Vrij lopende vliegen volgen: een methode om voortbeweging in Drosophila te beoordelen

Samenvatting

Bron: Sun, M. and Chen, L. L. A Novel Method to Model Chronic Traumatic Encephalopathy in Drosophila. J.Vis. Exp. (2017).

Deze video beschrijft hoe je vrij lopende vliegen kunt volgen om hun algemene bewegingsvermogen te beoordelen. Het aanbevolen protocol demonstreert de installatie en gegevensanalyse van de test met behulp van videotrackingsoftware.

Protocol

Dit protocol is een fragment uit Sun and Chen, A Novel Method to Model Chronic Traumatic Encephalopathy in Drosophila, J. Vis. Exp. (2017).

1. Video-ondersteunde bewegingstracking

1. Vul een Petrischaal met een diameter van 6 cm met transparant silicium elastomeer om de trackingarena te maken. Laat een ruimte van 3 mm tussen het silicium en het deksel van de schaal om de vliegen vrij te laten lopen, maar niet te vliegen.
2. Verdoof elke keer vier vliegen van de schijn- of behandelde groep en plaats ze in de arena. Laat de vliegen 1 uur op 22 °C staan.
3. Plaats een CCD-camera (Charge-Coupled Device) boven de arena's en neem 5 minuten op.
4. Analyseer de opgenomen bewegingstrajecten met behulp van Ctrax-software (vrij verkrijgbaar bij Caltech). Exporteer de bijgehouden gegevens in een programmeertaal (bijv. Matlab)-compatibel formaat en analyseer de gegevens op basis van de afgelegde afstand per frame. Bereken de gemiddelde loopafstand voor elke vlieg en combineer deze met alle andere geregistreerde vliegen /groep om een gemiddelde cumulatieve afstand te verkrijgen die wordt afgelegd door de populatie van bestanden in dezelfde groep.

Materialen

Lijst van materialen gebruikt in dit artikel

Naam	Bedrijf	Catalogusnummer	Opmerkingen
60 mm Petri Dishes	Fisher Scientific	FB0875713A	Used as a tracking arenas
Flow Regulator	Genesee Scientific	59-122WC
Fine Brush	Genesee Scientific	59-204
Flypad	Genesee Scientific	59-114
Sylgard Silicone Elastomer	Dow Corning	4019862
CCD Camera	Microsoft	HD-5000
Ctrax Walking Fly Tracker	Caltech	Ctrax 0.2.11
MATLAB Image Processing Toolbox	MATLAB	R2015b