Een abonnement op JoVE is vereist om deze inhoud te bekijken. Log in of start vandaag met uw gratis proefperiode.

Methodenartikel

Levensduurprotocol voor Drosophila melanogaster:overlevingscurven genereren om verschillen in vlieglevensduur te identificeren

5.6K weergaven

30 april 2023

In dit artikel

Samenvatting

Bron: Bovier, T. F., et al. Methoden om endocriene verstoring in Drosophila melanogasterte testen. J.Vis. Exp. (2019).

Wetenschappers gebruiken het Drosophila-levensduurprotocol om te meten hoe verschillende experimentele omstandigheden de levensduur van vliegen beïnvloeden en daarbij overlevingscurven te genereren om de experimentele resultaten te kwantificeren. Het monsterprotocol bevat de test die wordt toegepast om de effecten op de levensduur van blootstelling aan verschillende concentraties hormoonontregelende chemicaliën of EDC's, zoals 17-α-ethinylestradiol (EE2) te bestuderen.

Protocol

Dit protocol is een fragment uit Bovier et al., Methods to Test Endocrine Disruption in Drosophila melanogaster, J. Vis. Exp. (2019).

1. Voedselbereiding

  1. Gebruik voor voorraadonderhoud en voor larvale groei een maïsmeelmedium dat 3% poedergist, 10% sacharose, 9% voorgekookt maïsmeel, 0,4% agar, daarna Cornmeal medium (CM) wordt genoemd.
    1. Doe 30 g gist in 100 ml kraanwater, breng het aan de kook en laat het 15 minuten koken.
    2. Meng afzonderlijk goed 90 g voorgekookt maïsmeel, 100 g suiker en 4 g agar in 900 ml leidingwater.
    3. Breng de oplossing aan de kook, zet het vuur lager en k....

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Resultaten

figure-results-1
Figuur 1: Levensduurcurves. Aan de linkerkant wordt een representatieve tabel gerapporteerd waarin het aantal dode vliegen om de 3 dagen is geregistreerd, zowel voor de behandelingsgroep (medium + EDC [0,05 mM EE2]) als voor de controlegroep (medium + oplosmiddel), gedurende de gehele experimentele periode. De gemiddelde levensduur van elke groep is berekend met behulp van de MATRIX SUM. PRODUCT; de behan.......

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Materialen

Lijst van materialen gebruikt in dit artikel
NaamBedrijfCatalogusnummerOpmerkingen
17α-EthinylestradiolSigmaE4876-1G
Agar for Drosophila mediumBIOSIGMA789148
CornmealCA' BIANCA
Drosophila VialsBIOSIGMA78900825 mm x 95 mm
Drosophila VialsBIOSIGMA78900929 mm x 95 mm
Drosophila VialsKaltek18722 mm x 63 mm
EthanolFLUKA2860
Glass Bottle250 mL Bottles
Glass VialsMicrotechST 10024Flat bottom tube 100 x 24
Instant Success yeastESKAPowdered yeast
Methyl4-hydroxybenzoateSIGMAH5501
Stereomicroscope with LED lightsLeicaS4E
SucroseHIMEDIAMB025
Hand blender PimmyArietefood processor

Trefwoorden

Levensduur van Drosophilaendocriene disruptorscohousing van vliegenscheiding naar geslachtoverdracht van vialsregistratie van sterfteexperimentele conditiesgemiddelde overleving