Alcohol gebruik stoornis (AUD) is een grote nationale gezondheidsprobleem en de ontwikkeling van effectievere behandelingen is vereist ter compensatie van de behoeften van deze patiënten populatie. Te dien einde het volgende protocol maakt gebruik van twee eenvoudige knaagdier drinken modellen om te beoordelen van de preklinische werkzaamheid van anti-alcohol loodverbindingen.
Een abonnement op JoVE is vereist om deze inhoud te bekijken. Log in of start vandaag met uw gratis proefperiode.
Methodenartikel
RattenUitrustingen drinken modellen in de ontwikkeling van farmacotherapieën voor alcoholisme: drinken in de donkere en twee-fles keuze
* These authors contributed equally
In dit artikel
Samenvatting
Samenvatting
Alcohol gebruik stoornis (AUD) is een groot probleem met meer dan een geschatte 76 miljoen mensen wereldwijd aan de diagnostische criteria voldoet. Huidige behandelingen zijn beperkt tot drie FDA-goedgekeurde medicijnen die grotendeels ineffectief zelfs wanneer gecombineerd met psychosociale interventie zijn, zoals blijkt door de hoge relapse tarief. De zoektocht naar meer nieuwe behandelingen vertegenwoordigt als zodanig een belangrijke volksgezondheid doel. Te dien einde het volgende protocol maakt gebruik van twee eenvoudige knaagdier drinken modellen om te beoordelen van de preklinische werkzaamheid van anti-alcohol loodverbindingen: twee-fles keuze (TBC) en drinken in het donker (DID). De voormalige kunt muizen op vrijwillige drankje in matiging, terwijl de laatstgenoemde muizen tot de vrijwillige induceert consumeren een grote hoeveelheid alcohol in een korte periode dat binge drinken nabootst. De aard van de eenvoudige en hoge doorvoer van beide van deze paradigma's mogelijk voor snelle screening van farmacologische agenten of voor het identificeren van muizenstammen die bepaalde vrijwillige drinkgedrag vertonen.
Inleiding
Voor de afgelopen 25 plus jaren aanzienlijke inspanningen heeft gebracht aan de ontwikkeling van medicijnen voor de behandeling van de wanorde van het gebruik van Alcohol (AUD)1. Hoewel veel vooruitgang hebben geboekt, AUD blijft een belangrijk volksgezondheidsprobleem, meer dan 18 miljoen Amerikanen beïnvloeden en kost meer dan 220 miljard dollar jaarlijks2,3. Momenteel zijn er slechts drie FDA-goedgekeurde medicijnen, disulfiram, naltrexon en acamprosaat, die allemaal de inconsistente resultaten in klinische proeven en het beperkte succes zelfs wanneer gecombineerd met psychosociale i....
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Protocol
Alle procedures die hier worden beschreven zijn goedgekeurd door de institutionele Animal Care en gebruik commissies van de University of Southern California Health Sciences Campus.
1. experimentele opstelling en montage
- Verwerven alle volgende leveringen en chemicaliën voor de aanvang van de studie: muizen, kooien/metalen kooi toppen, beddengoed, voedsel, water, ethanol, pipets, sipper toppen, shrink wrap, mes, zip-banden, tape, Bunsenbrander, schaal, koplicht.
- C57BL/6J muizen, of van een commerciële bron of een in-house kolonie, houdend in mening dat muizen groep gehuisvest tot tijd kunnen van testikel te verkrijgen.
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Resultaten
In de volgende representatieve onderzoeken, was sociaal drinken gemodelleerd met behulp van de twee-fles keuze (TBC) paradigma. Kort, muizen hadden toegang tot twee flessen van oplossing, waarvan er één water en anderzijds een oplossing van 10% (v/v) ethanol bevatte. Onderwerpen waren vervolgens splitsen en gelijkmatig toegewezen aan drug behandelgroepen, moxidectin (MOX) vs. zoute controle, zodat elke groep zou hebben gemiddeld ethanol innameniveaus met de minste hoeveelheid variatie.
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Discussie
Wereldwijd ramingen blijkt dat maar liefst 76 miljoen mensen voldoen aan de criteria om te rechtvaardigen een diagnose voor Alcohol gebruik stoornis (AUD). Helaas, farmaceutische behandelingen die momenteel beschikbaar zijn grotendeels ineffectief en verdere ontwikkeling is noodzakelijk ter compensatie van de behoeften van deze klinische bevolking20. Te dien einde de volgende protocol is gericht op het vergemakkelijken van dit streven door het voorbeeldig voor twee van de meest elementaire knaagdi.......
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Openbaarmakingen
DLD en LA zijn uitvinders op een octrooi voor de herbestemming van ivermectine en verwante avermectins voor de behandeling van aandoeningen van het gebruik van alcohol. De auteurs hebben geen andere conflicten van belang en bent volledig verantwoordelijk voor de wetenschappelijke inhoud van het papier.
Dankbetuigingen
Dit werk werd gesteund, gedeeltelijk door onderzoek verleent SC CTSI NIH/NCRR/NCATS--UL1TR000130 (D.L.D.), AA022448 (D.L.D.) en de USC School voor farmacie.
....Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Materialen
| Naam | Bedrijf | Catalogusnummer | Opmerkingen |
|---|---|---|---|
| 1 L gradueercilinder | VWR | https://us.vwr.com/store/product/20935285/marisco-single-scale-cylinder-graduates-john-m-maris-co | Om ethanoloplossing voor te bereiden. |
| 1 L glazen fles | Pyrex (Fisher Scientific) | https://www.fishersci.com/shop/products/pyrex-reusable-media-storage-bottles-12/p-42752 | Om ethanoloplossing voor te bereiden. |
| 100 mL gradueercilinder | Fisher Scientific | https://www.fishersci.com/shop/products/kimble-chase-kimax-class-a-to-contain-graduated-cylinders-8/p-4369311 | Om ethanoloplossing voor te bereiden. |
| Analox | Een mogelijke methode om DID-bloedmonsters te analyseren is door de analox-machine te gebruiken | ||
| kogellager drinkbuisjes | Ancare Corp. | http://www.ancare.com/products/watering-equipment/open-drinking-tubes/straight-tubes-ball-point | Lengte: 2,5 inch, Diameter: 5/16 inch, Model: TD100 |
| C57BL/6J muizen | Jackson lab | https://www.jax.org/strain/000664 | Kan ook afkomstig zijn uit een interne kweekkolonie |
| wegwerp serologische pipetten | VWR International (VWR) | https://us.vwr.com/store/product/4760455/vwr-disposable-serological-pipets-polystyrene-sterile-plugged | 10 mL, 18 mL, of 25 mL |
| ethanol, puur, 190 proof (95%), USP, KOPTEC | Decon Labs (VWR) | https://us.vwr.com/store/product/4542412/ethanol-pure-190-proof-95-usp-koptec | --- |
| hittepistool | Master Appliances Corp. | http://www.masterappliance.com/master-heat-guns-kits/ | |
| krimpslang | --- | --- | Diameter: 3/8 inch |
| industrieel mes/blad | --- | --- | --- |
| metalen kooiplaat | --- | --- | Zou beschikbaar moeten zijn via het universitaire/institutionele vivarium |
| muizen RO-water | --- | --- | Zou beschikbaar moeten zijn via het universitaire/institutionele vivarium |
| draagbare elektronische weegschaal | Ohaus (VWR) | https://us.vwr.com/store/product/4789377/portable-electronic-cs-series-scales-ohaus | --- |
| rode licht koplamp | nyteBright (Amazon) | https://www.amazon.com/LED-Headlamp-Flashlight-Red-Light/dp/B00R0LMMF8/ref=sr_1_1?ie=UTF8&qid=1499591137&sr=8-1-spons&keywords=red+lamp+headlamp&psc=1 | --- |
| siliconen stoppen | Fisher | --- | --- |
| thermometer | Fisher Scientific | https://www.fishersci.com/shop/products/fisher-scientific-hygro-thermometer-clock-large-display-2/p-4077232 | --- |
| wegwerp weegschaal | VWR International (VWR) | https://us.vwr.com/store/product/16773534/vwr-pour-boat-weighing-dishes | Het deksel van een pipettip doos is een geschikt alternatief |
Referenties
- Litten, R. Z., Falk, D. E., Ryan, M. L., Fertig, J. B. Discovery, Development, and Adoption of Medications to Treat Alcohol Use Disorder: Goals for the Phases of Medications Development. Alcoholism: Clinical and Experimental Research. 40 (7), 1368-1379 (2016).
- Grant, B. F., Dawson, D. A., Stinson, F. S., Chou, S. P., Dufour, M. C., Pickering, R. P.
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Herprints en machtigingen
