Een abonnement op JoVE is vereist om deze inhoud te bekijken. Log in of start vandaag met uw gratis proefperiode.

Methodenartikel

PRP als een nieuwe aanpak om infectie te voorkomen: Voorbereiding en

21.2K weergaven

⸱

DOI:

10.3791/50351

⸱

9 april 2013

 , 

In dit artikel

Samenvatting

Implantaat-geassocieerde infectie is een significante klinische complicatie. Deze studie beschrijft een aanpak met bloedplaatjes-rijk plasma (PRP) van het implantaat-geassocieerde infecties, presenteert het protocol voor het bereiden PRP met constante concentratie van bloedplaatjes en rapporteert de nieuw geïdentificeerde antimicrobiële eigenschappen van PRP en bijbehorende protocollen voor de behandeling van dergelijke antimicrobiële eigenschappen In vitro.

Samenvatting

Implantaat-geassocieerde infectie wordt steeds meer en meer uitdagend om de gezondheidszorg over de hele wereld als gevolg van toenemende resistentie tegen antibiotica, de overdracht van antibiotica resistente bacteriën tussen dieren en mensen, en de hoge kosten van de behandeling van infecties.

In deze studie beschrijven we een nieuwe strategie die effectief in het voorkomen implantaat geassocieerde infectie gebaseerd op de potentiële antimicrobiële eigenschappen van bloedplaatjesrijk plasma (PRP). Door zijn goed bestudeerde eigenschappen voor het bevorderen genezing heeft PRP (een biologisch product) steeds meer gebruikt voor klinische toepassingen zoals orthopedische operaties, periodontale en orale chirurgie, maxillofaciale chirurgie, plastische chirurgie, sportgeneeskunde, etc.

PRP kan een geavanceerd alternatief voor conventionele antibiotica voorkomen implantaat-geassocieerde infecties. Het gebruik van PRP voordelig kunnen zijn in vergelijking met conventionele antibiotica siNCE PRP is minder kans op resistentie tegen antibiotica te induceren en PRP's antimicrobiële en helende eigenschappen te kunnen een synergetisch effect op infectiepreventie hebben. Het is bekend dat ziekteverwekkers en menselijke cellen race voor implantaatoppervlakken en PRP eigenschappen bevorderen genezing kunnen menselijke celhechting verbeteren waardoor de kans op infectie. Daarnaast PRP is inherent biocompatibel, en veilig en vrij van het risico van overdraagbare ziekten.

Voor ons onderzoek hebben we gekozen een aantal klinische bacteriestammen die gewoonlijk worden aangetroffen in orthopedische infecties en onderzocht of PRP heeft in vitro antimicrobiële eigenschappen tegen deze bacteriën. Wij hebben PRP met tweemaal centrifugeren benadering waarmee dezelfde bloedplaatjesconcentratie worden verkregen voor alle monsters. We hebben bereikt consistente antimicrobiële bevindingen en vond dat PRP sterk is in vitro antimicrobiële eigenschappen tegen bacteriën, zoals methicillin-gevoelige en methicilline-resistente Staphylococcus aureus, groep A Streptococcus en Neisseria gonorrhoeae. Daarom kan het gebruik van PRP hebben het potentieel om infectie te voorkomen en de dure postoperatieve behandeling van implantaten geassocieerde infecties te verminderen.

Inleiding

Implantaat-geassocieerde infectie is een belangrijk klinisch complicatie. Staphylococcus aureus (S. aureus) is een van de meest voorkomende micro-organismen geïsoleerd uit implantaten infecties. Het is in staat een biofilm de oppervlakken van implantaten omvat en kan leiden tot antibiotica-resistente infecties 1,2. Behandeling van implantaat-geassocieerde infectie vereist vaak langdurig verblijf in ziekenhuizen voor herhaalde debridements en langdurige parenterale antibiotische therapie. In antibiotica resistente gevallen kan verwijdering van het implantaat noodzakelijk. De stijgende resistentie van bacteriën tegen antibiotica is ook genoemd door ....

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Protocol

1. Bereiding en activering van PRP

1,1 bloed te trekken

  1. Verdoven konijn door inhalatie van isofluraan (2% in O 2 voor inductie en 1% voor onderhoud).
  2. Trek 2 ml 0,129 M trinatriumcitraat (een anticoagulent oplossing) in een 20 ml spuit. De trinatriumcitraat oplossing bereid door 1,897 g trinatriumcitraat in 50 ml gedestilleerd H 2 O en filteren met een 0,22 urn steriel filter.
  3. Steriliseer de konijnenoor met 70% ethanol.
  4. Bloeden (bijv. 5 ml) van het konijn oorader via een vlindernaald (25 G) op de injectiespuit.
  5. Meng het bloed met het trinatriumcitraat oplossing ....

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Resultaten

PRP is reproduceerbaar bereid met een tweemaal centrifugeren benadering (figuur 1). PRP blijkt op overtuigende (tot 100-voudige afname in CFU) in vitro antimicrobiële eigenschappen tegen methicilline resistente S. aureus (MRSA) (figuur 3), die meestal wordt gevonden in ziekenhuizen wereldwijd 14. Ook PRP heeft sterke antimicrobiële eigenschappen tegen methicilline gevoelige S. aureus (MSSA), Groep A Streptococcus en Neisseria gonorrhoea.......

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Discussie

Bloedplaatjesrijk plasma wordt steeds meer gebruikt voor klinische toepassingen vanwege de genezing bevorderende 15-17. In de huidige studie werd PRP gepresenteerd als een nieuwe aanpak voor infectiepreventie. PRP bleek sterke antimicrobiële eigenschappen tegen MRSA, MSSA, Groep A Streptococcus en Neisseria gonorrhoeae zijn. De belangrijkste voordelen van PRP, in vergelijking met conventionele behandelingen met antibiotica, voor infectiepreventie zijn onder andere: (1) Huidige antibiotica te.......

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Openbaarmakingen

De auteurs verklaren dat zij geen concurrerende financiële belangen hebben.

Dankbetuigingen

De auteurs danken Therwa Hamza, John E. Tidwell, Nina Clovis, en Suzanne Smith voor experimentele bijstand en Suzanne Smith voor het proeflezen. De auteurs danken ook John Thomas, PhD voor het verstrekken van de bacteriële klinische isolaten en John B. Barnett, PhD voor zijn steun en het gebruik van de biologische veiligheid lab bij de afdeling Microbiologie, Immunologie en Celbiologie aan Universiteit van West Virginia. De auteurs erkennen financiële steun van de osteosynthese en Trauma Care Foundation en de National Science Foundation (# 1003907). Microscoop experimenten en beeldanalyse werden ook uitgevoerd in de Universiteit van West Virginia Imaging Facility, di....

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Materialen

Lijst van materialen gebruikt in dit artikel
NaamBedrijfCatalogusnummerOpmerkingen
Bovine thrombinKing Pharmaceuticals, Inc60793-215-05Thrombine (van runder afkomst)
Calcium chlorideKing Pharmaceuticals, Inc60793-215-0510% calciumchloride
EthanolSigma-AldrichE7023
IsofluraneBaxter1001936060
Mueller Hinton bouillonBecton, Dickinson and Company275710
Fosfaat-gebufferde zoutoplossingSigma-AldrichD8662
Tri-natriumcitraatSigma-AldrichW302600
Tryptische soja-agarFisher ScientificR01202
CentrifugeKendro Laboratory Products750043077
SpuitfilterMilliporeSLGP033RS

Referenties

  1. Gristina, A. G. Biomaterial-centered infection: microbial adhesion versus tissue integration. Science. 237, 1588-1595 (1987).
  2. Gristina, A. G., Costerton, J. W. Bacterial adherence to biomaterials and tissue. The significance of its role in....

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Herprints en machtigingen

Meer artikelen verkennen

Bloedplaatjesrijk plasmaPRP-bereidingbacterieel inoculumtrombine-activatiekolonievormende eenhedenCFU-reductiedubbele centrifugatiemethicilline-resistente Staphylococcus aureuswondgenezende eigenschappen