Methodenartikel

Etikettering en beeldvorming van amyloïde plaques in hersenweefsel met behulp van de natuurlijke Polyphenol curcumine

DOI:

10.3791/60377

⸱

1 november 2019

 ,  ,  ,  , 
1Field Neurosciences Institute, Ascension St. Mary's Hospital, 2Field Neurosciences Institute Laboratory for Restorative Neurology, Central Michigan University, 3Program in Neuroscience, Central Michigan University, 4Department of Psychology, Central Michigan University, 5Department of Health Sciences, Saginaw Valley State University

In dit artikel

Samenvatting

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Curcumine is een ideale de voor het labelen en beeldvorming van amyloïde beta eiwit plaques in hersenweefsel als gevolg van de preferentiële binding aan amyloïde beta-eiwit, alsmede de structurele gelijkenissen met andere traditionele amyloïde bindende kleurstoffen. Het kan worden gebruikt om te labelen en beeld amyloïde beta eiwit plaques efficiënter en goedkoop dan traditionele methoden.

Samenvatting

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

De afzetting van amyloïde bèta-eiwitten (Aβ) in extra-en intracellulaire ruimten is een van de kenmerkende pathologieën van de ziekte van Alzheimer (AD). Daarom is detectie van de aanwezigheid van Aβ in AD hersenweefsel een waardevol hulpmiddel voor het ontwikkelen van nieuwe behandelingen om de progressie van AD te voorkomen. Er zijn verschillende klassieke amyloïde bindende kleurstoffen, fluorochrome, Imaging sondes en Aβ-specifieke antilichamen gebruikt om Aβ histochemisch op te sporen in AD hersenweefsel. Gebruik van deze verbindingen voor Aβ-detectie is kostbaar en tijdrovend. Vanwege zijn intense fluorescentie activiteit, hoge affiniteit en specificiteit voor Aβ, evenals structurele gelijkenissen met traditionele amyloïde bindende kleurstoffen, is curcumine (CUR) een veelbelovende kandidaat voor het labelen en beeldvorming van Aβ-plaques bij postmortem hersenweefsel. Het is een natuurlijke polyfenol van het kruid Curcuma longa. In de huidige studie, cur werd gebruikt om histochemisch label Aβ plaques van zowel een genetische muismodel van 5x familiaire ziekte van Alzheimer (5xFAD) en van menselijke AD weefsel binnen een minuut. Het etiketterings vermogen van cur werd vergeleken met conventionele amyloïde bindende kleurstoffen, zoals thioflavine-S (thio-S), Congo rood (CR) en fluoro-Jade C (FJC), evenals Aβ-specifieke antilichamen (6E10 en A11). We hebben geconstateerd dat cur de meest goedkope en snelste manier is om Aβ-plaques te labelen en te afbeeldenten in vergelijking met deze conventionele kleurstoffen en is vergelijkbaar met Aβ-specifieke antilichamen. Daarnaast bindt cur met de meeste Aβ-soorten, zoals oligomeren en fibrils. Daarom kan cur worden gebruikt als de meest kosteneffectieve, eenvoudige en snelle fluorochrome detectie-agent voor Aβ-plaques.

Inleiding

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

De ziekte van Alzheimer (AD) is een van de meest voorkomende, leeftijdsgebonden, progressieve neurologische aandoeningen en een van de belangrijkste doodsoorzaken wereldwijd1,2. Leren, geheugen en cognitie stoornissen, samen met neuropsychiatrische stoornissen, zijn de veelvoorkomende symptomen die zich manifesteren in AD3. Hoewel de etiologie van AD niet volledig is opgehelderd, geeft het beschikbare genetische, biochemische en experimentele bewijs aan dat de geleidelijke afzetting van Aβ een definitieve biomarker voor AD4is. Dit misgevouwen eiwit hoopt zich op in intracellulaire en extracellulaire ruimten en wordt verondersteld te worden betrokken bij synaptische verlies, verhoogde neuro ontsteking, en neurodegeneratie in de corticale en hippocampal regio's in de hersenen beïnvloed door AD5. Daarom is histochemische detectie van Aβ in het AD-weefsel een cruciale eerste stap in het ontwikkelen van niet-toxische, anti-amyloïde geneesmiddelen om de progressie van de advertentie te voorkomen.

In de afgelopen decennia zijn verschillende kleurstoffen en antilichamen door veel onderzoeklaboratoria gebruikt om Aβ-plaques in hersenweefsel te labelen en te afbeelden, maar sommige van deze methoden zijn tijdrovend en de gebruikte kleurstoffen of antilichamen zijn duur, waarvoor meerdere accessoires nodig zijn Chemische stoffen. Daarom zou de ontwikkeling van een goedkope manier van detectie van Aβ-plaques in de AD-hersenen een welkome nieuwe tool zijn. Veel laboratoria begonnen met het gebruik van cur, een veelbelovende anti-amyloïde natuurlijke polyfenol, voor labeling en beeldvorming Aβ, evenals een therapeutische agent voor AD6,7,8,9. De hydrofobiciteit en lypofiele aard, structurele gelijkenissen met klassieke amyloïde bindende kleurstoffen, sterke fluorescentie activiteit, evenals sterke affiniteit om te binden met Aβ maakt het een ideale de voor het labelen en beeldvorming van Aβ-plaques in AD-weefsel10 . Cur bindt met Aβ-plaques en oligomeren en de aanwezigheid ervan wordt ook gedetecteerd in intracellulaire ruimten7,11,12,13. Bovendien is aangetoond dat minimale hoeveelheden (1 − 10 nM) van cur can label Aβ plaques in 5x familiaire ziekte van Alzheimer (5xFAD) hersenweefsel7. Hoewel de concentratie van 1 nM niet de optimale fluorescentie intensiteit biedt voor het tellen van Aβ-plaques, is een concentratie van 10 nM of hoger van cur. Ran en collega's14 rapporteerden dat doses van slechts 0,2 nm van difluorboron-derivatized cur in vivo Aβ-afzettingen kunnen detecteren, evenals een infrarood sonde. Of deze dosis voldoende is om Aβ-plaques in weefsel te labelen, is nog steeds niet duidelijk. De meeste eerdere studies hebben 20 − 30 minuten gebruikt voor het kleuring van Aβ-plaques met behulp van cur, maar optimale kleuring kan veel minder tijd vergen.

De huidige studie werd ontworpen om de minimale tijd die door cur nodig is om Aβ-plaques in AD-hersenweefsel te labelen en om de gevoeligheid voor etikettering en beeldvorming van Aβ-plaques in hersenweefsel van de 5xFAD-muizen te vergelijken na kleuring met cur met andere conventionele Aβ-bindende kleurstoffen, zoals Thioflavine-S (thio-S), Congo rood (CR), en fluoro-Jade C (FJC). Het Aβ-etiketterings vermogen van deze klassieke amyloïde bindings kleurstoffen werd vergeleken met de huidige kleuring in paraffine-ingesloten en cryostaat coronale hersen secties van 5xFAD-muizen en van verouderde menselijke AD-en controle hersenweefsel. De bevindingen suggereren dat de cur-labels Aβ-plaques op een manier die vergelijkbaar is met Aβ-specifieke antilichamen (6E10) en matig beter dan thio-S, CR of FJC. Bovendien, wanneer intraperitoneale injecties van cur tot 5xFAD muizen werden toegediend voor 2 − 5 dagen, het stak de bloed-hersen barrière en gebonden met Aβ plaques7. Interessant is dat de nanomolaire concentraties van cur zijn gebruikt om Aβ-plaques in 5xfad-hersenweefsel7,14te labelen en te afbeelden. Bovendien kunnen morfologisch verschillende Aβ-plaques, zoals kern-, neuritische, diffuse en uitgebrande plaques, door cur efficiënter worden gelabeld dan met een van de andere conventionele amyloïde bindings kleurstoffen7. Overall, cur kan worden toegepast op etiket en beeld Aβ plaques in Postmortem hersenweefsel van AD diermodellen en/of menselijk AD weefsel op een eenvoudige en goedkope manier, als een betrouwbaar alternatief voor Aβ-specifieke antilichamen.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Alle hier beschreven methoden zijn goedgekeurd door het Dierenzorg-en gebruiks Comité (ACUC) van de Saginaw Valley State University. Het menselijk weefsel werd verkregen van een gevestigde hersen Bank aan het banner Sun Health Institute in Arizona15,16.

1. perfusie van de dieren

  1. Bereid de fixeer-en perfusie buffers voor.
    1. Bereid 0,1 M natriumfosfaat buffer door toevoeging van 80 g natriumchloride (NaCl), 2 g kaliumchloride (KCl), 21,7 g dinatriumwaterstoffosfaat (na2HPO4· 7h2O), 2,59 g kalium DIWATERSTOFFOSFAAT (KH2po4 ) en dubbel gedestilleerd water om in totaal 1 L te maken.
    2. Bereid 4% Paraformaldehyde (PFA) voor.
      1. Voeg 40 g Paraformaldehyde toe aan 1 L PBS (0,1 M, pH 7,4).
      2. Verwarm de PFA-oplossing tot 60 − 65 °C en meng met behulp van een magnetische roerder.
        Opmerking: de temperatuur mag niet hoger zijn dan 65 °C.
      3. Voeg enkele druppels NaOH (1 N) met een druppelaar toe om de PFA volledig op te lossen.
      4. Filtreer de PFA-oplossing met gemiddeld tot fijn filtreerpapier en bewaar bij 4 °C.
        Opmerking: de oplossing is goed voor een maand.
  2. Voer dieren anesthesie en perfusie.
    Opmerking: twaalf maanden oude B6SJL-TG APP SwFlLon, PSEN1 * M146L * L286V, 1136799Vas/J (5 × FAD) leeftijds afgestemde controle muizen (n = 6 per groep) werden gekocht bij verkopers en gefokt in het dieren huis van Saginaw Valley State University. Genotypering werd bevestigd door de polymerase kettingreactie (PCR) zoals eerder beschreven7. Menselijk AD hersenweefsel omvat post mortem AD hersenweefsel en leeftijdsgebonden controle weefsel.
    1. Anesthetiseer het dier met een geschikte verdovingsmiddel, zoals natriumpentobarbital (390 mg/kg lichaamsgewicht), of een mengsel van ketamine/xylazine (tot 80 mg/kg lichaamsgewicht ketamine en 10 mg/kg lichaamsgewicht xylazine) door intraperitoneale injectie (27 G naald en 1 mL spuit). Controleer het niveau van de anesthesie door het knijpen van een teen. Als het dier niet reageert, is het klaar voor een perfusie operatie.
    2. Plaats verdoken dier in de liggende positie op de perfusie chirurgie lade en het gebruik van kleine Iris schaar maken een incisie aan de achterste uiteinde van de linker ventrikel.
    3. Plaats een 22 G perfusie naald aan de linker ventrikel en maak een kleine incisie aan de rechter oorschelp om perfusievloeistof uit het lichaam te verwijderen. Gebruik een met zwaartekracht gevoed perfusie systeem om de ijskoude perfusievloeistof (0,1 M PBS, pH 7,4) gedurende 5 − 6 minuten te laten stromen (debiet 20 − 25 ml/min).
      Opmerking: een heldere lever is de indicator van een optimale perfusie.
    4. Zet de buffer klep op een ijskoude 4% Paraformaldehyde oplossing voor bevestiging en laat deze gedurende 8 − 10 minuten stromen.
      Opmerking: Tremor gevolgd door verharde of stijve ledematen zijn indicatoren van goede fixatie.
    5. Verwijder de hersenen uit de schedel met behulp van een schaar. Gebruik een spatel, verzamel de hersenen en plaats deze in een Injectieflacon van 4% PFA (ten minste 10x het volume van het hersenvolume) en bewaar deze bij 4 °C tot verder gebruik.

2. weefsel verwerking

  1. Cut cryostaat secties.
    1. Breng de hersenen over naar gegradeerde sucrose-oplossingen (10%, 20% en 30%) en bewaren bij 4 °C voor 24 uur per stuk, tot gebruik.
    2. Gebruik een cryostaat bij-22 °C, snijd 40 μm dikke delen. Verzamel 10 − 20 secties per put in een 6-put plaat gevuld met PBS en natrium natriumazide (0,02%).
  2. Paraffine insluiten de secties voor muis en menselijk hersenweefsel.
    1. Voor paraffine secties, dehydraat de geperfundeerd en 24 h post-vast hersenweefsel met gesorteerde alcoholen (50%, 70%, 90%) voor 2 h elk, gevolgd door 100% alcohol 2x voor 1 h elk), en vervolgens met xyleen 2x voor 1 h elk) bij kamertemperatuur.
    2. Penetreren het weefsel met xyleen-paraffine (1:1) 2x voor 1 uur bij 56 °C in een conische glazen kolf bedekt met aluminiumfolie.
    3. Dompel het weefsel onder in gesmolten paraffine (56 °C) gedurende 4 − 6 uur.
    4. Snijd 5 μm dikke delen met behulp van een roterende microtoom bij kamertemperatuur en plaats ze in een weefselwaterbad van 45 °C.
  3. Histochemisch etikettering van de Aβ-plaques in de cryostaat-secties met cur.
    1. Spoel de secties uit stap 2.1.2 met PBS (pH 7,4) 3x voor 5 min elk.
    2. Dompel de secties onder in 70% ethanol gedurende 2 minuten bij kamertemperatuur.
    3. Los voorraad cur (1 mM) op in methanol en Verdun met 70% ethanol om een uiteindelijke werkconcentratie van 10 μM te verkrijgen.
    4. Dompel de secties met een werkende cur-oplossing gedurende 1 − 5 min bij kamertemperatuur op een shaker bij 150 rpm.
    5. Gooi de huidige oplossing weg en was met 70% ethanol 3x voor 2 minuten per stuk.
    6. Zet de secties op poly-L-lysine gecoate glazen dia's en monteer met een dekglaasje met behulp van organische montage media, zoals distyreen weekmaker xyleen (DPX).
    7. Weergave onder een fluorescentiemicroscoop met 480/550 nm excitatie/emissie filters.
  4. Histochemisch etikettering van de Aβ-plaques in de met paraffine ingesloten muis en menselijke hersen secties met cur.
    1. Deparaffine de weefsel secties uit stap 2.2.4 met xyleen 2x voor 5 min elk bij kamertemperatuur.
    2. Hydrateer met gesorteerde alcohol oplossingen (100%, 80%, 70%, 50% voor elk 1 min) en met gedistilleerd water 2x gedurende 5 min bij kamertemperatuur.
    3. Vlekkendelen met cur (10 μM) gedurende 10 min bij kamertemperatuur in het donker, schudden bij 150 rpm. Wassen met 70%, 90%, en 100% alcohol voor 2 min elk.
    4. Helder met xyleen 2x voor 5 min elk en cover slip met DPX.
    5. Visualiseer onder een fluorescentiemicroscoop zoals vermeld in stap 2.3.7.
  5. Colocaliseren cur met het Aβ-antilichaam in Aβ-plaques en oligomeren.
    1. Was cryostatiesecties uit stap 2.1.2 met PBS 3x in een 12-put plaat.
    2. Blokkeer de secties met 10% normaal geiten serum (NGS) opgelost in PBS met 0,5% Triton-X-100 bij kamertemperatuur gedurende 1 uur.
    3. Gooi de blokkerende oplossing weg. Inbroed de secties met Aβ-specifieke antilichamen (6E10 of A11, verdund 1:200) opgelost in verse blokkerende oplossing met 10% NGS en 0,5% Triton-X100 's nachts bij 4 °C in een shaker bij 150 rpm.
    4. Gooi de antilichaam oplossing weg en was de secties met PBS 3x voor 10 min elk.
    5. Inbroed met de secundaire antilichaamtag met rode de (bijv. Alexa 594) voor 1 uur bij kamertemperatuur in het donker.
    6. Wassen met PBS 3x voor 10 min elk.
    7. Wassen met 70% alcohol 1x.
    8. Inincuberen de delen met cur (10 μM) gedurende 5 min bij kamertemperatuur.
    9. Wassen met 70% alcohol 3x voor 1 min elk.
    10. Dehydraat met 90% en 100% alcohol gedurende 1 minuut, helder met xyleen 2x voor 5 min elk, en monteer op dia's met behulp van DPX.
    11. Visualiseer met behulp van een fluorescentiemicroscoop met geschikte excitatie/emissie filters voor de rode en groene signalen.
    12. Voor intracellulaire Aβ-colokalisatie, vlek de secties met behulp van Aβ-antilichaam (6E10), restain met cur bij kamertemperatuur in het donker met schudden bij 150 rpm, en contra vlek met ofwel Hoechst-33342 (1 mg/ml) en/of DAPI (1UG/ml) gedurende 10 minuten bij kamertemperatuur in het donker met schudden bij 150 rpm. Wassen met PBS 3x.
    13. Maak afbeeldingen met de rode, groene en blauwe filters met een 100x-doelstelling (totale vergroting 1.000 x).
  6. Label Aβ plaques met thio-S, CR, en FJC.
    Opmerking: gedetailleerde protocollen voor thio-S en CR-labeling werden eerder gemeld7.
    1. Was voor FJC-kleuring de vrij zwevende secties die uit stap 2.1.2 zijn verkregen met PBS 3x gedurende 5 minuten per stuk.
    2. Leg de delen in een 12-put plaat en beits met FJC (0,001%) gedurende 10 min in het donker bij kamertemperatuur.
    3. Gooi de FJC-oplossing weg en was elke 5 minuten met PBS 3x.
    4. Incuberen met ammoniumchloride (NH4Cl, 50 mm opgelost in PBS) gedurende 10 min bij kamertemperatuur.
    5. Gooi de NH4cl-oplossing weg en was elke 5 minuten met PBS 3x.
    6. Na de stappen in punt 2,4, dehydraat met gesorteerde alcohol oplossingen, Clear, Mount en View onder een fluorescentie Microscoop met behulp van 450/520 nm excitatie/emissie filters.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Resultaten

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Curcumine etiketten Aβ plaques binnen een minuut. Wanneer we gekleurd 5xFAD weefsel met cur, we vonden dat cur label Aβ plaques binnen 1 min. Hoewel de toegenomen incubatietijd met de cur de intensiteit van de fluorescentie van Aβ-plaques enigszins verhoogde, was het aantal waargenomen Aβ-plaques niet significant verschillend tussen 1 min en 5 min kleurings tijd (Figuur 1).

Cur kan Aβ-plaques labele...

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Discussie

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Onze hypothese was dat cur zou kunnen worden gebruikt als de snelste, eenvoudigste en minst dure manier om Aβ-plaques in het postmortemad hersenweefsel te labelen en te afbeeldenten in vergelijking met andere klassieke amyloïde bindende kleurstoffen, evenals Aβ-specifieke antilichamen. De doelstellingen van deze studie waren het bepalen van de minimumtijd die nodig is om Aβ-plaques te labelen en te afbeelden door cur in het postmortemad hersenweefsel en te bepalen of cur kan worden gebruikt als alternatief voor Aβ-antili...

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Openbaarmakingen

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

De auteurs hebben niets te onthullen.

Dankbetuigingen

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Ondersteuning voor deze studie kwam van het veld Neurosciences Institute op Ascension of St. Mary's.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Materialen

Lijst van materialen gebruikt in dit artikel
NaamBedrijfCatalogusnummerOpmerkingen
4′,6-diamidino-2-phenylindole (DAPI)IHC wereld, Woodstock, MD
Aanimal model van de ziekte van AlzheimerJackson's laboratorium, Bar Harbor, ME
Absolute alcoholVWR, Radnor, PA
Alexa 594Santacruz Biotech, Dallas, TX
Antilichaam 6E10Biolegend, San Diego, CA
Antilichaam A11Millipore, Burlington, MA
Samengestelde lichtmicroscoopOlympus, Shinjuku, JapanOlympus BX51
Congo roodSigma, St. Louis, MO
CryostatGMI, Ramsey, MNLeicaCM1800
CurcumineSigma, St. Louis, MO
DinatriumwaterstoffosfaatSigma, St. Louis, MO
Dystyrene kunststofverzachter xyleenBDH, Dawsonville, GA
FilterpapierenFisher scientific, Pittsburgh, PA
Hoechst-33342Sigma, St. Louis, MO
Omgekeerde fluorescentiemicroscoopLeica, Buffalo Grove, ILLeica DMI 6000B
Omgekeerde fluorescentiemicroscoopOlympus, Shinjuku, JapanOlympus 1x70
Normaal geitenserumSigma, St. Louis, MO
ParaffineSigma, St. Louis, MO
ParaformaldehydeSigma, St. Louis, MO
Poly-lysine gecoate geladen glasplaatGlobe Scientific Inc, Mahwah, NJ
KaliumchlorideSigma, St. Louis, MO
KaliumdiwaterstoffosfaatSigma, St. Louis, MO
NatriumazietSigma, St. Louis, MO
NatriumchlorideSigma, St. Louis, MO
NatriumhydroxideEMD Millipore, Burlington, MA
NatriumpentobarbitalVortex Pharmaceuticals limited, Dearborn, MI
Thioflavijn-SSigma, St. Louis, MO
Triton-X-100Sigma, St. Louis, MO
XyleenVWR, Radnor, PA

Referenties

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Cummings, J. L. Alzheimer's disease. New England Journal of Medicine. 351 (1), 56-67 (2004).
  2. Jack, C. R., Holtzman, D. M. Biomarker modeling of Alzheimer's disease. Neuron. 80 (6), 1347-1358 (2013).
  3. Tarawneh, R., Holtzman, D. M. The clinical problem of symptomatic Alzheimer disease and mild cognitive impairment. Cold Spring Harbor Perspectives in Medicine. 2 (5), (2012).
  4. Selkoe, D. J. Cell biology of protein misfolding: the examples of Alzheimer's and Parkinson's diseases. Nature Cell Biology. 6 (11), 1054-1061 (2004).
  5. Hardy, J., Allsop, D. Amyloid deposition as the central event in the aetiology of Alzheimer's disease. Trends in Pharmacological Sciences. 12 (10), 383-388 (1991).
  6. Chen, M., et al. Use of curcumin in diagnosis, prevention, and treatment of Alzheimer's disease. Neural Regeneration Research. 13 (4), 742-752 (2018).
  7. Maiti, P., et al. A comparative study of dietary curcumin, nanocurcumin, and other classical amyloid-binding dyes for labeling and imaging of amyloid plaques in brain tissue of 5x-familial Alzheimer's disease mice. Histochemistry and Cell Biology. 146 (5), 609-625 (2016).
  8. Maiti, P., Dunbar, G. L. Use of Curcumin, a Natural Polyphenol for Targeting Molecular Pathways in Treating Age-Related Neurodegenerative Diseases. International Journal of Molecular Sciences. 19 (6), (2017).
  9. Maiti, P., Dunbar, G. L. Comparative Neuroprotective Effects of Dietary Curcumin and Solid Lipid Curcumin Particles in Cultured Mouse Neuroblastoma Cells after Exposure to Abeta42. International Journal of Alzheimer's Disease. , (2017).
  10. den Haan, J., Morrema, T. H. J., Rozemuller, A. J., Bouwman, F. H., Hoozemans, J. J. M. Different curcumin forms selectively bind fibrillar amyloid beta in post mortem Alzheimer's disease brains: Implications for in-vivo diagnostics. Acta Neuropathologica Communications. 6 (1), 75(2018).
  11. Koronyo, Y., et al. Retinal amyloid pathology and proof-of-concept imaging trial in Alzheimer's disease. JCI Insight. 2 (16), (2017).
  12. Koronyo, Y., Salumbides, B. C., Black, K. L., Koronyo-Hamaoui, M. Alzheimer's disease in the retina: imaging retinal abeta plaques for early diagnosis and therapy assessment. Neurodegenerative Diseases. 10 (1-4), 285-293 (2012).
  13. Koronyo-Hamaoui, M., et al. Identification of amyloid plaques in retinas from Alzheimer's patients and noninvasive in vivo optical imaging of retinal plaques in a mouse model. NeuroImage. 54 (Suppl 1), S204-S217 (2011).
  14. Ran, C., et al. Design, synthesis, and testing of difluoroboron-derivatized curcumins as near-infrared probes for in vivo detection of amyloid-beta deposits. Journal of the American Chemical Society. 131 (42), 15257-15261 (2009).
  15. Beach, T. G. The Sun Health Research Institute Brain Donation Program: Description and Experience, 1987-2007. Cell Tissue Bank. 9 (3), 229-245 (2008).
  16. Green, S. J., Killiany, R. J. Subregions of the inferior parietal lobule are affected in the progression to AD. Neurobiology of Aging. 31 (8), 1304-1311 (2010).
  17. Ono, K., Hasegawa, K., Naiki, H., Yamada, M. Curcumin has potent anti-amyloidogenic effects for Alzheimer's beta-amyloid fibrils in vitro. Journal of Neuroscience Research. 75 (6), 742-750 (2004).
  18. Garcia-Alloza, M., Borrelli, L. A., Rozkalne, A., Hyman, B. T., Bacskai, B. J. Curcumin labels amyloid pathology in vivo, disrupts existing plaques, and partially restores distorted neurites in an Alzheimer mouse model. Journal of Neurochemistry. 102 (4), 1095-1104 (2007).
  19. Mutsuga, M., et al. Binding of curcumin to senile plaques and cerebral amyloid angiopathy in the aged brain of various animals and to neurofibrillary tangles in Alzheimer's brain. Journal of Veterinary Medical Science. 74 (1), 51-57 (2012).
  20. Tei, M., Uchida, K., Mutsuga, M., Chambers, J. K., Nakayama, H. The binding of curcumin to various types of canine amyloid proteins. Journal of Veterinary Medical Science. 74 (4), 481-483 (2012).
  21. Liu, L., Komatsu, H., Murray, I. V., Axelsen, P. H. Promotion of amyloid beta protein misfolding and fibrillogenesis by a lipid oxidation product. Journal of Molecular Biology. 377 (4), 1236-1250 (2008).
  22. Wu, C., Scott, J., Shea, J. E. Binding of Congo red to amyloid protofibrils of the Alzheimer Abeta(9-40) peptide probed by molecular dynamics simulations. Biophysical Journal. 103 (3), 550-557 (2012).
  23. Wu, C., Wang, Z., Lei, H., Zhang, W., Duan, Y. Dual binding modes of Congo red to amyloid protofibril surface observed in molecular dynamics simulations. Journal of the American Chemical Society. 129 (5), 1225-1232 (2007).
  24. Gutierrez, I. L., et al. Alternative Method to Detect Neuronal Degeneration and Amyloid beta Accumulation in Free-Floating Brain Sections With Fluoro-Jade. ASN Neuro Methods. 10, 1-7 (2018).
  25. Yang, F., et al. Curcumin inhibits formation of amyloid beta oligomers and fibrils, binds plaques, and reduces amyloid in vivo. Journal of Biological Chemistry. 280 (7), 5892-5901 (2005).

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Herprints en machtigingen

Toestemming aanvragen om de tekst of afbeeldingen van dit JoVE-artikel te hergebruiken

Toestemming aanvragen

Trefwoorden

Curcumine labelingfluorescentiemicroscopiehistochemische labelingperfusieprotocolcryostaatsnijdenparaffinesnijdencurcumineconcentratieziekte van Alzheimer

Gerelateerde artikelen