Een abonnement op JoVE is vereist om deze inhoud te bekijken. Log in of start vandaag met uw gratis proefperiode.

Methodenartikel

In utero Meting van de hartslag in de Muis door invasieve M-mode echocardiografie

11.2K weergaven

⸱

DOI:

10.3791/50994

⸱

22 november 2013

 ,  , 

In dit artikel

Samenvatting

Ultra-hoge frequentie echografie is een krachtige live-imaging tool om cardiale afwijkingen in kleine proefdieren. Zijn noninvasiveness maakt het handhaven van de fysiologische toestand van de embryo's. Hierin tonen we het gebruik van M-mode echo om de hartslag van embryo meten E18.5 in de baarmoeder.

Samenvatting

Aangeboren hartziekte (CHZ) is de meest voorkomende niet-infectieuze oorzaak van overlijden bij de geboorte. De incidentie van CHD varieert van 4 tot 50/1, 000 geboorten (Ziekte en verwondingen regionale schattingen, World Health Organization, 2004). Operaties die vaak afbreuk doen aan de kwaliteit van het leven nodig zijn om hartafwijkingen corrigeren, herinnert ons aan het belang van het vinden van de oorzaken van hart-en vaatziekten. Mutant muismodellen en live imaging technologie zijn geworden essentiële instrumenten om de etiologie van deze ziekte te bestuderen. Hoewel geavanceerde methoden is het mogelijk live-beeldvorming van abnormale harten in embryo's, worden de fysiologische en hemodynamische toestanden van de laatste vaak aangetast als gevolg van chirurgische en / of langdurige procedures. Invasieve echografie, kan echter zonder chirurgisch bloot het embryo, waardoor hun fysiologie handhaven gebruikt. Hierin maken we gebruik van eenvoudige M-mode echo om hartslag van embryo's beoordelen op E18.5 in de baarmoeder. De detectie van abnormale hartslag is inderdaad een goede indicator van dysfunctie van het hart en vormt dus een eerste stap in het identificeren van defecten in de ontwikkeling die kan leiden tot hartfalen.

Inleiding

CHD is de meest voorkomende niet-infectieuze oorzaak van overlijden bij de geboorte 1. Meerdere operaties zijn vaak nodig om de structurele gebreken bij patiënten van wie de kwaliteit van leven kan gecompromitteerd 1 blijven corrigeren. Kinderen met CHD ontwikkelen vaak neurologische aandoeningen, zelfs als ze niet een operatie hebben ondergaan, met vermelding van belang in de baarmoeder gevolgen voor ontwikkeling 2,3. Zowel genetische als omgevingsfactoren, zoals blootstelling aan virussen of chemische stoffen (alcohol) tijdens de zwangerschap, oorzaak CHD. Het bestuderen van de genetische medewerkers zich nog in een vroeg s....

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Protocol

Alle in dit protocol procedures zijn goedgekeurd door de IRCM Animal Care Comite.

1. Ultrasound System en Station Voorbereiding

  1. Start het ultrasone beeldvormingssysteem en sluit de aftastkop en de fysiologie controller eenheid volgens aanwijzingen van de fabrikant (figuur 1). Kies Cardiale meetprogramma en de aftastkop die overeenkomt met de 30 MHz transducer.
  2. Vul het neusstuk van de aftastkop met gedemineraliseerd water. Vermijd luchtbellen als ze interfereren met beeldvorming resolutie. Plaats de scankop met het handvat naar boven aan de houder ervan in de buurt van de imaging platform (Figu....

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Resultaten

De bovenstaande methode werd gebruikt om het effect van de aanwezigheid of afwezigheid van de serine protease furine endotheelcellen hartslag van muizenembryo's op E18.5 in utero beoordelen. Furine behoort tot de familie van proproteïne convertases (PC's) die aanhangen eiwitvoorlopers na basische residuen. Furine en zijn substraten zijn secretoire eiwitten en splitsing kan in het Golgi-apparaat, endosomen of op het celoppervlak. Belangrijke furine substraten omvatten TGFb en TGFb-achtige factoren, zoals.......

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Discussie

M-mode echocardiografie is een effectieve en eenvoudige methode om te meten in utero hartslag van muizenembryo's. Commercieel beschikbare transducers voldoende resolutie om kleine kloppende harten te visualiseren. Dus ze laten een zeer nauwkeurige hartslagmeting, vergeleken met andere methoden, zoals hartslag meting en kan hoge resolutie video microscopie vervangen. Echter, de huidige instrumenten niet toe dat de gelijktijdige analyse van alle embryo's, wat een vervelende procedure elk van de embryo'.......

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Openbaarmakingen

Geen belangenconflict verklaard.

Dankbetuigingen

Wij danken Manon Laprise voor opleiding in echocardiografie en Ann Chamberland voor het nemen van de in de figuren 1 en 2 foto's. Dit werk werd ondersteund door de Canadese Institutes of Health Research subsidie ​​MOP 44.363 en Canada Stoel 950-216684.

....

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Materialen

Lijst van materialen gebruikt in dit artikel
NaamBedrijfCatalogusnummerOpmerkingen
IsofluraanPharmaceutical Partners of Canada Inc.CP0406v21-chloor-2,2,2-trifluorethyl difluormethyl ether
EchografiegelParker Laboratories Inc.Aquasonic Clear
ElektrodegelParker Laboratories Inc.Spectra 360
Oftalmisch gelNovartisTear-Gel
OntharingscrèmeChurch Dwight Co., Inc.Nair
Haarknipmachine
Gaas/katoenen doekQ-tips
Permanente stift
Hoge Resolutie In vivo Ultrasoon BeeldvormingssysteemVisual SonicsVevo770
30 MHz TransducerVisual SonicsRMV707B
Beeldvormingsplatform en fysiologie controller unitVisual Sonics
AnesthesiesysteemCyprane North America Inc.312462
Infrarood verwarmingslamp

Referenties

  1. Hoffman, J. I., Kaplan, S. The incidence of congenital heart disease. J. Am. Coll. Cardiol. 39, 1890-1900 (2002).
  2. Miller, S. P., et al. Abnormal brain development in newborns with congenital heart disease. N. Engl. J. Med. 357, 1928-1938 (2007).
  3. Bru....

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Herprints en machtigingen

Meer artikelen verkennen

Foetale hartslag in uterobeeldvorming van muisembryo'sniet-invasieve echografieaangeboren hartafwijkingenembryonale hartslagcardiale metingechogelgenotypering van embryo'sfoetale fysiologie van de muis