Een abonnement op JoVE is vereist om deze inhoud te bekijken. Log in of start vandaag met uw gratis proefperiode.

Methodenartikel

Vasculaire Ballon Letsel en Intraluminale Administration in Rat halsslagader

16.5K weergaven

⸱

DOI:

10.3791/52045

⸱

23 december 2014

 , 
1Nanobioscience, State University of New York College of Nanoscale Science and Engineering (SUNY CNSE)

In dit artikel

Samenvatting

Dit protocol maakt gebruik van een ballonkatheter om een ​​intraluminale blessure aan de rat halsslagader veroorzaken en voortaan ontlokken neointimale hyperplasie. Dit is een gevestigd model voor de studie van de mechanismen van vasculaire remodellering reactie op letsel. Het wordt ook veel gebruikt om de geldigheid van mogelijke therapeutische benaderingen te ontwikkelen.

Samenvatting

De halsslagader ballonletsel model in ratten is goed vastgesteld dan twee decennia. Het blijft een belangrijke methode om de moleculaire en cellulaire mechanismen die betrokken zijn in het gladde spierweefsel dedifferentiation, neointimavorming en vasculaire remodeling bestuderen. Mannelijke Sprague-Dawley ratten zijn de meest gebruikte dieren voor dit model. Vrouwelijke ratten niet de voorkeur als vrouwelijke hormonen beschermend zijn tegen vaatziekten en daarmee introduceren een variatie op deze procedure. De linker halsslagader wordt typisch benadeeld rechts carotis dient als negatieve controle. Linker carotis letsel wordt veroorzaakt door de opgeblazen ballon die het endotheel denudes en uitzetten en de vaatwand. Na letsel kunnen potentiële therapeutische strategieën zoals het gebruik van farmacologische verbindingen en beide genen of shRNA overdracht geëvalueerd. Typisch voor het gen of shRNA overdracht, wordt de benadeelde deel van het lumen van het vat lokaal getransduceerde gedurende 30 minuten met vIral deeltjes die coderen voor een eiwit of shRNA voor de levering en expressie in de verwonde vaatwand. Nieuwe intima verdikking die proliferatieve vasculaire gladde spiercellen pieken meestal 2 weken na beschadiging. Schepen worden meestal geoogst op dit tijdstip voor cellulaire en moleculaire analyse van signaaltransductie wegen en gen- en eiwitexpressie. Schepen kunnen worden geoogst op eerdere tijdstippen voor het begin van expressie en / of activatie van een specifiek eiwit of route bepalen, afhankelijk van de experimentele doeleinden bedoeld. Vaartuigen kunnen worden gekarakteriseerd en geëvalueerd met behulp van histologische kleuringen, immunohistochemie, eiwit / mRNA assays, en de activiteit assays. De intacte rechter halsslagader van hetzelfde dier ideaal interne controle. Schade-geïnduceerde veranderingen in de moleculaire en cellulaire parameters kunnen worden geëvalueerd door de gewonden slagader om de interne juiste controle arterie. Evenzo kunnen therapeutische modaliteiten worden geëvalueerd door het verwondend en behandelde slagader naar de controle gewonden enige slagader.

Inleiding

Ballonkatheters medische apparaten voor een procedure van angioplastie, het doel van verbreding belemmerd locatie (s) van atheroma of trombus in een bloedvat. De vernauwde lumen vat wordt gedwongen te openen door de opgeblazen ballon en bloedtoevoer zou worden hersteld achtereenvolgens stroomafwaarts ischemie symptomen, zoals angina, myocard infarct, en been pijn. Niettemin heeft het grote succes van angioplastiek wordt verminderd door postoperatieve complicaties zoals resultaten van kracht die vasculaire barotrauma (ballonletsel), namelijk vaatwand remodellering en vaak opnieuw vernauwen van het vat lumen (restenose) 1.

Een aantal dierlijke modellen ontwikkeld nabootsen van de angioplastieprocedure te helpen onderzoekers begrijpen mechanismen die ten grondslag liggen aan de ballon-letsel-gerelateerde vaatwand remodeling 2. Van alle diersoorten gebruikt voor het modelleren, rat is de meest gebruikte één. Compared konijnen, honden en varkens, de voordelen van ratten hun lage kosten, de relatieve gebruiksgemak en de huidige kennis van rat fysiologie. Hoewel muizen hebben een extra voordeel in een breed scala van genetisch gemanipuleerde stammen de muizen vat te klein om een ​​ballon katheter. In de afgelopen drie decennia hebben experimentele ratten toegestaan ​​onderzoekers tot een beter begrip van de moleculaire en cellulaire mechanismen die ten grondslag liggen neointimavorming en vasculaire remodeling 3-6 te winnen. Beyond ballonletsel, vasculaire remodellering ook betrokken bij de meeste grote vaatziekten, zoals atherosclerose 7,8, hypertensie 9 en aneurysma 10. Zo is kennis die is opgedaan door de ballon blessure model is in het algemeen gunstig voor de algehele vaatwand ziekte studies.

Het algemene doel van de rat ballonletsel model is alleen verder begrijpen vaatziekten, maar ook om de sterkte van nieuwe agentia testenziektebestrijding 11,12. Huidige klinische behandeling met geneesmiddelen om restenose wordt toegepast door de drug-eluting stents geplaatst via het lumen van het vat direct na angioplastiek. In diermodellen, een efficiënte en toch zuiniger manier voor nieuwe agent testen is een goed ontwikkelde lokale intraluminale perfusie methode. Gegadigde middelen die zijn getest door deze werkwijze omvatten kleine moleculen 13,14, cytokine of groeifactoren 15,16, gen manipuleren middelen (cDNA klonen, siRNA, etc.) 17-20 en nieuwe farmaceutische formuleringen 21,22.

Tot nu toe, de rat ballon letsel model blijft een van de meest bruikbare modellen voor het bestuderen van vasculaire ziekten / aandoeningen. Het is de fundamentele stap van bench to bedside, gewoonlijk in de eerste stap bewegen van in vitro naar in vivo, maar het moet niet de laatste zijn. De uitkomst van experimenten rat moet worden overlegd en verder gekenmerkt voordat vertaling in het menselijkklinisch gebruik, vanwege het verschil in vasculaire bedden en verblijf anatomie en de intrinsieke species verschillen tussen mens en rat 23-26. Toch is het nog steeds een essentieel instrument in translationeel medisch onderzoek. Hoewel dit onderzoek gebruikt te worden beperkt door het ontbreken van genetisch gemodificeerde ratten, is het niet langer een probleem geweest aangezien nieuwe genomische benaderingen zoals zinkvinger nucleasen 27 Talens 28 en CRISPR-Cas 29 hebben knockout ratten gemakkelijk toegankelijk gemaakt.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Protocol

LET OP: Het gebruik van dieren voor de volgende experimenten werd beoordeeld en goedgekeurd door de Institutional Animal Care en gebruik Comite (IACUC) goedgekeurd.

1. Preoperatieve Procedures

  1. Steriliseren chirurgische instrumenten voor gebruik.
    1. Autoclaaf alle chirurgische instrumenten 24 uur of minder voor de operatie. Als er meerdere operaties worden uitgevoerd op dezelfde dag, steriliseren van de instrumenten door een droge kraal sterilisator tussen ingrepen.
  2. Filter-steriliseren van de zoutoplossing voor gebruik.
  3. Weeg de rat en bereken de dosis anesthetica (ketamine 80 mg / kg en xylazine 7 mg / kg).
  4. Dien de anesthetica intraperitoneaal (ip).
    1. Controleer de geschiktheid van sedatie door teen knijpen in 5-10 min. Dien een extra kleine dosis drugs (ketamine 7 mg / kg xylazine en 0,6 mg / kg) of sedatie is niet compleet.
    2. Zorg ervoor dat de naald diep genoeg is om de levering van drugs intra-per-itoneally omdat het niet de hele drug oplossing te leveren in de peritoneale holte zal onvoldoende sedatie veroorzaken.
      OPMERKING: Zweren en haarverlies in de huid op de injectieplaats zal zichtbaar enkele dagen na de operatie, door onbedoelde subcutane (sc) geneesmiddeloplossing injectie.
  5. Injecteer 3 ml steriele zoutoplossing subcutaan (sc). Met behulp van een steriel wattenstaafje, een kleine hoeveelheid oogzalf beide ogen te voorkomen dat de hoornvliezen uitdroogt.
  6. Bereid de verwarming. Pre-warm warmte pads door de magnetron of waterbad.
  7. Zet het dier achterover op de chirurgische platform.
    1. Verwijder de haren in het ventrale halsgebied. Breng het haar remover met een wattenstaafje, wacht 30 seconden en veeg volledig af met een gaasje.
    2. Zwabberen de hals met povidonjood scrub en 70% ethanol.
  8. Trek van persoonlijke beschermingsmiddelen, inclusief toga, haar cover, chirurgisch masker, en glazen. Doe sterile chirurgische handschoenen aan het eind vóór de behandeling van de steriele chirurgische instrumenten en benodigdheden.
  9. Drapeer de rat met een steriel chirurgisch blad met alleen de nek blootgesteld.

2. Chirurgische ingrepen

  1. Tijdens de chirurgische ingreep, controleer sedatie diepte van dierlijke teen knijpen in elke 15 min. Als dier reageert op teen knijpen, voeg extra kleine dosis (10% van de initiële dosis) van ketamine en xylazine.
  2. Ontleden verliet gemeenschappelijke halsslagader (CCA)
    1. Gebruik een scalpel een rechte longitudinale incisie in het midden van de nek maken. De globale lengte van de incisie is 1.5-2 cm, ten behoeve van het isoleren van een 1.5-2 cm portie slagader. De lengte kan variëren afhankelijk van het doel van de studie.
    2. Botweg ontleden het bindweefsel van de huid. Houd de tang tips op en zorg ervoor dat niet aan de huid of het onderliggende weefsel te doorboren.
    3. Ontleden spierlagen lengterichting AlonG de linkerkant van trachea.
    4. Bij het openen van de spierlaag, visualiseren links CCA met de nervus vagus nauw verbonden. Botweg ontleden naast de linker halsslagader met uiterste voorzichtigheid aan de nervus vagus te scheiden met minimale stretching.
    5. Ontleden CCA distaal tot aan de splitsing. Ontleden de splitsing en twee takken zorgvuldig - interne halsslagader (ICA) en externe halsslagader (ECA).
    6. Houd ontleden rond de CCA tot ongeveer gedeelte 1,5-2 cm van de slagader wordt geïsoleerd van de omringende weefsels.
  3. Ballon letsel
    1. Permanent maken van een ligatuur op de Europese Rekenkamer op ongeveer 5 mm van bifurcatie. Permanent afbinden de occipitale tak van de Rekenkamer dat dicht bij de splitsing van de Rekenkamer en ICA. Ook permanent afbinden andere eventuele bijkantoren, lokaliseren tussen de splitsing en ECA ligatuur - bijvoorbeeld, de superieure schildklier tak. Hechtingen die gebruikt worden voor alle ligaturen is 4-0 zwartzijde. Klem op het proximale uiteinde van CCA en het distale einde van ICA.
      OPMERKING: Nu is de doorbloeding is gestopt permanent door ligatie (op ECA) of tijdelijk door middel van knippen (op CCA en ICA). Luminale inhoud in de vertakking gebied zijn geïsoleerd uit de systemische circulatie.
    2. Maak een arteriotomie incisie op ECA door kleine micro-schaar. Zorg ervoor dat de incisie nabij de distale hechtdraad knoop. Schoon bloed met een zoutoplossing en wattenstaafjes.
    3. Plaats de niet-opgeblazen 2F ballonkatheter in de ECA lumen. Vooraf de ballonkatheter proximaal aan de CCA lumen. Houd het bevorderen van de katheter proximaal totdat de punt bereikt waar de clip blijft.
    4. Sluit de ballon opblaasinrichting een vrouwelijke luer lock op een 3-weg kraan en sluit de mannelijke luer lock van de 3-weg kraan om de ballonkatheter.
    5. Langzaam opblazen van de ballon met ongeveer 1,5 atm druk om de halsslagader uitzetten tot 1,5-voudige van de diameter.
    6. Trek de ballon rotatie terug naar de splitsing.
    7. Leeglopen van de ballon en vooruit het terug naar het proximale uiteinde. Opblazen het opnieuw en herhaal de trekken-back procedure nog twee keer.
    8. Trekken de ballonkatheter uit de slagader lumen.
  4. Intraluminale toediening van reagentia (bijvoorbeeld siRNA, drugs)
    OPMERKING: Hier, het gebruikte reagens is een oplossing die lentivirale deeltjes coderen voor shRNA gericht Stromal Interaction Molecule 1 (STIM1) of niet-gerichte shRNA controle. STIM1 is een transmembraan endoplasmatisch reticulum (ER) eiwit dat een ER Ca2 + sensor regelen de activering van plasmamembraan Ca2 + kanalen en up-gereguleerd in vasculaire gladde spieren dedifferentiatie een proliferatieve trekkende fenotype 12,30-33.
    1. Sluit een intravasculaire over-de-naald katheter een injectiespuit (24 G, 1,6 cm). Zuig 30 ui oplossing van de testen Reagenten. Steek de katheter in dezelfde incisie op ECA.
    2. Vooraf de katheter tip in de CCA en leg een stukje hechtdraad met een enkele knoop aan de Rekenkamer om de katheter te bevestigen en sluit tijdelijk de incisie.
    3. Injecteer het testen reagens oplossing in de lumen van CCA. Bewaar de oplossing in de lumen van het vat gedurende 30 minuten. Houd het blootgestelde weefsel vochtig met zout en bedek het met een stukje nat gaasje.
    4. Na incubatie zuigen de resterende oplossing. Draai dat enkele knoop en de katheter in te trekken.
    5. Bind de Rekenkamer met een stuk hechtdraad proximaal aan de arteriotomie incisie. Maak de knoop zo dicht mogelijk bij de vertakking.
  5. Close-up van de wond.
    1. Sinds de ballon letsel en katheter introductie een lek of punctie van het bloedvat kan veroorzaken, verwijdert u de clip op de ICA en controleer of er een lek. Als bloeden wordt waargenomen, breng dan een stuk gaas en zachte druk om het bloeden te stoppen toepassing.
    2. Verwijderende andere clip op CCA.
    3. Zorg ervoor dat er geen tekenen zijn van bloeden, en verwijder vervolgens alle klemmen en andere chirurgische instrumenten. Snijd overtollig hechtingen.
    4. Sluiten wond met behulp van de huid hechtingen (4-0 zwarte zijde). Swab aan alle zijden van de gesloten wond met de Povidon-jodium of andere anti-septische / bactericide / virucide middel. Injecteer 3 ml steriele zoutoplossing sc

3. Postoperatieve Procedures

  1. Houd rat op warmte pad na de operatie. Dien één dosis van 0,05 mg / kg buprenorfine via intramusculaire injectie (im) aan de rat. Tijdens de invorderingsprocedure, houden de ogen van dieren en mond vochtig. Controleer het dier tot het wakker en ambulant.
  2. Plaats het dier in een schone kooi zonder beddengoed tot deze volledig is hersteld. Na herstel, wordt het dier terug naar het dier en individueel gehuisvest.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Resultaten

Twee weken na de verwonding, worden halsslagaders geoogst, doorgesneden en onderworpen aan morfologische analyse. Slagaders zijn dwarsdoorsnede en gekleurd met H & E (figuren 1, 2B, C en 3). Rat halsslagader muur bevat vier lagen elastische lamina, die als roze lijnen verschijnen. Het gebied tussen de buitenste lamina externe elastische lamina (EEL) en de binnenste lamina, interne elastische lamina (IEL) de media gladde spierlaag (figuur 1). Het gedeelte binnen het IEL de intima, ee...

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Discussie

De rat carotis ballon schade is goed beschreven door Tulis in 2007 34. Er is uitvoerig gesproken over alle details van deze procedure door Dr. Tulis. De lezers die geïnteresseerd zijn in het uitvoeren van deze procedure zijn sterk aanbevolen om Tulis 'protocol te lezen. Echter, er is één ding dat we niet eens met Dr. Tulis: In plaats van het opblazen van de ballon met een zoutoplossing of enige vorm van vloeistof, hebben we voorgesteld om hem op te blazen met lucht. Volgens onze persoonlijke ervaring, het opblazen met vloeist...

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Openbaarmakingen

De auteurs verklaren dat ze geen concurrerende financiële belangen hebben.

Dankbetuigingen

We zijn Dr. Clowes dankbaar dat hij deze methode als eerste heeft ontwikkeld en beschreven. We zijn ook dankbaar aan Dr. Tulis voor zijn gedetailleerde protocol dat fundamenteel nuttig is geweest voor ons vorige, huidige en toekomstige werk. Dit werk werd ondersteund door subsidies R01HL097111 en R01HL123364 van de NIH aan M.T., en door een American Heart Association-subsidie 14GRNT18880008 aan M.T.

We willen Rachel Newton bedanken voor haar deskundige technische ondersteuning en voor haar waardevolle hulp tijdens het filmproces.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Materialen

Lijst van materialen gebruikt in dit artikel
NaamBedrijfCatalogusnummerOpmerkingen
Fogarty ballon embolectomie katheters, 2 French Edwards Lifesciences, Germany 120602F
Deltaphase Operating Board - Inclusief 2 pads & 2 isolatorenBraintree Scientific, Inc.39OP
LED lichtbronFisher Scientific12-563-501 
Hartmann Mosquito Forceps 4” gebogenApiary Medical, Inc. San Diego, CAgS 22.1670
Crile Retractor 4” dubbel uiteindeApiary Medical, Inc.gS 34.1934
Andere chirurgische instrumentenRoboz Surgical Instrument Company, Inc., Gaithersburg, MD
Perifere Intraveneuze (I.V.) Cannula, 24 GBD381312
Ketamine HCl, 100 mg/ml, 10 mlKetaset- Patterson Vet07-803-6637 
Xylazine (AnaSed), 20 mg/ml, 20 mlKetaset- Patterson Vet07-808-1947
Buprenex, 0.3 mg/1 ml (5 Ampullen/Doos)Ketaset- Patterson Vet07-850-2280
Nair Baby Oil Hair Removal Lotion - 9 ozAmazon/Walmart/CVSN/A
OpblaasapparaatDemax MedicalDID30
D300 3-weg stopkraanB.Braun Medical Inc.4599543
Kunstmatige Tranen Ointment Rugby Laboratories, Duluth, GAN/A

Referenties

  1. Landzberg, B. R., Frishman, W. H., Lerrick, K. Pathophysiology and pharmacological approaches for prevention of coronary artery restenosis following coronary artery balloon angioplasty and related procedures. Progress in Cardiovascular Diseases. 39, 361-398 (1997).
  2. Muller, D. W., Ellis, S. G., Topol, E. J. Experimental models of coronary artery restenosis. J. Am. Coll. Cardiol. 19, 418-432 (1992).
  3. Clowes, A. W., Reidy, M. A., Clowes, M. M. Kinetics of cellular proliferation after arterial injury. I. Smooth muscle growth in the absence of endothelium. Laboratory Investigation: A Journal of Technical Methods and Pathology. 49, 327-333 (1983).
  4. Clowes, A. W., Reidy, M. A., Clowes, M. M. Mechanisms of stenosis after arterial injury. Laboratory Investigation: A Journal of Technical Methods and Pathology. 49, 208-215 (1983).
  5. Clowes, A. W., Clowes, M. M. Kinetics of cellular proliferation after arterial injury. IV. Heparin inhibits rat smooth muscle mitogenesis and migration. Circulation Research. 58, 839-845 (1986).
  6. Li, G., Chen, S. J., Oparil, S., Chen, Y. F., Thompson, J. A. Direct in vivo evidence demonstrating neointimal migration of adventitial fibroblasts after balloon injury of rat carotid arteries. Circulation. 101, 1362-1365 (2000).
  7. Kiechl, S., Willeit, J. The natural course of atherosclerosis. Part II: vascular remodeling. Bruneck Study Group. Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 19, 1491-1498 (1999).
  8. Yamamoto, S., et al. Derivation of rat embryonic stem cells and generation of protease-activated receptor-2 knockout rats. Transgenic Research. 21, 743-755 (2012).
  9. Intengan, H. D., Schiffrin, E. L. Vascular remodeling in hypertension: roles of apoptosis, inflammation, and fibrosis. Hypertension. 38, 581-587 (2001).
  10. Meng, H., et al. Complex hemodynamics at the apex of an arterial bifurcation induces vascular remodeling resembling cerebral aneurysm initiation. Stroke. 38, 1924-1931 (2007).
  11. Sun, C. K., Shao, P. L., Wang, C. J., Yip, H. K. Study of vascular injuries using endothelial denudation model and the therapeutic application of shock wave: a review. American Journal of Rranslational Research. 3, 259-268 (2011).
  12. Zhang, W., et al. Orai1-mediated I (CRAC) is essential for neointima formation after vascular injury. Circulation Research. 109, 534-542 (2011).
  13. Ollinger, R., et al. Bilirubin: a natural inhibitor of vascular smooth muscle cell proliferation. Circulation. 112, 1030-1039 (2005).
  14. Levitzki, A. PDGF receptor kinase inhibitors for the treatment of restenosis. Cardiovascular Research. 65, 581-586 (2005).
  15. Asahara, T., et al. Local delivery of vascular endothelial growth factor accelerates reendothelialization and attenuates intimal hyperplasia in balloon-injured rat carotid artery. Circulation. 91, 2793-2801 (1995).
  16. Lee, K. M., et al. Alpha-lipoic acid inhibits fractalkine expression and prevents neointimal hyperplasia after balloon injury in rat carotid artery. Atherosclerosis. 189, 106-114 (2006).
  17. Ji, R., et al. MicroRNA expression signature and antisense-mediated depletion reveal an essential role of MicroRNA in vascular neointimal lesion formation. Circulation Research. 100, 1579-1588 (2007).
  18. Merlet, E., et al. miR-424/322 regulates vascular smooth muscle cell phenotype and neointimal formation in the rat. Cardiovascular Research. 98, 458-468 (2013).
  19. Huang, J., Niu, X. L., Pippen, A. M., Annex, B. H., Kontos, C. D. Adenovirus-mediated intraarterial delivery of PTEN inhibits neointimal hyperplasia. Arteriosclerosis, Thrombosis, And Vascular Biology. 25, 354-358 (2005).
  20. Gonzalez-Cobos, J. C., et al. Store-independent Orai1/3 channels activated by intracrine leukotriene C4: role in neointimal hyperplasia. Circulation Research. 112, 1013-1025 (2013).
  21. Guzman, L. A., et al. Local intraluminal infusion of biodegradable polymeric nanoparticles. A novel approach for prolonged drug delivery after balloon angioplasty. Circulation. 94, 1441-1448 (1996).
  22. Lipke, E. A., West, J. L. Localized delivery of nitric oxide from hydrogels inhibits neointima formation in a rat carotid balloon injury model. Acta Biomaterialia. 1, 597-606 (2005).
  23. Osterrieder, W., et al. Role of angiotensin II in injury-induced neointima formation in rats. Hypertension. 18, II60-II64 (1991).
  24. Powell, J. S., et al. Inhibitors of angiotensin-converting enzyme prevent myointimal proliferation after vascular injury. Science. 245, 186-188 (1989).
  25. Does the new angiotensin converting enzyme inhibitor cilazapril prevent restenosis after percutaneous transluminal coronary angioplasty? Results of the MERCATOR study: a multicenter, randomized, double-blind placebo-controlled trial. Multicenter European Research Trial with Cilazapril after Angioplasty to Prevent Transluminal Coronary Obstruction and Restenosis (MERCATOR) Study Group. Circulation. 86, 100-110 (1992).
  26. Faxon, D. P. Effect of high dose angiotensin-converting enzyme inhibition on restenosis: final results of the MARCATOR Study, a multicenter, double-blind, placebo-controlled trial of cilazapril. The Multicenter American Research Trial With Cilazapril After Angioplasty to Prevent Transluminal Coronary Obstruction and Restenosis (MARCATOR) Study Group. J Am Coll Cardiol. 25, 362-369 (1995).
  27. Geurts, A. M., et al. Knockout rats via embryo microinjection of zinc-finger nucleases. Science. 325, 433(2009).
  28. Tesson, L., et al. Knockout rats generated by embryo microinjection of TALENs. Nature Biotechnology. 29, 695-696 (2011).
  29. Li, D., et al. Heritable gene targeting in the mouse and rat using a CRISPR-Cas system. Nature Biotechnology. 31, 681-683 (2013).
  30. Potier, M., et al. Evidence for STIM1- and Orai1-dependent store-operated calcium influx through ICRAC in vascular smooth muscle cells: role in proliferation and migration. FASEB Journal : Official Publication Of The Federation Of American Societies For Experimental Biology. 23, 2425-2437 (2009).
  31. Aubart, F. C., et al. RNA interference targeting STIM1 suppresses vascular smooth muscle cell proliferation and neointima formation in the rat. Molecular Therapy. The Journal Of The American Society Of Gene Therapy. 17, 455-462 (2009).
  32. Berra-Romani, R., Mazzocco-Spezzia, A., Pulina, M. V., Golovina, V. A. Ca2+ handling is altered when arterial myocytes progress from a contractile to a proliferative phenotype in culture. American journal of physiology. Cell Physiology. 295, C779-C790 (2008).
  33. Bisaillon, J. M., et al. Essential role for STIM1/Orai1-mediated calcium influx in PDGF-induced smooth muscle migration. American journal of physiology. Cell Physiology. 298, C993-C1005 (2010).
  34. Tulis, D. A. Rat carotid artery balloon injury model. Methods In Molecular Medicine. 139, 1-30 (2007).
  35. Zhang, W., Trebak, M. Balloon Injury in Rats as a Model for Studying TRP Channel Contribution to Vascular Smooth Muscle Remodeling. T TRP Channels in Drug DiscoveryMethods in Pharmacology and Toxicology. Szallasi, A., Bíró, T. , Humana Press. 101-111 (2012).
  36. Tulis, D. A. Histological and morphometric analyses for rat carotid balloon injury model). Methods In Molecular Medicine. 139, 31-66 (2007).
  37. Advanced Sterilization Products. How to use Cidex OPA solution. , Available at: http://www.hopkinsmedicine.org/hse/forms/cidexopa/OPAHowToUse.pdf (2014).

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Herprints en machtigingen

Meer artikelen verkennen

Rattenmodelballonkatheterneointimavormingvasculaire remodelleringgladspierremodelleringhistologische kleuringimmunohistochemieinterne controle
Vasculaire Ballon Letsel en Intraluminale Administration in Rat halsslagader
Neem contact met ons op
Aanbevelen aan de bibliotheek

Privacy

Gebruiksvoorwaarden

Beleidsoverzicht

Copyright © 2026 MyJoVE Corporation. Alle rechten voorbehouden.