Beoordeling van Activity based Anorexia in muizen

Samenvatting

Muizen individueel ondergebracht bij een lopend wiel terwijl gezien de beperkte toegang tot voedsel ontwikkelen verlagingen van de voedselconsumptie en verhogen van de activiteit op het draaiende wiel. Deze experimentele verschijnsel heet activity based anorexia. Dit paradigma is een experimentele instrument voor het bestuderen van de neurobiologie en gedrag onderliggende aspecten van anorexia nervosa.

Samenvatting

Knaagdieren ontwikkelen activity based anorexia (ABA) wanneer blootgesteld aan een beperkte voeding schema en gratis toegang tot een lopend wiel. Deze omstandigheden leiden tot een levensbedreigende afname van lichaamsgewicht. Knaagdieren blootgesteld aan slechts één van deze voorwaarden passen echter uiteindelijk om het herstel van normale lichaamsgewicht. Hoewel toegenomen uitgevoerd samen met vermindering in vrijwillige voedselinname lijken paradoxaal ABA voorwaarden, wordt ABA gedrag waargenomen via talrijke soorten zoogdieren.

Het ABA-paradigma biedt een diermodel voor anorexia nervosa (AN), een eetstoornis met ernstige disregulatie van eetlust en gedrag. Onderwerpen zijn afzonderlijk ondergebracht met gratis toegang tot een lopend wiel. Elke dag, is het onderwerp voedsel voor een beperkte hoeveelheid tijd aangeboden. In de loop van het experiment vermindert het lichaamsgewicht van een onderwerp van hoogactieve en lage calorie-inname. De duur van het onderzoek varieert, afhankelijk van hoe lang voedsel wordt aangeboden per dag, het soort voedsel aangeboden, de stam van de muis, als drugs worden getest, en omgevingsfactoren.

Een gebrek aan effectieve farmacologische behandelingen voor een patiënten, hun lage levenskwaliteit, hoge kosten van behandeling en hun hoog sterftecijfer geven de urgentie om verder onderzoek AN. Wij bieden een eenvoudige schets voor het uitvoeren van ABA experimenten met muizen, het aanbieden van een methode om te onderzoeken van AN-achtig gedrag om het ontwikkelen van nieuwe therapieën. Dit protocol is geoptimaliseerd voor gebruik in Balb/cJ muizen, maar kan gemakkelijk worden gemanipuleerd voor andere stammen, grote flexibiliteit in het werken met verschillende vragen, vooral met betrekking tot genetische factoren van ABA.

Inleiding

Sinds 1953, zijn knaagdieren bij Toon een paradoxale hyperactiviteit op wielen uitgevoerd wanneer ze gratis toegang tot de wielen krijgen terwijl vrijwillige hypophagia ondergaan als beschikbaarheid van voedsel beperkt^{1 is}gemeld. Omgekeerd, knaagdieren doen niet snel dalen in lichaamsgewicht wanneer voedsel op een schema, aangeboden zonder wielen of wanneer ondergebracht bij het uitvoeren van de wielen en het aangeboden voedsel ad libitum^1,2,3. Het ABA-model betrouwbaar resulteert in dramatische dalingen in lichaamsgewicht hypophagia, hypothermie, verlies van estrus, en verhoogde stimulatie van de HPA-as⁴. Uiteindelijk, ABA resulteert in de dood, tenzij het onderwerp wordt verwijderd uit de paradigma-⁵. Het ABA-paradigma biedt onderzoekers met een dierlijk model van AN, een complexe eetstoornis die beschikt over ernstige disregulatie van eetlust-gedrag, die ongeveer 1 op de 100 vrouwen en een kleiner percentage van mannetjes⁶. Patiënten die lijden aan AN vertonen vaak hyperactiviteit, bestaande uit extreme hoeveelheden van oefening, en/of algemene rusteloosheid^7,8. AN heeft met een sterftecijfer van ongeveer 10%, het hoogste sterftecijfer onder alle psychiatrische stoornissen⁹. Huidige behandeling voor AN is beperkt tot cognitieve therapieën, aangezien er geen erkende farmacologische behandelingen voor mensen die lijden aan een^10,11.

AN is meestal beschouwd als een stoornis die hoofdzakelijk vrouwen. Als een diagnose die is 10 keer meer kans bij vrouwtjes dan mannetjes, zijn vrouwelijke onderwerpen traditioneel de focus in een¹². Speciale aandacht moet echter worden gehouden in het uitsluiten van mannetjes uit studies. Terwijl de diagnose van een blijft lager bij mannen, spier dysmorphia (MD) een aandoening die veel overeenkomsten met AN is, heeft in dat lichaam afbeelding wordt vervormd en dieet is vaak ontregelde. Er is ondersteuning voor het begrip dat MD en AN kunnen worden ingedeeld in een soortgelijke manier^13,14,15. Dit kan wijzen op dat sommige gevallen van MD de "mannelijke versie" van AN vertegenwoordigen. In het kader van diermodellen, hebben sommige rapporten gesuggereerd dat de mannetjes meer vatbaar dan vrouwtjes aan het paradigma van ABA zijn. Bijvoorbeeld, een recente studie toonde een hogere sterftecijfer en daalde van voedselinname ten opzichte van vrouwen in C57Bl/6 muizen¹⁶. Een voorspeller van gevoeligheid voor ABA is spontane fysieke activiteit (SPA). Ratten met hogere of lagere SPA hebben meer kans om gewicht te verliezen in de ABA paradigma, met mannelijke ratten tonen een sterker effect dan vrouwtjes¹⁷. Vrouwelijke knaagdieren zijn omgekeerd, te oefenen meer dan mannetjes tijdens de fase van de beperking van ABA¹⁸waargenomen. Bovendien, studies met Balb/cJ muizen is gebleken het tegenovergestelde effect van C57Bl/6 muizen, waar vrouwelijke muizen hebben een hogere sterftecijfer en daalde van voedselinname ten opzichte van mannen (Figuur 1)⁶. Met verschillende resultaten tussen de seksen in de ABA paradigma en vergroten van het bewustzijn van mannen met ontregelde eetpatroon, moeten zowel mannelijke als vrouwelijke onderwerpen worden getest.

Afgezien van seks verschillen in de ABA paradigma, leeftijd en stam moeten worden beschouwd bij de keuze van onderwerpen. Adolescent muizen kunnen nauwkeuriger model AN, aangezien AN meestal in de adolescentie, ontstaat zoals waargenomen met ratten en muizen^19,20,21,22. Spanningen die actiever zijn dan anderen op een basislijn-niveau een hoger tarief van gevoeligheid en ernst van ABA^{23 hebben}. Stammen bekend om hogere niveaus van angst, bijvoorbeeld DBA/2, toegenomen wiel activiteit, die op een sneller tempo van de schoolverlaters in de ABA paradigma^{24 wijzen}uitgevoerd. Afhankelijk van de proefopzet, kan de stam van keuze worden aangepast om te maximaliseren van de duur van ABA.

De paradox van ABA is niet uniek voor muizen. Andere zoogdieren zoals ratten, hamsters, gerbils, varkens, chipmunks en cavia's is gebleken dat dit fenomeen⁶. De instandhouding van het fenomeen van de ABA over zoogdiersoorten suggereert dat het ABA-paradigma een translationeel hulpmiddel voor het onderzoek naar de mechanismen die ten grondslag liggen aan anorexia-achtig gedrag bij de mens kan bieden. Muizen zijn met name zeer geschikt voor de studie van de mechanismen die ten grondslag liggen aan de ABA. Muizen kunnen dichtbevolkte worden ondergebracht en generatietijd is relatief kort. Muizen hebben een volledig gesequenceerd genoom, en talrijke ingeteelde, outbred en speciale stammen, zoals congenics, zijn beschikbaar. Een groot aantal genetisch gemanipuleerde lijnen zijn gegenereerd, waardoor ze ideaal voor studies beoordeling van genetische invloeden op aandoeningen zoals AN. afhankelijk van de vraag bij de hand, onderzoekers kunnen manipuleren complexe neurale circuits en/of gen-expressie om te beoordelen van gedrag in de ABA paradigma, potentieel het beantwoorden van vragen over genetische invloed die niet mogelijk zijn bij de studie van de mens.

Een beperkt aantal dierlijke modellen van AN momenteel bestaan. Stressmodellen induceren hypophagia bij knaagdieren met staart knijpen, nieuwigheid-geïnduceerde hypophagia, koud zwemmen en hersenstimulatie. Door inducerende stress, verminderen veranderingen in de HPA-as eetlust, wat resulteert in verminderde lichaam gewicht²⁵. De HPA-as wordt echter ook krachtig gestimuleerd door ABA, waarin ook extra functies van AN zoals hyperactiviteit. Een ander model te overwegen bij het studeren AN is het voedsel van de chronische beperking model. Door het beperken van voedsel op een reeks van 40 tot 60% van ad libitum, kan een de fysiologische respons op ondervoeding²⁶na te bootsen. Hoewel deze methode effectief is voor het bestuderen van de effecten van onvoldoende voeding, doet het niet reproduceren een kern van de zaak van AN, oftewel vrijwillige voedsel beperking. In de ABA paradigma, dieren zijn verstoken van voedsel toegang voor een deel van de dag, maar ook vrijwillig verminderen voedselinname als een wiel ook aanwezig is. Genetische modellen zijn ook gebruikt voor het onderzoeken van de etiologie van AN. onderzoekers neurochemical en genetische factoren betrokken bij AN, zoals de gene BDNF en neurotransmitters dopamine en serotonine²⁷hebben gevonden. Het gebruik van genetische modellen is cruciaal voor het begrijpen van de neurale mechanismen achter AN. Echter, genoom-brede vereniging studies voor AN hebben nog niet opgeleverd voor grote hits en geen zeldzame varianten in AN zijn geïdentificeerd. Toekomstige studies moeten een genetische benadering combineren met het ABA-model toe begrip van AN-gerelateerde fenotypen.

Ontwikkeling van diermodellen voor hele psychiatrische stoornissen is het vrijwel onmogelijk is als gevolg van de complexiteit en heterogeniteit van menselijke aandoeningen. Echter door het modelleren van specifieke, welomschreven onderdelen van een psychiatrische stoornis, kunnen unieke inzichten in de onderliggende neurobiologie of pathofysiologie worden verkregen. Dergelijke biologische inzichten kunnen vervolgens worden gebruikt voor het identificeren van nieuwe behandelingen. Het knaagdier ABA paradigma biedt daarom een preklinische instrument voor de studie van de mechanismen die ten grondslag liggen aan de AN-achtig gedrag dat ethisch niet kan worden bestudeerd bij de mens, zoals de gevolgen van genetische manipulaties, verstoringen op neurale circuits, en de gevolgen van bepaalde milieufactoren.

Protocol

Alle methoden die hier worden beschreven zijn goedgekeurd door de institutionele Animal Care en gebruik Comité (IACUC) van de University of California, San Diego.

1. muizen

1. Kies de juiste muis stam voor de studie.
2. Muizen kopen bij een leverancier of versterken van een regel om te verkrijgen van de juiste experimentele nummers.
3. Groep-huis gekocht muizen in de dier faciliteit voor ten minste 1 week vóór het begin van de studie te voorzien van een ruime acclimatisering periode.
4. Beginnen de vooraf experimentele acclimatisering fase wanneer muizen 8 weken oud zijn.

2. huisvesting

1. Kies kooien die groot genoeg zijn om een on-gehinderd draaiende wiel, voedsel recipiënt en een fles water bevatten.
2. Kamertemperatuur en luchtvochtigheid ter aanvulling van de hypothese geteste regelen.
   Opmerking: Hogere temperaturen zal de ontwikkeling van ABA²⁸verminderen.

3. lopende wielen

1. Kies wielen met draadloze communicatie om te voorkomen dat potentiële afleiding en verwikkelingen binnen de kooi, zie de Tabel van materialen voor een voorbeeld.

4. waterflessen

1. Selecteer een fles water dat niet voor ruimte met het draaiende wiel of de recipiënt van het voedsel in de kooi concurreren zal.
2. Als medicamenteuze behandeling in het drinkwater, plakband de fles een lichtgevoelige omgeving te creëren.

5. voedsel

1. Selecteer een laag vetgehalte chow geschikt is voor de hypothese wordt getest (b.v.de Envigo knaagdier dieet 8604).
   Opmerking: Diëten hoog in vet en suiker kunnen verminderen de ontwikkeling van ABA²⁹.
2. Gebruik een kleine glazen pot chow, ongeveer 65 cm in diameter x 50 cm in hoogte.
   Opmerking: Een geautomatiseerde feeder kan worden gebruikt in plaats van een glazen pot, die stress verminderen kan door interferentie van de onderzoeker beperken. Dit kan worden voordeligste als ABA studies met drug manipulaties uitvoeren.

6. vooraf experimentele acclimatisering fase

1. Het experimentele gebied instellen door te kiezen voor een kooi rack dicht bij de laptop en wiel hubs. Hiermee beperkt u problemen met gegevensoverdracht.
2. Zet de laptop en draadloze hubs.
3. Open de beheersoftware van de wiel op de laptop.
   1. Als we kijken naar de software om ervoor te zorgen dat beide naven zijn actief.
   2. Open "extra" en selecteer "verwijderen wielen." Herhaal deze stap 5 keer.
   3. De software sluit en opnieuw te openen.
4. Plaats 3 AAA-batterijen in de accu van een wielbasis.
   1. Sluit de batterij pack draden aan de hardware van de wielbasis. Dit zal worden verbroken vóór gebruik. Sluit de battery pack in de wielbasis.
5. Controleer de software om de wielbasis wordt vermeld met de ID "1" onder de juiste draadloze hub. Als de base wordt niet weergegeven als ID "1", losgemaakt van het pak van de batterij, en beginnen bij stap 6.2.
6. De ID van de wiel van "1" met de muis-ID in de naamkolom wijzigen.
7. Houden het draaiende wiel base naar de bodem van de kooi met duct tape om stabiliteit te waarborgen. Laat niet alle tape uitsteken, zoals muizen op blootgestelde tape kauwen zal.
8. Kies dan voor een lopend wiel disc zonder een gecorrodeerde magnetische stuk.
9. Plaats het wiel op de base en draai het wieltje om te controleren of de goedkeuring van de kooi wanden en raspen.
10. Draai de schijf een bepaald aantal rotaties om ervoor te zorgen dat het wiel lopende software is goed tellen rotaties.
11. Verhinderen dat stukken van chow verloren in de natte bedden of krijgen door de onderzijde van de pot van voedsel aan de vloer van de kooi, weg van het draaiende wiel en de fles water koker-taping.
    Opmerking: Natte chow verhoogt voedselinname vergeleken om chow³⁰droog.
12. 5 stuks van chow plaatst in de pot.
    Opmerking: De chow tijdens de pre experimentele fase is beschikbaar ad libitum en hoeft niet te worden gewogen. Blootstelling aan de wielen lopen tijdens de acclimatisatie periode kan intensiveren ABA^21,31.
13. Plaats van een volledige fles water in de kooi en geef water ad libitum.
14. Herhaal totdat alle kooien een draadloos verbonden draaiende wiel, voedsel en water.
15. Individueel plaats muizen in hun juiste kooien.
16. In het wiel beheer software, ga naar "file" en klik op "start overname."
17. Bekijk de software-update om wiel rotaties worden geteld en het systeem goed werkt.
18. Muizen aan de huisvestingsomstandigheden van de experimentele voor 2 totale dagen acclimatiseren.
19. Muizen tijdens deze fase te garanderen dat ze gezond genoeg om te behandelen het ABA-experiment te beoordelen.
20. Kooien voor eventuele overstroming van flessen water elke dag te controleren. Als de flessen hebben overstroomd, de oude kooi vervangen door een nieuwe kooi en herhaalt u de nodige stappen te onderschrijven wielen en voedsel naar de kooi zonder inmenging.
21. Op dag 2, kooien voor voedsel niveaus te controleren. Als levensmiddelen slinkt, vullen met 2 stuks van chow. Doe dit zonder verstoring van de muizen.
    Opmerking: Als tijdens de fase van pre experimentele acclimatisering normale muizen hypophagia exposeert of ondergewicht, verwijder de muis uit de studie.

7. experimentele basislijn fase - dag 1

1. Selecteer "end" en "start overname" in de wiel-beheersoftware.
2. Meten uit 9 g chow in een kleine plastic bekerglas op een schaal met 0.00 g gevoeligheid. Record het exacte gewicht.
3. Voorzichtig verwijderen en wegen van de muis in een grote plastic bekerglas op een schaal met 0,0 g gevoeligheid. Record gewicht.
   Opmerking: Het is cruciaal voor het beperken van de stress van muizen terwijl behandeling, daarom behandelen ze geduldig.
4. Gooi alle acclimatisering voedsel.
5. Zoek strooisel voor elke voedsel dat kan zijn verwijderd uit de pot en de afzet van die ook.
6. Laat de waterfles in plaats, maar zorgen er voldoende volledige.
7. Schoon bevuild wielen met 70% isopropanol en papieren handdoekjes.
8. Als reiniging noodzakelijk was nadat het isopropanol droogt, de muis terug te keren naar zijn kooi en vervangt de kooi op het rek.
9. Herhaal deze stappen totdat elke muis wordt gewogen en 9 g van voedsel is gemeten uit en geplaatst in kooien.

8. experimentele basislijn fase - 2-7 dagen

1. Op hetzelfde tijdstip elke dag terugkeren naar het dier faciliteit. Niet bij het nemen van metingen door boven of onder 10 min variëren.
2. Meten uit 9 g chow in een kleine plastic bekerglas op een schaal met 0.00 g gevoeligheid. Record het exacte gewicht.
3. Voorzichtig verwijderen en wegen van de muis in een grote plastic bekerglas op een schaal met 0,0 g gevoeligheid. Record gewicht.
4. Trek de pot voedsel uit de kooi en dumpen van al het voedsel in een kleine bekerglas op de schaal van 0.00 g.
   1. Als ontlasting en beddengoed in de pot eten met het eten, kies alle strooisel en uitwerpselen. Gebruik een kleine zeef te wrijven van poedervormige levensmiddelen in het bekerglas van de wegen. Verwijder eventuele uitwerpselen alvorens dit te doen met een pincet (indien nodig).
      Opmerking: Beddengoed zal niet breken in kleinere stukken te passen door de zeef.
   2. Zoeken naar eventuele resten van voedsel in de kooi en voeg ze toe aan het bekerglas wordt gewogen. De hoeveelheid resterende voedsel opnemen.
      Opmerking: Als het beddengoed en de kooi moeten worden gezocht, is het beste om dat te doen terwijl de muis is in de weeg bekerglas of overdracht kooi om stress te verminderen.
   3. Beschikken over alle voedsel.
5. Maak jar schoon en plaats terug in de kooi. Vervang tape indien nodig.
6. Plaatst de eerder gemeten 9 g van nieuwe levensmiddelen in de pot.
7. Schoon bevuild wielen met 70% isopropanol, vervolgens drogen de wielen. Deze één kooi op een moment doen en doen niet per ongeluk interchange wielen.
8. Beëindig en start overname in wiel programma om de andere dag uitvoert.
9. Herhaal deze stappen tot het begin van de fase van de beperking.

9. experimentele beperking fase - dag 1

1. Einde en begin acquisitie in de wiel-beheersoftware.
2. Weeg muizen, oude en nieuwe voedsel per protocol van de basislijn.
3. Wielen niet nu schoon. Dit kan het afleiden van muizen in hun beperkte voeding periode.
4. Toegang tot nieuwe voedingsmiddelen, 9 g chow, gedurende 6 uur. Record de tijd voedsel wordt aangeboden.
   Opmerking: De tijd tijdens de lichte cyclus die voedsel beschikbaar is zal van invloed zijn op de ontwikkeling van ABA. Omdat muizen normaal tijdens de cyclus van licht slapen, verergert die toegang geven tot voedsel gedurende deze tijd de ontwikkeling van ABA, omdat muizen niet meestal het grootste deel van hun dagelijkse voedsel op dit moment consumeren. Omgekeerd, muizen eten toegang krijgen tijdens de donkere cyclus zal ontwikkelen ABA langzamer³². Aanpassing van de duur van voedsel toegang zal resulteren in meer of kortere overleving keer (Figuur 2). Voedsel anticiperende activiteit (FAA) is hyperactiviteit, die treedt op onmiddellijk voordat voedsel wordt aangeboden^32,33,34. FAA, kan dit gevolgen hebben voor de ontwikkeling van ABA, zoals is gebleken dat de ontkenning van de wiel met access tijdens FAA ABA gedrag^{32 uitzitten}.
   1. Verwijderen van voedsel precies 6 h later voor elke muis en meet de hoeveelheid resterende. Record de tijd voedsel wordt verwijderd.
5. Schoon wielen nu, indien nodig, en proberen om dit te doen zonder het krijgen achter op het trekken van voedsel van latere kooien.
6. Weeg voedsel en berekening van het verschil in voedsel om te bepalen van de hoeveelheid voedsel per muis gegeten.
7. Bereken het gewicht van de schoolverlaters voor elke muis.
   Opmerking: Dropout gewicht is als een muis moet worden verwijderd uit het experiment, wanneer zij 75% van de laatste meting van het lichaamsgewicht van de basislijn tot. Bijvoorbeeld, als een muis bij het begin van de fase van de beperking, wanneer het bereikt 15 g 20 g weegt moeten worden verwijderd uit het experiment.
8. Houd een kopie van de dropout gewichten aan de kant in het dier faciliteit.
   Opmerking: Evaluatie van de terugwinning van ABA experimenten kunnen worden geprobeerd; voedsel is ofwel ad libitum, verstrekt of wielen worden vergrendeld om te bestuderen van het proces waardoor muizen terug naar een gezond lichaam gewicht³⁴.

10. experimentele beperking fase - 2 tot en met 14 dagen

1. Herhaal alle stappen van de meting in het protocol beperking dag 1. Verrichten niet herstarten wiel acquisitie.
2. Als een muis bereikt gewicht (75% van zijn lichaamsgewicht basislijn) dalen, verwijderen van de wiel en voedsel pot uit de kooi en zorgen voor voldoende voedsel op de bodem van de kooi, dan gaat u verder met de andere muizen. Zodra alle kooien hebben te zijn bijgewoond, euthanaseren alle muizen die druppel gewicht hebben bereikt.
3. Laat het wiel op voor elke muis voor de duur van het experiment.
4. Controleer elke muis dagelijks voor eventuele verwondingen. Indien nodig, beschadigde teennagels knippen, zweren, enz Ask dierenverzorgers personeel voor advies behandelen als onzeker over hoe verder te gaan met een blessure.

11. beëindiging van de studie

1. Als de studie 14 dagen duurde heeft, Weeg alle de muizen op dag 15. Beperking dag 1 gewicht wordt beschouwd als een basislijn gewicht.
   Opmerking: De lengte van de studie kan worden gewijzigd om aan te pakken van de hypothese dat wordt getest. Langere duur voedsel toegang perioden kunnen worden gebruikt om uit te breiden van de lengte van de studie.
2. Euthanaseren muizen als dit nodig is.
3. Neem vuile apparatuur naar passende kamers.
4. Wiel graaf overname eindigt op dag 15 tot en met 10 volle dagen van gegevens verstrekken.
5. Uitschakelen draadloos wheel hubs.
6. Extraheren van gegevens.
7. Gegevens analyseren.

Resultaten

Hersenen-afgeleide neurotrophic factor (BDNF), een proteïne dat aan de regulering bijdraagt van de voeding en gewicht onderhoud, is in het serum van patiënten met een³⁵verlaagd. Dit experiment onderzocht de effecten van de geplande voederen, lopend wiel toegang of beide op BDNF expressie binnen de hippocampus (HPC), ventrale tegmental gebied (VTA), nucleus accumbens (NAc) en mediale prefrontale cortex (mPFC). Expressie van neuronale cel adhesie molecuul 1 (NCAM1) w...

Discussie

Het ABA-experiment kan worden gewijzigd door onderzoekers voor het testen van verschillende stammen, leeftijden, drugs en verschillende andere variabelen AN. dragen in genetische variabiliteit van de geest, aanpassingen aan het draaiende wiel of voedsel toegangsperiode zou vergroten of verkleinen van de ernst van symptomen en aantal schoolverlaters. Dit kan dienen te verhogen of verlagen van de lengte van het experiment, afhankelijk van de experimentele kwestie van belang.

Nauwkeurige meting v...

Materialen

Lijst van materialen gebruikt in dit artikel

Naam	Bedrijf	Catalogusnummer	Opmerkingen
Wireless Low Profile Running Wheels, Hubs, Software	Med Associates	ENV-047
Standard Teklad Rodent Chow	Envigo	8604
8 Week Old Mice	Jackson Laboratories	Balb/cJ	Stam gebruikt in ons onderzoek - Kan andere stammen gebruiken om ABA te beoordelen
Scout Pro Scale 200 g	Ohaus	SPE202	Wordt gebruikt om muizen te wegen
Scout Pro Scale 400 g	Ohaus	SPE402	Wordt gebruikt om voedsel te wegen