In de afgelopen twee decennia geworden diagnostische toepassingen voor elementaire voor diepgaande studies over de ontwikkeling van de wereldwijde volksgezondheid. Traditioneel worden laboratorium diagnostische hulpprogramma's gebruikt voor het opsporen van ziekten. Hoewel ze nog steeds een belangrijke rol bij het diagnosticeren van ziekten spelen, point-of-care testen (POCT) uitgevoerd in de buurt van de patiënt of door de patiënt zelf is in de afgelopen jaren meer en meer gemeengoed geworden. Met name in dergelijke gevallen die onmiddellijke behandeling, zoals acuut myocardinfarct of diabetes controle, vereisen is de snelle bevestiging van een klinische bevinding essentieel. Vandaar, is er een groeiende behoefte aan POCT apparaten dat kan worden bediend door niet-deskundigen en die kunnen in het gelijktijdig uitvoeren van nauwkeurige in vitro diagnostische tests in een korte tijd1,2,3,4 .
Opmerkelijke verbeteringen hebben reeds bereikt op het gebied van POCT. Er zijn echter nog veel uitdagingen te overwinnen van5,6,7,8. Voor een POCT platform te worden met veel succes gelanceerd op de markt en te kunnen concurreren met laboratorium diagnostiek, het apparaat moet strikt voldoen aan de volgende eisen voldoen: (i) bieden nauwkeurige en kwantitatieve testresultaten die consistent met laboratorium zijn bevindingen; (ii) hebben korte monster-naar-result tijden, waardoor de onmiddellijke behandeling van de patiënt; (iii) functie ongecompliceerd en gemakkelijk behandeling, zelfs wanneer die worden geëxploiteerd door ongeoefende personen, en vereist de tussenkomst van de geminimaliseerde gebruiker; en (iv) bestaan uit een low cost sensor-eenheid ontworpen voor eenmalig gebruik toepassingen. Bovendien zijn diagnose apparatuur-vrij gunstig, voornamelijk in resource-poor omgevingen3,4,6.
Als gevolg van deze strenge eisen, hebt slechts twee POCT systemen op basis van elektrochemische detectie (bijvoorbeeld bloed glucose test strips) en laterale-flow-immunoassay (bijvoorbeeld thuis zwangerschapstesten) is gestart op de markt dus veel. Maar beide systemen lijdt aan nadelen zoals slechte prestaties (dat wil zeggen bloed glucose monitoring heeft onjuiste testresultaten en laterale stroom testen alleen kwalitatieve (positief of negatief) meetresultaten)4, 6. Deze nadelen van conventionele POCT systemen hebben geleid tot een toenemende vraag over het verkennen van nieuwe technologieën die snelle, goedkope en kwantitatieve detectie op het punt van zorg4,5 bieden.
Om te voldoen aan deze uitdagingen POCT apparaten, heeft DFR technologie onlangs gewerkt voor de fabricage van biosensoren besteedbaar en goedkope9,10,11,12, 13 , 14. in vergelijking met zachte en vloeibare lithografische materialen, zoals PDMS of SU-8, DFRs presenteren veel voordelen: ze (i) zijn verkrijgbaar in een verscheidenheid aan composities en diktes (van een paar microns tot enkele millimeters); (ii) hebben een zeer ruwe oppervlakte, dat vergemakkelijkt de hechting aan diverse materialen; (iii) functie uitstekende dikte uniformiteit; (iv) bieden goedkope facile en high-throughput fabricage voor massaproductie; (v) zijn gemakkelijk te snijden met verschillende laaggeprijsde hulpmiddelen, zoals een eenvoudige paar van schaar; en (vi) toestaan voor het creëren van driedimensionale structuren, zoals microfluidic kanalen, door het stapelen van meerdere DFR lagen op elkaar.
Aan de andere kant, hebben DFRs in het algemeen een relatief lage resolutie ten opzichte van vloeibare photoresists, die voornamelijk veroorzaakt wordt door de laagdikte en door de grotere afstand tussen het masker en de DFR als gevolg van de beschermende folie, waarmee bovendien licht verstrooiing. Toch, voor de vervaardiging van geïntegreerde microfluidic biosensoren, DFRs zijn zeer geschikt voor goedkope massaproductie.
Daarom werken we aanwezig in dit de fabricage en de toepassing van een elektrochemische microfluidic DFR gebaseerde biosensor. Het gedetailleerd protocol beschrijft elke stap van de productie van de biosensor platform, de immobilisatie op de chip van een model op basis van DNA-test en de elektrochemische uitlezing met behulp van de stop-flow-techniek. Deze universele platform laat de opsporing van talrijke soorten biomoleculen, met behulp van verschillende assay technologieën (b.v., genomics, cellomics en proteomics) of assay formaten (bijvoorbeeld, concurrerende, sandwich, of direct). Gebaseerd op een dergelijke DFR platform, onze fractie eerder succesvol gebleken de snelle en gevoelige kwantificering van verschillende analyten, met inbegrip van antibiotica13,15,16 (tetracycline, pristinamycin, en ß-lactam antibiotica), troponine ik17, en stof P18.