Hier presenteren we een protocol om een repliceerbaar geleidingsverlies inductie te creëren via chirurgische trommelvlies membraan punctie en verificatie door Otoscoop visualisatie en gedrags beoordeling door Clap Startle.
Een abonnement op JoVE is vereist om deze inhoud te bekijken. Log in of start vandaag met uw gratis proefperiode.
Methodenartikel
Eenvoudige chirurgische inductie van Conductief gehoorverlies met verificatie met behulp van Otoscope visualisatie en Gedragsclap Startle respons bij ratten
* These authors contributed equally
In dit artikel
Samenvatting
Samenvatting
Conductief gehoorverlies (CHL) is een overwegend gehoorstoornis bij de mens. Het doel van het protocol is om een eenvoudige chirurgische procedure te beschrijven voor het induceren van CHL bij knaagdieren. Het protocol demonstreert CHL door trommelvlies membraan punctie. Verificatie van de CHL-chirurgie was door Otoscoop-onderzoek en gedrags beoordeling door Clap schrikreactie-respons, zowel repliceerbaar als betrouwbaar, en zijn eenvoudige methoden om gehoorverlies aan te tonen. De eenvoudige CHL-procedure is voordelig vanwege de reproduceerbaarheid en flexibiliteit van verschillende activiteiten in onderzoek naar gehoorverlies. De beperkingen van inducerende CHL door een chirurgische benadering worden geassocieerd met de leercurve om de chirurgische ingreep en het vertrouwen in Audiologisch onderzoek uit te voeren. Door een gehoorstoornis door CHL te induceren, kan men gemakkelijk de neurale manifestaties en gedrags resultaten van gehoorverlies bestuderen.
Inleiding
De prevalentie van het gehoorverlies bij kinderen en volwassenen is respectievelijk ongeveer 19,5%1 en 15,2%2 . Echter, ongeveer 39,3% van alle pasgeborenen met een abnormale Gehoorscreening krijgen geen corrigerende behandeling zoals gerapporteerd door de centra voor Ziektecontrole3. Gehoorverlies is een algemeen bestudeerde aandoening en het knaagdier is een robuust model voor het bestuderen van normale gehoor-en gehoor aandoeningen4,5,6,7,....
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Protocol
De huidige studie en procedures werden goedgekeurd door de ethische comités voor onderzoek van dieren van de Universiteit van Hongkong, de University of Hong Kong en het Department of Health van de speciale administratieve regio Hongkong.
1. dieren
- Gebruik Sprague-Dawley (SD) ratten van twee maanden (N = 90, 200-250 g).
Opmerking: knaagdieren werden verstrekt door de geaccrediteerde laboratorium Animal Unit van de Universiteit van Hong Kong. - Houd de ratten onder een constante temperatuur van 25 °C en 60-70% vochtigheid bij de onderzoekseenheid voor laboratoriumdieren.
- Huis knaagdieren in 12/12-h licht/donker....
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Resultaten
De eenvoudige CHL-procedure werd uitgevoerd op 90 ratten en uit deze groep 2 had een significante bloeding en 2 had de volgende dag geen gehoorverlies als beoordeeld door Behavioral Clap Startle. Deze vier ratten werden weggegooid. Ratten moeten worden weggegooid zoals beschreven door de redenen in de discussie als gevolg van complicaties. Inducerende TM punctie en/of verplaatsing/verwijdering van malleus (Figuur 2b) ONTLOKT CHL, wat resulteert in gedrags man.......
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Discussie
We beschrijven een eenvoudige chirurgische inductie van CHL met verificatie met behulp van Otoscoop visualisatie en Behavioral Clap schrikreactie respons bij ratten. Hier demonstreren we de methode op rat en eerder is deze methode toegepast op gerbils en muizen. De methode kan gemakkelijk worden overgenomen door andere knaagdieren. Inductie van CHL maakt het mogelijk om een subtiele vorm van gehoorverlies te bestuderen die zich manifesteert in auditieve corticale veranderingen en psychopfysische gedrags bevindingen
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Openbaarmakingen
De auteurs verklaren geen financiële of niet-financiële belangenconflicten.
Dankbetuigingen
Dit werk werd deels gesteund door de Hong Kong Research Grants Council, het Early Career Scheme, project #21201217 to C. L., voor het project Brain Mapping geleide elektrofysiologie met toepassingen in gehoor-en lawaai vervuiling onderzoek. Wij danken de Posgrado en Ciencias Biomédicas, het Instituto de Neurobiología van de Universidad Nacional Autónoma de México (UNAM), de Consejo Nacional de Ciencia y Tecnología (CONACyT) México voor de Graduate Fellowship 578458 aan FAM Manno.
....Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Materialen
| Naam | Bedrijf | Catalogusnummer | Opmerkingen |
|---|---|---|---|
| Latex, polyvinyl of nitril handschoenen | AMMEX | Gebruik onbestoven handschoenen van 8-mil | |
| Micro veerschaar (zie Fig. 1b) | RWD Life Science | S11035-08 | 8,0 cm totale lengte, met 3,5 mm snijkant, of vergelijkbare microtang. Standaard pincetten met veerwerking is voldoende |
| Otoscoop mini 3000 | HEINE | D-008.70.120M | Standaard LED otoscoop is voldoende |
| Raad of muis | JAX labs | Elke kleine knaagdier | |
| Klein knaagdierkooi | Tecniplast | 1284L | Twee kooien nodig om CHL knaagdier te scheiden van gehoor knaagdier. Als knaagdieren in direct contact met elkaar zijn, zullen ze elkaar verschrikken. Kooiafmetingen 365 x 207 x 140 mm, vloeroppervlak: 530 cm2/82,15 in2 |
Referenties
- Shargorodsky, J., Curhan, S. G., Curhan, G. C., Eavey, R. Change in prevalence of hearing loss in US adolescents. The Journal of the American Medical Association. 304 (7), 772-778 (2010).
- Lucas, J. W., Schiller, J. S., Benson, V.
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Herprints en machtigingen
