Levensduuranalyse: Het meten van de levensduur van C. elegans

Abstract

Bron: Cornwell, A.B., et al. De replicasetmethode: een benadering met hoge doorvoer om de levensduur van Caenorhabditis elegans kwantitatief te meten. J.Vis. Exp.  (2018).

Deze video beschrijft een traditionele, op platen gebaseerde methode om de levensduur van C. elegans te meten. Het voorbeeldprotocol meet de levensduur van wormen die met RNAi worden behandeld.

Protocol

Het volgende protocol is een uittreksel uit Cornwell et al, The Replica Set Method: A High-throughput Approach to Quantitatively Measure Caenorhabditis elegans Lifespan, J. Vis. Exp.  (2018).

1. Voorkomen van nakomelingenproductie door toevoeging van 5-Fluoro-2'-deoxyuridine (FUdR)

1. Kweek dieren tot het L4-stadium bij 20 °C. Controleer of gesynchroniseerde dieren zich ongeveer 40 uur na het zaaien tot L4 hebben ontwikkeld (stap 2.1.7).
   OPMERKING: De ont....

Results

Figuur 1: De traditionele en de replicasetmethode voor het scoren van de levensduur van C.elegans (A). De traditionele methode voor het scoren van C. elegans levensduur. Verschillende kleine gesynchroniseerde populaties van isogene dieren per aandoening worden in de loop van de tijd gevolgd. Dezelfde populatie dieren wordt gedurende de hele studie gevol.......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
FuDR (5-Fluoro-2'-deoxyuridine)	Alfa Aesar	L16497
24 Well Culture Plates	Greiner Bio-One	#662102
600 µL 96-well plates	Greiner Bio-One	#786261
2mL 96-well plates	Greiner Bio-One	#780286
96-pin plate replicator	Nunc	250520
C. elegans RNAi clone library in HT115 bacteria- Ahringer	Source Bioscience	C. elegans RNAi Collection (Ahringer)	See also Kamath et. al, Nature 2003.
C. elegans RNAi clone library in HT115 bacteria- Vidal	Source Bioscience	C. elegans ORF-RNAi Resource (Vidal)	See also Rual et. al, Genome Research 2004. This library is also available from Dharmacon.
L4440 Empty Vector Plasmid	Addgene	1654	https://www.addgene.org/1654/