resultaten
    • Om de gegevens die u hebt verzameld te analyseren, zet u eerst de gegevenspunten in kaart met de x-as als tijd en de y-as als de afstand die de manometer heeft afgelegd, wat de zuurstofconsumptie vertegenwoordigt.
    • Bereken de helling van elke lijn met behulp van deze vergelijking.
    • Noteer deze waarden voor elke microre

Browse More Videos

Cellular Respiration