Methodenartikel

Chemisch-geïnduceerde huid carcinogenese model met behulp van Dimethylbenz [a] anthraceen en 12-O-Tetradecanoyl Phorbol-13-acetaat (DMBA-TPA)

DOI:

10.3791/60445

⸱

19 december 2019

 ,  ,  ,  , 
1Faculty of Medicine and Health Technology, Tampere University and Tampere University Hospital, 2Department of Clinical Microbiology, Fimlab Laboratories

* These authors contributed equally

In dit artikel

Samenvatting

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Tweetraps huid carcinogenese wordt geïnduceerd door twee topisch toegepaste chemicaliën. Een mutagene stof 7, 12-dimethylbenz [a] anthraceen) veroorzaakt mutaties in de epidermale cellen en een continue toepassing van de algemene groeistimulator 12-O-tetradecanoyl phorbol-13-acetaat versnelt de vorming van papillomavirus.

Samenvatting

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Kanker is een van de meest verwoestende menselijke ziekten. Experimentele kanker modellen zijn belangrijk om inzicht te krijgen in het complexe samenspel van verschillende celtypen en genen in het bevorderen van tumorprogressie en om een platform te bieden voor het testen van de werkzaamheid van verschillende therapeutische benaderingen. Een van de meest gebruikte experimentele inflammatoire kanker modellen is de DMBA-TPA tweetraps huid carcinogenese model. Tumor vorming wordt in dit model geïnduceerd door de actuele toepassing van twee verschillende chemicaliën, 7, 12-dimethylbenz [a] antraceen (DMBA) en 12-O-tetradecanoyl phorbol-13-acetaat (TPA), die samen de papillomavirus vorming in de huid veroorzaken. Omdat het primaire resultaat papillomavirus-vorming in de huid is, is het model een ideale, betrouwbare en reproduceerbaar manier om beide tumor initiatie (tumor vrije overleving) en tumorprogressie (aantal en grootte van zichtbare tumoren) aan te pakken. De effecten van de DMBA-TPA-behandeling worden overgebracht via een ontstekingsmechanisme, waardoor dit model vooral geschikt is om de rol van het immuunsysteem bij tumorvorming te bestuderen. Dit model is echter beperkt tot de huid en andere oppervlakken waar de chemicaliën kunnen worden aangebracht. In dit artikel vindt u een gedetailleerd protocol om het model te kunnen gebruiken.

Inleiding

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Kanker is een van de belangrijkste doodsoorzaken in de wereld. Daarom is er een eis om betrouwbare experimentele ziekte modellen te ontwikkelen om een beter begrip van de ziekte te verkrijgen en om mogelijke therapeutische benaderingen te onderzoeken. Een van de meest gebruikte experimentele in vivo modellen om de ontwikkeling van huidkanker te bestuderen is de chemisch geïnduceerde tweetraps huid carcinogenese model1,2. Het model biedt een hulpmiddel om tumor initiatie, promotie en progressie te bestuderen naast specifieke gebeurtenissen zoals immuuncelinfiltratie en angiogenese.

Om het tweetraps huid carcinogenese model te gebruiken, wordt de rughuid van muizen behandeld met twee verschillende chemicaliën die samen tumorvorming induceren. Het model wordt geïnitieerd met een lage dosis van de mutagene stof, DMBA, gevolgd door langdurige blootstelling aan de tumor promotor, TPA3 (Figuur 1). Dmba muteert DNA willekeurig door covalente adducten te vormen met het DNA van epidermale cellen en primaire Keratinocyt stamcellen4,5,6,7. Sommige van deze willekeurige mutaties vinden plaats in een proto-oncogen, zoals Hras1 (mutaties in kras en Nri's worden ook gedetecteerd) en de omzetting van proto-oncogenen naar oncogenen stimuleert de tumorvorming onder de juiste stimuli. TPA, op zijn beurt, is de meest gebruikte tumor groeibevorderende agent. Het moleculaire doelwit is proteïne kinase C (PKC)8. TPA activeert ook WNT/β-bovenbouw in signalering die cruciaal is voor tumorvorming in model9. Herhaalde en langdurige blootstelling aan de bevorderend middel leidt tot verbeterde celsigna lering, verhoogde productie van groeifactoren, en een lokale ontstekingsreactie, die duidelijk zijn als gevolg van verhoogde DNA-synthese en inflammatoire celinfiltratie in de behandelde huid.

De belangrijkste ontstekingsmediatoren in het DMBA-TPA-model zijn geïdentificeerd10. Interleukine-17a (Il-17a) is bekend dat het bijzonder tumorigene in de dmba-TPA model11,12. Het werkt in synergie met Interleukine 6 (Il-6) en participeert in macrofaag en neutrofiele recruitment13,14. Daarnaast is aangetoond dat CD4+ T-cellen en neutrofielen tumorigene zijn in het dmba-TPA-model. Tot slot, macrofagen kunnen ook bevorderen tumorvorming in het model15,16,17.

Tijdens de promotie fase wordt de celproliferatie van de gemuleerde cellen versterkt en wordt een aanhoudende hyperplasie van de epidermis gehandhaafd1. Dit leidt tot de ontwikkeling van papillomavirus in de huid in 10 – 20 weken, waarna de papillomas beginnen te converteren naar kwaadaardige tumoren, plaveiselcel carcinomen (SCCs)2. Echter, minder dan 10% van de papillomas vooruitgang naar maligniteit, hoewel dit percentage ook afhangt van de genetische achtergrond van de muizen2,18. Decennia lang was het niet bekend wat voor soort cellen werden aanvankelijk gemuleerd in de tumoren leidt tot maligniteit, hoewel sommige studies duidelijk onderscheiden kenmerken in de kwaadaardige tumoren had gemeld in vergelijking met goedaardige papillomas19,20. Echter, recente studies hebben sterk toegenomen ons begrip op de klonale oorsprong van tumorvorming in de DMBA-TPA model21. 22. 23. aangetoond is dat zowel epitheliale cellen als haarfollikel stamcellen in het beenmerg bijdragen aan de tumorvorming22. Stage-specifieke Lineage tracing studies hebben onthuld dat goedaardige papillomas van monoklonale oorsprong zijn, maar ze rekruteren nieuwe epitheliale celpopulaties21,23. Echter, slechts één van de cel klonen fungeert als een driver voor carcinogenese; het bevat een Hras-mutatie23. De progressie naar carcinoom vorming wordt geassocieerd met een van klonen sweep23.

De kankerverwekkende stof DMBA initieert de papillomavirus-formatie en TPA bevordert de tumorgroei. Vandaar, de tumor initiatie kan afzonderlijk worden bestudeerd van de promotie door het onderbreken van het experiment voor de TPA behandelingsperiode. Als de tumorprogressie wekelijks wordt bestudeerd biedt het een grote kans voor gedetailleerde tumorgroei analyse gedurende de studie. Omdat de tumoren worden gegenereerd door externe chemicaliën, is een oncogene mutatie in de kiembaan overbodig. Het bestuderen van de effecten van een genetische achtergrond (bijv. Knockout/transgene vs. wild type) op tumorvorming is dus rechtlijnig2. Kortom, de DMBA/TPA huidkanker model is een bijzonder nuttige aanpak voor het bestuderen van de rol van het immuunsysteem in de progressie van de tumor, alsmede voor de evaluatie van de inleiding van de tumor en promotie stappen onafhankelijk of onderling afhankelijk.

figure-introduction-1
Figuur 1: DMBA-TPA-geïnduceerde huid carcinogenese modeloverzicht. De kankerverwekkende stof DMBA wordt topisch toegepast om DNA-mutaties in de initiatie fase van het model te induceren. De groeibevorderende agent TPA wordt 2 x per week toegediend om de celproliferatie tijdens de promotie fase te verbeteren, wat leidt tot de ontwikkeling van papillomas in de huid. Dieren worden geofferd nadat de papillomavirus-reactie een plateau bereikt, meestal binnen weken 15 – 20, afhankelijk van de genetische achtergrond van de muizen. Een klein deel van de papillomas kan binnen 20 – 50 weken verder uitgroeien tot Scc's. Voor het bestuderen van vroege gebeurtenissen in de initiatie-en vroege promotie fase kunnen monsters worden verzameld (bijvoorbeeld kort na de tweede TPA-toepassing). Een representatieve foto en hematoxyline en eosine gekleurd doorsnede van papillomas op een C57BL/6 muis huid na 19 weken behandeling worden getoond. Schaalbalk = 0,1 mm. Klik hier om een grotere versie van dit cijfer te bekijken.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Het hier beschreven protocol is goedgekeurd door de nationale Commissie voor dierenethiek van Finland (protocolnummer ESAVI/23659/2018).

1. proefdieren, reagentia en apparatuur

  1. Gebruik leeftijd en seks-gematchte muizen. Start de studie met een leeftijd van 7 – 9 weken, omdat de huid in de meeste muizen zich in telogene bevindt (de rustfase) rond die leeftijd2.
  2. Observeer het gedrag van de dieren tijdens de studie en als ze vechten, wat vaak gebeurt met mannen, huis ze apart. Gevechten kunnen snijden in de huid veroorzaken, die tumorvorming bevorderen. Vrouwelijke muizen hebben de voorkeur vanwege hun minder agressief gedrag. De typische experimentele groepsgrootte varieert tussen de 8 – 20 dieren per groep24,25,26,27.
    Opmerking: vermogens berekeningen op basis van de biologische variantie in eerdere studies helpen bij het kiezen van een voldoende grote groepsgrootte. De stammen die worden gebruikt als voorbeelden in dit artikel zijn Balb/c en C57BL/6. Echter, veel andere muis stammen zoals sencar en FVB zijn gebruikt met de dmba-TPA-model, evenals Wistar en Sprague-Dawley ratten2,28,29. Een licentie van het nationale of lokale Comité van dierlijke werk is nodig voor de inleiding van de studie. Naast algemene welzijnsoverwegingen zijn de modelspecifieke eindpunten meestal plaveiselcelcarcinoom (SCC) en een infectie van de huid. Krassen in de huid als gevolg van jeuk na het aanbrengen van de tumorigene chemicaliën in aceton is typerend, maar anders moeten de dieren geen tekenen van ongemak vertonen. Regelmatig wegen (bijvoorbeeld 2x per maand) helpt bij het evalueren van het welzijn van de dieren.
  3. Gebruik de DMBA en TPA, beide verdund in aceton. De werkconcentratie van DMBA is 250 g/L. Een dosis voor één dier is 50 μg DMBA in 200 μL aceton. De stam concentratie van TPA is 125 g/L en de behandelings concentratie 25 g/L. Een TPA-dosis voor één dier is 5 μg in 200 μL aceton.
    Letop: dmba is schadelijk bij inslikken en kan kanker veroorzaken. Aceton verdampt snel en is ontvlambaar. Het kan leiden tot duizeligheid en irriteren ogen. Gebruik een ademhalingsmasker en/of werk onder een vacuüm stroom. Verander handschoenen na het hanteren van een van deze chemicaliën. Kooien voor individueel geventileerde voorkomen de verspreiding van de chemicaliën tijdens de behuizing van de muizen. Verzamel na het aanbrengen de pipetpunten die worden gebruikt voor het hanteren van de DMBA en gooi deze weg als gevaarlijk afval.
    Opmerking: de dmba moet beschermd zijn tegen licht. De verdunde TPA wordt bewaard in-20 °C, bij voorkeur beschermd tegen licht.
  4. Aanschaffen van de volgende apparatuur: een schaal, een gewone scheerapparaat voor de vacht, pipetten en tips van een geschikte grootte, een gewone liniaal, een digitale camera, een Kladblok en een pen of een computer voor het opnemen van de papillomas, een geïnhaleerd anesthesie systeem of een muis fixator met een opening op de achterkant, en een kooldioxide-narcotische systeem voor het opofferen van muizen.

2. huid papilloma inductie en promotie

  1. Scheer de achterste huid en weeg het dier. Later, Scheer de huid wanneer nodig, maar niet op het moment van de chemische blootstelling.
    Letop: Wees voorzichtig bij het scheren rond de papillomas en Vermijd het maken van bezuinigingen op de huid. Weeg elk dier elke 2 weken om eventuele gewichtsverlies op te merken.
  2. Breng 50 μg DMBA in 200 μL aceton topisch op het geschoren gebied aan met behulp van een pipet 48 h na het scheren van de vacht. Indien nodig, bedwingen het dier met behulp van lichte inhalatie anesthesie of een muis fixator.
  3. Na 7 dagen, geef de eerste dosis TPA. Breng 5 μg TPA aan in 200 μL aceton topisch met een pipet 2x per week, bij voorkeur maandag en donderdag of dinsdag en vrijdag.
  4. Tellen, opnemen en fotograferen van de papillomas elke week. Een palpabele massa groter dan 1 mm in diameter wordt als een papillomavirus beschouwd als het langer dan 1 week blijft. Markeer elke afzonderlijke papillomavirus op een kaart en vermeld de grootte wekelijks. Bewaar digitale foto's.

3. dieren offer en Monsterverzameling

  1. Ga door met de behandeling totdat de tumor reactie een plateau bereikt. Over het algemeen zal de papillomavirus-last naar verwachting 10 – 20 weken na de initiatie toenemen, afhankelijk van de gebruikte muis stam. Het plateau wordt verwacht in 15 – 20 weken. Een klein deel van de papillomas (onder 3%) kan zich ontwikkelen tot Scc's binnen 20 – 50 weken2.
  2. Offer de dieren 24 h na de laatste TPA-toepassing. Gebruik kooldioxide-narcose met cervicale dislocatie of een andere geschikte methode.
  3. Afhankelijk van de onderzoeksvraag, verzamelen van de juiste monster materiaal van de dieren30,31.
    1. Neem bijvoorbeeld bloedmonsters voor het opofferen en scheid het plasma.
    2. Snij stukjes van de huid voor de kleuring van immunohistochemie (IHC) (bijv. hematoxyline en eosine, prolifererende of inflammatoire cellen).
    3. Gebruik biopsie stoten om huid stukjes te verzamelen met papillomavirus weefsel of niet-papillomavirus (behandelde) huid voor genexpressie (bijv. qPCR) en/of eiwit analyses (bijv. Western Blot of ELISA).
    4. Verzamel een stukje van de milt en huid-afvoerende lymfeklieren voor Flowcytometrie analyse als meer gedetailleerde analyse van de immuuncelpopulaties gewenst is. U ook de epidermale en dermale lagen scheiden voor verdere analyses.

4. statistieken

  1. Teken een Kaplan-Meier-overlevings curve van de papilloom vrije tijd en gebruik de mantel-Cox log-Rank test voor de overleving. Teken een lineaire curve van het aantal papillomas per week. Omdat dit aantal gegevens is, gebruikt u een niet-lineaire regressiemodel. Raadpleeg indien nodig een statisticus.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Resultaten

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Het belangrijkste resultaat is de overleving (d.w.z. papillomavirus vrije) tijd tussen de behandelings-of genotype groepen. Het secundaire resultaat is het aantal papillomas per week in elke groep (Figuur 2). De verwachte resultaten zijn een statistisch significant verschil in het papillomavirus vrije tijd en in het aantal papillomen tussen de experimentele (twee of meer) groepen. Het wordt aanbevolen om het aantal papillomas te tellen en een curve te tekenen tijdens de promotie fase (TPA) o...

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Discussie

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

DMBA-TPA-geïnduceerde huidkanker is een van de meest gebruikte kanker modellen omdat het zeer reproduceerbaar is en informatie verschaft over de progressie van de tumor van initiatie tot maligniteit. De belangrijkste uitkomst maatregel, de vorming van papillomavirus, is eenvoudig en betrouwbaar kwantitatief. Het model behandelt beide tumor initiatie (tumor-vrije overleving) en progressie (tumor aantallen en-maten) tegelijkertijd. Het model is geschikt voor het bestuderen van verschillende verbindingen, zoals potentiële t...

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Openbaarmakingen

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

De auteurs hebben niets te onthullen.

Dankbetuigingen

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Dit werk werd gefinancierd door de Academie van Finland (subsidies 25013080481 en 25013142041 (I.J.), 286377 en 295814 (M.P.), 287907 (T.J.)), Päivikki en Sakari Sohlberg Foundation (M.P., T.J.), Finnish Medical Foundation (T.P.), het competitieve State Research Financiering van het gebied van de deskundige verantwoordelijkheid van het universitair ziekenhuis van Tampere (Grant 9V049 en 9X044 (M.P.), 9X011 en 9V010 (T.J.)), de competitieve staats onderzoeksfinanciering van het deskundige verantwoordelijkheidsgebied van Fimlab Laboratories (Grant X51409 (I.J.)), tays Support Foundation (I.J., M.P., T.J.), Tampere Tuberculosefonds (I.J., M.P., T.J.), de Finse culturele stichting (M.V.), de Paulo Foundation (T.P.), kanker Sociëteit van Finland (M.P.), en de Emil Aaltonen Foundation (T.P.).

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Materialen

```html

Lijst van materialen gebruikt in dit artikel
NaamBedrijfCatalogusnummerOpmerkingen
1000 ul RPT XL Graduated Filter Tip (Steriele), RefillStarlabS1182-1730-C
300 ul RTP Graduated Filter Tip (steriele), RefillStarlabS1180-9710-C
7,12-Dimethylbenz[a]anthracene (DMBA)SigmaD3254-100MGSchadelijk bij inslikken en kan kanker veroorzaken. Beschermd tegen licht bewaren.
AcetonSigma1000141011Verdampt snel en is ontvlambaar.
Attane vet 1000 mg/gPiramal Critical Care LimitedVloeibaar isofluraan voor inademing
Batterij-aangedreven Clipper IsisAlbert Kerlb GmbHGT421Voor het scheren van de vacht
CONTRAfluran-RestgasfilterZeoSys GmbHVoor anesthesie
Linex Nature N1030 Lineaal 30 cmStaples Business Advantage60383Voor het meten van papillomen
Medium CO2-kamer 300 x 200 x 200mm - RoodVetTech Solutions LtdAN045ARVoor slacht
MekasoftMekalasi23008Tabelovertrek
Muizen (Balb/c JRj)Janvier labsAndere stammen ook mogelijk
Muizen (C57BL/6JRj)Janvier labsAndere stammen ook mogelijk
Panasonic Lumix DMC-FS5 Digitale CameraPanasonic
ParaformaldehydeMerck30525-89-4Voor histologie-monsters
Phorbol 12-myristaat 13-acetaat ook bekend als 12-Otetradecanoylphorbol-13-acetaat (TPA)EnzoBML-PE160-0001
Precisiebalans PLJ-C/PLJ-GKERN & SOHN GmbHPLJ 600-3CM
Vooraf ingestelde CO2-systeem-2-kamer-S/S-behuizingVetTech Solutions LtdAN044BXVoor slacht
RNAlaterQiagen76104Voor nucleïnezuurmonsters
Tacta pipette 100-1000 ulSartoriusLH-729070
Tacta pipette 20-200 ulSartoriusLH-729060
UNO Anesthetisch sleutelvulmiddelScintica instrumentation inc.Voor anesthesie
UNO Gezichtsmasker voor MuisScintica instrumentation inc.Voor anesthesie
UNO FM2200 FlowmeterScintica instrumentation inc.Voor anesthesie
UNO GasafvoereenheidScintica instrumentation inc.Voor anesthesie
UNO InductieboxScintica instrumentation inc.Voor anesthesie
UNO200VAP VerdamperScintica instrumentation inc.Voor anesthesie
```

Referenties

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. DiGiovanni, J. Multistage carcinogenesis in mouse skin. Pharmacology & Therapeutics. 54 (1), 63-128 (1992).
  2. Abel, E. L., Angel, J. M., Kiguchi, K., DiGiovanni, J. Multi-stage chemical carcinogenesis in mouse skin: fundamentals and applications. Nature Protocols. 4 (9), 1350-1362 (2009).
  3. Perez-Losada, J., Balmain, A. Stem-cell hierarchy in skin cancer. Nature Reviews. Cancer. 3 (6), 434-443 (2003).
  4. Bonham, K., et al. Activation of the cellular Harvey ras gene in mouse skin tumors initiated with urethane. Molecular Carcinogenesis. 2 (1), 34-39 (1989).
  5. Quintanilla, M., Brown, K., Ramsden, M., Balmain, A. Carcinogen-specific mutation and amplification of Ha-ras during mouse skin carcinogenesis. Nature. 322 (6074), 78-80 (1986).
  6. Nelson, M. A., Futscher, B. W., Kinsella, T., Wymer, J., Bowden, G. T. Detection of mutant Ha-ras genes in chemically initiated mouse skin epidermis before the development of benign tumors. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 89 (14), 6398-6402 (1992).
  7. Morris, R. J. A perspective on keratinocyte stem cells as targets for skin carcinogenesis. Differentiation. 72 (8), 381-386 (2004).
  8. Chung, Y. W., Kim, H. K., Kim, I. Y., Yim, M. B., Chock, P. B. Dual function of protein kinase C (PKC) in 12-O-tetradecanoylphorbol-13-acetate (TPA)-inducec manganese superoxide dismutase (MnSOD) expression: activation of CREB and FOXO3a by PKC-alpha phosphorylation and by PKC-mediated inactivation of Akt, respectively. The Journal of Biological Chemistry. 286 (34), 29681-29690 (2011).
  9. Su, Z., et al. Tumor promoter TPA activates Wnt/β-catenin signaling in a casein kinase 1-dependent manner. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 115 (32), 7522-7531 (2018).
  10. Swann, J. B., et al. Demonstration of inflammation-induced cancer and cancer immunoediting during primary tumorigenesis. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 105 (2), 652-656 (2008).
  11. Wang, L., Yi, T., Zhang, W., Pardoll, D. M., Yu, H. IL-17 enhances tumor development in carcinogen-induced skin cancer. Cancer Research. 70 (24), 10112-10120 (2010).
  12. He, D., et al. IL-17 mediated inflammation promotes tumor growth and progression in the skin. PLoS One. 7 (2), 32126(2012).
  13. Roussel, L., et al. IL-17 promotes p38 MAPDK-dependent endothelial activation enhancing neutrophil recruitment to sites of inflammation. Journal of Immunology. 184 (8), 4531-4537 (2010).
  14. Wanqiu, H., Young-Hee, J., Hyun, S. K., Byung, S. K. Interleukin-6 (IL-6) and IL-17 synergistically promote viral persistence by inhibition cellular apoptosis and cytotoxic T cell function. Journal of Virology. 88 (15), 8479-8489 (2014).
  15. Yusuf, N., et al. Antagonistic roles of CD4+ and CD8+ T-cells in 7,12-dimethylbenz(a)anthracene cutaneous carcinogenesis. Cancer Research. 68 (10), 3924-3930 (2008).
  16. Gong, L., et al. Promoting effect of neutrophils on lung tumorigenesis is mediated by CXCR2 and neutrophil elastase. Molecular Cancer. 12 (1), 154(2013).
  17. Vestweber, D., Wessel, F., Nottebaum, A. F. Similarities and differences in the regulation of leukocyte extravasation and vascular permeability. Seminars in Immunopathology. 36 (2), 177-192 (2014).
  18. Woodworth, C. D., et al. Strain-dependent differences in malignant conversion of mouse skin tumors is an inherent property of the epidermal keratinocyte. Carcinogenesis. 25 (9), 1771-1778 (2004).
  19. Tennenbaum, T., et al. The suprabasal expression of alpha 6 beta 4 integrin is associated with a high risk for malignant progression in mouse skin carcinogenesis. Cancer Research. 53 (20), 4803-4810 (1993).
  20. Hennings, H., Shores, R., Mitchell, P., Spangler, E. F., Yuspa, S. H. Induction of papillomas with a high probability of conversion to malignancy. Carcinogenesis. 6 (11), 1607-1610 (1985).
  21. Auto, Y., et al. Time-Series Analysis of Tumorigenesis in a Murine Skin Carcinogenesis Model. Scientific Reports. 8 (1), 12994(2018).
  22. Park, H., et al. Bone marrow-derived epithelial cells and hair follicle stem cells contribute to development of chronic cutaneous neoplasms. Nature Communications. 9 (1), 5293(2018).
  23. Reeves, M. Q., Kandyba, E., Harris, S., Del Rosario, R., Balmain, A. Multicolour lineage tracing reveals clonal dynamics of squamous carcinoma evolution from initiation to metastasis. Nature Cell Biology. 20 (6), 699-709 (2018).
  24. Dao, V., et al. Prevention of carcinogen and inflammation-induced dermal cancer by oral rapamycin includes reducing genetic damage. Cancer Prevention Research. 5, Philadelphia Pa. 400-409 (2015).
  25. Yeong, L. T., Abdul Hamid, R., Saiful Yazan, L., Khaza’ai, H., Mohtarrudin, N. Low dose triterpene-quinone fraction from Ardisia crispa root precludes chemical-induced mouse skin tumor promotion. BMC Complementary and Alternative Medicine. 15 (1), 431(2015).
  26. Kong, Y. H., Xu, S. P. Salidroside prevents skin carcinogenesis induced by DMBA/TPA in a mouse model through suppression of inflammation and promotion of apoptosis. Oncology Reports. 39 (6), 2513-2526 (2018).
  27. Jung, M., Bu, S. Y., Tak, K. H., Park, J. E., Kim, E. Anticarcinogenic effect of quercetin by inhibition of insulin-like growth factor (IGF)-1 signaling in mouse skin cancer. Nutrition Research and Practice. 7 (6), 439-445 (2013).
  28. Hu, Y. Q., Wang, J., Wu, J. H. Administration of resveratrol enhances cell-cycle arrest followed by apoptosis in DMBA-induced skin carcinogenesis in male Wistar rats. European review for medical and pharmacological sciences. 13, 2935-2946 (2016).
  29. Schweizer, J., Loehrke, H., Hesse, B., Goerttler, K. 7,12-Dimethylbenz[a]anthracene/12-O-tetradecanoyl-phorbol-13-acetate-mediated skin tumor initiation and promotion in male Sprague-Dawley rats. Carcinogenesis. 3 (7), 785-789 (1982).
  30. Vähätupa, M., et al. T-cell-expressed proprotein convertase FURIN inhibits DMBA/TPA-induced skin cancer development. Oncoimmunology. 5 (12), 1245266(2016).
  31. May, U., et al. Resistance of R-Ras knockout mice to skin tumour induction. Scientific Reports. 5, 11663(2015).
  32. Krajewska, M., et al. Image analysis algorithms for immunohistochemical assessment of cell death events and fibrosis in tissue sections. The Journal of Histochemistry and Cytochemistry. 57 (7), 649-663 (2009).
  33. Järvinen, T. A., Ruoslahti, E. Target-seeking antifibrotic compound enhances wound healing and suppresses scar formation in mice. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 107 (50), 21671-21676 (2010).
  34. Schwarz, M., Münzel, P. A., Braeuning, A. Non-melanoma skin cancer in mouse and man. Archives of Toxicology. 87 (5), 783-798 (2013).
  35. Slaga, T. J. SENCAR mouse skin tumorigenesis model versus other strains and stocks of mice. Environmental Health Perspectives. 68, 27-32 (1986).
  36. Goerttler, K., Loehrke, H., Schweizer, J., Hesse, B. Systemic two-stage carcinogenesis in the epithelium of the forestomach of mice using 7,12-dimethylbenz(a)anthracene as initiator and the phorbol ester 12-O-tetradecanoylphorbol-13-acetate as promoter. Cancer Research. 39 (4), 1293-1297 (1979).
  37. Topping, D. C., Nettesheim, P. Promotion-like enhancement of tracheal carcinogenesis in rats by 12-O-tetradecanoylphorbol-13-acetate. Cancer Research. 40, 4352-4355 (1980).
  38. Wille, J. J. Circadian rhythm of tumor promotion in the two-stage model of mouse tumorigenesis. Cancer Letters. 190 (2), 143-149 (2003).
  39. Lee, Y. S., et al. Inhibition of skin carcinogenesis by suppression of NF-κB dependent ITGAV and TIMP-1 expression in IL32γ overexpressed condition. Journal of Experimental & Clinical Cancer Research. 37 (1), 293(2018).
  40. Kiss, A., et al. Cell type-specific p38δ targeting reveals a context-, stage-, and sex-dependent regulation of skin carcinogenesis. International Journal of Molecular Sciences. 20 (7), 1532(2019).
  41. Tomo-o, I., et al. Positron emission tomography imaging of DMBA/TPA mouse skin multi-step tumorigenesis. Molecular Oncology. 4 (2), 119-125 (2010).
  42. Mantovani, A., Allavena, P., Sica, A., Balkwill, F. Cancer-related inflammation. Nature. 454 (7203), 436-444 (2008).
  43. Crusz, S. M., Balkwill, F. R. Inflammation and cancer: advances and new agents. Nature Reviews. Clinical Oncology. 12 (10), 584-596 (2015).
  44. Hennings, L., et al. Malignant conversion and metastasis of mouse skin tumors: a comparison of SENCAR and CD-1 mice. Environmental Health Perspectives. 68, 69-74 (1986).
  45. Gómez-Cuadrado, L., Tracey, N., Ma, R., Qian, B., Brunton, V. G. Mouse models of metastasis: progress and prospects. Disease Models & Mechanisms. 10 (9), 1061-1074 (2017).
  46. Ouhtit, A., Ananthaswamy, H. N. A model for UV-induction of skin cancer. Journal of Biomedicine and Biotechnology. 1 (1), 5-6 (2001).
  47. Day, C. -P., Marchalik, R., Merlino, G., Michael, H. T. Mouse models of UV-induced melanoma: genetics, pathology, and clinical relevance. Laboratory Investigation. 97 (6), 698-705 (2017).

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Herprints en machtigingen

Toestemming aanvragen om de tekst of afbeeldingen van dit JoVE-artikel te hergebruiken

Toestemming aanvragen

Trefwoorden

DMBA TPA modeltumorinitiatietumorprogressiepapilloomvormingimmunohistochemieflowcytometriegenexpressieanalyseeiwitanalyseveiligheidsmaatregelen

Gerelateerde artikelen