Zure postconditioning beschermt tegen cerebrale ischemie. Hier presenteren wij twee modellen om APC uit te voeren. Ze worden respectievelijk bereikt door corticostriatale plakjes over te brengen naar zure buffer na zuurstof-glucose-deprivatie in vitro en door inademing van 20% CO 2 na middelste cerebrale arterie-occlusie in vivo .
Een abonnement op JoVE is vereist om deze inhoud te bekijken. Log in of start vandaag met uw gratis proefperiode.
Methodenartikel
Experimentele modellen om de neuroprotectie van zure postconditioning te bestrijden tegen cerebrale ischemie
* These authors contributed equally
In dit artikel
Samenvatting
Samenvatting
Stroke is een van de belangrijkste oorzaken van sterfte en handicap wereldwijd, met beperkte therapeutische benaderingen. Als een endogene strategie voor neuroprotectie, hebben postconditionerende behandelingen bewezen veelbelovende therapieën tegen cerebrale ischemie. Maar ingewikkelde procedures en mogelijke veiligheidsproblemen beperken hun klinische toepassing. Om deze nadelen te overwinnen hebben we een zware postconditioning ontwikkeld (APC) als een therapie voor experimentele focal cerebrale ischemie. APC verwijst naar de milde acidose behandeling door CO 2 in te ademen tijdens reperfusie na ischemie. Hier presenteren wij twee modellen om respectievelijk APC in vitro en in vivo uit te voeren. De zuurstof-glucose-deprivatie (OGD) -behandeling van muizen en de corticostriatale occlusie- en middelste cerebrale arteriële occlusie (MCAO) van muizen werden gebruikt om cerebrale ischemie te mimmen. APC kan eenvoudig worden bereikt door hersenschijfjes over te brengen naar zuurbuffer die met 20% CO 2 , o wordt geborreldR door muizen die 20% CO 2 inademen. APC vertoonde significante beschermende effecten tegen cerebrale ischemie, zoals weerspiegeld door weefsel levensvatbaarheid en het infarct volume van het hersenen.
Inleiding
Beroerte is een van de belangrijkste oorzaken van sterfte en handicap wereldwijd. Er zijn grote inspanningen gedaan om effectieve behandelingen voor beroerte in de afgelopen decennia te vinden, maar de prestatie is nogal onbevredigend. Postconditioning is een proces gemanipuleerd door subtoxische spanningen na een ischemische aflevering. Postconditioning, met inbegrip van ischemische, hypoxische, lage glucose en afgelegen ischemische postconditioning, trigger endogene adaptieve mechanismen, en bewezen zijn veelbelovende therapieën tegen cerebrale ischemie 1 , 2 , 3 ,
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Protocol
Alle experimenten werden goedgekeurd door en uitgevoerd in overeenstemming met de ethische richtlijnen van de Zhejiang Experimentatie Dieren Experimentatie en waren in volledige overeenstemming met de National Institutes of Health Guide voor de zorg en het gebruik van laboratoriumdieren. Er werden inspanningen gedaan om pijn of ongemak te minimaliseren en het minimale aantal dieren werd gebruikt.
1. OGD van Corticostriatale Plakjes
- Oplossingspreparatie:
- Bereid 1000 ml r-ACSF (124 mmol / L NaCl, 5 mmol / l KCI, 1,25 mmol / l KH 2PO 4, 2 mmol / l MgSO4, 26 mmol / l N....
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Resultaten
In het hierboven beschreven corticostriatale snijmodel werd de corticostriatale snij-levensvatbaarheid gekwantificeerd door TTC-analyse op 1 uur na reperfusie. TTC-omzetting werd berekend door de absorptie bij 490 nm te normaliseren op de controleschijf. Volgens de TTC-omzetting beschermt APC tegen OGD-geïnduceerde reperfusie letsel in een aanvangstijd en duurafhankelijke wijze. In detail heeft zowel 1 en 3 min. Acidose behandeling de levensduur verbeterd na 5 minuten na 15 minuten OGD, .......
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Discussie
Hier presenteren wij twee experimentele modellen om de neuroprotectie van APC tegen cerebrale ischemie te bestuderen. In breinschijfjes wordt APC bereikt door incubatie van muizen corticostriatale plakjes in zure buffer, die met 20% CO 2 na 20 20 20 20 20 20 20 25 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 25 30 35 60 100 Beide modellen weerspiegelen de neuroprotectie van APC tegen cerebrale ischemie. De bescherming was vergelijkbaar met dat verkregen door ischemische postconditioning maar met een breder tij.......
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Openbaarmakingen
De auteurs hebben niets te onthullen.
Dankbetuigingen
Dit werk werd gefinancierd door de National Natural Science Foundation of China (81573406, 81373393, 81273506, 81221003, 81473186 en 81402907), Zhejiang Provinciale Natuurwetenschappenstichting (LR15H310001) en het Programma voor Zhejiang Leading Team van S & T Innovatie Team (2011R50014).
....Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Materialen
| Naam | Bedrijf | Catalogusnummer | Opmerkingen |
|---|---|---|---|
| Natriumchloride | Sigma | S5886 | |
| Kaliumchloride | Sigma | P5405 | |
| Monokaliumfosfaat | Sigma | P9791 | |
| Magnesiumsulfaat | Sigma | M2643 | |
| Natriumbicarbonaat | Sigma | S5761 | |
| Calciumchloride dihydraat | Sigma | C5080 | |
| D-(+)-Glucose | Sigma | G7021 | |
| Vibratome | Leica | VT1000 S | |
| 2,3,5-trifenyltetrazoliумchloride | Sigma | T8877 | |
| Absoluut ethanol | Aladdin Industrial Corporation | E111993 | |
| Dimethylsulfoxide | Sigma | D8418 | |
| Laser Doppler Flowmetrie | Moor Instruments Ltd | Model Moor VMS-LDF2 | |
| Gedehydrateerd di-ethylether | Sinopharm Chemical Reagent Corporation | 80059618 | |
| Trichloroacetaldehyde hydraat | Sinopharm Chemical Reagent Corporation | 30037517 | |
| 10% Formaline | Aladdin Industrial Corporation | F111936 | |
| 24-well platen | Jet Biofil | TCP-010-024 |
Referenties
- Zhao, H., Sapolsky, R. M., Steinberg, G. K. Interrupting reperfusion as a stroke therapy: ischemic postconditioning reduces infarct size after focal ischemia in rats. J Cereb Blood Flow Metab. 26 (9), 1114-1121 (2006).
- Leconte, C., et al.
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Herprints en machtigingen
