Dunne darm-afhankelijke gal zuur reabsorptie en feedback remming van hepatische gal zuur synthese is belangrijk voor systemische homeostase en gezondheid. In deze studie beschrijven we een muismodel voor ileale resectie ileectomy-geïnduceerde gal malabsorptie, overaccumulation, en toxiciteit in de darm van de muis te evalueren.
Een abonnement op JoVE is vereist om deze inhoud te bekijken. Log in of start vandaag met uw gratis proefperiode.
Methodenartikel
Overaccumulation van de Ileectomy-geïnduceerde gal in de darm van de muis
* These authors contributed equally
In dit artikel
Samenvatting
Samenvatting
Intestinale resectie is een gemeenschappelijk therapeutische benadering voor menselijke ziekten zoals zwaarlijvigheid, ontstekingsdarmziekte, ziekte van Crohn en darmkanker die vaak leidt tot ernstige korte darm syndroom-achtige nadelige effecten met inbegrip van gal zuur diarree, dehydratatie, elektrolytenstoornissen en malabsorptie van voedingsstoffen. Hier introduceren we een model lymfkliertest ileale resectie, ileectomy, om te evalueren van de mededeling van de weefsel en het onderhoud van systemische homeostase genoemd. Na ileale resectie is Circulerend bloed permanent verstoken van het ileum-specifieke endocriene hormoon fibroblast groeifactor 15 (FGF15), die de versies van de endocriene remming van gal zuur synthese in de lever. In combinatie met de toenemende productie en afgeschaft reabsorptie van galzuren na het verwijderen van het ileum, last muizen die onderging operatie een van gal zout overaccumulation in de darm en de geassocieerde diarree, de morbiditeit en de mortaliteit. Roman gebruik van het model van de chirurgie geïntroduceerd in deze studie kan inzicht verwerven mechanistische en functionele in ileale controle van systemische metabole verordening in fysiologie en ziekte.
Inleiding
In moderne biomedisch onderzoek, worden genetisch gemanipuleerde diermodellen wijd gebruikt om te sprokkelen inzichten in ziekten bij de mens. In het bijzonder zijn weefsel of cel-specifieke functies van de winst-en verliesrekening van genen gebruikt om de studie van moleculaire verordening evenals geïnduceerde biologische effecten. Ondanks de vooruitgang in het manipuleren van doel genen in vivo, zijn er aanhoudende beperkingen. Eerste, vele cel of het weefsel specifieke verwijderingen beïnvloedt meerdere organen. Bijvoorbeeld zal epitheliale gene schrapping elimineren expressie in epitheel van meerdere weefsels. Verder, zelfs als schrapping beperkt tot een ....
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Protocol
dierlijke protocol werd beoordeeld en goedgekeurd door het institutionele Animal Care en gebruik Comité bij Case Western Reserve University School of Medicine, en werd uitgevoerd volgens de National Institutes of Health (NIH) richtsnoeren voor de Zorg en het gebruik van proefdieren (8ste editie, 2011). Muizen werden euthanized door methoden voldoen aan de Amerikaanse veterinaire medische vereniging (AVMA) richtsnoeren voor euthanasie van dieren (2013 editie). C57BL/6J, mannelijke, 8-16 week oude muizen werden gebruikt in dit protocol. Muizen werden gehuisvest in een 12u donker/licht cyclus omgeving.
1. preoperatieve voorbereiding
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Resultaten
De procedures voor de ileectomy staan in Figuur 1. De eerste stap omvat de voorbereiding van de buikhuid muis, een abdominale sneetje maken en het gebruik van oprolmechanismen volledig bloot van de darm (Figuur 1A-C). Vervolgens de muis blindedarm bevond (Figuur 1D); gezien het feit dat de grootte en vorm er een herkenbaar oriëntatiepunt. De blindedarm, deel van de d.......
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Discussie
Om een succesvolle ileectomy, moet de superieure mesenterische slagader op voorhand worden afgebonden om te blokkeren van de bloedtoevoer naar het resecting segment. De ischemische ileale segment zal Donkerpaars draai na afbinding. De ileale segment moet dan volledig worden gereseceerd. Een normale bloedvoorziening moet worden gezorgd voor de ingehouden uiteinden. Dit is essentieel om te voorkomen bloeden en oneigenlijke verwijdering, die kan gemakkelijk chirurgische storing van de oorzaak als het gevolg van ischemische .......
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Openbaarmakingen
De auteurs hebben niets te onthullen.
Dankbetuigingen
Dit onderzoek wordt ondersteund door Tom Peterson Foundation en NIH grant R01-HL119780 (Jain, MK).
....Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Materialen
| Naam | Bedrijf | Catalogusnummer | Opmerkingen |
|---|---|---|---|
| Dissection microscope | Olympus | SZ61 | Voor chirurgie |
| Animal temperature controller | Physitemp Instruments, Inc. | TCAT-2LV | Voor lichaamstemperatuur controle |
| Isoflurane anesthetic vaporizer | VetEquip | 911104 | Voor anesthesie |
| Dissection forceps | Fine Science Tools, Inc. | 11274-20 | Voor chirurgie |
| Scissors | Fine Science Tools, Inc. | 14084-08 | Voor chirurgie |
| Needle holder | Roboz Surgical Instrument Co. | RS-7882 | Voor chirurgie |
| Micro knives-needle blade | Fisher Scientific | 10318-14 | Voor chirurgie |
| 6-0 monofilament suture | Ethicon | 1698G | Voor abdominale huid sluiting |
| 7-0 silk suture | Ethicon | 766G | Voor ligatie |
| 8-0 monofilament suture | Ethicon | 1714G | Voor anastomose |
| Surgical sponges | Dynarex Corp. | 3333 | Voor chirurgie |
| Small cotton-tipped applicators | Fisher Scientific | 23-400-118 | Voor chirurgie |
| Isoflurane | Piramal Healthcare Limited | 66794-013-25 | Voor anesthesie |
| Buprenorphine hydrochloride | Reckitt-Benckiser Pharmaceuticals | 12496-0757-1 | Voor pijnstilling |
| 0.9% sodium chloride Injection | B. Braun Medical Inc. | 0264-7800-10 | Voor wassen/injectie |
| Povidone iodine prep solution | Dynarex Corp. | 1413 | Voor huid voorbereiding |
| Puralube vet ointment | Dechra Veterinary Products | 17033-211-38 | Voor oogbescherming |
| Hair remover lotion | Church & Dwight Co., Inc. | Voor huid voorbereiding | |
| Intensive care unit | ThermoCare | FW-1 | Voor post-operatieve herstel |
| DietGel recovery | ClearH2O | 72-06-5022 | Voor post-operatieve herstel |
| Aurum total RNA fatty and fibrous tissue kit | Bio-Rad | 7326830 | Voor RNA isolatie |
| iScript reverse transcription supermix for RT-qPCR | Bio-Rad | 1708841 | Voor reverse transcriptie assay |
| TaqMan fast advanced master mix | Applied Biosystems/Life Technologies | 4444965 | Voor QPCR analyse |
| Total bile acid assay kit | Genzyme Diagnostic | DZ042A-K01 | Voor galzuur assay |
| C57BL/6J | The Jackson Laboratory |
Referenties
- McLeod, R. S. Surgery for inflammatory bowel diseases. Dig Dis. 21, 168-179 (2003).
- Hancock, L., Windsor, A. C., Mortensen, N. J. Inflammatory bowel disease: the view of the surgeon. Colorectal Dis. 8, 10-14 (2006).
- Polle, S. W., Bemelman, W. A.
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Herprints en machtigingen
