Prostaatkanker (PRCA) en benigne prostaathyperplasie (BPH) zijn significant gezondheidslasten. PRCA is de tweede meest voorkomende solide orgaantransplantatie kanker bij mannen en een belangrijke oorzaak van kanker-gerelateerde sterfte 1. BPH is ook zeer vaak voor bij oudere mannen, en er wordt geschat dat de klinische manifestatie van BPH, de lagere urinewegen (LUTS), is van invloed op 50-90% van de mannen 2. Terwijl androgenen en oestrogenen zijn bekend belangrijk om in PRCA en BPH, ons begrip van de hormonale mechanismen die ten grondslag liggen aan het ontstaan van kanker en de groei is nog onvolledig 3,4. Eenvoudige en genetisch handelbaar diermodellen ondersteunen de studies die deze prioriteiten zullen met prostaat onderzoek. In hormoon reagerende aandoeningen zoals PRCA en BPH, het gebruik van subcutane, langzame afgifte hormoon pellets, op zich of in combinatie met een renale capsule xenografting (de overdracht van cellen, weefsels of organen van de ene soort in de andere) in het immunocompromised muisgastheer, biedt een eenvoudige en reproduceerbare methode voor het bestuderen van hormonale regulatie van de groei en carcinogenese.
Subcutaan hormoon pellet implantatie is een eenvoudige en reproduceerbare techniek om hormonale regulatie van carcinogenese en goedaardige groei van de prostaat 5 bestuderen. Subcutane implantatie van volwassen mannelijke muizen met 25 mg testosteron (T) en 2,5 mg 17β-oestradiol (E2), veroorzaakt een toename in serum E2 en geleidelijke afname T, opnieuw de dynamische hormonale milieu van oudere mannen 5,6. Daarnaast is dit model recapituleert veel van de klinische kenmerken van BPH-LUTS 5,7. Alternatieve methoden voor het hormoon toediening omvatten orale / maagsonde of intraperitoneale injectie, die leed veroorzaken bij de knaagdieren, zijn minder consequent in het leveren van dezelfde hoeveelheid geneesmiddel in de tijd, en zijn arbeidsintensiever dan een eenmalige chirurgische implantatie. Andere subcutane modi voor hormone en / of drug delivery omvatten Silastic capsules 8. Terwijl we hebben ook ervaring met het gebruik van Silastic capsules, worden gecomprimeerd pellets favoriet voor hun gebruiksgemak en reproduceerbaarheid. Bovendien afgiftesnelheden van samengeperste hormoon pellets beter na te bootsen de dynamische geslacht steroïde hormoon ratio's waargenomen bij oudere mannen 5,7.
Sinds de ontwikkeling van genetisch immuungecompromitteerde muizen hebben talrijke in vivo modelsystemen waarin xenografting technieken ontwikkeld voor de studie van een grote verscheidenheid van normale en zieke weefsels. Er zijn een aantal standaard categorieën van xenografting. Weefsel xenotransplantaten bestaan uit een klein stukje intacte weefsel, dat een normale structuur, kwaadaardige tumor, of goedaardige groei zijn. Szot et al.. (2007) hebben onlangs verlicht niercapsule xenografting van pancreaseilandjes 9. Aamdal et al.. (1985) beschreven niercapsule xenografting van 27 kanker bij de mens cellijnen in immunocompromised muis biedt 10. Enten kan ook bestaan uit een geïmmortaliseerde cellijn (kanker of niet-tumorigene), of kan bestaan uit een geïmmortaliseerde cellijn in combinatie met cellen geïsoleerd uit mesenchym (cel recombinant graft).
Wij zijn voorstander van xenografting van cel recombinanten de respectieve rol van stroma en epitheel in de ontwikkeling van PRCA en BPH sonde. Cunha et al.. (1980) was de eerste om te melden dat bij volwassen muizen blaas epitheel wordt gecombineerd met embryonale urogenitale sinus mesenchym (UGM) en xenotransplantatie onder de renale capsule van mannelijke muizen gastheren, het weefsel ontwikkelt tot structuren die lijken prostaat acini 11. Norman et al.. (1986) toonden aan dat volwassen muis prostaat ductaal epitheel en UGM, gecombineerd in weefsel recombinanten ondergaan ductale groei en vertakking morfogenese 12. Hayward et al.. (1988) toonden dat menselijke prostaat epitheel aan foetale m inductieveesenchyme soortgelijke wijze 13. Een model van hormonale carcinogenese in de prostaat, door de combinatie van geïmmortaliseerde humane prostaat epitheliale cellijn BPH-1 met UGM, werd eerst beschreven door Wang et al.. 14 (2001) en wordt veelvuldig gebruikt in ons laboratorium 15. Dit model is zeer geschikt voor het begrijpen van PRCA progressie omdat benigne prostaathyperplasie epitheel transformeert naar metastatische ziekte, het modelleren van geavanceerde PRCA bij de mens 5. Omdat specifieke onderdelen genetisch kunnen worden gemanipuleerd, recombinante cel enten is bijzonder bruikbaar als een benadering stroma-epitheliale interacties te evalueren.
Andere sites die geschikt zijn voor xenografting zijn intradermale, subcutane en orthotopische locaties 16. Afhankelijk van het weefsel en ziekteproces plaats kunnen deze geschikt alternatieve benaderingen. Voor de studie van de prostaat hormonale kanker en goedaardige groei regulering, kiezen we de nierkapselsite voor xenografting vanwege de hogere graft nemen tarief, overvloedige bloedtoevoer, en het vermogen om een groter aantal xenograften implanteren in een beperkt plaats 16. Bovendien hormonale manipulatie van de ontvangende muis die resulteert in prostaatatrofie beperkt het gebruik van prostate orthotope enten 16.
Dit protocol beschrijft technieken gecomprimeerde hormoon / geneesmiddel pellet productie en chirurgische implantatie, evenals renale capsule xenografting menselijke prostaatcellen en weefseltransplantaten. Samen vormen deze technieken bieden een gevoelige test om te bepalen of een genetisch gemodificeerde muizen is gevoeliger voor PRCA en / of BPH inleiding dan controlestammen. Xenografting is een krachtige techniek voor in vivo bepaling van de potentie van experimentele cellen histologische en moleculaire kenmerken van maligniteit ontwikkelen, en een test voor nieuwe behandelingsstrategieën voor een breed scala van goedaardige en kwaadaardige ziekten.