Klein dier beeldvormende technieken laten seriële diagnostische onderzoeken en therapeutische interventies in vivo. Onlangs heeft de reikwijdte van de toepassingen aanzienlijk verbreed en omvat momenteel de beoordeling van het colon tumor ontwikkeling, wondgenezing en de monitoring van de ontsteking. Dit protocol illustreert deze diverse mogelijke toepassingen van muizen endoscopie.
Een abonnement op JoVE is vereist om deze inhoud te bekijken. Log in of start vandaag met uw gratis proefperiode.
Methodenartikel
Muizen Endoscopie voor In Vivo Multimodal Imaging van Carcinogenese en Evaluatie van intestinale wondgenezing en ontsteking
* These authors contributed equally
In dit artikel
Samenvatting
Samenvatting
Muismodellen zijn op grote schaal gebruikt voor pathogenese van menselijke ziekten te bestuderen en diagnostische procedures en therapeutische interventies preklinisch evalueren. Echter, deugdelijke bepaling van pathologische veranderingen vereist vaak histologische analyse, en als ex vivo uitgevoerd, vereisen dood van het dier. Daarom wordt in conventionele experimentele instellingen, intra-individuele follow-up onderzoeken zijn zelden mogelijk. Aldus ontwikkeling van muizen endoscopie in levende muizen kunnen onderzoekers voor het eerst zowel direct visualiseren de maag mucosa en ook herhaal de procedure te controleren op wijzigingen. Tal van toepassingen voor in vivo muizen endoscopie bestaan, waaronder het bestuderen van intestinale ontsteking of wondgenezing, het verkrijgen van mucosale biopten herhaaldelijk, en lokaal toe te dienen diagnostische of therapeutische middelen met behulp van miniatuur injectie katheters. Onlangs heeft moleculaire beeldvorming uitgebreid diagnostische beeldvorming modalities om specifieke detectie van afzonderlijke doelmoleculen met specifieke photoprobes. De conclusie is dat muizen endoscopie ontpopt als een nieuwe cutting-edge technologie voor diagnostische experimentele in vivo beeldvorming en kan een aanzienlijke impact hebben op preklinisch onderzoek op diverse terreinen.
Inleiding
Diermodellen zijn sterk verrijkt ons begrip van talrijke intestinale pathologieën. Het laboratorium muis (Mus musculus) heeft zich als eerste diermodel in biomedisch onderzoek vanwege de overvloedige genetische en genomische informatie en is direct beschikbaar in transgene en knockout stammen. Naast de verbetering van het begrip ziekte pathogenese, zijn diermodellen ook belangrijker is gebruikt voor het testen van kandidaat-geneesmiddelen evenals preklinische diagnostische of therapeutische ingrepen. Ondanks de verschillende muismodellen nabootsen menselijke ziekten, vele diagnostische en interventionele opties die routinematig worden gebruikt in patiëntenzo....
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Protocol
Alle dierproeven werden goedgekeurd door het Landesamt für Natur, Umwelt und Verbraucherschutz (LANUV) volgens de Duitse wet op de dierenbescherming.
1 Materialen en Experimentele Setup
- Dierenverzorging
- Gebruik vrouwelijke of mannelijke muizen van een stam met een gewicht van 20 tot 25 g en het huis aan de ter plaatse verzorging van dieren wetgeving.
- Feed muizen met speciale chow voor knaagdieren en toepassen-alfalfa gratis chow ten minste drie dagen voor de examens fluorescentie te endoluminal auto-fluorescentie te minimaliseren.
- Bieden geautoclaveerd drinkwater ad libitum.
....
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Resultaten
In vivo opvolging van intestinale wondgenezing
Tijdens routine endoscopie werden mucosale wonden mechanisch geïnduceerd door miniatuur biopsietang met een diameter van 3 French (gelijk aan 1 mm Figuur 1A). Vervolgens werd de wondgenezing gecontroleerd door dagelijkse endoscopische onderzoeken en gekwantificeerd door het meten van de resterende wond gebied met behulp van software voor beeldbewerking, bijvoorbeeld ImageJ (Figuur 1B). De individuel.......
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Discussie
Epitheliale wondheling is een continu proces. Continue fysiologische afschilfering van huidcellen in de maag mucosa optreedt die regelmatig regeneratie van epitheelcellen 16. Bijgevolg verminderde wondgenezing heeft een enorme impact op een aantal ziekten, waaronder gastro-intestinale ulcera en 17 naadlekkage 18. Evaluatie van de moleculaire achtergrond als potentiële kandidaat-geneesmiddelen te epitheliale genezing te stimuleren kan slechts gedeeltelijk worden uitgevoerd in celkweek sys.......
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Openbaarmakingen
De auteurs hebben niets te onthullen.
Dankbetuigingen
Wij danken Sonja Dufentester en Elke Weber voor deskundige technische bijstand. Wij danken Faekah Gohar voor het proeflezen van het manuscript en Stefan Brückner voor medische informatica ondersteuning. Dit werk werd ondersteund door een interdisciplinaire subsidie van de Else-Kröner-Fresenius-Stiftung (2012_A94). D. Bettenworth werd ondersteund door een onderzoeksbeurs van de Faculteit der Geneeskunde, Westfälische Wilhelms-Universität Münster. M. Brückner werd ondersteund door een "Gerok" draai stand van de Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG SFB1009B8). Wij danken H....
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Materialen
| Naam | Bedrijf | Catalogusnummer | Opmerkingen |
|---|---|---|---|
| Reagents | |||
| Alfalfa-vrije voeding | Harlan Laboritories, Madison, USA | 2014 | |
| Azoxymethaan (AOM) | Sigma-Aldrich, Deisenhofen, Duitsland | A5486 | |
| Bepanthen oogzalf | Bayer, Leverkusen, Duitsland | 80469764 | |
| Dextransulfaat natrium (DSS) | TdB Consultancy, Uppsala, Zweden | DB001 | |
| Eosine | Sigma-Aldrich, Deisenhofen, Duitsland | E 4382 | |
| Ethyleendiaminetetraazijnzuur (EDTA) | Sigma-Aldrich, Deisenhofen, Duitsland | E 9884 | |
| Falcon buis 50 ml | BD Biosciences, Erembodegem, België | 352070 | |
| Florene 100 V/V | Abbott, Wiesbaden, Duitsland | B506 | |
| Hematoxylinen | Sigma-Aldrich, Deisenhofen, Duitsland | HHS32-1L | |
| Isopentaan (2-Methylbutaan) | Sigma-Aldrich, Deisenhofen, Duitsland | M32631-1L | |
| Methyleenblauw | Merck, Darmstadt, Duitsland | 1159430025 | |
| O.C.T. Tissue Tek compound | |||
Referenties
- Bettenworth, D., et al. Translational 18F-FDG PET/CT imaging to monitor lesion activity in intestinal inflammation. Journal of nuclear medicine : official publication, Society of Nuclear Medicine. 54, 748-755 (2013).
- Lewis, J. S., Achilefu, S., Garbow, J. R., Laforest, R., Welch, M. J.
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Herprints en machtigingen
