Een abonnement op JoVE is vereist om deze inhoud te bekijken. Log in of start vandaag met uw gratis proefperiode.

Methodenartikel

Synthese en Kalibratie van Phosphorescent nanosondes voor zuurstof Imaging in Biological Systems

13.4K weergaven

DOI:

10.3791/1731

3 maart 2010

In dit artikel

Samenvatting

We presenteren de beginselen van zuurstof metingen door fosforescentie afschrikken en herziening ontwerp van porfyrine-op basis van dendritische nanosensoren voor zuurstof imaging in biologische systemen.

Samenvatting

Zuurstof meting door fosforescentie afschrikken [1, 2] bestaat uit de volgende stappen: 1) de sonde wordt geleverd in het medium van belang (bijv. bloed of interstitiële vloeistof), 2) het object wordt verlicht met het licht van de juiste golflengte te prikkelen de sonde in zijn triplet toestand, 3) de uitgezonden fosforescentie wordt verzameld, en het tijdsverloop is geanalyseerd om de fosforescentie levensduur, die wordt omgezet in de zuurstofconcentratie (of de partiële druk, PO opbrengst

Protocol

1. Algemene beschrijving van zuurstof meetprotocol

(Deze sectie heeft geen actie, maar is cruciaal voor het begrijpen van de rest van het papier. Het kan worden gefilmd, bijvoorbeeld als een opeenvolging van een aantal Power Point dia's, vergezeld van de stem.)

1.1) De sonde wordt geleverd in het medium van belang, bijvoorbeeld, geïnjecteerd in het bloed of interstitiële vloeistof van een dier.

1.2) Het object (oppervlak van het weefsel) wordt verlicht met het licht van de juiste golflengte om de sonde te bevorderen in de aangeslagen triplet toestand. Typisch excitatie vindt plaats <....

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Dankbetuigingen

Ondersteuning van de subsidies EB007279 en HL081273 van de NIH VS is dankbaar erkend.

....

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Materialen

Afkorting Volledige naam NMP TFA DIPEA HBTU DMSO CDMT NMM
N-methylpyrrolidinone
Trifluorazijnzuur
Diisopropylethylamine
2 - (1H-benzotriazol-1-yl) -1,1,3,3-tetramethyluronium hexafluorfosfaat
Dimethylsulfoxide
CDMT = 1-chloor-3 ,5-dimethoxytriazine
NMM = N-methylmorfoline

Referenties

  1. Vanderkooi, J. M., Maniara, G., Green, T. J., Wilson, D. F. An optical method for measurement of dioxygen concentration based on quenching of phosphorescence. J. Biol. Chem. 262, 5476-5482 (1987).
  2. Rumsey, W. L., Vanderkooi, J. M., Wilson, D. F.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Herprints en machtigingen

Trefwoorden

SondesynthesesondekalibratietweefotonexcitatieStern Volmer kalibratiefosforescentielevensduurgrootte uitsluitingschromatografiedendritische fosforescerende nanosensorenbiologische zuurstofmeting