Dit nieuwe model voor orthotope achterste ledematen transplantatie in de muis, van een niet-hechtingsmanchet techniek voor super-microvasculaire anastomose, een krachtig hulpmiddel voor in vivo mechanistische immunologisch onderzoek naar gevasculariseerd samengestelde allotransplantatie (VCA).
Een abonnement op JoVE is vereist om deze inhoud te bekijken. Log in of start vandaag met uw gratis proefperiode.
Methodenartikel
Orthotope Hind Limb Transplantation in de muis
* These authors contributed equally
In dit artikel
Samenvatting
Samenvatting
In vivo diermodelsystemen, en in het bijzonder muismodellen, zijn uitgegroeid tot krachtige en veelzijdige wetenschappelijke instrumenten die onmisbaar zijn voor fundamenteel en translationeel onderzoek op het gebied van transplantatiegeneeskunde. Een groot scala aan reagentia is exclusief in dit setting beschikbaar, inclusief mono- en polyklonale antilichamen voor zowel diagnostische als interventionele toepassingen. Bovendien staat een groot aantal gegenotypeerde, ingefokt, transgene en knock-out stammen gedetailleerd onderzoek toe van de individuele bijdragen van humorale en cellulaire componenten aan de complexe wisselwerking van een immuunrespons en maakt de muis de gouden standaard voor immunologisch onderzoek.
Vascularized Composite Allotransplantation (VCA) beschrijft een nieuw veld van transplantatie waarbij allogenen worden gebruikt om 'gelijksoortigs' te vervangen bij patiënten die lijden aan traumatische of aangeboren weefselverlies. Dit chirurgische methodologische protocol toont het gebruik van een niet-naad-manchettechniek voor super-microvasculaire anastomose in een orthotopisch muis achterpoottransplantatiemodel. Het model maakt specifiek vergelijking mogelijk tussen gevestigde paradigma's in solide orgaantransplantatie met een nieuwe vorm van transplantaten bestaande uit verschillende weefselcomponenten. Uniek staat dit model de transplantatie toe van een levensvatbaar gevasculariseerd beenmergcompartiment en niche die het potentieel hebben om een gunstig effect uit te oefenen op de balans tussen immuunacceptatie en afstoting. Deze techniek biedt een hulpmiddel om allogenenherkenning en allograft afstoting en acceptatie te onderzoeken, en maakt ook de voortzetting van functionele zenuwregeneratiestudies mogelijk om dit nieuwe veld van transplantatie verder te ontwikkelen.
Inleiding
De late jaren negentig luidden de baanbrekende dagen van reconstructieve transplantatie in met de eerste succesvolle handtransplantatie die in 1998 in Frankrijk werd uitgevoerd. Sindsdien is het gebruik van VCA's voor reconstructie van verwoestende weefseldervingen met succes toegepast bij een breed spectrum van patiënten. Tot op heden telt de wereld 76 ontvangers van 112 bovenste ledematen en 31 gezichten 1-3. Bovendien zijn verschillende andere soorten VCA's zoals buikwand 4, larynx 5, luchtpijp 6, gevasculariseerde gewrichten 7 en zelfs penis 8 uitgevoerd. Verder werd onlangs de levende geboorte van ....
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Protocol
Alle experimenten werden uitgevoerd in overeenstemming met de Gids voor de Zorg en gebruik van proefdieren van het National Institute of Health (NIH) en werden goedgekeurd door de Johns Hopkins University Dierverzorging en gebruik Comite (JHUACUC). De specifieke procedures werden uitgevoerd in het kader van het goedgekeurde ACUC protocol MO13M108.
1. Donor Operation
- Dien pijnstilling op het juiste tijdstip voor elke farmacologische formulering voorafgaand aan de operatie. Zoals aangegeven in de goedgekeurde dier zorg en het gebruik protocol gebruik 0,1 mg / kg lichaamsgewicht van buprenorfine subcutaan 1 uur voorafgaand aan de huid incisie.
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Resultaten
Uitvoeren gevasculariseerde composiet allotransplantation in een muizenmodel met een niet-hechtingsmanchet techniek maakt uitstekende lange termijn graft en dierlijke overleving bereiken zoals getoond in figuur 1. Bovendien is een betrouwbare methode om reproduceerbare resultaten geleidelijke allograft afstoting bij gevasculariseerde composiet allotransplantatie zoals blijkt uit de in figuur 2 beelden. H & E histologie van weefsel va.......
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Discussie
Doorbloed Composite allotransplantatie, zoals de bovenste ledematen en het gezicht transplantatie voor de wederopbouw van de verwoestende weefsel gebreken, heeft zich ontwikkeld als een geldige behandelingsoptie voor patiënten die niet amendeerbaar conventionele reconstructieve procedures. Technische ontwikkelingen op het gebied van reconstructieve microchirurgie en ruime ervaring met krachtige immuunonderdrukkende en immuunmodulerende therapieën in orgaantransplantaties, nu mogelijk langdurige allograft overleving bij .......
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Openbaarmakingen
De auteurs verklaren dat ze geen concurrerende financiële belangen hebben.
Dankbetuigingen
Dit werk werd ondersteund door het leger, de marine, NIH, Air Force, VA en Health Affairs aan de AFIRM II te steunen, onder Award No. W81XWH-13-2-0053. De US Army Medical Research overnameactiviteit, 820 Chandler Street, Fort Detrick MD 21702-5014 is het toekennen en beheren van acquisitie kantoor. Adviezen, interpretaties, conclusies en aanbevelingen zijn die van de auteur en zijn niet per se door het ministerie van Defensie onderschreven.
De auteurs willen graag Jessica Izzi, DVM, Caroline Garrett, DVM en Julie Watson, DVM bedanken voor hun uitstekende veterinaire steun tijdens deze studie.
....Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Materialen
| Naam | Bedrijf | Catalogusnummer | Opmerkingen |
|---|---|---|---|
| Suture, 6-0 Nylon | MWI | 31849 | |
| Suture, 6-0 Polysorb | MWI | 72667 | |
| Suture, 10-0 Nylon | Aero Surgical | TK-107038 | |
| Polyimide Tubing, Size 25 | Vention Medical | 141-0023 | |
| Polyimide Tubing, Size 27 | Vention Medical | 141-0015 | |
| Microvascular Clamps (Single) | Synovis | 00396 | |
| Microvascular Clamps (Double) | Synovis | 00414 | |
| Micro-Scissors | Synovis | SAS-18 | |
| Micro-Forceps | Synovis | FRS-15 RM-8 | |
| Micro-Dilators | Synovis | FRS-15 RM-8d.1 | |
| Micro-Needledriver | Synovis | C-14 | |
| Micro-Clamp Applicator | Synovis | CAF-4 | |
| Micro-Flushing Needle | Hamilton | 10MM, 30°, 33G | |
| Lactated Ringers Solution | Fisher Scientific | NC9968051 | |
| Buprenorphine | DEA Number required; verkregen bij de ziekenhuisapotheek. | ||
| Enrofloxacin; Baytril | Bayer Health Care | 186599 | |
| Heparin | Verkregen bij de ziekenhuisapotheek |
Referenties
- Khalifian, S., et al. Facial transplantation: the first 9 years. Lancet. , (2014).
- Petruzzo, P., Dubernard, J. M. The International Registry on Hand and Composite Tissue allotransplantation. Clin. Transpl. , 247-253 (2011).
- Shores, J. T., Brandacher, G., Lee, W. A.
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Herprints en machtigingen
