Methodenartikel

Operating Procedures van de Electrochemotherapy voor de behandeling van de Tumor bij honden en katten

29.8K weergaven

⸱

DOI:

10.3791/54760

⸱

24 oktober 2016

 ,  ,  ,  ,  , 
1Clinic for Surgery and Small Animals, Veterinary Faculty, University of Ljubljana, 2Department of Experimental Oncology, Institute of Oncology Ljubljana, 3Faculty of Health Sciences, University of Primorska, 4IPBS (Institut de Pharmacologie et de Biologie Structurale), CNRS, 5IPBS (Institut de Pharmacologie et de Biologie Structurale), Université de Toulouse

In dit artikel

Samenvatting

Elektrochemotherapie is de lokale behandeling van vaste tumoren. Het belangrijkste mechanisme is door elektroporatie gemedieerde permeabilisatie van het membraan van de tumorcellen, wat een verhoogde internalisatie van cytostatica zoals bleomycine en cisplatine mogelijk maakt. Hierdoor wordt de antitumor-effectiviteit op de plaats van toediening van elektrische pulsen op de tumoren versterkt.

Samenvatting

Electrochemotherapy (ECT) is een lokale benadering die wordt gebruikt voor het behandelen van vaste tumoren van verschillende histologie. Het mechanisme berust op celmembraan permeabilisatie via "elektroporatie". De "elektroporatie" van de cellen te bereiken, worden elektrische pulsen gegenereerd door een generator en het doelweefsel uit met het gebruik van elektroden. Elektroporatie is een fysische methode die wordt gebruikt om moleculen te introduceren, zoals cytostatica, in de cellen die het celmembraan niet kan doorgeven op zichzelf. In electrochemotherapy, momenteel, cisplatine en bleomycine worden klinisch gebruikt. Electrochemotherapy antitumor effectiviteit is hoog, bijvoorbeeld tot 100% volledige respons van canine mestcel tumoren kleiner dan 2 cm 3 bedraagt. Bovendien kan electrochemotherapy worden gebruikt voor de behandeling van inoperabele tumoren. Een belangrijk kenmerk van electrochemotherapy is dat het effectief is als een eenmalige behandeling kan wordenalleen. In geval van storing of partiële tumorrespons kan meerdere keren herhaald met dezelfde of verbeterde effectiviteit. Electrochemotherapy al een standaardbehandeling van cutane en subcutane tumoren van verschillende histologie in humane en veterinaire oncologie. Bovendien, een aantal klinische studies exploiteren electrochemotherapy voor diepgewortelde tumoren zijn aan de gang.

Inleiding

ECT is een lokaal ablatieve techniek voor de behandeling van tumoren van verschillende histologie. Ablatie resultaten van de drug geïnduceerde celdoding, dat een gevolg van de toegenomen accumulatie van het geneesmiddel in de cellen door veranderde celmembraan permeabiliteit geïnduceerd door directe levering van elektrische pulsen op de huid rond de tumor na intratumorale of intraveneuze injectie van het geneesmiddel. Het belangrijkste mechanisme van ECT is om de effectiviteit van cytostatica met verhoogde intracellulaire accumulatie van het geneesmiddel versterken, door celmembraan electropermeabilization (elektroporatie) 1,2. Elektroporatie veroorzaakt een verhoogde geneesmiddelopname twee cytostatica: bleomycine en cisplatine, die hydrofiele geneesmiddelen met een slechte permeabiliteit zijn. Door de verhoogde cytotoxiciteit van bleomycine en cisplatine op de plaats van toepassing van elektrische stroom worden lage doses geneesmiddel nodig voor goede antitumor effectiviteit en derhalve geen of minimale systemische bijwerkingen van de geneesmiddelen OBSERVed 3. Een ander kenmerk van ECT is een tumor antivasculaire effect dat enerzijds leidt tot vasculaire slot, dwz., Verminderde bloedtoevoer in de tumor, en derhalve de retentie van cytostatica daarin en ten tweede een vasculaire verstoren werking, dwz., Direct doden van endotheelcellen van de kleine bloedvaten leidt tot secundaire tumor celdood 4-6. Het derde mechanisme van ECT antitumor effectiviteit is de activering van het immuunsysteem ECT een immuunrespons opwekt door tumorantigeen uitscheiding de tumor omgeving. De betrokkenheid van het immuunsysteem is cruciaal voor de volledige uitroeiing van de tumor 7.

ECT heeft aangetoond groot potentieel in humane kanker, waarbij ECT reeds als standaardbehandeling voor cutane en subcutane tumoren wordt gebruikt vertoont tot 80% objectieve responsen 3. Bovendien ECT wordt gebruikt in verschillende klinische studies behandelen tumor metastasen in de hersenen 8, 9 bot en lever 10. Klinische studies in veterinaire oncologie hebben reeds aangetoond dat behandeling ECT leidt tot 80% langdurig doelstelling respons bij de behandeling van cutane en subcutane tumoren bij honden 11, 12, 13 katten en paarden 14. De werkzaamheid tegen tumoren is afhankelijk van tumorgrootte en tumoren kleiner dan 2 cm 3 reageren beter dan grotere tumoren 15.

Ook een vergelijkende studie chirurgie met ECT behandeling mastceltumoren bij honden toonde aan dat behandeling met ECT resulteerde in 70% van de complete respons tijdens chirurgie resulteerde in 50% van de totale respons 11 aantonen dat ECT een gelijkwaardige behandeling chirurgie. Daarnaast ECT staat voor een alternatieve methode voor de behandeling van solide tumoren chirurgische behandeling, in het bijzonder in die gevallen waarin eigenaren niet instemt met een operatie of als de tumoren zijn moeilijk te accijns met duidelijke marges vooral te wijten aan hunlocatie (bijvoorbeeld infiltreren grote bloedvaten, tumoren van het hoofd of been, in de anale regio etc.). Het doel van dit artikel is om de operationele procedures van ECT het geven van instructies voor het gebruik van cisplatine en bleomycine in combinatie met de toepassing van elektrische pulsen om cutane en subcutane tumoren bij honden en katten veilig en adequaat te behandelen definiëren.

Protocol

Dit protocol werd goedgekeurd door de Ethische Commissie van het ministerie van Landbouw, Bosbouw en Voedselvoorziening en volgt de richtlijnen. Het protocol werd gevalideerd op meer dan 80 honden en 20 katten.

LET OP: ECT behandeling bestaat uit het toedienen van cisplatine of bleomycine en de blootstelling van de tumor knobbeltjes om elektrische pulsen.

1. Selectie Patient

OPMERKING: Selectie van patiënten kan de arts om te bepalen of de patiënt geschikt is of niet profiteren van deze behandeling.

  1. Evalueer de geschiedenis van de patiënt (algemene gegevens over leeftijd, ras, geslacht en de aanwezigheid van andere ziekten, tumortype, evolutie van de tumor met de tijd, eerdere behandelingen en de resultaten, herhaling en snelheid van herhaling, eigenaar verwachtingen de successfulness van de therapie).
  2. Voer een lichamelijk onderzoek van de patiënt
    1. Evalueer de tumor in detail om make een mogelijke klinische differentiaal diagnose en het uitvoeren van een fijne naald aspireren voor cytologie evaluatie en de eventuele weefsel biopsie voor histologie evaluatie met het oog op het te behandelen gebied te bepalen: behandelen als een potentieel invasieve tumor wordt voorgesteld de brede marges (de beslissing over de grootte van de behandeld varieerden volgens aanbevelingen voor andere behandelingen hetzelfde type tumor, bijvoorbeeld mastceltumor 2r ≤ 1 cm, 1 cm marge moeten worden beschouwd; r - radius).
    2. Evalueer het aantal en de grootte van de knollen teneinde een behandelmethode bereiden.
  3. algemeen onderzoek
    1. Implementeer een volledige algemeen onderzoek met het oog op het opvoeren van de ziekte te maken en te controleren:
      1. Als er geen andere concurrerende ziekte die de behandeling kan uitsluit, indien de patiënt een voorgeschiedenis van chronische infectie (volgens epidemiologie in een bepaald gebied) of immuungemedieerde ziekte die hematologische of coagulat kunnen wijzigenion veranderingen (voeren specifieke analyses), Als het dier in staat is een aantal diepe Kalmerende middelen en / of algemene anesthesie te weerstaan, als de patiënt gevoeligheid voor cisplatine (standaard dosis 60-70 mg / m2 lichaamsoppervlak / 21 d) of bleomycine of reeds een cumulatieve dosis van bleomycine dan 400,000 IU / m 2 ontvangen.
    2. Diagnose- beeldvormingstechnieken (radiografie van de thorax en echografisch onderzoek van de buik) om eventuele uitzaaiingen volgens de tumortype controleren.

2. laboratoriumanalyse

  1. Bloed werk
    1. Voer compleet hematologie analyseert met een biochemie panel van bloed ureum stikstof (BUN), creatinine, alanine-aminotransferase (ALT), alkalische fosfatase (AF) en calcium tot geavanceerde chronische nier- en leverziekten en mogelijk meest voorkomende paraneoplastische syndromen te sluiten om te bepalen de klinische fase waarin een ef vermoedelijkfect op de prognose.
    2. Doe een aanvullende specifieke bloedanalyse:
      1. Als de patiënt een geneesmiddel die potentieel veranderingen in de bloedstolling vermogen kunnen veranderen wordt gegeven, controleer dan de coagulatie profiel.
      2. Bij gebruik van invasieve behandeling (naald elektroden), controleer het aantal plaatjes; het aantal bloedplaatjes moet> 100 of indien het is <100, de stollingsprofiel (PT, APTT, fibrinogeen, D-dimeer) moet normaal zijn.
      3. In specifieke gevallen volgens neoplastische ziekte en de klinische toestand van de patiënt toont de totale eiwitten, albumine, fosfor, natrium (Na), kalium (K), chloor (Cl) en lipase concentratie.
  2. Tumor (s) histologische analyse
    1. Histologie analyse niet nodig als de cytologische diagnose eerder werd uitgevoerd. Bij bepaalde tumortypen waar de histologische graad is een belangrijke prognostische factor (bijv mastceltumoren) verricht hematoxyline en eosine staining 16.
      LET OP: De biopsie (incisional of "punch") kan worden ingesteld bij ECT tijdens hetzelfde bezoek. In ieder geval is goede klinische praktijk om het tumortype diagnosticeren.
      NB: Na de zaak volledig is geëvalueerd een grondige bespreking en verduidelijking met de eigenaar van het dier nodig is. Leg aan de eigenaar wat ECT is en wat kan worden verwacht van ECT in termen van klinische resultaten. Bespreek met de eigenaar van de kuur: het aantal ECT sessies onder narcose of diepe sedatie, de totale duur van de behandeling, de kosten van de behandeling, mogelijkheden van herhaling. Het verkrijgen van schriftelijke toestemming van de eigenaar in het geval van de patiënt opname in een klinische trial van ECT, als de patiënt is eigenlijk in aanmerking.

3. De keuze van de behandeling Modality

LET OP: Voor ECT bij honden gebruiken cisplatine en bleomycine. Voor ECT bij katten gebruiken bleomycine alleen, zoals cisplatine is gecontra-indiceerd bij katten.

  1. Behandel iedere tumor afzonderlijk. Bepaal de locatie en grootte van elk gezwel en het aantal knobbeltjes voor het behandelprotocol schetsen.
  2. Bereken het volume van tumoren met de formule V = ab²π / 6 ( "a" de grotere diameter van de tumor gezwel en "b" de diameter van de tumor gezwel loodrecht op "a") of V = abcπ / 6 ( " a "," b "en" c "dan drie loodrechte diameters van de tumor gezwel).

4. Keuze van Operating Modality

  1. Selectie van elektroden
    NB: Het is belangrijk om de optimale elektrode type te kiezen als elektrode configuratie van invloed op het elektrische veld distributie in het weefsel. Er zijn twee soorten van de elektrode worden gebruikt: plaat en naald elektroden. Plaatelektroden parallelle roestvrijstalen platen: de inwendige afstand tussen de elektroden afhankelijk van de grootte van de tumor en het vermogen van de generator van elektrische pulsen. Normaliter is de afstand zijnsen de elektroden 6-8 mm. Naaldelektroden kunnen worden opgesteld in rijen (parallel array) of hexagonale geometrie. De zeshoekige electrode heeft een centrale naald en 6 naalden in een cirkelvormige array. De pulsen worden aangelegd tussen de elektroden in de cirkelvormige reeks onderling en met het centrale deel. De pulsen worden toegevoerd in beide richtingen tussen elk paar elektroden. Kies het type elektrode volgens de diepte van de tumor gezwel en passende elektroporatie in het gewenste behandelde gebied geheel. Kies de electrodes volgens de specifieke doelweefsel. In het algemeen kan beide typen elektroden worden gebruikt voor de behandeling.
  2. Selectie en voorbereiding van cisplatine of bleomycine
    LET OP: ECT bestaat uit intratumorale toediening van cisplatine of bleomycine of intraveneuze toediening van bleomycine en de blootstelling van de tumor knobbeltjes om elektrische pulsen.
    1. Kies een geschikte cytostatica en de route van de administratie.
    2. ontbinden cisplatin (cis-diamminedichloorplatina II), indien verkregen als een poeder in gedestilleerd water bij een concentratie van 1 mg / ml (anders farmaceutisch bereide oplossingen kunnen worden gebruikt). Geef cisplatine intratumoraal.
    3. Bleomycine oplossen in een fysiologische zoutoplossing bij een concentratie van 3 mg / ml en geven intratumoraal of intraveneus.
  3. Anesthesie
    Opmerking: Afhankelijk van de operationele modaliteit (tabel 1) diepe sedatie of algemene anesthesie worden gebruikt.
    1. Evalueer de patiënt volgens de American Society of Anesthesiologists (ASA) fysieke status classificatie en volgens type tumor vanwege mogelijke paraneoplastische syndromen.
  4. diepe sedatie
    1. Met medetomidine (0,08 mg / kg) of dubbele combinatie medetomidine (0,025 mg / kg) met butorphanoltartraat (0,1 mg / kg) in honden en de standaardprocedures voor diepe sedatie in de specifieke ziekenhuis.
  5. Narcose
    1. Premedicate met acepromazine (0,02 mg / kg) en methadon (2 mg / kg).
    2. Dertig minuten later induceren algemene anesthesie met thiopental (5 mg / kg) of propofol (1 mg / kg).
    3. Plaats endotracheale tube en anesthesie met isofluraan in zuurstof geleverd via een T-stuk verdoving circuit te handhaven.
    4. Tijdens verdoving vloeibare drager behandeld met de oplossing Hartmann bij een snelheid van 10 ml / kg / uur en analgesie met een enkele dosis van een niet-steroïde analgetische geneesmiddelen (bijv carprofen 2-4 mg / kg).
    5. Gebruik oogzalf tot droog voorkomen terwijl onder verdoving. Na de behandeling toezicht op de patiënt, totdat het voldoende bewustzijn borstligging herwint. Houd de patiënt in de kliniek voor ongeveer 2 tot 4 uur.
      LET OP: Standaard procedures voor algemene anesthesie in de specifieke ziekenhuis kan ook gevolgd worden.
  6. bedrijfsomgeving
    LET OP: Het personeel operating worden opgeleid ECT operators (DVM), anesthesisten en assistenten.
    1. Gebruik een ambulance kamer toen ECT onder diepe sedatie wordt uitgevoerd of een chirurgische ruimte waar algehele anesthesie is toegestaan.
    2. Voor sedatie en / of algehele narcose gebruik van alle benodigde apparatuur op basis van de procedures voor anesthesie.
    3. Voor de ECT procedure bekijk alle benodigde materialen in de Materials List.
  7. Operator en de omliggende personeelsbescherming
    LET OP: Druppeltje blootstelling van de huid aan cytostatica zelden veroorzaakt acute problemen. Cisplatine en bleomycine worden niet geabsorbeerd door intacte huid. Cisplatine mag alleen irritatie veroorzaken. Cisplatine en bleomycine lekkage kunnen optreden bij het injecteren stevige knobbeltjes of tumoren. In het geval van een prikaccident, wassen met overvloed aan water en verzorgen van de wond volgens de standaard medische praktijk.
    1. Bescherm de exploitant en de omliggende assistenten met maskers en handschoenen. In het geval van blootstelling van de huid aan cisplatine of bleomycine oplossing, onmiddellijk spoelen met veel water.
    2. Opzetten bioveiligheidsmaatregelen volgens een kwaliteit verzekering programma dat voldoet aan de plaatselijke regelgeving over het gebruik van anti-drug, indien van toepassing.
  8. Generatoren van elektrische pulsen
    OPMERKING: Toepassingen van elektrische pulsen kunnen worden uitgevoerd met de generator van elektrische pulsen uitgevoerd. Gewoonlijk is het apparaat een blokvormige pulsgenerator met geïntegreerde software en een touch-screen interface met vooraf ontworpen elektrische pulsen te selecteren. Het is uitgerust met een handbediende elektrodehouder met een puls-activerende knoop door een koord aan de generator gekoppeld. Het leveren van elektrische pulsen kan worden bestuurd door een voetschakelaar. De generator van de elektrische pulsen moeten voldoen aan de EU-normen: 2006/95 / EG van 12/12/2006 betreffende elektronische materialen binnen bepaalde spanningsgrenzen, 2004/108 / EG van 2004/12/15 het gebied van elektromagnetische compatibiliteit en moet in overeenstemming zijn met de FDA regelgeving.
  9. Procedure voor de toepassing van elektrische pulsen
    LET OP: The toepassing van elektrische pulsen volgt de intratumorale toediening van cisplatine of bleomycine, of intraveneuze toediening van bleomycine. Bij toediening intratumorale cytostatisch moet langzaam worden toegepast om lekkage te voorkomen. Voor intraveneuze toediening moet cytostatica worden toegepast bolus durende ongeveer 30 seconden. Een gel op waterbasis wordt gebruikt om een ​​goed contact tussen de huid en de elektroden, ofwel plaat of naald bereiken en minder heterogene elektrische veldverdeling bereiken. De geleidbaarheid van gels moet tussen 0,5 tot 1 S / m 17,18. De elektrische geleidbaarheid van de gel die werd gebruikt was 0,5 S / m. De plaatelektroden moet zodanig dat de tumor wordt omvat daartussen geplaatst. Bovendien betere verdeling van het elektrische veld de toepassing van elektrische pulsen moet tweemaal in een loodrechte richting worden uitgevoerd bereiken. Als de tumor groter dan de afstand tussen de elektroden, moet de toepassing van elektroden stert van de marge van de tumor (inclusief de veiligheidsmarge) en voortgang naar het midden van de tumor. Bij naaldelektroden, moet ervoor worden gezorgd dat alle naalden worden ingebracht in het weefsel om de juiste verdeling van het elektrische veld te bereiken. De toepassing van een gel is niet nodig. Anders is de procedure dezelfde als bij plaatelektroden.
    1. Ontharen de huid in het gebied van toepassing van elektrische pulsen
    2. Dien cisplatine of bleomycine. Als cytostaticum wordt intraveneus toegediend wacht 8 min en het tijdinterval voor elektrische pulsen levering 20 min. Als cytostatische intratumoraal wordt toegediend starten de toepassing van elektrische pulsen onmiddellijk (binnen 1 min na injectie).
    3. Voor het aanbrengen van elektrische pulsen toe te passen een waterig gel op het onthaarde huid.
    4. Voor plaat elektroden gebruiken deze puls parameters: pulsduur 100 usec, amplitude de elektrode afstand verhouding 1300 V /cm, frequentie 1 Hz en 5 kHz. Lever elke run van 8 unipolaire elektrische pulsen in twee treinen van vier pulsen met 1 sec interval, in twee loodrechte richtingen.
    5. Voor naald elektroden met rijen gebruiken puls parameters: pulsduur 100 usec, amplitude van de afstand verhouding elektrode 1000 V / cm, de frequentie 1 of 5 kHz. Elke run van unipolaire elektrische pulsen bestaat uit acht pulsen.
    6. Voor naald elektroden, te regelen in een hexagonale configuratie en het gebruik pulse parameters: pulsduur 100 usec; de zeshoekige elektrode een vaste spanning van 730 V (als de afstand tussen de elektroden 7 mm; 1040 V / cm), met een frequentie van 5 kHz en het aantal pulsen afhankelijk van het aantal naalden. Bij 7 naalden 24 pulsen worden toegevoerd
  10. Verwijdering van besmet materiaal.
    1. Gooi alle besmette materialen (spuiten, naalden, flesjes, gaasjes, handschoenen) in een container die bestemd zijn voor verbranding.

5. Opvolgen

LET OP: Bij elk bezoek, worden tumoren gemeten met een schuifmaat en gefotografeerd. Deze bezoeken dienen ook om de mogelijke lokale en systemische bijwerkingen evalueren. Reactie op de behandeling paal 4 weken op basis van de criteria van "reactie evaluatiecriteria in vaste tumoren" (RECIST) 19 als een volledige reactie (CR) - verdwijning van het gezwel, partiële respons (PR) - ten minste 30% afname van de som van de diameters van het beoogde letsel, met als referentie de basislijn som diameters, progressieve ziekte (PD) - ten minste een toename van 20% van de som van de diameters van de beoogde laesies, met als referentie de kleinste sum bestudeerd, stabiele ziekte (SD) - niet voldoende krimp te komen voor PR, noch een voldoende verhoging te komen voor PD, als referentie de kleinste som diameters. Voor alle definities reactie minimaal 4 weken durende vereist voor Qualifying elk type respons. Observatie tijd wordt berekend als het interval tussen de datum van de eerste behandeling en de datum van de laatste onderzoek van de patiënt. Mogelijke bijwerkingen worden bepaald op basis van de Veterinaire Cooperative Oncology Group toxiciteit schaal (VCOG - CTCAE) 20 bij elk follow-up onderzoek.

  1. Een afspraak 1 week na de behandeling. Een afspraak 2 weken na de behandeling. Een afspraak 4 weken na de behandeling. Na 4 weken een afspraak keer per maand.

Resultaten

De zaak vertoont mastceltumor op het ooglid van een hond. De patiënt werd behandeld met intratumorale geïnjecteerde cisplatine en de toepassing van elektrische pulsen via 8 plaatelektroden.

De omvang van de tumor 5 mm. Door het gevoelige gebied van locatie narcose de tumor werd gebruikt. Volgens de grootte van de tumor 0,5 ml (0,5 mg) van cisplatine intratumoraal geïnjecteerd. Een min na de injectie van elektrische pulsen werden toegepast onder toepassing van een 8 mm plaatelektrode. Slechts één punt van elektrische pulsen werd toegepast. Na behandeling werd de patiënt bewaakt tot het voldoende bewustzijn herwonnen. De patiënt werd vrijgelaten na twee uur. Na een week van de patiënt kwam voor een regelmatige check-up. De tumor zweren en het gebied rond de tumor was enigszins gezwollen. De tumor werd gemeten door Vernier schuifmaat en gefotografeerd. Een maand na de treatment geen verder bewijs van de tumor werd waargenomen. De wond werd gesloten en litteken alopecia gezien bij de behandelingsplaats. Na behandeling de hond geen tekenen van pijn vertoonden, heeft de functie van het ooglid bewaard gedurende de gehele herstelperiode en cosmetische effecten na behandeling zijn uitstekend.

figure-results-1
Figuur 1. Behandeling Electrochemotherapy. Het getal voor de hond vóór behandeling (A), één week (B), één maand (C) en drie maanden na de behandeling (D). (A) mastceltumor op het onderste ooglid. De 2,5-jarige Duitse boxer hond met een tumorgrootte van 5 mm voorafgaand aan de therapie. (B) Na de behandeling van de tumor begon te zweren en het weefsel rondom de geëlektroporeerde gebied werd licht gezwollen. twee weeks na de behandeling een korst gevormd op de tumorplaats en viel (niet getoond). (C) Een maand na electrochemotherapy geen bewijs van de tumor werd waargenomen en litteken alopecia werd gezien op de tumorplaats. (D) Drie maanden na electrochemotherapy totale re-epithelisatie plaatsgevonden op de plaats van de tumor. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.

Operating modaliteit (OM)
Nummer, en de plaats van tumoren EEN B
1-3 knobbeltjes <1 cm³ huid en orale tumoren √
> 3 knobbeltjes, elk volume huid en mondelinge tumoren hoofd √
een aantal, elk volume van de huid en orale tumoren hoofd √

Tabel 1. Keuze van de modaliteit is gebaseerd op het aantal tumoren en hun omvang diepe sedatie = OM A.; Algemene anesthesie = OM B.

Chemotherapeuticum / grootte van de tumor intratumorale applicatie intraveneuze toediening
Cisplatine dosis (1 mg / ml) <1 cm 3 1 ml (1 mg) / cm3 tumor
Cisplatine dosis (1 mg / ml)> 1 cm3 0,5-1 ml (0,5-1 mg) / cm3 tumor
Bleomycine dosis (3000 IE / ml) <1 cm 3 0,5 ml (1500 IE) / cm3 Tumor 300 IU / kg
Bleomycine dosis (3000 IE / ml)> 1 cm3 0,5-1 ml (1500-3000 IU) / cm3 tumor 300 IU / kg

Tabel 2. De juiste injectievolume van cytostatica volgens de toedieningsroute en tumorgrootte bij honden.

Chemotherapeuticum / grootte van de tumor intratumorale applicatie intraveneuze toediening
Bleomycine dosis (3000 IE / ml) <1 cm 3 0,5 ml (1500 IE) / cm3 tumor 300 IU / kg
Bleomycine dosis (3000 IE / ml)> 1 cm3 0,5-1 ml (1.500 - 3.000 IE) / cm 3 van de tumor 300 IU / kg

Tabel 3. De juiste injectievolume van cytostatica volgens de tumorgrootte bij katten.

Discussie

Electrochemotherapy heeft bewezen zeer effectief tegen verschillende primaire tumoren of metastasen bij honden en katten zijn. Electrochemotherapy kan worden gebruikt met opzet curatieve solitair of meerdere cutane of subcutane tumoren of hulpstof behandeling chirurgie. De standaardbehandeling van de keuze voor verscheidene tumoren bij honden, waaronder mestceltumoren, is chirurgische excisie van de tumor. Een studie die chirurgie als een behandeling om de ECT behandeling mastceltumoren bij honden toonde aan dat behandeling met ECT resulteerde in 70% van de complete respons tijdens chirurgie resulteerde in 50% van de totale respons 11 aantonen dat ECT een gelijkwaardige behandeling chirurgie.

Voor de uitgesproken anti-tumor effect van ECT twee voorwaarden moet worden voldaan, die kritische stappen in het protocol zijn. De eerste is de toediening van cytostatica. De aanwezigheid van het geneesmiddel in de doelweefsels bepaalt ECT efficiëntieals geneesmiddel moet aanwezig zijn in de cellen zijn om ze te doden. Bij het injecteren van de drug intratumoraal, het teken van goede weefselretentie is weefsel whitening. Ook zou enige lekkage van oplossing na toediening plaatsvinden door de gaten door de naald in de tumor of necrotiserende weefsels tijdens verdere ECT sessies. Zo bereiken 1 mg / cm 3 (cisplatine) of 3000 IE / cm 3 (bleomycine) concentraties kunnen dan puur theoretisch in die gevallen echter, het doel is om te proberen zoveel mogelijk oplossing in de doelweefsels behouden. Bovendien elektrische pulsen worden zo snel mogelijk om een ​​vaatvernauwende effect dat bijdraagt ​​retentie oplossing te verkrijgen aangebracht.

Twee verschillende routes van toediening kan worden gebruikt met ECT: intratumorale en intraveneuze. De anti-tumor effect van ECT met intratumorale cisplatine of bleomycine of met intraveneus bleomycine is vergelijkbaar met 21 terwijl electrochemotherapy met de intraveneuze toediening van cisplatine minder effectief dan 22 cisplatine alleen in intratumorale toediening. Een ander belangrijk kenmerk van de cisplatine geneesmiddel dat het gebruik bij katten is gecontraïndiceerd cisplatine is aangetoond zeer giftig katten 23 zijn. Als de patiënt één of slechts enkele knobbeltjes, dan een intratumorale route wordt aanbevolen. Als het aantal knobbeltjes overschrijdt ~ 5 knobbeltjes, dan een intraveneuze route wordt aanbevolen. Intratumorale injectie van cisplatine heeft sommige antitumor effectiviteit zelfs zonder toepassing van elektrische pulsen, terwijl bleomycine, vanwege de hoge hydrofiele aard, niet. Daarom cisplatine is het eerste geneesmiddel van keuze als intratumorale toepassing mogelijk bij honden. Dit is belangrijk omdat de tweede voorwaarde waaraan moet worden voldaan om effectief antitumor werking van ECT en dat bereik van de gehele tumor met een voldoende hoog elektrisch veld. De toename in cel vindenmembraan permeabilisatie, moeten de geïnduceerde elektrische veld in het weefsel een bepaalde drempel overschrijdt. De verdeling van het elektrische veld in het weefsel is afhankelijk van de elektroden, daarom is het belangrijk welke elektroden worden gebruikt. Plaat of parallel matrix elektroden kan veilig worden gebruikt voor kleine oppervlakkige tumoren 24. Wanneer de tumoren zijn dikker en groter, zeshoekige elektroden geschikter. Een belangrijk gegeven is dat de toepassing van de elektrische pulsen worden herhaald, zodat de gehele tumor is bedekt, inclusief de veiligheidsmarges. Aangezien elektrische pulsen veroorzaken vasculaire slot moet de toepassing beginnen vanaf de rand van de tumor, richting het midden.

Momenteel is de beperking van de techniek is de beschikbaarheid van de elektroden waarin de behandeling van diepliggende tumoren voorkomt. De configuratie van de elektroden een technologische functie die snel ontwikkelt en nu verschillende reeksen elektroden worden gebruikt fof specifieke administraties lange naald enkele elektroden voor metastasen van colorectale tumoren in de lever 25, botmetastasen 7, weke delen sarcoom 26, endoluminal elektroden voor colorectale, maag- en slokdarmkanker tumoren 27 en uitbreidbaar '' paraplu '' elektroden bij hersentumoren 8 .

ECT kan effectief zijn als slechts een eenmalige behandeling, maar in geval van storing of partiële tumorrespons kan meerdere keren worden herhaald met verbeterde effectiviteit. ECT is een lokale ablatieve behandeling. De lokale effectiviteit is aan 80% van de lokale tumorcontrole maar zonder merkbaar effect op verre metastasen 7, die een andere beperking van de therapie. Daarom een ​​systemische respons ECT kan worden gecombineerd met andere therapieën. Onlangs stelden we een combinatie van ECT met een andere biomedische toepassing van elektroporatie, dat wil zeggen, gen Electroforetisch van de immunomodulerende Molecule interleukine-12 (IL-12), dat bekend staat om zijn antitumoractiviteit. Combinatie van ECT en gen Electroforetisch met IL-12 is reeds aangetoond dat een veilige combinatietherapie zonder bijwerkingen en goede lokale tumor met hoge volledige respons 28, die ook voorkomen herhaling verre metastasen.

Concluderend, de voordelen van electrochemotherapy zijn eenvoud, korte duur van de behandelingen, cytostatische lage doses en onbeduidend bijwerkingen. Daarnaast wordt uitgevoerd op een poliklinische basis, dus de patiënten niet te blijven in het ziekenhuis.

Tegenwoordig is de beschikbaarheid van verschillende producenten van elektrische pulsen op de markt toeneemt hetgeen ook tot een verlaging van de prijs van de turbines zonder verlies van betrouwbaarheid en waardoor electrochemotherapy nog voordeliger. Deze moeten allemaal leiden tot een ruimer gebruik van deze therapie in de diergeneeskunde.

Openbaarmakingen

De auteurs hebben niets te onthullen.

Dankbetuigingen

De auteurs erkennen de financiële steun erkenning die ontvangen is uit de staatsbegroting door de Sloveense Onderzoeksagentschap (programma nr. P3-0003, projectnr. J3-6796). Het onderzoek werd uitgevoerd in het kader van het EBAM Europees Geassocieerd Laboratorium (LEA). Dit manuscript is het resultaat van de netwerkingsinspanningen van de COST Action TD1104. Wij wensen Alenka Seliskar, Mojca Juvan (veterinaire faculteit, kliniek voor chirurgie en kleine dieren) en Jakob Konda (Instituut voor Oncologie, Ljubljana, Slovenië) te bedanken voor al hun waardevolle hulp.

Materialen

Lijst van materialen gebruikt in dit artikel
NaamBedrijfCatalogusnummerOpmerkingen
Cisplatin KobiFresenius Kobi Oncology, Hampshire, Groot-Brittanniëcytostaticum
Bleomycin PCHPharmachemie B.V., Haarlem, Nederlandscytostaticum
AquaUltra BasicUltragel, Boedapest, Hongarijewatergebaseerde gel 
Electropulsator ELECTROvetS13 Leroy biotech, Toulouse, Frankrijkvierkant-golf pulsgenerator

Referenties

  1. Mir, L. M., Orlowski, S., Belehradek, J. Jr, Paoletti, C. Electrochemotherapy potentiation of antitumour effect of bleomycin by local electric pulses. Eur J Cancer. 27 (1), 68-72 (1991).
  2. Sersa, G., Cemazar, M., Miklavcic, D. Antitumor effectiveness of electrochemotherapy with cis-diamminedichloroplatinum(II) in mice. Cancer Res. 55 (15), 3450-3455 (1995).
  3. Sersa, G., et al. Electrochemotherapy in treatment of tumours. Eur J Surg Oncol. 34 (2), 232-240 (2008).
  4. Sersa, G., Cemazar, M., Miklavcic, D., Chaplin, D. J. Tumor blood flow modifying effect of electrochemotherapy with bleomycin. Anticancer Res. 19 (5B), 4017-4022 (1999).
  5. Markelc, B., Sersa, G., Cemazar, M. Differential mechanisms associated with vascular disrupting action of electrochemotherapy: intravital microscopy on the level of single normal and tumor blood vessels. PLoS One. 8 (3), e59557(2013).
  6. Bellard, E., et al. Intravital microscopy at the single vessel level brings new insights of vascular modification mechanisms induced by electropermeabilization. J Control Release. 163 (3), 396-403 (2012).
  7. Sersa, G., et al. Electrochemotherapy of tumors as in situ vaccination boosted by immunogene electrotransfer. Cancer Immunol Immunother. 64 (10), 1315-1327 (2015).
  8. Linnert, M., Iversen, H. K., Gehl, J., et al. Multiple brain metastases - current management and perspectives for treatment with electrochemotherapy. Radio Oncol. 46 (4), 271-278 (2012).
  9. Bianchi, G., Campanacci, L., Donati, D. Electrochemotherapy in bone metastases: results of a phase II study. 7th Conference on Experimental and Translational Oncology, , Association of Radiology and Oncology. Portorož, Slovenia. 46-47 (2013).
  10. Edhemovic, I., et al. Intraoperative electrochemotherapy of colorectal liver metastases. J Surg Oncol. 110 (3), 320-327 (2014).
  11. Kodre, V., et al. Electrochemotherapy compared to surgery for treatment of canine mast cell tumours. In Vivo. 23 (1), 55-62 (2009).
  12. Spugnini, E. P., et al. Electrochemotherapy for the treatment of recurring aponeurotic fibromatosis in a dog. Can Vet J. 54 (6), 606-609 (2013).
  13. Tozon, N., Pavlin, D., Sersa, G., Dolinsek, T., Cemazar, M. Electrochemotherapy with intravenous bleomycin injection: an observational study in superficial squamous cell carcinoma in cats. J Feline Med Surg. 16 (4), 291-299 (2014).
  14. Tamzali, Y., et al. Successful treatment of equine sarcoids with cisplatin electrochemotherapy: a retrospective study of 48 cases. Equine Vet J. 44 (2), 214-220 (2012).
  15. Mali, B., et al. Tumor size and effectiveness of electrochemotherapy. Radiol Oncol. 47 (1), 32-41 (2013).
  16. Blackwood, L., et al. European consensus document on mast cell tumors in dogs and cats. Vet Comp Oncol. 10 (3), e1-e29 (2012).
  17. Ivorra, A., Al-Sakere, B., Rubinsky, B., Mir, L. M. Use of conductive gels for electric field homogenization increases the antitumor efficacy of electroporation therapies. Phys Med Biol. 53 (22), 6605-6618 (2008).
  18. Suzuki, D. O. H., Marques, C. M. G., Rangel, M. M. M. Conductive Gel Increases the Small Tumor Treatment With Electrochemotherapy Using Needle Electrodes. Artif Organs. , (2016).
  19. Eisenhauer, E. A., et al. New response evaluation criteria in solid tumours: revised RECIST guideline (version 1.1). Eur J Cancer. 45 (2), 228-247 (2009).
  20. Veterinary Co-operative Oncology Group (VCOG). Veterinary Co-operative Oncology Group - Common Terminology Criteria for Adverse Events (VCOG-CTCAE) following chemotherapy or biological antineoplastic therapy in dogs and cats v1.0. Veterinary and Comparative Oncology. 2 (4), 195-213 (2004).
  21. Cemazar, M., et al. Electrochemotherapy in veterinary oncology. J Vet Intern Med. 22 (4), 826-831 (2008).
  22. Sersa, G. Electrochemotherapy: animal model work review. Methods Mol Med. 37, 119-136 (2000).
  23. Knapp, D. W., Richardson, R. C., DeNicola, D. B., Long, G. G., Blevins, W. E. Cisplatin toxicity in cats. J Vet Intern Med. 1 (1), 29-35 (1987).
  24. Cemazar, M., Golzio, M., Sersa, G., Rols, M. P., Teissie, J. Electrically-assisted nucleic acid delivery to tissues in vivo: where do we stand? Curr Pharm Des. 12 (29), 3817-3825 (2006).
  25. Edhemovic, I., et al. Electrochemotherapy: a new technological approach in the treatment of metastases in the liver. Technol Cancer Res Treat. 10 (5), 475-485 (2011).
  26. Campana, L. G., et al. Electrochemotherapy treatment of locally advanced and metastatic soft tissue sarcomas: results of a non-comparative phase II study. World J Surg. 38 (4), 813-822 (2014).
  27. Soden, D. M., et al. Successful application of targeted electrochemotherapy using novel flexible electrodes and low dose bleomycin to solid tumours. Cancer Lett. 232 (2), 300-310 (2006).
  28. Cemazar, M., Avgustin Ambrozic, J., Pavlin, D., Sersa, G., Poli, A., Krhac Levacic, A., Tesic, N., Lampreht Tratar, U., Rak, M., Tozon, N. Efficacy and safety of electrochemotherapy combined with peritumoral IL-12 gene electrotransfer of canine mast cell tumours. Vet Comp Oncol. , (2016).

Herprints en machtigingen

Tags

ElektroporatieCisplatineBleomycineElektrische PulsenPlaatelektrodenNaaldelektrodenTumorbehandelingToediening van GeneesmiddelenVasculaire Lock
Operating Procedures van de Electrochemotherapy voor de behandeling van de Tumor bij honden en katten
Neem contact met ons op
Aanbevelen aan de bibliotheek

Privacy

Gebruiksvoorwaarden

Beleidsoverzicht

Copyright © 2026 MyJoVE Corporation. Alle rechten voorbehouden.