Hersenstam Evoked Response audiometrie is een belangrijk hulpmiddel in de klinische neurofysiologie. Tegenwoordig is Brain stem Evoked Response audiometrie ook toegepast in de basiswetenschap en preklinische studies waarbij zowel farmacologische als genetische diermodellen betrokken zijn. Hier geven we een gedetailleerde beschrijving van hoe auditieve hersenstam reacties met succes kunnen worden opgenomen en geanalyseerd in muizen.
Een abonnement op JoVE is vereist om deze inhoud te bekijken. Log in of start vandaag met uw gratis proefperiode.
Methodenartikel
Data-acquisitie en analyse in hersenstam evoked respons-Audiometrie bij muizen
In dit artikel
Samenvatting
Samenvatting
Hersenstam Evoked Response audiometrie (BERA) is van centraal belang in de klinische neurofysiologie. Zoals andere Evoked potential (EP)-technieken, zoals visueel Evoked mogelijkheden (veps) of somatosensorische Evoked mogelijkheden (SEPS), worden de auditieve Evoked mogelijkheden (aeps) veroorzaakt door de repetitieve presentatie van identieke stimuli, de elektro-encefalografische (EEG) respons daarvan wordt vervolgens gemiddeld resulterend in uitgesproken positieve (p) en negatieve (n) afbuigingen. Bij de mens kunnen zowel de amplitude als de latentie van individuele pieken worden gebruikt om veranderingen in synchronisatie-en geleidings snelheid in de onderliggende neuronale circuits te karakteriseren. Belangrijk is dat AEPs ook wordt toegepast in de basis-en preklinische wetenschap om de auditieve functie in farmacologische en genetische diermodellen te identificeren en te karakteriseren. Nog meer, diermodellen in combinatie met farmacologische testen worden gebruikt om te onderzoeken op mogelijke voordelen bij de behandeling van Sensorineuraal gehoorverlies (bijv. leeftijd-of lawaai-geïnduceerde gehoor tekorten). Hier bieden we een gedetailleerde en integratieve beschrijving van het opnemen van auditieve hersenstam-Evoked Reacties (Abr's) in muizen met behulp van click en Tone-Burst applicatie. Een specifieke focus van dit protocol ligt op pre-experimentele dieren huis, anesthesie, ABR-opname, ABR-filterprocessen, geautomatiseerde, op wavelet gebaseerde amplitude-groei functie-analyse en latentie detectie.
Inleiding
Een centraal aspect van hersen fysiologie is de mogelijkheid om milieu-informatie te verwerken die resulteert in verschillende intrinsieke of extrinsieke output, zoals leren, geheugen, emotionele reacties of motorische reacties. Verschillende experimentele en diagnostische benaderingen kunnen worden gebruikt om te karakteriseren de elektrofysiologische responsiviteit van individuele neuronale celtypen of clusters/ensembles van neuronen binnen een stimulus-gerelateerde neuronale circuits. Deze elektrofysiologische technieken beslaan verschillende spatiotemporele afmetingen op de micro-, meso-en macroscale1. Het micro schaalniveau omvat spanning ....
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Protocol
Alle dier procedures werden uitgevoerd volgens de richtlijnen van de Duitse Raad voor Dierverzorging en alle protocollen werden goedgekeurd door het lokale institutionele en nationale Comité voor de verzorging van dieren (Landesamt für Natur, Umwelt, und Verbraucherschutz, staat Kantoor van Noordrijn-Westfalen, departement natuur, milieu en consumerisme [LANUV NRW], Duitsland). De auteurs verklaren verder dat alle dier experimenten zijn uitgevoerd in overeenstemming met de National Institutes of Health Guide voor de verzorging en het gebruik van proefdieren (NIH Publications No. 80-23) herziene 1996 of de Britse dieren (wetenschappelijke procedures) Act 1986 en bijbeh....
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Resultaten
Click-and-tone burst-opgeroepen ABR-opnames kunnen worden gebruikt om gehoor drempel verschillen, amplitude groei functie en latentie vergelijking te evalueren. Click-Evoked Abr's in de SPL-stijgend modus worden afgebeeld in afbeelding 1 voor besturingselementen en twee voorbeeldige Mutante muis lijnen die een tekort hebben aan de cav3,2 T-type voltage-gated CA2 + kanaal (d.w.z. cav3,2+/- en ca v3,2 null .......
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Discussie
Dit protocol biedt een gedetailleerde en integratieve beschrijving van het opnemen van auditieve Evoked hersenstam reacties bij muizen. Het legt specifieke focus op dier voorbehandeling, anesthesie, en mogelijke methodologische verstorende factoren. Deze laatste omvatten onder meer geslacht, muis lijn, leeftijd en huisvestingsomstandigheden. Opgemerkt moet worden dat al deze factoren een impact kunnen hebben op perceptief gehoorverlies en fundamentele aspecten van auditieve informatieverwerking. Daarom is passende strati.......
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Openbaarmakingen
De auteurs hebben niets te onthullen.
Dankbetuigingen
De auteurs willen Dr. Christina Kolb (Duits centrum voor neurodegeneratieve ziekten [DZNE]) en Dr. Robert Stark (DZNE) bedanken voor hun hulp bij de veeteelt en de diergezondheid. Dit werk werd financieel gesteund door het Federaal Instituut voor drugs en medische hulpmiddelen (Bundesinstitut für Arzneimittel und Medizinprodukte, BfArM, Bonn, Duitsland).
....Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Materialen
| Naam | Bedrijf | Catalogusnummer | Opmerkingen |
|---|---|---|---|
| AEP/OAE Software voor RZ6 (BioSigRZ software) | Tucker-Davis Technologies (TDT) | BioSigRZ | |
| Binoculair chirurgisch vergrotingsmicroscoop | Zeiss Stemi 2000 | 0000001003877, 4355400000000, 0000001063306, 4170530000000, 4170959255000, 4551820000000, 4170959040000, 4170959050000 | |
| Katten (Macrolon) | Techniplast | 1264C, 1290D | |
| Carprox vet, 50mg/ml | Virbac Tierarzneimittel GmbH | PZN 11149509 | |
| Koud lichtbron | Schott KL2500 LCD | 9.705 202 | |
| Wattenstaafjes (steriele) | Carl Roth | EH12.1 | |
| Op maat gemaakte gaasvormige metalen Faraday kooi (roestvrij staal, 2 mm dik, 1 cm maaswijdte) | op maat gemaakt | op maat gemaakt | |
| 5% Dexpanthenol (Bepanthen oog- en neuscreme) | Bayer Vital GmbH | PZN: 01578681 | |
| Disposible Subdermal roestvrijstalen naald elektroden, 27GA, 12mm | Rochester Electro-Medical, Inc. | S03366-18 | |
| Chirurgische draaglakens (steriele) | Hartmann | PZN 0366787 | |
| Ethanol, 70% | Carl Roth | 9065.5 | |
| 1/4'' Free Field Measure Calibration Mic Kit | Tucker-Davis Technologies (TDT) | PCB-378C0 | |
| Handschoenen (steriele) | Unigloves | 1570 | |
| Graefe Pincetten-gebogen, gekarteld | FST | 11052-10 | |
| GraphPad Prism 6 Software, V6.07 | GraphPad Prism Software, Inc. | https://www.graphpad.com/ | |
| Verwarmingsgestuurde chirurgische instrumentensterilisator | FST | 18000-50 | |
| Homeothermisch verwarmde blanked | ThermoLux | 461265 / -67 | |
| Ketanest S (Ketamine), 25mg/ml | Pfizer | PZN 08707288 | |
| Ringer's oplossing (steriele) | B.Braun | PZN 01471434 | |
| Matlab software | MathWorks, Inc. | https://de.mathworks.com/products/matlab.html | |
| Medusa 4-kanaals lage imped. Hoofdstation | Tucker-Davis Technologies (TDT) | RA4LI | |
| Medusa 4-kanaals voorversterker/Digitizer | Tucker-Davis Technologies (TDT) | RA4PA | |
| Microfoon | PCB Pieztronics | 378C01 | |
| Multi Field Speaker- Stereo | Tucker-Davis Technologies (TDT) | MF1-S | |
| Oscilloscoop | Tektronix | DPO3012 | |
| Optical PC1 express kaart voor Optibit Interface) | Tucker-Davis Systems (TDT) | PO5e | |
| Askina Braucel pads (cellulose absorberende kussentjes) | B.Braun | PZN 8473637 | |
| Voorversterker | PCB Pieztronics | 480C02 | |
| RZ6 Multi I/O Processor systeem (BioSigRZ) | Tucker-Davis Technologies (TDT) | RZ6-A-PI | |
| 0,9% zoutoplossing (NaCl, steriele) | B.Braun | PZN:8609255 | |
| SigGenRZ software | Tucker-Davis Technologies (TDT) | https://www.tdt.com/ | |
| Software R (versie 3.2.1) + Reshape 2 (Versie 1.4.1) + ggplot 2 (versie 1.0.1) + datatable (versie 1.9.4), + gdata (versie 2.13.3), + pastecs (versie 1.3.18), + waveslim (versie 1.7.5), + MassSpecWavelet (versie 1.30.0) | The R Foundation, R Core Team 2015 | Open Source Software (gratis te distribueren) | |
| Geluidsdempingskast | Med Associates Inc. | ENV-018V | |
| Standaard patroon pincetten, 12 cm en 14,5 cm lengte | FST | 11000-12, 11000-14 | |
| Leukosilk tape | BSN medical GmbH & Co. KG | PZN 00397109 | |
| Weefsel pincetten- 1x2 Tanden 12 cm | FST | 11021-12 | |
| Uniprotect geventileerde kast | Bioscape | THF3378 | |
| Geventileerde kast | Tecniplast | 9AV125P | |
| Xylazin (Rompun), 2% | Bayer Vital GmbH | PZN 1320422 |
Referenties
- Sporns, O., Tononi, G., Kotter, R. The human connectome: A structural description of the human brain. PLOS Computational Biology. 1 (4), e42(2005).
- Bebarova, M. Advances in patch clamp technique: towards higher quality and quantity. Ge....
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Herprints en machtigingen
