Methodenartikel

Schatting van het Nephron aantal in hele nieren met behulp van de zure methode

9.9K weergaven

⸱

DOI:

10.3791/58599

⸱

22 mei 2019

 ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Pharmacology and Toxicology, The University of Mississippi Medical Center, 2Department of Medicine, Division of Nephrology, Rush University Medical Center, 3Department of Medicine, Division of Nephrology, The University of Mississippi Medical Center, 4Department of Neurology, The University of Mississippi Medical Center

In dit artikel

Samenvatting

Schattingen van de hele nier nephron nummer zijn belangrijk klinisch en experimenteel, want er is een omgekeerde associatie tussen nephron aantal en een verhoogd risico op nier-en hart-en vaatziekten. Hierin, wordt het gebruik van de zure methode van de vergisting, die snelle en betrouwbare ramingen van het gehele nephron aantal van de nier verstrekt, aangetoond.

Samenvatting

Nephron schenking verwijst naar het totale aantal nephrons een individu is geboren met, als nephrogenesis bij de mens is voltooid door 36 weken van de dracht en geen nieuwe nephrons worden gevormd na de geboorte. Nephron nummer verwijst naar het totale aantal nephrons gemeten op elk punt in de tijd na de geboorte. Zowel beïnvloeden de genetische als milieufactoren zowel nephron schenking als aantal. Inzicht in hoe specifieke genen of factoren van invloed op het proces van nephrogenesis en nephron verlies of ondergang is belangrijk als individuen met een lagere nephron schenking of het aantal wordt gedacht dat een hoger risico op het ontwikkelen van renale of hart-en vaatziekten. Inzicht in hoe milieurisico's in de loop van het leven van een persoon beïnvloedt nephron aantal zal ook van vitaal belang bij het bepalen van toekomstige ziekterisico. Aldus, is de capaciteit om geheel nier nephron aantal snel en betrouwbaar te beoordelen een basis experimentele vereiste om mechanismen beter te begrijpen die bijdragen tot of bevorderen nephrogenesis of nephron verlies. Hier beschrijven we de zure methode voor de schatting van de hele nier nephron nummer op basis van de procedure beschreven door Damadian, Shawayri, en Bricker, met lichte wijzigingen. De zure methode zorgt voor snelle en betrouwbare schattingen van het aantal nephron (zoals beoordeeld door het tellen van glomeruli) die binnen 5% van die bepaald met behulp van meer geavanceerde, zij het duur, methoden zoals Magnetic Resonance Imaging. Bovendien is de methode van de zure verwerking een uitstekende high-throughput methode om nephron aantal in grote aantallen steekproeven of experimentele voorwaarden te beoordelen.

Inleiding

Nephron is zowel de fundamentele structurele als functionele eenheid van nier1. Structureel, de nephron bestaat uit de kluwen (capillairen en podocytes) gelegen binnen de Bowman de capsule en de renale tubulus, bestaande uit de proximale tubulus, de lus van Henle, en de distale tubulus die eindigt in de verzamelbuis. Functioneel, de rol van de nephron is de filtratie en heropname van water en elektrolyten en de secretie van afval. In het algemeen, nephrogenesis is voltooid op 36 weken van de dracht bij de mens en kort na de geboorte in verschillende soorten, zoals de muis en de rat2. Nephron schenking verwijst naar het totale aantal nephrons dat een individu is geboren met, terwijl Nephron aantal is het totale aantal nephrons gemeten op elk moment na de geboorte3. De term nephron nummer en glomerulaire nummer worden vaak door elkaar gebruikt. Omdat er slechts een kluwen per nephron, de beoordeling van glomeruli nummer is een belangrijke surrogaat voor het schatten van nephron nummer.

De beoordeling van nephron schenking en nephron aantal is van klinisch belang aangezien de studies een vereniging tussen nephron schenking en verminderde nephron aantallen met een verhoogde weerslag van cardiovasculaire ziekte4,5 hebben aangetoond ,6,7,8,9,10,11,12,13,14, 15. op basis van bevindingen in de nieren bij autopsie, Brenner merkte op dat hypertensieve personen gepresenteerd met een lager totaal aantal nephrons dan normotensive individuen16. Zo, Brenner hypothetische dat er een omgekeerde relatie tussen nephron aantal en het risico op het ontwikkelen van hypertensie later in het leven. Brenner ook hypothetische dat een vermindering van nephron aantal werd gecompenseerd door de nephrons dat bleef. Met het oog op de normale filtratietarief in de nieren te handhaven, residuele nephrons compenseren door het verhogen van hun glomerulaire oppervlak (glomerulaire hypertrofie), waardoor het werken aan een nadelig effect van nephron verlies op de nierfunctie te verzachten4 ,16.

Terwijl de bescherming op de korte termijn, glomerulaire hypertrofie, op de lange termijn, leidt tot een verhoogde natrium-en vochtretentie, verhoogde extracellulaire vloeistof volume, en verhogingen van de arteriële bloeddruk, wat leidt tot een vicieuze cirkel van verdere stijgingen in glomerulaire capillaire druk, glomerulaire hyperfiltratie, en nephron littekens (sclerose) en verwonding4,16.

Het verkrijgen van schattingen of tellingen van nephron nummer bieden een paar experimentele voordelen: 1) het geeft informatie over het proces van nephrogenesis, die vervolgens kan worden gekoppeld aan specifieke genen of factoren in het embryo of de moeder-foetale omgeving, en 2) Er is een vereniging van nephron nummer met hart-en vaatziekten en, dus is er het potentieel dat de ramingen van nephron nummer kan worden gebruikt om toekomstige cardiovasculaire risico te voorspellen2,17,18, 19 , 20 , 21 , 22. in aanvulling op de moeder-foetale omgeving, verschillende ziekten rechtstreeks effect nephron aantal en nierfunctie, met inbegrip van atherosclerose, diabetes, hypertensie, en zelfs normale veroudering2,9, 10,11,12,22,23. Aldus, is de beoordeling van het gehele nephron aantal van de nier belangrijk om zowel de genetische als milieufactoren te begrijpen die nephrogenesis (d.w.z., nephron schenking) en nephron aantal over de cursus van het leven van een persoon en de resulterende gevolgen beïnvloeden op de nierfunctie en de cardiovasculaire gezondheid.

Momenteel zijn er verschillende methoden beschikbaar voor de bepaling en kwantificering van nephron nummer, elk met zijn eigen voordelen en beperkingen24,25,26,27,28 ,29,30. Geavanceerde methoden voor het bepalen van hele nier nephron nummer omvatten stereological methoden, zoals de Dissector/fractionator methode, en Magnetic Resonance Imaging25,26. Vaak beschouwd als de goud-standaard voor het bepalen van hele nier nephron nummer, de Dissector/fractionator methode is zowel duur en tijdrovend. De recente vooruitgang en de verbetering van Magnetic Resonance Imaging en verwerking hebben de hulpmiddelen verstrekt om elk nephron individueel te tellen. Echter, Magnetic Resonance Imaging is niet alleen tijdrovend, maar ook extreem duur. Bovendien vereist zowel de Dissector/fractionator methode als de Magnetic Resonance Imaging geavanceerde technische expertise, waardoor het gebruik van dergelijke methoden in het merendeel van de onderzoekslaboratoria wordt beperkt.

De meeste methodes om nephron aantal te bepalen maken tellingen of ramingen die op de identificatie van glomeruli worden gebaseerd, aangezien zij gemakkelijk identificeerbaar structureel zijn. In deze paper, de zure methode voor het schatten van nephron aantal in hele nieren wordt beschreven en aangetoond27. De zure methode is snel, betrouwbaar en beduidend minder duur dan andere methoden, zoals de Dissector/fractionator methode en Magnetic Resonance Imaging. Bovendien, de zure methode biedt zeer herhaalbare schattingen van nephron nummer dat zijn gemeld te worden binnen het bereik van die bepaald met behulp van Magnetic Resonance Imaging26.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Protocol

Leveringen en reagentia hieronder vermeld zijn voor de bepaling van de hele nier nephron nummer in een muis, dat is, twee nieren. Wijzigingen voor het gebruik van de zure methode voor de moedermaceraat worden geïdentificeerd met sterretjes. Alle experimentele protocollen die aan de nationale instituten van de gids van de gezondheid voor de zorg en het gebruik van proefdieren worden voldeden en werden goedgekeurd door de institutionele Commissie van de Dierenzorg en van het gebruik bij het medische centrum van de Universiteit van Mississippi.

1. de isolatie procedure van de nier

  1. Weeg de muis (of andere soorten) en euthanaseren het met een Isofluraan (5%-8%) overdosis of pentobarbital (150 mg/kg intraperitoneale injectie).
  2. Zodra de muis is euthanized, open haar buikholte met behulp van fijne chirurgische schaar langs de middellijn.
  3. Til de darmen en de voortplanting vet aan de rechterkant van de buikholte. Door de bruto dissectie, isoleren van de linker nier. Met behulp van fijne chirurgische schaar, snijd de linker renale slagader en ader en zorgvuldig verwijderen van de linker nier, het plaatsen van de nier in een adequaat gelabeld (muis nummer/Identifier) Weeg boot met fosfor-gebufferde zoutoplossing (PBS).
  4. Herhaal de procedure voor de juiste nier.
  5. Verwijder elke nier van de respectieve wegen boot en plaats deze op een chirurgische gaas pre-bevochtigd met PBS.
  6. Het verlaten van de nier op de chirurgische gaas, snel verwijderen van alle aanhangige niet-renale weefsel (zoals perirenal vet of bijnier), gevolgd door het verwijderen van de renale capsule. Weeg elke nier individueel, het opnemen van het gewicht van de linker en rechter nier afzonderlijk in een laboratorium notebook.

2. homogenisering, incubatie, en het spannen procedures

  1. Zodra elke nier wordt gewogen, drain elke weeg boot van PBS en plaats de nieren terug in de juiste gelabelde weeg boot. Met behulp van een schone scheermesje, snijd de nieren in de helft, in de lengte. Plaats elke nier half naar beneden gericht en snijd elke helft in 2-mm of kleinere stukken.
  2. Met behulp van dezelfde RazorBlade, zorgvuldig te verzamelen en plaats de gehakte stukjes nieren in een gelabelde 15-mL kegelvormige buis (muis nummer/Identifier; links versus rechts nier).
  3. Herhaal de procedure voor de tegenovergestelde nier, met behulp van een nieuwe scheermesje. Plaats de gehakte nier in een apart gelabelde 15-mL conische buis.
  4. Voeg in een goed geventileerde rook kap 5 mL zoutzuur van 6 M toe aan elke kegelvormige buis van 15 mL.
  5. Vervang de dop aan de kegelvormige buis, voorzichtig roeren de nier/HCl mengsel, en plaats de 15-mL kegelvormige buis in een voorverwarmde waterbad ingesteld op 37 °C voor 90 min (* 120 min voor de rat nieren).
  6. Schud elke 15 minuten kort elke 15 mL-buis gedurende de incubatie om ervoor te zorgen dat alle weefsels aan HCl-zuur worden blootgesteld.
  7. Plaats een 18-G naald in een 5-mL spuit (* 10-mL spuit voor rat) en verwijder voorzichtig de spuit plunjer. Plaats de spuit in een conische buis van 50 mL (buis #1) in een rook kap.
  8. Verwijder de nier/HCl oplossing uit het waterbad en giet het weefsel oplossing in het open uiteinde van de spuit en zet de 15-mL kegelvormige buis opzij in een test buis rack. Vervang de zuiger voorzichtig en duw de plunjer langzaam om de oplossing door de naald en in buis #1 te extruderen.
  9. Was de 15 mL kegel buis met 5 mL PBS-oplossing. Wervel de PBS in de 15-mL kegel buis om eventuele resterende nier weefsel te solubilize.
  10. Nogmaals, verwijder voorzichtig de plunjer van de 5-mL spuit met de 18-G naald en giet de inhoud van de 15-mL kegelvormige buis in het open uiteinde van de spuit. Vervang voorzichtig de zuiger en spoel de spuit door voorzichtig naar beneden te duwen op de zuiger, in de buis #1. Herhaal dit proces 2x (3x in totaal uitgevoerd).
  11. Plaats een 21-G naald in een nieuwe 5-mL spuit (* 10-mL spuit voor rat) en verwijder voorzichtig de spuit plunjer. Plaats de spuit met de 21-G naald bevestigd in een nieuwe 50-mL conische buis (Tube #2).
  12. Giet de inhoud van de buis #1 in het open uiteinde van de spuit met de 21-G naald. Plaats voorzichtig de zuiger en spoel de spuit door voorzichtig naar beneden te duwen op de spuit plunjer en het plaatsen van de geëxtrudeerde oplossing in de buis #2.
  13. Was buis #1 met 5 mL PBS-oplossing. Swirl de PBS in buis #1 om om het even welk blijvend nier weefsel te solubilize.
  14. Nogmaals, verwijder voorzichtig de plunjer van de 5-mL spuit met de 18-G naald en giet de inhoud van de buis #1 in het open uiteinde van de spuit. Vervang voorzichtig de zuiger en spoel de spuit door voorzichtig naar beneden te duwen op de zuiger, extruderen oplossing in de buis #2. Herhaal dit proces 2x (3x in totaal uitgevoerd).
  15. Breng het totale volume van de buis #2 tot 50 mL door toevoeging van extra PBS, tot de 50-mL lijn op buis #2.
  16. Incubeer buis #2 met de oplossing van het nier weefsel in een buis rek op een tuimelschakelaar in een ijskast die bij 4 °C 's nachts wordt geplaatst (minimum 8-10 h).

3. telling van glomeruli en extrapolatie van het Nephron nummer

  1. Verwijder de buis #2 uit de koelkast en het gekorrelde weefsel opnieuw op te schorten door voorzichtig het omkeren van de buis meerdere malen om een homogene oplossing te creëren. Wij adviseren het tellen van glomeruli binnen 5 d na verwerking.
  2. Zorgvuldige hoeveelheid 500 µ L van de nier oplossing in een enkele put van een 12-well plaat. Herhaal dit 2x, het plaatsen van elke hoeveelheid in een aparte goed, zodat er drie putten van de nier-oplossing per nier, voor analyse in drievoud.
  3. Voeg 500 µ L van PBS aan elk van de drie putten met de nier oplossing, voor een 1:1 verdunning.
  4. Met behulp van een omgekeerde Microscoop, Tel het aantal glomeruli per well. Tellen wordt geholpen met behulp van een raster van 16 aparte secties geplaatst op de bodem van elk goed. Tel het aantal glomeruli per gerasterde sectie en dan som de telling per net om het totale aantal glomeruli per put te krijgen. Glomeruli zijn gemakkelijk identificeerbaar door hun sferische structuur. Extra identificatiemiddelen omvatten een roodachtige tint als gevolg van bloed gevulde haarvaten, evenals pre-of post-arterioles die blijven gehecht aan het lichaam van individuele glomeruli (Figuur 1).
  5. Voeg het totale aantal glomeruli geteld per elk van de drie putten en vervolgens verdeel ze door drie voor het gemiddelde aantal glomeruli per 500 µ L van nier-oplossing. Als het verschil in het gemiddelde aantal glomeruli per put groter is dan 10%, herhaal dan de nephron-tellende procedure, waarbij veel aandacht wordt besteed aan de homogene aard van de nier oplossing. Vermenigvuldig het aantal glomeruli geteld per well tijden 100 voor het gemiddelde aantal glomeruli per nier. Totaal nephron aantal kan worden uitgedrukt per nier of, met behulp van nier gewicht, per mg of g weefsel.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Resultaten

Hieronder zijn representatieve schattingen van de hele nier nephron nummer van een gevestigde muismodel van hypertensie en een genetische rat model van leeftijdsgebonden chronische nierziekte. De belangrijkste kenmerken van glomeruli, zoals een sferische structuur met of zonder bijgevoegde pre-of post-arteriolaire of buisvormige constructies, worden gemarkeerd voor de nieuwe methoden van de zure snij methode (Figuur 1).

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Discussie

Met een goede experimentele techniek, de zure methode is ideaal voor het schatten van nephron aantal in hele nieren. Hoewel de nier in zuur wordt opgelost, blijft glomeruli grotendeels intact en is gemakkelijk identificeerbaar, makend het tellen van individuele glomeruli vrij gemakkelijk en ongecompliceerd. De zure snijtechniek is om verschillende redenen bijzonder voordelig. Ten eerste, de zure methode is een snelle en handige methode die relatief weinig in termen van kosten en fysieke inspanning vereist. Alle reagentia...

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Openbaarmakingen

De auteurs hebben niets te onthullen.

Dankbetuigingen

Dit werk werd gesteund voor een deel door de nationale instituten van gezondheid, nationaal hart, Long, en het Instituut van het bloed (R01HL107632).

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Materialen

Lijst van materialen gebruikt in dit artikel
NaamBedrijfCatalogusnummerOpmerkingen
Isoflurane anesthesieAbbott Laboratories05260-05
Isoflurane verdampingssysteem & flowmeterBraintree ScientificVP IInclusief medisch zuurstofvoorraad
Leica Inverted Microscoop DMIL LEDLeica MicrosystemsDMIL LEDElk merk ook geschikt
Digitale waterbadFisher Scientific2239Elk merk ook geschikt
ToughCut Fijne chirurgische schaarFine Science Tools14058-1125 mm snijkant, 11.5 cm lengte; Tips: scherp-scherp; Tipvorm: recht
Micro disserpeertang 4 1/4 inchBiomed Res Instruments, Inc10-1760Gebogen tip
Plexiglas bord 5 inch x 7 inchelke bron geschiktn/aElk merk ook geschikt
Zeshoekige polystyreen weegschaalFisher Scientific02-2002-100Elk merk ook geschikt
Scheermessen Fisher Scientific12-640Eenzijdig koolstofstaal 0.009
Gaas sponzen 4 x 4 inch 8 lagenFisher ScientificMSD-1400250
10x concentraat fosfaat gebufferde zoutoplossing (PBS)Sigma AldrichP5493-4LVerdun tot 1x 
6 N Hydrochloorzuur oplossingSigma Aldrich3750-32
15 mL kegelvormige centrifugeerbuisFisher Scientific14-959-70CElk merk ook geschikt
50 mL kegelvormige centrifugeerbuisFisher Scientific14-959-49AElk merk ook geschikt
Weggeef 5 mL spuitCole PalmerEW-07944-06Elk merk ook geschikt
18G1.5 wegwerpnaaldFisher Scientific14-826-5DElk merk ook geschikt
21G1.5 wegwerpnaaldFisher Scientific14-826-5BElk merk ook geschikt
12-well meervoudige celcultuur platen met dekselCole Palmer#FW-01959-06Elk merk ook geschikt
Polypropyleen modulaire testbuisjesrekCole Palmer#EW-06733-00In staat om 15 en 50 mL kegelbuizen te bergen; elk merk ook geschikt

Referenties

  1. Hall, J. E., Guyton, A. C. Guyton and Hall Textbook of Medical Physiology. , 13th, Elsevier. Philadelphia, PA. (2016).
  2. Wang, X., Garrett, M. R. Nephron number, hypertension, and CKD: physiological and genetic insight from humans and animal models. Physiological Genomics. 49 (3), 180-192 (2017).
  3. Didion, S. P. A novel genetic model to explore the Brenner hypothesis: Linking nephron endowment and number with hypertension. Medical Hypotheses. 106, 6-9 (2017).
  4. Brenner, B. M. Nephron adaptation to renal injury or ablation. American Journal of Physiology. 249 (3 Pt 2), F324-F337 (1985).
  5. Didion, S. P., Wang, X., Garrett, M. R. Direct correlation between blood pressure and nephron endowment in a genetic model of hypertension. Hypertension. 68, A052(2016).
  6. Luyckx, V. A., Brenner, B. M. The clinical importance of nephron mass. Journal of the American Society of Nephrology. 21 (6), 898-910 (2010).
  7. Mackenzie, H. S., Brenner, B. M. Fewer nephrons at birth: a missing link in the etiology of essential hypertension? American Journal of Kidney Diseases. 26 (1), 91-98 (1995).
  8. Nyengaard, J. R., Bendtsen, T. F. Glomerular number and size in relation to age, kidney weight, and body surface in normal man. The Anatomical Record. 232 (2), 194-201 (1992).
  9. Denic, A., Glassock, R. J., Rule, A. D. Structural and functional changes with the aging kidney. Advances in Chronic Kidney Disease. 23 (1), 19-28 (2016).
  10. Denic, A., et al. The substantial loss of nephrons in healthy human kidneys with aging. Journal of the American Society of Nephrology. 28 (1), 313-320 (2016).
  11. Keller, G., Zimmer, G., Mall, G., Ritz, E., Amann, K. Nephron number in patients with primary hypertension. The New England Journal of Medicine. 348 (2), 101-108 (2003).
  12. Hoy, W. E., et al. Nephron number, glomerular volume, renal disease and hypertension. Current Opinion in Nephrology and Hypertension. 17 (3), 258-265 (2008).
  13. Hoy, W. E., et al. Distribution of volumes of individual glomeruli in kidneys at autopsy: association with age, nephron number, birth weight and body mass index. Clinical Nephrology. 74 (Suppl 1), S105-S122 (2010).
  14. Hughson, M. D., et al. Hypertension, glomerular hypertrophy and nephrosclerosis: the effect of race. Nephrology Dialysis Transplantation. 29 (7), 1399-1409 (2014).
  15. Puelles, V. G., et al. Glomerular number and size variability and risk for kidney disease. Current Opinion in Nephrology and Hypertension. 20 (1), 7-15 (2010).
  16. Brenner, B. M., Garcia, D. L., Anderson, S. Glomeruli and blood pressure. Less of one, more of the other? American Journal of Hypertension. 1 (4 Pt 1), 335-347 (1988).
  17. Clark, A. T., Bertram, J. F. Molecular regulation of nephron endowment. American Journal of Physiology. 276 (4 Pt 2), F485-F497 (1999).
  18. Benz, K., et al. Early glomerular alterations in genetically determined low nephron number. American Journal of Physiology Renal Physiology. 300 (2), F521-F530 (2011).
  19. Zhao, H., et al. Role of fibroblast growth factor receptors 1 and 2 in the ureteric bud. Developmental Biology. 276 (2), 403-415 (2004).
  20. Sims-Lucas, S., Caruana, G., Dowling, J., Kett, M. M., Bertram, J. F. Augmented and accelerated nephrogenesis in TGF-beta2 heterozygous mutant mice. Pediatric Research. 63 (6), 607-612 (2008).
  21. Cullen-McEwen, L. A., Kett, M. M., Dowling, J., Anderson, W. P., Bertram, J. F. Nephron number, renal function, and arterial pressure in aged GDNF heterozygous mice. Hypertension. 41 (2), 335-340 (2003).
  22. Stelloh, C., et al. Prematurity in mice leads to reduction in nephron number, hypertension and proteinuria. Translational Research. 159 (2), 80-89 (2012).
  23. Galinsky, R., et al. Effect of intra-amniotic lipopolysaccharide on nephron number in preterm fetal sheep. American Journal of Physiology Renal Physiology. 301 (2), F280-F285 (2011).
  24. Bertam, J. F., et al. Why and how we determine nephron number. Pediatric Nephrology. 29 (4), 575-580 (2014).
  25. Nyengaard, J. R. Stereologic methods and their application in kidney research. Journal of the American Society of Nephrology. 10 (5), 1100-1123 (1999).
  26. Beeman, S. C., et al. Measuring glomerular number and size in perfused kidneys using MRI. American Journal of Physiology Renal Physiology. 300 (6), F1454-F1457 (2011).
  27. Damadian, R. V., Shawayri, E., Bricker, N. S. On the existence of non-urine forming nephrons in the diseased kidney of the dog. Journal of Laboratory and Clinical Medicine. 65, 26-39 (1965).
  28. Bonvalet, J. P., et al. Number of glomeruli in normal and hypertrophied kidneys of mice and guinea-pigs. The Journal of Physiology. 269 (3), 627-641 (1977).
  29. Bains, R. K., Sibbons, P. D., Murray, R. D., Howard, C. V., Van Velzen, D. Stereological estimation of the absolute number of glomeruli in the kidneys of lambs. Research in Veterinary Science. 60 (2), 122-125 (1996).
  30. Assmann, K. J., van Son, J. P., Koene, R. A. Improved method for the isolation of mouse glomeruli. Journal of the American Society of Nephrology. 2 (4), 944-946 (1991).
  31. Wang, X., et al. Nephron deficiency and predisposition to renal injury in a novel one-kidney genetic model. Journal of the American Society of Nephrology. 26 (7), 1634-1646 (2015).
  32. Lodrup, A. B., Karstoft, K., Dissing, T. H., Pedersen, M., Nyengaard, J. R. Kidney biopsies can be used for estimations of glomerular number and volume: a pig study. Virchows Archiv. 452 (4), 393-403 (2008).
  33. Fassi, A., et al. Progressive glomerular injury in the MWF rat is predicted by inborn nephron deficit. Journal of the American Society of Nephrology. 9 (8), 1399-1406 (1998).
  34. Wintour, E. M., et al. Reduced nephron number in adult sheep, hypertensive as a result of prenatal glucocorticoid treatment. The Journal of Physiology. 549 (Pt 3), 929-935 (2003).
  35. Van Vuuren, S. H., et al. Compensatory growth of congenital solitary kidneys in pigs reflects increased nephron numbers rather than hypertrophy. PLoS One. 7 (11), e49735(2012).

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Herprints en machtigingen

Toestemming aanvragen om de tekst of afbeeldingen van dit JoVE-artikel te hergebruiken

Toestemming aanvragen

Trefwoorden

Schatting van het aantal nefronentellen van glomerulidissectie van de nierbehandeling met zoutzuurhomogenisatie van weefselwassen met PBSinverted microscopieanalyse van de gehele nierhigh throughput screening

Gerelateerde artikelen