Methodenartikel
Dit protocol beschrijft het evaluatieproces van genezing van pezen bij ratten die zijn ingespoten met allogene platelet rich plasma (PRP) of zoutoplossing na het verwijderen van deel van de achillespees. De voortgang van de genezing van de pees wordt geëvalueerd op verschillende tijdstippen met behulp van verschillende types van analyses.
Dit artikel beschrijft de experimentele procedures gebruikt om te observeren als PRP positief pees genezing beïnvloeden kunt. Er zijn 4 belangrijke stappen te volgen: induceren van een laesie in de achillespees; PRP bereiden en Injecteer het (of de zoutoplossing); Verwijder de pees; en biomechanische, moleculaire en histologische evaluaties uit te voeren. Bij elke stap, zijn alle procedures en methoden in detail beschreven, zodat deze gemakkelijk kan worden gereproduceerd.
Achilles pezen geweest operatief verdeelde (verwijdering van een lang stuk van 5 mm). Daarna werd PRP of zoutoplossing geïnjecteerd om te bestuderen of PRP een positief effect heeft op de genezing van de pees. Drie groepen van 40 dieren (totaal 120 ratten werden gebruikt in deze studie) werden onderverdeeld in 2 deelgroepen: PRP injectie groep en een zoutoplossing injectie controle groep. Ratten werden opgeofferd in toenemende tijd punten (groep A: 5 dagen; Groep B: 15 dagen; Groep C: 30 dagen) en pezen werden verwijderd. 90 pezen onderging biomechanische testen vóór het uitvoeren van analyses van de transcriptomic en de 30 resterende pezen aan histologische analyse werden voorgelegd.
Stolling, inflammatoire processen en de immuniteit modulatie rollen van bloedplaatjes zijn bekende1. Meer recentelijk is gebleken dat ze ook herstellende eigenschappen2,3 hebben. Inderdaad, verschillende cytokines en groei factoren (VEGF, PDGF, TGF-B, IGF-I, en HGF) worden uitgebracht door trombocyten tijdens degranulatie. Deze factoren die de groei bevorderen angiogenese, weefsel remodeling en wond genezing (bot, huid, spier, pees)2. Centrifugeren autoloog bloed produceert bloedplaatjes rijk plasma (PRP), waarin hoge bloedplaatjes concentraties afhankelijk van d....
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Zorg en behandeling van de dieren werden uitgevoerd volgens de richtsnoeren voor de verzorging en het gebruik van proefdieren opgesteld door de National Academy of Sciences en gepubliceerd door de nationale instituten van gezondheid (USA). Europese en nationale wetgevingen werden zorgvuldig gevolgd.
1. dierlijke voorbereiding
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
De resultaten worden uitgedrukt als de gemiddelde ± standaardafwijking van het gemiddelde en werden vergeleken met variantieanalyse (ANOVA). Een two-way ANOVA en post hoc test de Scheffé, die is een parametrische test, werden gebruikt.
De ultieme treksterkte (UTS) moet leiden tot een breuk van de niet-verwonde Achilles pezen van ratten was 42.0 ± 5.7 N (n = 10). De treksterkte aanzienlijk gestegen (p < 0.0001) in beide .......
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Bloedplaatjes zijn essentieel voor de vroege inflammatoire fase van de pees genezingsproces. Wanneer deze bloedplaatjes worden blootgesteld aan bindende weefsel of factoren die coagulatie veroorzaken, zal zij vrijgeven groeifactoren die zijn voorradig in α korrels. Als gevolg van deze interactie, extracellulaire matrix macromoleculen zijn synthetized en mesenchymale cellen vermenigvuldigen. Trombocyten hebben ook een Chemotactische activiteit op voorlopercellen in de bloedcirculatie, verbeteren van de angiogenese en het .......
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Geen belangenconflicten verklaard.
Deze studie werd ondersteund door Standard de Liège en Lejeune - Lechien verleent van de Leon Frédéricq fondsen.
....Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
| Naam | Bedrijf | Catalogusnummer | Opmerkingen |
|---|---|---|---|
| Xylazine (Xyl-M) | VMD | none | anesthetisch middel |
| Ketamin (Jétamine 1000 CEVA) | CEVA Santé Animale | none | anesthetisch middel |
| Buprenorphin (Vetergésic Multidosis) | ALSTOE | none | pijnstiller |
| iso-Betadine | MEDA-Pharma | none | Desinfectant |
| resorbable yarn Vicryl 6/0 | Johnson & Johnson | ||
| Nembutal | CEVA Santé Animale | none | anesthetisch middel |
| Paraformaldehyde | Sigma-Aldrich | P6148 | Behoudt structuur van het weefsel |
| Isopropanol 100% | VWR | 20,922,364 | |
| Ethanol 95% | VWR | 20,823,362 | |
| Xylene | VWR | 28973.363 | |
| Paraffin | VWR | LEIC3950.1006 | |
| Hematoxylin | Millipore | 1.15938.0025 | Kleurstof |
| Eosin | Millipore | 1.15935.0100 | Kleurstof |
| Eukitt | Sigma-Aldrich | 3989 | Montagemiddel |
| CaCl2 |
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Toestemming aanvragen om de tekst of afbeeldingen van dit JoVE-artikel te hergebruiken
Toestemming aanvragen