Methodenartikel

Multi-unit Opname Methoden om neurale activiteit karakteriseren in de Locust ( Schistocerca Americana) Olfactorische Circuits

DOI:

10.3791/50139

⸱

25 januari 2013

 ,  ,  , 
1Department of Biomedical Engineering, Washington University in St. Louis

In dit artikel

Samenvatting

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

We tonen variaties van de extracellulaire multi-unit opname techniek om geur-reacties van de consument te karakteriseren in de eerste drie fasen van de ongewervelde olfactorische pad. Deze technieken kunnen gemakkelijk worden aangepast aan ensemble activiteit onderzocht andere neurale systemen.

Samenvatting

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Detectie en interpretatie van olfactorische signalen zijn van cruciaal belang voor het voortbestaan ​​van veel organismen. Opmerkelijk is dat soorten over phyla suggereert opvallend vergelijkbaar olfactorische systemen die de biologische aanpak van de chemische detectie is geoptimaliseerd over evolutionaire tijd 1. In het insect olfactorische systeem, geurstoffen worden getransduceerd door olfactorische receptor neuronen (ORN) in de antenne, die chemische stimuli omzetten in treinen van actiepotentialen. Sensorische input van de ORNs wordt vervolgens doorgezonden naar een antennelid kwab (AL, een structuur analoog aan de vertebrate bulbus olfactorius). In de AL, neurale representaties voor geuren in de vorm van spatio-temporele patronen afvuren verdeeld over ensembles van de hoofdsom neuronen (PN, ook wel aangeduid als projectie neuronen) 2,3. De AL-uitgang wordt vervolgens verwerkt door Kenyon cellen (KCS) in de stroomafwaartse paddestoel lichaam (MB), een structuur in verband met olfactorisch geheugen en het leren 4,5. Haare, presenteren we elektrofysiologische opname technieken om geur-opgewekte neurale respons moet worden gecontroleerd in deze olfactorische circuits.

Eerst geven we een enkele sensillen opname methode om geur-reacties van de consument te bestuderen op het niveau van populaties van ORNs 6,7. We bespreken het gebruik van zout gevuld geslepen glazen pipetten als elektroden aan extracellulair monitoren ORN reacties. Vervolgens presenteren we een methode om extracellulair monitoren PN reacties met behulp van een commerciële 16-kanaals elektrode 3. Een soortgelijke benadering met behulp van een op maat gemaakte 8-kanaals gedraaide draad tetrode is aangetoond voor Kenyon cel opnames 8. Wij bieden informatie over onze experimentele opstelling en de huidige vertegenwoordiger van registratie van de sporen voor elk van deze technieken.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1. Geur Voorbereiding en Levering

  1. Verdunde oplossingen geur in minerale olie volume om de gewenste concentratie te bereiken. Sla een 20 ml mengsel van minerale olie en de geurstof in een 60 ml glazen fles. Plaats twee injectienaalden een rubber stop (gauge 19), vanaf de onderkant en de andere van de top, een inlaat en een uitlaat lijn. Sluit de glazen fles met deze rubberen stop en voeg een speciaal ontworpen actieve kool filter op de inlaat lijn (Figuur 1A).
  2. Het koolstoffilter wordt gemaakt van twee 6 ml spuiten. Snijd de spuiten in de helft en verwijder de zuiger. Vul elk van de overige stukken met katoen en actieve kool voordat u ze aan elkaar met krimpkous.
  3. Sluit de afvoerleiding van de geur fles (met behulp van polyethyleen buis, ID 0,86 mm) om de plastic buis (Nalgene FEP Slangen, ID 5,8 mm) die een constante luchtstroom levert aan de overkant van de antenne (Figuur 1B ).
  4. Directe koolstof gefiltreerd, droge lucht (dragergas; debiet, 0,75 L / min) naar de sprinkhaan met een plastic buis geplaatst binnen enkele cm van de sprinkhaan antenne.
  5. Voor geur stimulatie verplaatsen een constant volume (0,1 L / min) van de statische headspace boven de geur oplossing in de fles. Dit wordt bereikt door het injecteren van een gelijke hoeveelheid ontvochtigde lucht in de fles met een Pico-pomp (WPI, PV-820). De dampen van de geur fles wordt geleid door de afvoerleiding op de luchtstroom buis (Figuur 1B).
  6. Verwijder de geleverde geur dampen door het plaatsen van een vacuüm trechter ~ 10 cm achter de sprinkhaan antenne.

2. Voorbereiding Locust Antenne voor Single sensillen opnemen

  1. Selecteer een jong-volwassen sprinkhaan van beide geslachten met volgroeide vleugels, maar voorafgaand aan de paring etappe van een drukke kolonie. Om de sprinkhaan te beperken, eerst amputeren zijn benen. Sluit de amputatie sites met weefsel lijm (Vetbond, 3M). Secure thij sprinkhaan op een speciaal ontworpen ruimte met behulp van een klein stukje isolatietape gedrapeerd rond haar thorax (figuur 2A).
  2. Onder een dissectie microscoop, een ondiepe groef in de was platform (Figuur 2A) voor antenneplaatsing. De antenne in de groef en te stabiliseren met batik was bij de twee uiteinden van de antenne (Figuur 2B, een electrowaxer wordt gebruikt voor het smelten van de was).
  3. Plaats een aardelektrode (gechloreerde zilverdraad) in de thorax (~ 1 cm afstand van het hoofd). Gebruik batik wax om zowel afdichting van de incisie en houd de grond draad op zijn plaats (Figuur 2A).

3. Single sensillen Opnemen op Geur-opgeroepen Reacties Monitor van olfactorische receptor neuronen (ORNs)

  1. Plaats de gestabiliseerde sprinkhaan antenne onder een stereomicroscoop (Leica M205C) op een trillingsisolatie tabel (TMC) (Figuur 3A). Zorg ervoor dat de basis van de opname sensillen duidelijkly zichtbaar zijn (Figuur 3B).
  2. Gebruik een micropipet trekker (Sutter P-1000) op glas elektrodes (impedantie 3 tot 10 MQ wanneer gevuld met sprinkhaan zoutoplossing 9, tip diameter 1 tot 3 urn) met behulp van een borosilicaatglas capillaire buis (OD 1,2 mm, ID 0,69 mm) te fabriceren.
  3. Plaats de glazen elektrode in een micropipet houder die is bevestigd aan een micromanipulator gemotoriseerde (Sutter MP-285). Steek de elektrode in de basis van een sensillen (Figuur 3B). Merk op dat elke sensillen kan 3 tot 50 ORNs bevatten sprinkhanen 10.
  4. Versterken het signaal (10.000 keer) met een AC versterker (Grass P-55). Filter het signaal tussen 0,3 tot 10,0 kHz en verwerven tegen een 15 kHz bemonsteringsfrequentie (figuur 3D) met een data acquisitie systeem (LabView, PCI-MIO-16E-4 DAQ kaarten; National Instruments).

4. Locust Dissection Procedure voor antennaal Lobe en Mushroom Body Recordings

  1. Volg de restraining procedures zoals beschreven in paragraaf 2.1. Plaats de sprinkhaan in een speciaal ontworpen geplaatst zoals aangegeven in figuur 4A en B.
  2. Om zoutoplossing perfuseren tijdens en na de dissectie procedure, een wax cup opgebouwd rond de sprinkhaan hoofd. De was moet beginnen kop boven de monddelen, en buiten de samengestelde ogen omvat het gebied tussen de twee antennes zoals weergegeven in figuur 4C.
  3. Om de antennes om door de wax cup, maak kleine tunnels aan beide zijden met kunststof (polyethyleen) slang (5 mm lang, ID 0.86 mm). Zorg ervoor dat de kunststof buis kan schuiven door de was beker. Dit laatste wordt bereikt door een rubber pakking die strak wikkelt rond de plastic buis maar is bevestigd aan de was-cup (Figuur 4C).
  4. Met epoxyhars, bevestig de basis van de antenne tot de onderkant van de plastic buis. Deze stap zorgt ervoor dat de antennes worden gehouden, ook nadat de omringendecuticula is verwijderd.
  5. Houd de was beker gevuld met een zoutoplossing 9 vanaf dit punt. Verwijder eerst een centraal rechthoekig gebied tussen de twee antennes (lange zijde van de rechthoek uitgelijnd met de achterwaartse as). Verwijder vervolgens cuticula in aangrenzende gebieden zonder de samengestelde ogen en cuticula aan de basis van de antenne (Figuur 4D).
  6. Met behulp van fijne tang, verwijder voorzichtig luchtzakken en vet lichamen rond de hersenen. Aan het einde van deze stap dient de sprinkhaan hersenen duidelijk zichtbaar (Figuur 4D). Merk op dat de hersengebieden die de geur-informatie (met lichtgele pigmentatie) verwerken, zijn gelegen tussen de twee antennes.
  7. In sprinkhanen de darm loopt onder de hersenen en langs de lengte van het lichaam. Om beweging van de darm te voorkomen dat potentieel destabiliserende de voorbereiding, trekt u de voordarm en snijd met behulp van fijne schaar. Maak een kleine incisie in de buik netboven het rectum en verwijder de darm door te trekken de dikke darm met grof tang. Om een ​​zoutoplossing lekkage te voorkomen, binden de buik direct anterior naar de incisie site met hechtdraad draden.
  8. Gebruik een kleine platform van dunne draad bekleed met een dunne laag van was op de hersenen te verhogen en te stabiliseren 11 tijdens elektrofysiologie zoals weergegeven in figuur 4D.
  9. Het insect hersenen bedekt met een dunne isolerende mantel die moet vóór experimenten worden verwijderd. Om desheath de hersenen, uitgespreid een kleine hoeveelheid van een enzym (0,3-0.4 mg protease, Sigma Aldrich) over het oppervlak van de hersenen met fijne forceps 9. Na ~ 5-10 seconden van enzym toepassing, spoel de hersenen met een zoutoplossing. Met behulp van super-fijne pincet heel zachtjes samen te knijpen en trek de schede omhoog en vervolgens scheuren te openen over de opname locaties (AL en MB; weergegeven in figuur 4E, F).

5. Multi-unit Opnamen van de antennaal Lobe ende Mushroom Lichaam

  1. Plaats de sprinkhaan preparaat (figuur 5A) onder een stereomicroscoop opgehangen aan een boom stand op een trillingsisolatie tabel.
  2. Zorg voor een constante zoutoplossing perfusiesnelheid (ongeveer 0,04 l / uur) gedurende het experiment. Gebruik een gechloreerde zilverdraad ondergedompeld in de zoutoplossing gevulde beker was de aardelektrode.
  3. Voor PN-opnamen, gebruik maken van een 16-kanaals silicium sonde (NeuroNexus Technologies, item # A2x2-tet-3mm-150-150-121-A16, Figuur 5B). Vóór elk experiment elektrolytisch de elektroden met goud weerstanden in het bereik 200-300 kQ bereiken. Gebruik de schakeling van figuur 7 voor galvaniseren.
  4. Plaats de elektrode dicht bij het ​​oppervlak van de antennelid kwab en voorzichtig plaats in het weefsel een manuele micromanipulator (WPI, M3301R) (Figuur 5D).
  5. Advance de elektrode in ~ 10 micrometer stappen. Wacht 2-3 min bij elke stap en evalueren van de te verwervend kwaliteit van het signaal. In een ideale opname site, extracellulaire signalen worden opgepikt door meerdere opname kanalen en een hoge signaal-ruisverhouding (SNR> 3-5 keer noise SDS) hebben.
  6. Voor KC-opnamen gebruikt u een op maat gemaakte gedraaide draad tetrode (Figuur 5C, stap-voor-stap fabricage procedure gepresenteerd in hoofdstuk 6). Elektrolytisch deze elektroden zoals besproken in stap 5.3. Plaats de tetrode op het oppervlak van de MB (Figuur 5E) als KC somata beperkt tot de oppervlakkige laag van de MB 8.
  7. Zowel PN en KC opnamen tegelijkertijd worden gemaakt van dezelfde sint preparaat zoals schematisch getoond in figuur 5A.
  8. Wacht ten minste 15 minuten na het vinden van de opnamelocatie tot een stabilisatie van de elektroden mogelijk te maken.
  9. Acquire alle extracellulaire signalen bij 15 KHz, filter tussen 0,3-6 kHz, en versterken (10.000 keer) met een 16-kanaals AC versterker (Biologie Elektronica Winkel; Caltech, Pasadena) (Figuur 6A, B).

6. Procedures voor Twisted draadelektrode Maak voor KC Recordings

  1. Om een multi-unit elektrode te ontwerpen voor KC-opnamen, gebruik dan geïsoleerde nikkel-chroom draad (RO800, 0.0005 "filament) 8.
  2. Als acht elektroden worden gewenst dan wikkel de draad rond een 10-15 cm lang stuk karton 4 keer. De uiteinden van het karton kan worden bedekt met plastic buis om de randen voorkomen snijden van de draad. Terwijl verpakking, zorg ervoor dat er weinig speling, maar zorg ervoor dat de draad niet strak staat. Wees voorzichtig met de draad als het breekt gemakkelijk.
  3. Leg de draden samen bovenaan het karton en met een stukje tape (Time Tape, T-534-RP) aan elkaar te houden. Snijd de strengen aan de andere kant. Verwijder de draden en de groep van de draden aan het afgesneden uiteinde en met behulp van een ander stuk van de tape.
  4. Met behulp van een titerplaat shaker (Thermo Scientific, Model 4625Q), wind de strengen aan elkaar (~ 72 omw / min gedurende 3min) tot een gedraaide draad vormen. De onderkant van de opgenomen strengen kan worden geklikt om de titer plaat rotor en de top kan worden geklikt om een ​​boom staan. Tijdens het wikkelen, moet de draad weinig speling, maar niet gespannen zijn.
  5. Smelt de isolatie met een heteluchtpistool (Weller 6966C) aan elkaar plakken van de individuele strengen en vormen een enkele draad. 3-4 slow passes (3-4 sec elk) over de lengte van de draad moet voldoende te verwarmen en versmelten de strengen. Laat vervolgens de draad van de bodem en laat hem om te ontspannen. Knip de draad in de buurt van de uiteinden van de tape te verwijderen.
  6. Het ene uiteinde van de draad door een 5-6 cm lang, glazen capillaire buis (OD 1,0 mm, 0,58 mm ID). Plagen elkaar de gedraaide draad aan het ene uiteinde met behulp van fijne pincet en verwijder de bekleding door heel kort torching het einde met een vlam. Deze stap moet zorgvuldig gebeuren; blootstellen van de draad om de vlam te lang zal de strengen te smelten en wirwar.
  7. Voorzichtig scheiden de 8 strengen aan de gevlamde einde eennd soldeer elke streng afzonderlijk in een 8-pens IC-voet. Smeer de bovenkant van de IC-voet met epoxy de strengen en glazen capillaire plaats houden. Plaats ook een kleine druppel epoxy aan de andere kant van het capillair om de draad op zijn plaats (figuur 5C).
  8. Snij vervolgens het uiteinde van de draad bij een 45 graden hoek met carbide schaar ongeveer 0,5 cm uit de capillaire punt.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Resultaten

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Geur opgewekte responsen van een ORN twee verschillende alcoholen worden getoond in de figuur 3D. Afhankelijk van de opnameplaats (sensilla type, plaatsing van de elektrode) multi-unit opnames kan worden bereikt.

Een ruwe extracellulaire golfvorm van een AL opname is weergegeven in figuur 6A. Actiepotentialen of spikes van verschillende amplitudes afkomstig van verschillende PN worden waargenomen in deze spanning trace. Hoewel de sprinkhaan antennaal kwab he...

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Discussie

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

De meeste zintuiglijke prikkels oproepen combinatorische reacties die worden verdeeld over ensembles van neuronen. Vandaar gelijktijdige bewaking van multi-neuron activiteit noodzakelijk om te begrijpen hoe stimulus-specifieke informatie wordt gerepresenteerd en verwerkt door neurale circuits in de hersenen. Hier hebben we aangetoond extracellulaire multi-unit opname technieken om geur-reacties van de consument te karakteriseren aan de eerste drie verwerkingscentra langs de insect olfactorische pad. We merken op dat de ...

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Openbaarmakingen

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Geen belangenconflicten verklaard.

Dankbetuigingen

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

De auteurs willen graag de volgende bedanken voor de financiering van dit werk: royale-opstarten middelen van de faculteit Biomedische Technologie in Washington University, een McDonnell Center for Systems Neuroscience subsidie, een Office of Naval Research toekenning (Toekenning #: N000141210089) naar BR

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Materialen

Lijst van materialen gebruikt in dit artikel
NaamBedrijfCatalogusnummerOpmerkingen
Naam Vennootschap Catalogusnummer Reacties
Elektrofysiologie Equipment
AC-versterker GRAS Model P55 voor enkele sensillen opnames
Audio-monitor (model 3300) AM Systems 940000
Custom-made 16-kanaals voorversterker en eindversterker Cal. Tech. Biologie Elektronica Winkel voor AL en MB-opnamen
Data acquisitie-eenheid National Instruments BNC-2090
Glasvezel licht WPI SI-72-8
Lichtbron 115 V WPI NOVA
Handmatig micromanipulator WPI M3301R voor sint-hersenen-opnamen
Stereomicroscope1 op giek stand Leica M80 voor sint-hersenen-opnamen
Stereomicroscope2 Leica M205C voor enkele sensillen opnames
Trillingsisolatie tafel TMC 63 tot 500 serie
Gemotoriseerde micromanipulator Sutter Instrumenten MP285 / T
Oscilloscoop Tektronix TD2014B
Elektroden / Bouw & Industrie
16-kanaals elektrode NeuroNexus A2x2-tet-3mm-150 tot 121 voor antennaal kwab opnames
Borosilicate capillairen met gloeidraad, ID 0,69 mm Sutter Instrumenten BF120-69-10 voor het maken van glas elektrodes
Micropipet trekker Sutter Instrumenten P-1000
Functiegenerator Multimeter Warehouse SG1639A voor gold-plating elektroden
Gold plating oplossing (niet cyanide) SIFCO Industries NC SPS 5355
Impedantie tester BAK Electronics Inc IMP-2 voor gold-plating elektroden
Schakel roterende Electroswitch C7D0123N voor goud-plating elektroden
Pulse isolator WPI A365 voor gold-plating elektroden
Q series elektrodehouder Warner Instruments 64-1.091
Zilverdraad 0.010 "diameter AM Systems 782500 aardelektrode
8-pins DIP IC socket Digikey ED90032-ND
Borosilicate capillairen met gloeidraad, ID 0,58 mm Warner Instruments 64-0.787 gedraaide draad tetrode bouw
Warmte kanon Weller 6966C
Rediohm-800 kabel Kanthal Precision Technologies PF002005
Titerplaat shaker ThermoWetenschappelijk 4625Q draaien draden
Carbide schaar, 4.5 " Biomedisch Onderzoek Instr 25-1,000 voor het snijden twisted draden tetrode
Fijne punt pincet HECO 91-EF5-SA voor plagen tetrode draden uit elkaar
Geur Levering
6 ml spuit Kendall 1180600777 voor op maat ontworpen actief koolfilter
Bruin geur flessen Visser 08-912-165
Houtskool BuyActivatedCharcoal.com GAC-48C
Droogmiddel Drieriet 23005
Drieriet gasdroogapparaat jar Fischer Scientific 09 tot 204
Krimpbuizen 3M EPS-200 geurfilter voorbereiding
Injectienaald aluminium naaf, gauge 19 Kendall 8881-200136 voor het verstrekken van in-en uitlaat lijnen voor geur flessen
Minerale olie Mallinckrodt Chemicals 6357-04 voor geur verdunning
Nalgene plastic buizen, 890 FEP Thermo Scientific 8050-0310 voor draaggas levering
Pneumatische picopump WPI sys-pv820 voor geur levering
Polyethyleen buis ID 0,86 mm Intramedic 427421 voor geur fles outlet verbons en zout overvloed slangen
Stoppers Lab Pure 97041 voor het afdichten geur flessen
Tijd tape PDC T-534-RP
Tubing luer Cole-Parmer 30.600-66
Vacuüm buis McMaster-Carr 5488K66
Voorbereiding / Dissection
100 x 15 mm petrischaal VWR International 89000-304
18 AWG koper gevlochten draad Lapp Kabel 4510013 draadisolatie wordt gebruikt als rubber pakkingen
22 AWG HOOKUP WIRE AlphaWire 1551 hersenenplatform
Batik wax Jacquard 7946000
Dental periferie Wax Henry Schein Dental- 6652151
Electrowaxer Almore International 66000
Epoxy, 5 min Permatex 84101
Injectienaald aluminium naaf Kendall 8881-200136
Protease van Streptomyces griseus Sigma-Aldrich P5147 voor desheathing sprinkhaan hersenen
Hechtdraad niet-steriele Visser NC9087024 voor het binden van de buik na darm verwijderen
Vetbond 3M 1469SB voor het afdichten amkening plaatsen
Dumont # 1 pincet (grof) WPI 500335
Dumont # 5 titanium pincet (fijn) WPI 14096
Dumont # 5SF pincet (superfijne) WPI 500085 desheathing sprinkhaan hersenen
10 cm ontleden schaar WPI 14393 voor het verwijderen van poten en vleugels
Vannas schaar (fijn) WPI 500086 voor het verwijderen van nagelriemen, het snijden van de voordarm
Saline Profusion
Uitbreidingsset met tarief debietregelaar Moore Medical 69136 voor het regelen van zout stroom
Intraveneuze toediening set metY injectieplaats Moore Medical 73190 voor het regelen van zout stroom

Referenties

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Ache, B. W., Young, J. M. Olfaction: diverse species, conserved principles. Neuron. 48, 417-430 (2005).
  2. Laurent, G., Wehr, M., Davidowitz, H. Temporal representations of odors in an olfactory network. Journal of Neuroscience. 16, 3837-3847 (1996).
  3. Stopfer, M., Jayaraman, V., Laurent, G. Odor identity vs. intensity coding in an olfactory system. Neuron. 39, 991-1004 (2003).
  4. Steven de Belle, J., Heisenberg, M. Associative odor learning in Drosophila abolished by chemical ablation of mushroom bodies. Science. 263, 692-695 (1994).
  5. Cassenaer, S., Laurent, G. Conditional modulation of spike-timing-dependent plasticity for olfactory learning. Nature. 482, 47-52 (2012).
  6. Hallem, E. A., Carlson, J. R. Coding of odors by a receptor repertoire. Cell. 125, 143-160 (2006).
  7. Raman, B., Joseph, J., Tang, J., Stopfer, M. Temporally diverse firing patterns in olfactory receptor neurons underlie spatiotemporal neural codes for odors. Journal of Neuroscience. 30, 1994-2006 (2010).
  8. Perez-Orive, J., et al. Oscillations and sparsening of odor representations in the mushroom body. Science. 297, 359-365 (2002).
  9. Naraghi, M., Laurent, G. Odorant-induced oscillations in the mushroom bodies of the locust. The Journal of Neuroscience. 14, 2993-3004 (1994).
  10. Ochieng, S. A., Hallberg, E., Hansson, B. S. Fine structure and distribution of antennal sensilla of the desert locust, Schistocerca gregaria (Orthoptera: Acrididae). Cell and Tissue Research. 291, 525-536 (1998).
  11. Burrows, M., Laurent, G. Synaptic Potentials in the Central Terminals of Locust Proprioceptive Afferents Generated by Other Afferents from the Same Sense Organ. Journal of Neuroscience. 13, 808-819 (1993).
  12. Pouzat, C., Mazor, O., Laurent, G. Using noise signature to optimize spike-sorting and to assess neuronal classification quality. Journal of Neuroscience Methods. 122, 43-57 (2002).
  13. Mazor, O., Laurent, G. Transient dynamics versus fixed points in odor representations by locust antennal lobe projection neurons. Neuron. 48, 661-673 (2005).
  14. Christensen, T. A., Pawlowski, V. A., Lei, H., Hildebrand, J. G. Multi-unit recordings reveal context dependent modulation of synchrony in odor-specific neural ensembles. Nature Neuroscience. 3, 927-931 (2000).
  15. Pellegrino, M., Nakagawa, T., Vosshall, L. B. Single Sensillum Recordings in the Insects Drosophila melanogaster and Anopheles gambiae. J. Vis. Exp. (36), e1725(2010).
  16. Geffen, M. N., Broome, B. M., Laurent, G., Meister, M. Neural Encoding of Rapidly Fluctuating Odors. Neuron. 61, 570-586 (2009).
  17. Ito, I., Ong, R. C., Raman, B., Stopfer, M. Sparse odor representation and olfactory learning. Nature Neuroscience. 11, 1177-1184 (2008).
  18. Laurent, G. Olfactory network dynamics and the coding of multidimensional signals. Nature Review Neuroscience. 3, 884-895 (2002).
  19. Brown, S. L., Joseph, J., Stopfer, M. Encoding a temporally structured stimulus with a temporally structured neural representation. Nature Neuroscience. 8, 1568-1576 (2005).
  20. MacLeod, K., Laurent, G. Distinct mechanism for synchronization and temporal patterning of odor-encoding neural assemblies. Science. 274, 976-979 (1996).
  21. Wehr, M., Laurent, G. Relationship between afferent and central temporal patterns in the locust olfactory system. The Journal of Neuroscience. 19, 381-390 (1999).
  22. Moreaux, L., Laurent, G. Estimating firing rates from calcium signals in locust projection neurons in vivo. Frontiers in Neural Circuits. 1, 1-13 (2007).
  23. Galizia, C. G., Joerges, J., Kuttner, A., Faber, T., Menzel, R. A semi-in-vivo preparation for optical recording of the insect brain. Journal of Neuroscience Methods. 76, 61-69 (1997).
  24. Galan, R. F., Sachse, S., Galizia, C. G., Hez, A. V. M. Odor-driven attractor dynamics in the antennal lobe allow for simple and rapid olfactory pattern classification. Neural Computation. 16, 999-1012 (2004).
  25. Kuebler, L. S., Schubert, M., Karpati, Z., Hansson, B. S., Olsson, S. B. Antennal Lobe Processing Correlates to Moth Olfactory Behavior. Journal of Neuroscience. 32, 5772-5782 (2012).
  26. Silbering, A. F., Bell, R., Galizia, C. G., Benton, R. Calcium Imaging of Odor-evoked Responses in the Drosophila Antennal Lobe. J. Vis. Exp. (61), e2976(2012).
  27. Skiri, H. T., Galizia, C. G., Mustaparta, H. Representation of Primary Plant Odorants in the Antennal Lobe of the Moth Heliothis virescens Using Calcium Imaging. Chemical Senses. 29, 253-267 (2004).

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Herprints en machtigingen

Toestemming aanvragen om de tekst of afbeeldingen van dit JoVE-artikel te hergebruiken

Toestemming aanvragen

Trefwoorden

Locust Olfactory CircuitsSingle Sensillum RecordingPrincipal Neuron RecordingsKenyon Cell RecordingsGlass Microelectrode Fabrication16 channel Silicon ProbeTwisted Wire TetrodeAntennal Lobe RecordingsMushroom Body Recordings

Gerelateerde artikelen