Ethiek Verklaring: Procedures met menselijke deelnemers zijn goedgekeurd door het menselijk deelnemer ethische toetsingscommissie / Institutional Review Board in de Academia Sinica, Taiwan.
1. Stimuli en experimenteel programma Voorbereiding
- Bereid een pool van meer dan 60 emotioneel gezicht foto's 29 onderverdeeld in drie gezichtsuitdrukkingen (boos, blij en neutraal). Gebruik grafische software te maskeren haar en oor delen foto met zwarte achtergrond zoals getoond in figuur 1A, zodat deelnemers kunnen concentreren op de gelaatstrekken in de foto.
- Open een foto in de grafische software. Gebruik de selectie toolbox om een elliptische regio te trekken en pas de regio grootte, zodat de oren en de meeste haren niet in de ellips vallen.
- Inverteer de geselecteerde regio. Klik op "delete" om de ongewenste gebied van de foto te verwijderen en te vervangen door de zwarte kleur als achtergrond.

Figuur 1. Voorbeelden van emotioneel gezicht stimuli. (A) foto gezichten waar het haar en oren zijn uitgeschreven gemaskeerd in de zwarte achtergrond kleur, en (B) line-tekening gezichten die zijn bewerkt vanuit (A) door de grafische software. De gezichten tonen neutraal, gelukkig, en boze emoties, respectievelijk van boven naar onderste rijen. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.
- Maak een pilotstudie. Werven pilot-deelnemers voor het selecteren van geschikte prikkels uit de foto zwembad.
Opmerking: De proef deelnemers niet deelnemen aan de EEG experiment. - Configureren van de stimulus presentatie programma te beginnen met de eerste computerscherm presenteren de taak instructie, gevolgd door 5 familiarization proeven. Begin iedere proef met een kruis fixatie, gevolgd door een gezicht stimulus, en emotionaliteit evaluatietaak. Zie Aanvullende Code File voor een voorbeeld programma.
Opmerking: De echte pilots volgen onmiddellijk de kennismaking proeven door het selecteren van het gezicht foto's in een willekeurige volgorde van het zwembad. - Maak een experimenteel programma, met inbegrip van de instructie schermen en een centrale eye-fixatie scherm. Maak het gezicht stimulus scherm zoals weergegeven in figuur 2 door het configureren van de foto formaat 18,3 x 24,4 cm 2 (breedte x hoogte) met zwarte achtergrond kleur, voorzien van een computer grootte van het scherm 41 x 25,6 cm 2 met een resolutie van 1680 x 1050. Zie Aanvullende Code File voor een voorbeeld programma.
- Een scoresysteem voor emotionaliteit evaluatie in het programma zoals weergegeven in figuur 3. Plaats een horizontale lijn gaande van -100 tot 100 in traploos in het midden van het scherm without elke tick merktekens, behalve de centrale en eindpunten. Bereid het programma zodanig dat de deelnemers vrij de emotionaliteit van een foto gezicht kan evalueren door de scoring cursor naar links te slepen voor erg boos (-100) en naar rechts voor heel gelukkig (100), en druk op de START-knop.
Opmerking: Het scoresysteem lijn is ontworpen zonder tick-merken omdat de patiënten met AS gemakkelijk kunnen vast komen te zitten in het plaatsen van de cursor tussen teken tijdens emotionaliteit evaluatie. Daarom is traploos voorkeur voor patiënten. - Zorg ervoor dat het programma registreert behavioral resultaten van een deelnemer (bijvoorbeeld reactietijd en emotionaliteit scores), die worden gebruikt als criteria voor de selectie foto's uit de pool (zie stap 1.3.1).
- Recruit pilot-deelnemers (5 controle en 5 AS pilot-deelnemers). Diagnosticeren klinische patiënten volgens Gillberg 30 en DSM-IV criteria 26 en het beheer van de klinische afgeleide verkorte vorm van Wechsler Adult Intelligence Scale (WAIS-III) 31. Overeenkomen met de controles aan hun AS collega's zo goed mogelijk op geslacht en op verbale / prestatie IQ-scores.
- Voer de experimentele procedure in de pilot voor elke individuele deelnemer. Na het voltooien van de emotionele gezichtsherkenning taak, interviewen elke piloot AS deelnemer op de redelijke duur van de fixatie centrale-oog en stimulus presentatie periodes, moeilijkheid van de taak, het gemak van het gebruik van de scoring systeem en het maximum aantal pogingen voor het houden van zijn / haar concentratie, op grond waarvan het programma kan worden ingesteld voor de EEG experiment (zie stap 1.3.2)

Figuur 2. Een screenshot van een gezicht stimulus in het programma. De grootte van het gezicht is geconfigureerd om de hoogte van het scherm. Het lege gebied wordt gevuld met de zwarte kleur.uploaden / 53962 / 53962fig2large.jpg "target =" _ blank "> Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.

Figuur 3. Een screenshot van het scoresysteem voor emotionaliteit evaluatie. Het scoresysteem is zo ontworpen dat er geen vinkje hebben. De deelnemer moet de muis om de score toegewezen aan een gezicht te selecteren en druk op de START-knop om de taak af te slepen. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.
- Programma voor Taak 1: fotosessie.
- U kunt kiezen uit de pool 30 foto's, die 10 elk voor gelukkig, boos, en neutrale gezichtsuitdrukkingen (5 mannelijke en 5 vrouwelijke gezichten voor elk type uitdrukkingen), dat de meest vergelijkbare gemiddelde reactietijden te geven en gemiddelde emotionaliteit scores tussen de 5 AS en 5 controle piloot deelnemers.
- Update het experimentele programma configuraties van de feedback van de piloot patiënten, zoals de optimale centrale eye-fixatie periode (dat wil zeggen, 1000 msec), duur van stimulus (dwz 1000 msec), inter-stimulus interval (dat wil zeggen, willekeurig toegewezen -tussen 4 en 7 sec), en de omvang van de scoring systeem (dat wil zeggen, -100 tot 100). Voeg vijf kennismaking proeven voorafgaand aan de 30 experimentele trials in het programma.
- Wijzig het aantal stimuli en tijdsintervallen in een extern configuratie tekstbestand in verband met het experimentele programma.
Opmerking: De tekst bestand kan worden aangepast aan de verschillende experimentele condities te passen zonder tussenkomst van software engineers. - Reken er maar niet de vijf foto toe voor kennismaking proeven om de 30 geselecteerde foto's. Laat de EEG's en de gedrags-gegevens die zijn opgenomen in kennismaking proeven in data-analyse niet gebruiken.
- programma fof Taak 2: Line-tekening sessie.
- Create-lijntekening foto's van de 35 foto's (5 voor kennismaking trials, 30 voor experimentele studies) die in opdracht 1 door het traceren van de randen van elk gezicht. Gebruik grafische software om de grijsschaal foto's te wijzigen in zwart-wit lijntekeningen zoals weergegeven in figuur 1B.
Opmerking: Stappen hieronder voor foto bewerken is een van de mogelijke oplossingen voor het maken van lijntekeningen. - In de grafische software, de helderheid / contrast van de foto, zodat de oorspronkelijke grijsschaal intensiteit in de meeste pixels valt in zwart of wit.
- Toepassen "schetseffect" in het "effect" of menu "filter" van de software grijsschaal foto zodat alleen contour van de hoge ruimtelijke frequentie deel bewaard en toepassing "nood effect" op de uitzetting van de contour lines .
- Gebruik een penseel om de contouren te verbeteren en het gebruik van een gum tool omopruimen ongewenste delen. Zorg ervoor dat u belangrijke gelaatstrekken te houden door de controle heen en weer tussen de originele foto en haar lijntekening tegenhanger.
- Maak een kopie van het programma van de Task 1 in stap 1,3 tot een programma voor taak 2 te creëren en de plaats van de 35 foto's in opdracht 1 met de bijbehorende line-tekeningen.
2. EEG Opnameprocedure
- voorbereidingen
- Recruit 10 gezonde controlepersonen en 10 patiënten met AS voor EEG-experimenten gebaseerd op de richtlijnen van de plaatselijke menselijke deelnemer onderzoek ethische commissie / Institutional Review Board.
- Dien de verkorte vorm van WAIS-III 31 de patiënten individueel voor de experimenten en vind de controles die overeenkomen met de patiënt zo goed mogelijk van geslacht en de verbale / prestatie IQ.
- EEG Recording
- Seat de deelnemer in een comfortabele stoel in een geluid isolerend (gedimd) kamer en stel de stoelpositie, zodat het beeldscherm is 60 cm voor de deelnemer. Na een tutorial over de experimentele procedure, moet de deelnemer invullen van de toestemming vormt samen met een paar vragen over zijn / haar handigheid.
- Gebruik een EEG cap met 132 Ag / AgCl elektroden (inclusief 122 10-10 systeem EEG, en de bipolaire VEOG, HEOG, ECG, EMG elektroden, samen met zes gezichts-spieren kanalen) te EEG's op te nemen. Sluit de dop om twee 64-kanaals versterker met 0,1-100 Hz analoge band-pass filter voor ruwe EEGs digitaliseren bij 1000 Hz sampling rate.
- Monteer de standaard 128-kanaals EEG cap aan het hoofd van elke deelnemer. Pas de dop zodat de elektrode label "referentie" is geplaatst op de positie "Cz", die is gelegen ten opzichte van de voorste / achterste middellijn oriëntatiepunten (dwz midden van de nasion tot INION afstand) en links / rechts bezienswaardigheden (dwz midden links / rechts tragis), volgens de EEG internationale 10/10 systeem.
- Voorzichtig gebruik van een stompe naald om geleidende gel te injecteren in alle elektroden. Roer met de naald langzaam in de elektrode gel goed contact tussen de hoofdhuid en de elektrode (dat wil zeggen de impedantie beneden 5 kQ houden) waarborgen. Voortdurend de staat van gel contactpersoon bij de elektroden met het label "referentie" en "ground" aan de EEG cap om ervoor te zorgen dat de impedantie meting correct is.
- Let op de elektrode impedantie door het bekijken van de elektrode impedantie scherm ondersteund door de EEG-opname-software (bijv SCAN 4.5 in deze studie) die meestal gaat met de EEG-systeem. Op het scherm zijn de elektroden weergegeven in kleuren en verschillende kleuren geven de niveaus van de impedantie.
- Plaats een HEOG elektrode de canthus van een oog (positief plaatse) en de tweede elektrode in de ooghoek van de andere oog (negatieve plaatse), één VEOG elektrode boven en de ander onder de left oog, bipolaire EKG elektroden aan de achterzijde van de linker- en rechterhand en bipolaire EMG-elektroden in het gebied tussen de duim en wijsvinger van de rechterhand en de zes gezicht elektroden rond de wenkbrauwen en wangen.
- Record in een notebook die slechte kanalen waarin de impedantie hoger is dan 5 kOhm, of rechtstreeks op het scherm te zien impedantie besparen op alle elektroden. Gebruik dit als naslagwerk voor het teruggooien slechte kanalen in het stadium van de EEG data processing.
- Record resting state EEGs na het instrueren van de deelnemer voor de ogen te sluiten voor 12 min. Gedurende deze tijd, dubbel controleren de kwaliteit van de onderhavige EEG stroom op het scherm ondersteund door de EEG-registratie software.
Let op: Er moeten duidelijke alfa-golven verspreid in het achterhoofd kanalen tijdens de ogen gesloten toestand vergeleken met de ogen open toestand. Als de alfa-golven zijn te luidruchtig (het negeren van de slechte kanalen) of vervormd, terug naar stap 2.2.4 en pas de gel contact. - Start de twee experimentele taken in een tegenwicht orde over de deelnemers. Record EEG's door te klikken op het pictogram Opnemen op het scherm ondersteund door de opname-software.
- Na het lezen van taakinstructie op het scherm, moet elke deelnemer voeren de 5 vertrouwd proeven, gevolgd door de 30 taak proeven. Gebruik dezelfde procedure voor zowel foto en lijntekening taken. In de taak instructie, stimuleren de deelnemers om een score te emotionaliteit van een gezicht stimulus zo snel mogelijk toe te wijzen.
- BELANGRIJK: Controleer programma's opgesteld in de stappen 1.3.2 en 1.4.2 voor evenementen-time vergrendeld aan het begin van de centrale eye-fixatie, gezicht stimulus presentatie correct verzenden, en het drukken van de GO-knop om de opname-software tijdens emotionaliteit evaluatie. Die onset tijden worden gecodeerd als numeriek en kan worden gecontroleerd op het scherm ondersteund door de opname-software.
Opmerking: De deelnemer kan een pauze te nemen tussen de twee taken. Er is geen EEG regens tijdens de pauze.
- Gebruik een digitizer (bijvoorbeeld de Polhemus FASTRAK 3D digitizer in deze studie) om de 3D-posities van de elektroden op te nemen en op te slaan in een bestand (bijv .3dd of DAT-bestand) voor co-registratie EEG caps over deelnemers aan data-analyse.
- Na de EEG experiment, moet de deelnemer het invullen van een 35 vraag inventaris op zijn / haar gedrag en gevoelens tijdens de EEG experiment (bijvoorbeeld negatieve emoties, viel bijna in slaap), en hen de betaling voor deelname aan het experiment.
- Breng de deelnemer naar de wasruimte te reinigen / drogen zijn / haar haren.
- Reinig en ontsmet de EEG Kap volgens klinische aanwijzingen.
3. Verwerking van EEG-gegevens
Opmerking: De software commando's in deze sectie zijn specifiek voor EEGLAB.
- Filter de EEG-signalen met behulp van een hoogdoorlaatfilter van 1 Hz en een laagdoorlaatfilter van 50 Hz door te bellenpop_eegfilt.m functie 32.
Opmerking: Gebruik een low-pass filter van 40 Hz voor sommige landen dat 50 Hz elektriciteitsnet frequentie hebben - Gooi slechte kanalen met een impedantie hoger dan 5 kOhm na controle van de elektrode impedantie opgenomen in stap 2.2.6. Lever dit slechte kanalen met zeer verschillende vermogensspectrum opzichte van de naburige kanalen door visuele inspectie van het vermogensspectrum kenmerken (bijvoorbeeld de maximumwaarde, de kromming, etc.) in elk kanaal.
- Bereken en plot het vermogensspectrum van het EEG-signaal door te bellen naar de pop_spectopo.m functie 32.
- Re-verwijzen naar de EEG-signalen met het gemiddelde van de hersenen kanalen zonder de slechte kanalen door te bellen naar het pop_reref.m functie.
- Segment EEGs in-stimulus vergrendeld tijdvakken, die elk variëren van -2,0 tot 1,5 sec pre- sec na de stimulus onset. Corrigeer basislijn (-2,0 tot -1,2 seconden voordat de stimulus onset) door de gemiddelde basislijn values uit elk tijdperk.
- Bel de pop_epoch.m en pop_rmbase.m functies, respectievelijk. Kies het interval van basislijn vóór het centrale oog-fixatie periode en het begin van het gezicht stimulus.
- Mark slechte tijdperken die lijken te zijn artefacten bevatten. Gooi de slechte tijdperken, terwijl het reserveren van de tijdperken besmet met het oog knippert. De tijdperken met kunstvoorwerpen kijken meestal luidruchtig of hebben een extreem hoge piekwaarde (bijvoorbeeld hoger dan 100 mV) in vergelijking met typische tijdperken.
- Bel de pop_rejmenu.m functie om een semi-automatische procedure te starten. Een interactie venster pop uit om opnieuw te bevestigen automatisch geselecteerd slechte tijdperken door de gebruiker via visuele inspectie. Hoewel een meerderheid van de tijdperken zijn verontreinigd door het oog knippert, kunnen deze tijdperken voorlopig worden gereserveerd voor later verwijdering door onafhankelijke component analyse (ICA) 33 in stap 3.8.
- Na weggooien slecht kanalen en slechte tijdperken, draaien ICA op de gesnoeide EEG-gegevens met behulp van de pop_runica.m functie.
- Onder de geschatte onafhankelijke componenten (IC's), te identificeren artefacten als gevolg van oogbeweging / knipperen, spieractiviteit, hartslag, en ruis op de lijn 32.
Opmerking: Een significant hoge correlatie (R 2> 0,9) tussen IC scores van een component en die van alle referentie-kanalen (VEOG, HEOG, EKG, en gezicht kanalen) geeft aan dat deze component vooral bijgedragen door artefacten. De geschatte IC scores verklaard door de artefacten kan worden opgeruimd met behulp van meerdere regressie-analyse. - Verwijder artefact IC's en een schatting van de schone EEG's die zijn afgeleid door het product van de ICA mengen matrix en-artefact schoongemaakt IC score matrix. Bewaar de schone EEGs voor verdere analyse.
- Houd de residuen van het voorspellen van artefact IC's (R 2> 0,9) van de referentie-VEOG, HEOG, EKG en gezicht kanalen in de IC score matrix. Verwijder andere artefact ICs door de pop_subcomp.m functie. De functie geeft de-artefact schoongemaakt EEG's.
4. Statistische analyse
- Partitie EEG kanalen in elf homogene gebieden het aantal statistische vergelijkingen verminderen ERP en ERSP analyses, dat wil zeggen, links (10 kanalen), midline- (14) en rechter frontale (10); links (13) en rechter-temporele (13); links (9), midline- (14) en rechter-centrale (9); links (9), midline- (12) en rechter pariëtale occipitale (9) zoals getoond in figuur 4. Deze gebieden worden bepaald op basis van de functionele anatomie van cortex 34. Functionele homogeniteit van EEG-signalen in deze regio's is gevalideerd in verschillende experimenten 13,35,36.

Figuur 4. Het kanaal partitie. De kanalen zijn verdeeld in elf gebieden. LF: links-frontaal (10 kanalen), MF: middellijn-frontale (14), RF: rechts-frontaal (10), LT: links-temporale (13), RT: rechts-temporele (13), LC: links-centrale (9), MC: middellijn-centrale (14), RC: rechter-centrale (9), LP: linker-occipitale pariëtale (9), MP: middellijn-occipitale pariëtale (12), RP :. rechts-pariëtale occipitale (9) klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.
- Laad de schone EEGs in stap 3.8. Bereken het kanaal ERP door het gemiddelde signalen over tijdvakken in elk kanaal, en regionale ERP door het gemiddelde van ERP binnen dezelfde regio.
Opmerking: Wanneer EEG's worden geladen met de pop_loadset.m functie EEGLAB, worden de signalen in de structuur variabele "EEG.data" opgeslagen in een kanaal per keer per tijdvak array. - In de Matlab command window, berekenen het kanaal ERP door het gemiddelde EEG.data over tijdperken voor elk kanaal (bijv channelERP = gemiddelde (EEG.dat, 3)). Bereken de regionale ERP door het gemiddelde van het kanaal ERP binnen elke regio op basis van de partitie in 4.1 (bijv regionalERP = gemiddelde (channelERP (index, :), 1), waar de 'index' staat voor het kanaal indices in een bepaalde regio).
- Bereken het kanaal ERSPs door toepassing van een time-frequentie transformatie (bijv Wavelet transformatie) om signalen in elk kanaal tijdperk en regionale ERSPs door het gemiddelde kanaal ERSPs in dezelfde regio.
- Voer de time-frequentie te transformeren door te bellen naar het pop_newtimef.m functie.
Let op: In deze studie, de "wavelet cycli" is ingesteld op [1, 0,5] en "basislijn" is ingesteld op [-2.000--1.200] msec. Het resulterende kanaal ERSPs worden opgeslagen in een frequentie-by-tijd-voor-kanaal matrix. - In de Matlab command window, berekenen de regionale ERSP door het gemiddelde ERSPs verschillende kanalen binnen elke regio op basis van de partitie in 4.1 (bijv regionalERSP = gemiddelde (channelERSP (:,:, index), 3), waarbij "channelERSP" is de output uit de pop_newtimef.m functie en "index" staat voor het kanaal indices in agregio iven).
- Bereken de gemiddelde waarden in verschillende tijdsintervallen (bv 50-150, 150-250, 250-350, 350-450 msec) voor de regionale ERP. Bereken de gemiddelde waarden in verschillende tijd-frequentie-intervallen (bv 50-150, 150-250, 250-350, 350-450, 450-800 msec in 07/01 Hz en 200-800 msec in 30/08 Hz) voor de regionale ERSPs.
- Solliciteer MANOVA in statistische software (bijvoorbeeld IBM SPSS) om de gemiddelde waarden van de regionale ERP en ERSPs naar de belangrijkste gevolgen voor de taak (foto vs. line-tekening), regio (elf hoofdhuid regio's), en de groep te evalueren (AS vs. controle) evenals de interactie-effecten tussen de taak regio en aan.
- In de statistische analyse, overwegen geslacht (man versus vrouw) als covariaat, en schat de hoofd- en interactie-effecten door het houden van het geslacht effect constant.