Gonadenhormonen zoals oestrogeen moduleren geheugenvorming in een aantal experimentele paradigma's, inclusief angstuitdovingsgeheugen. Dit protocol beschrijft een reeks methoden voor het onderzoeken van de invloed van gonadale hormonen specifiek tijdens uitdoving bij natuurlijk cyclische vrouwtjes, inclusief oestruscyclusbewaking en exogeen oestrogeentoediening.
Een abonnement op JoVE is vereist om deze inhoud te bekijken. Log in of start vandaag met uw gratis proefperiode.
Methodenartikel
Protocol voor het bestuderen van Uitsterven van geconditioneerde angst in Naturally Fietsen vrouwelijke ratten
In dit artikel
Samenvatting
Samenvatting
Verval van geconditioneerde vrees is uitgebreid bestudeerd in mannelijke knaagdieren. Onlangs is er een toenemend aantal studies aangeeft dat neurale mechanismen voor bepaalde gedragstaken en respons gedragingen verschillend bij vrouwen en mannen zijn. Met behulp van vrouwen in het onderzoek studies kan een uitdaging vormen vanwege de variatie van geslachtshormonen tijdens hun loopsheid. Dit protocol beschrijft gevestigde procedures die nuttig zijn bij het onderzoek naar de rol van oestrogeen in angst uitsterven geheugen consolidatie in vrouwelijke ratten zijn. Fase van de loopsheid en exogene oestrogenen administratie voorafgaand aan het uitsterven training kan uitsterven recall 24 uur later te beïnvloeden. De vaginale zwabberen techniek voor estrous fase identificatie hier beschreven helpt onderzoek en behandeling van natuurlijk fietsen geslachtshormonen. Het gebruik van deze fundamentele knaagdiermodel kan een nadere afbakening van de mechanismen waarmee oestrogeen angst uitsterven geheugen kan moduleren invrouwtjes.
Inleiding
Inherente sekseverschillen zijn in verschillende cognitieve gedrag en leren paradigma's waargenomen in zowel mensen als knaagdieren. Bijvoorbeeld, het is gemeld dat vrouwen over het algemeen sterker verbale en detail-oriented capaciteiten, terwijl mannen beter ruimtelijk inzicht 1-3. Deze sekseverschillen kunnen zijn deels te wijten aan de invloed van geslachtshormonen. Hoge estradiol niveaus te verbeteren de prestaties op taken waarbij vrouwen beter zijn, maar verergeren prestaties op taken die mannen goed 4-6 doen meestal. Hoewel dit bewijs is dwingend, de beperkte mogelijkheid om volledige controle experimentele omgevingen humane studies ....
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Protocol
OPMERKING: Alle procedures in dit protocol zijn goedgekeurd door de Subcommissie Research Animal Care, die dient als de Institutional Animal Care en gebruik Comite (IACUC) voor het Massachusetts General Hospital, en zijn in overeenstemming met de National Institutes of Health richtlijnen.
1. Dierlijke Huisvesting en Hanteringprocedure
- Bij aankomst, huis volwassen Sprague Dawley vrouwelijke ratten ongeveer 8-10 weken oud (met een gewicht van 200-225 g) in groepjes van 3-4 inch plastic bakken met houtsnippers beddengoed. Behouden ze op een dieet van ad libitum toegang tot chow en water en een 12 uur licht / donker-cyclus. Laat ra....
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Resultaten
In deze angst uitsterven recall-protocol, werd procent vriespunt gemeten als een indicator van angst. Dieren die goed gedoofd en behield de herinnering aan het uitsterven training tentoongesteld lage angst op de laatste dag van de gedrags-testen tijdens uitsterven recall. Mannelijke en vrouwelijke ratten niet significant verschillen in geconditioneerde angst expressie tijdens de conditionering, uitsterven, en herinneren fasen (figuur 2). Echter, een sex verschil wordt duidelijk wanneer de dieren afzonde.......
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Discussie
Angst uitsterven is uitgebreid bestudeerd bij mannelijke ratten met de neurale mechanismen bemiddelen geconditioneerde angst uitsterven geïdentificeerd en beoordeeld op basis van diverse manipulaties. Relatief weinig studies hebben vrouwelijke ratten of de rol van geslachtshormonen in angst uitsterven onderzocht. Om specifiek bestuderen de effecten van oestrogeen op angst uitsterven, zijn natuurlijk fietsen vrouwelijke ratten onderworpen aan een driedaagse behavioral paradigma. Deze procedure bestaat uit gewenning / con.......
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Openbaarmakingen
De auteurs van dit manuscript hebben geen concurrerende financiële belangen of andere belangenconflicten bekend te maken.
Dankbetuigingen
Mohammed R. Milad wordt ondersteund door NIMH-subsidie R01 MH097880 en institutionele fondsen van de afdeling Psychiatrie bij MGH.
....Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Materialen
| Naam | Bedrijf | Catalogusnummer | Opmerkingen |
|---|---|---|---|
| Fear conditioning chamber | Coulbourn Instruments | ||
| Graphic State | Coulbourn Instruments | ||
| Sound-attenuating box | Med Associates, Inc. | NIR-022MD | |
| Estradiol | Sigma-Aldrich | E1024 | In sesamolie voor subcutane injectie |
| Sesame oil | Sigma-Aldrich | S3547-250ML | |
| Freezescan | Cleversys, Inc. | ||
| Dip quick stain | Jorgensen Laboratories, Inc. | J0322A1, J0322A2, J0322A3 | |
| Cotton-tipped applicators | Fisher Scientific | 23-400-114 | 6-inch, steriele |
| 0.9% saline | LabChem, Inc. | LC23460-2 | Natriumchloride w/v |
| Selectfrost microscope slides | Fisher Scientific | 12-550-003 | |
| Virex II 256 | Diversey, Inc. | 5019317 | Verdun 1:256 met water |
| Luer-Lok Tip 1ml Syringes | Becton Dickinson | 309628 | |
| Hypodermic disposable needles | Exelint International, Co. | 26402 | 26-gauge |
Referenties
- Baron-Cohen, S., Knickmeyer, R. C., Belmonte, M. K. Sex differences in the brain: implications for explaining autism. Science. 310 (5749), 819-823 (2005).
- Voyer, D., Voyer, S., Bryden, M. P. Magnitude of sex differences in spatial abiliti....
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Herprints en machtigingen
