Drosophila melanogaster (fruitvlieg)

Vanwege hun grote omvang en relatief eenvoudige organisatie zijn drosophila-verpleegkundige cellen bij uitstek geschikt voor live celbeeldvormingsstudies. Deze video beschrijft een micro-injectiemethode voor de levering van exogene verbindingen in de cellen, en het aanbevolen protocol demonstreert de procedure met fluorescerende oligonucleotide-sondes genaamd moleculaire bakens (MB's) die worden gebruikt om endogene mRNA-transcripties te visualiseren.

Het Drosophila embryo is omgeven door beschermende buitenste membranen. Om toegang te krijgen tot het embryo wordt het koraal – de buitenste van de membranen – vaak verwijderd. Deze video beschrijft een veelgebruikte methode van dechorionatie met natriumhypochloriet. Het voorbeeldprotocol demonstreert de procedure met behulp van steriele technieken die nodig zijn voor de bijl- of gnotobiotische veeteelt.

Immunostaining van Drosophila late-stage oöcyten kan een uitdaging zijn vanwege de omliggende membranen van de oöcyten. Deze video beschrijft een methode met hoge doorvoer voor het verkrijgen van oöcyten, hun fixatie en het verwijderen van membranen voor immunostaining. Het aanbevolen protocol demonstreert deze technieken met laat stadium oöcyten die worden gebruikt om verschillende stadia van meiose te visualiseren.

Deze video beschrijft een methode om de chorion- en vitellinemembranen mechanisch te verwijderen uit eerder vaste volwassen Drosophila-oöcyten. Het aanbevolen protocol toont een gedetailleerde demonstratie van de procedure die oöcyten oplevert die compatibel zijn met fluorescerende in situ hybridisatietesten.

Deze video beschrijft hoe u micro-invoegingen uitvoert die reagentia leveren in levende Drosophila-embryo's. Onderzoekers kunnen deze methode gebruiken om exogene verbindingen zoals nucleïnezuren en eiwitten te introduceren tijdens de vroege stadia van embryo-ontwikkeling. Het aanbevolen protocol demonstreert hoe de procedure voor injectie van een oplosbaar reagens moet worden opgezet en uitgevoerd - hier een fluorescerend eiwit voor live beeldvormingsexperimenten.

Source:Siddarth Gunnala1, Nafisa M. Jadavji2,3,41Department of Biomedical Sciences, Midwestern University, Glendale, AZ, USA2Division of Integrative and Molecular Physiology, Department of Biomedical Sciences, Southern University of Illinois, Carbondale, IL, USA3Department of Child Health, College of Medicine Phoenix, University of Arizona, Phoenix, AZ, USA4Department of Neuroscience, Carleton University, Ottawa, ON, CanadaThis video demonstrates hypoxia-induced climbing behavior in Drosophila...

Deze video toont een methode om hypoxie bij Drosophila-larven te testen door hun graaf- en tunnelcapaciteiten te beoordelen. Met behulp van deze techniek kunnen onderzoekers larven met zuurstoftekort onderscheiden van larven met ontwikkelingsachterstanden. Het voorbeeldprotocol demonstreert de instellingen voor deze test.

Bij het kleuren van Drosophila imaginal schijven, vaak een ruwe dissectie wordt uitgevoerd waar de schijven worden blootgesteld, maar blijven bevestigd aan het lichaam. Eenmaal bevlekt, worden de schijven van belang geïsoleerd en gemonteerd. Het voorbeeldprotocol demonstreert een procedure voor vleugel imaginaire schijfdissectie en montage.

De Drosophila neuromusculaire verbinding (NMJ) wordt gebruikt als model om de morfologie en functie van synapsen te bestuderen. Deze video beschrijft belangrijke kenmerken die onderzoekers kwantificeren om de NMJ te karakteriseren. Het voorbeeldprotocol demonstreert een software die de kwantificering automatisch kan uitvoeren.

Deze video beschrijft twee-foton laser ablatie van axonen in een Drosophila melanogaster larve en een voorbeeld protocol om letsel te induceren en beeld de verwonding site.

Deze video beschrijft hoe larvale filets te bereiden die worden gebruikt om sensorische dendritische arborization (da) neuronen en hun bijbehorende epidermale cellen te visualiseren. Het aanbevolen protocol laat in detail zien hoe spierweefsel uit de lichaamswand kan worden verwijderd met behoud van de morfologie van de cellen, wat de immunostaining en visualisatie van de anders verduisterde da-neuronen en epidermale cellen verbetert.

De Drosophila hemolymph dient als zowel bloed als interstitiële vloeistof en circuleert door het hele lichaam tijdens de larve- en volwassen stadia. Deze video beschrijft een protocol om larvale hemolymph te verzamelen om de circulerende cellen te kwantificeren.

Drosophila-larven zijn lichtgevoelig en reageren op veranderingen in het omringende licht. Deze video beschrijft een test die hun vermogen om licht te vermijden test, de zogenaamde light spot assay. Het aanbevolen protocol laat zien hoe u de test instelt met een led met blauw licht en laat zien hoe u het gedrag van het dier kunt registreren als reactie op de ontmoeting met het licht.

Deze video beschrijft de Drosophila ringklier, een complexe endocriene structuur die belangrijk is voor biosynthese en afscheiding van ecdysteroïden en andere hormonen. Het aanbevolen protocol demonstreert de dissectie, fixatie en immunostaining.

Drosophila-larven hebben speciale sensorische neuronen - nociceptoren - waarvan de reactie op potentieel schadelijke thermische stimuli aversief - of zogenaamd "nocifensief" - gedrag bij het dier veroorzaakt. Deze video beschrijft een methode om thermische nociceptie te beoordelen door larvaal gedrag op te nemen als reactie op lokale toepassing van een warmtesonde op de cuticula. Deze methode wordt daarom de lokale hittesondetest genoemd.

Drosophila-fruitvliegen kunnen kleine temperatuurveranderingen onderscheiden en daarom omgevingen met gunstige thermische omstandigheden selecteren. Deze video beschrijft een gedragstest die de temperatuurvoorkeur van Drosophila-larven test op een lineaire thermische gradiënt.

Deze video beschrijft de Drosophila-lymfklier - de primaire plaats van hematopoiese in de vlieglarve - en toont een voorbeeldprotocol om het orgaan te ontleden en te monteren voor immunohistochmie en fluorescerende beeldvorming.

Dit artikel beschrijft een techniek om het puparium van een insect te verwijderen terwijl de binnenpop intact blijft en daarom geschikt is voor verder onderzoek. Het voorbeeldprotocol toont de procedure met Drosophila guttifera; deze techniek is echter van toepassing op andere Drosophila-soorten.

Deze video beschrijft hoe je het oog-hersencomplex kunt ontleden en isoleren van Drosophila poppen. Het aanbevolen protocol demonstreert de procedure die hoogwaardig weefsel oplevert, compatibel met bijvoorbeeld immunostaining en andere genexpressie-experimenten.

De Drosophila vluchtspieren worden gebruikt als een modelsysteem voor spierontwikkeling en fysiologie. Deze video beschrijft het vluchtspierstelsel van volwassenen en belicht een protocol om het ontwikkelen van indirecte vluchtspieren te ontleden die geschikt zijn voor RNA-sequencing van poppen.

Deze video beschrijft een klassieke conditioneringstest die leren en geheugen test in Drosophila, verkeringsconditionering genoemd. De test is gebaseerd op de vermindering van mannelijke verkering na het ervaren van een afwijzing door een niet-ontvankelijke voorafgemateerde vrouw. Het voorbeeldprotocol toont een instelling voor de procedure die kan worden gebruikt om het kortetermijngeheugen en het langetermijngeheugen te beoordelen.

Deze video beschrijft een eenvoudige methode om vliegbeweging te kwantificeren en toont de uitgevoerde klimtest.  De vliegklimtest is een algemene test van de motorische functie die afhankelijk is van een negatieve geotaxis-respons.

Deze video beschrijft de dissectie van de accessoire klieren van mannelijke vliegen en toont een voorbeeld waarin de geïsoleerde klier zal worden gescheiden in een eencellige suspensie.

Deze video beschrijft de algemene anatomie van de Drosophila-eierstok en bevat een methode om eierstokken te ontleden voor levende of vaste beeldvorming.

Dit artikel beschrijft de dissectie van de voorste Malinese tubuli (MT) van een vrouwelijke Drosophila-vlieg en een voorbeeldprotocol van Rossano et al. (2017) waarin de MT's worden voorbereid op live beeldvorming in een perfusiekamer.

Deze video beschrijft de eilandtest, een gedragsmethode die wordt gebruikt om drosophila-voortbeweging te bestuderen. Het voorbeeldprotocol bevat een installatie voor de test die compatibel is met semi-geautomatiseerde beeldanalyse.

Wetenschappers gebruiken het Drosophila-levensduurprotocol om te meten hoe verschillende experimentele omstandigheden de levensduur van vliegen beïnvloeden en daarbij overlevingscurven te genereren om de experimentele resultaten te kwantificeren. Het monsterprotocol bevat de test die wordt toegepast om de effecten op de levensduur van blootstelling aan verschillende concentraties hormoonontregelende chemicaliën of EDC's, zoals 17-α-ethinylestradiol (EE2) te bestuderen.

Deze video beschrijft een voedingstest voor fruitvliegen waarbij gekleurd voedsel wordt gebruikt om de voeding te controleren en het effect dat toegevoegde verbindingen kunnen hebben op de voedingsactiviteit. Het voorbeeldprotocol test de effecten van verschillende hormoonontregelende chemicaliën (EDC).

Deze video beschrijft een methode om intacte hersenen van volwassen vliegen onder een brugschuif te monteren en toont het protocol dat wordt uitgevoerd op immunostained hersenen voor fluorescerende microscopie.

Deze video beschrijft een screeningsmethode om transgene Drosophila-vliegen te identificeren, waarvan het genoom is gewijzigd met CRISPR-Cas9. CRISPR-Cas9 is een krachtige genoombewerkingstool die een revolutie teweegbracht in de manier waarop wetenschappers het genoom van een organisme kunnen manipuleren. In het voorbeeldprotocol zullen we zien hoe crispr-gegenereerde mutanten kunnen worden geïdentificeerd, waarbij het inbrengen van een transactiveringssequentie de eerste exon van het...

Scanning elektronenmicroscopie (SEM) is een krachtig hulpmiddel om de oppervlaktekenmerken van een biologisch monster in beeld te brengen. Een goede monstervoorbereiding is echter van cruciaal belang voor het verkrijgen van kwaliteitsafbeeldingen. Deze video richt zich op de uitdrogings- en droogstappen van het voorbereiden van intacte volwassen Drosophila voor SEM.

Deze video beschrijft hoe je Drosophila-hoofden in paraffine kunt insluiten met behulp van de kraagmethode, een techniek die vliegkoppen voorbereidt op seriële doorsneden. Paraffinesecties worden gebruikt voor histologisch onderzoek van de anatomie van de hersenen en voor de beoordeling van neurodegeneratie. Het aanbevolen protocol laat zien hoe meerdere vliegen in één voorbereiding kunnen worden verwerkt, waardoor de tijdsefficiëntie wordt verhoogd en experimentele artefacten worden...

Deze video beschrijft hoe een injectie van levende volwassen vliegen uit te voeren en bevat een voorbeeldprotocol waarin gelabelde deeltjes en trypanblauw in de buik van vliegen worden geïnjecteerd om fagocytose te meten.

Deze video beschrijft de smaakvoorkeurstest, een gedragsmethode die wordt gebruikt om aantrekkingskracht of vermijding te meten voor gekleurde oplossingen die anders smaken door de buikkleuring van de vlieg na inname van de voorkeursstof te beoordelen. Het aanbevolen protocol toont de procedure aan die wordt gebruikt om de voorkeur van vliegen te meten voor oplossingen van verschillende sacharoseconcentraties.

Deze video beschrijft de CApillary FEeder, of CAFE, assay, een gedragsmethode die de voedselinname en voorkeur van ongeremde fruitvliegen meet. Het aanbevolen protocol laat zien hoe u de test kunt uitvoeren met minimale verdamping van de met vloeistof gevulde haarvaten die worden gebruikt om het voedsel te leveren en de inname ervan bij te houden.

Deze video beschrijft hoe de volwassen Drosophila-hersenen kunnen worden ontleed en geïsoleerd - een procedure die nodig is voor het visualiseren van het orgaan, dat anders wordt verduisterd door de cuticula, het oog en het tracheaweefsel. Het voorbeeldprotocol toont een gedetailleerde demonstratie die hoogwaardige preparaten oplevert die kunnen worden gebruikt voor immunostaining- en beeldvormingsmethoden in de drosophila-neurobiologie.

Drosophila microbiota beïnvloedt de ontwikkeling, immuniteit en fysiologie van het dier. Deze video beschrijft een methode om bacteriën uit vliegen te kwantificeren door de kolonievormende eenheden van hele lichaamspreparaten te bepalen. Het aanbevolen protocol demonstreert de techniek met vliegen, gekweekt onder gnotobiotische omstandigheden met behulp van vier bacteriesoorten.

Deze video beschrijft een methode om het drosophila volwassen been te ontleden, te repareren en te monteren, terwijl het neuromusculatuur intact blijft voor beeldvormingsanalyse.

Deze video beschrijft hoe je vrij lopende vliegen kunt volgen om hun algemene bewegingsvermogen te beoordelen. Het aanbevolen protocol demonstreert de installatie en gegevensanalyse van de test met behulp van videotrackingsoftware.

Deze video beschrijft één methode om een vliegenaspirator te bouwen, die kan worden gebruikt om insecten zonder anesthesie tussen behuizingen over te brengen. De aspirator in het voorbeeldprotocol was voorbereid op een experiment om individueel verzorgingsgedrag te...

Deze video beschrijft in vivo calcium beeldvorming in Drosophila neuronen met behulp van GCaMP. De aanbevolen protocolclip laat zien hoe u veranderingen in GCaMP-fluorescentie van paddestoellichaamneuronen kunt registreren tijdens een olfactorisch conditioneringsexperiment.

Fruitvliegen hebben een complex reuksysteem, kunnen honderden geurstoffen onderscheiden en hun reukvermogen gebruiken om gedragsbeslissingen te sturen. Deze video beschrijft de vierweg olfactometertest, een methode om reukgedragsreacties bij vliegen te bestuderen. De uitgelichte protocolclip laat zien hoe om te gaan met testvliegen en wat kritieke stappen zijn tijdens het uitvoeren van de test.

Agressie is een aangeboren gedrag en eerdere vechtervaring beïnvloedt de vechtstrategie en het resultaat van latere gevechten in vliegen. Deze video beschrijft een test die wordt gebruikt om het agressieve gedrag van Drosophilate bestuderen. Het voorbeeldprotocol bevat de test die wordt uitgevoerd in een opstelling die vliegbehandeling elimineert en daarom stress voor de dieren vermindert, wat anders de prestaties van de proefpersonen zou beïnvloeden.

Deze video beschrijft een methode om reukgedrag in de fruitvlieg te testen, het Y-doolhof. De aanbevolen protocolclip laat zien hoe u de test instelt en uitvoert.

Deze video beschrijft het Drosophila activity monitor (DAM) systeem dat wordt gebruikt om de motorische activiteit te volgen. Onderzoekers gebruiken activiteitsgegevens verzameld van de DAM om circadiaanse ritmes bij fruitvliegen te bestuderen. De aanbevolen protocolclip laat zien hoe u vliegen in het apparaat laadt en activiteitsgegevens opneemt voor circadiane experimenten.

Optogenetica maakt het gebruik van licht mogelijk om neuronen te manipuleren die genetisch zijn ontworpen om specifieke opsines-lichtgevoelige eiwitten uit te drukken waarvan de lichtactivatie een verandering in de toestand van het neuron teweegbrengt. Hier beschrijven we een optogenetische benadering in Drosophila met behulp van de opsin Channelrhodopsin2. Het voorbeeldprotocol bevat een optogenetische testset om het neuronale circuit achter het ontsnappingsgedrag van de vlieg te bestuderen.

In deze video belichten we een dissectie van de volwassen Drosophila-darm en het verzamelen van midguts die geschikt zijn voor eencellige dissociatie en FACS om darmstamcellen te isoleren.

Deze video beschrijft het volwassen hart van de vlieg, of anders het Drosophila dorsale vat genoemd. Het aanbevolen protocol demonstreert een dissectieprocedure voor levende hartpreparaten.

Drosophila-vrouwtjes kiezen tussen substraten en selecteren locaties die aantrekkelijk zijn voor het leggen van eieren. Deze video beschrijft een gedragstest die hun besluitvorming test, de zogenaamde eierleggingsvoorkeurstest. De aanbevolen clip demonstreert de procedure met een op maat gemaakte opstelling, waarmee onderzoekers niet alleen het gedrag van veel vrouwen tegelijkertijd kunnen testen, maar ook compatibel zijn met video-opname en optogenetische opstellingen.