We beschrijven hier een methode voor het fabriceren van Ti3C2 MXene micro-elektrode arrays en ze te gebruiken voor in vivo neurale opname.
Een abonnement op JoVE is vereist om deze inhoud te bekijken. Log in of start vandaag met uw gratis proefperiode.
Methodenartikel
We beschrijven hier een methode voor het fabriceren van Ti3C2 MXene micro-elektrode arrays en ze te gebruiken voor in vivo neurale opname.
Implanteerbare micro-elektrode technologieën zijn op grote schaal gebruikt om neurale dynamiek op de microschaal op te helderen om een dieper begrip van de neurale onderbouwing van hersenziekten en letsel te krijgen. Aangezien elektroden worden geminiaturiseerd tot de schaal van individuele cellen, beperkt een overeenkomstige stijging van de interfaceimpedantie de kwaliteit van geregistreerde signalen. Bovendien zijn conventionele elektrodematerialen stijf, wat resulteert in een significante mechanische mismatch tussen de elektrode en het omringende hersenweefsel, wat een ontstekingsreactie uitlokt die uiteindelijk leidt tot een verslechtering van de prestaties van het apparaat. Om deze uitdagingen het hoofd te bieden, hebben we een proces ontwikkeld om flexibele micro-elektroden te fabriceren op basis van Ti3C2 MXeen, een recent ontdekt nanomateriaal dat opmerkelijk hoge volumesvochtcapaciteit, elektrische geleidbaarheid, oppervlaktefunctionaliteit en verwerkbaarheid in waterige dispersies bezit. Flexibele arrays van Ti3C2 MXeen micro-elektroden hebben opmerkelijk lage impedantie als gevolg van de hoge geleidbaarheid en hoge specifieke oppervlakte van de Ti3C2 MXeen films, en ze hebben bewezen uitstekend gevoelig te zijn voor het opnemen van neuronale activiteit. In dit protocol beschrijven we een nieuwe methode voor micropatterning Ti3C2 MXeen in micro-elektrodearrays op flexibele polymere substraten en schetsen we het gebruik ervan voor in vivo micro-elektrocorticografie-opname. Deze methode kan gemakkelijk worden uitgebreid tot MXene elektrode arrays van willekeurige grootte of geometrie voor een reeks andere toepassingen in bio-elektronica te creëren en het kan ook worden aangepast voor gebruik met andere geleidende inkten naast Ti3C2 MXeen. Dit protocol maakt eenvoudige en schaalbare fabricage van micro-elektroden uit op oplossingen gebaseerde geleidende inkten mogelijk, en maakt het specifiek mogelijk om de unieke eigenschappen van hydrofiele Ti3C2 MXeen te benutten om veel van de barrières te overwinnen die de wijdverbreide adoptie van koolstofgebaseerde nanomaterialen voor neurale micro-elektroden op basis van koolstof lang hebben belemmerd.
Inzicht in de fundamentele mechanismen die ten grondslag liggen aan neurale circuits, en hoe hun dynamiek worden veranderd bij ziekte of letsel, is een cruciaal doel voor het ontwikkelen van effectieve therapieën voor een breed scala van neurologische en neuromusculaire aandoeningen. Micro-elektrode technologieën zijn op grote schaal gebruikt om neurale dynamiek op fijne ruimtelijke en temporele schalen op te helderen. Het verkrijgen van stabiele opnames met een hoge signaal-ruisverhouding (SNR) van microschaalelektroden is echter bijzonder uitdagend gebleken. Aangezien de afmetingen van de elektroden worden gereduceerd tot de aanpak van cellulaire schaal, een overeen....
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Alle in vivo procedures in overeenstemming met de National Institutes of Health (NIH) Guide for the Care and Use of Laboratory Animals en werden goedgekeurd door het Institutional Animal Care and Use Committee (IACUC) van de Universiteit van Pennsylvania.
1. Synthese van Ti3C2 MXeen
OPMERKING: De reactieprocedures beschreven in deze sectie zijn bedoeld voor gebruik in een chemische rookkap. Waspassen die in deze procedure zijn opgenomen, zijn bedoeld om te worden gebruikt met gebalanceerde centrifugebuizen. Al het geproduceerde afval wordt beschouwd als gevaarlijk afval en moet op de ....
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Voorbeeld van micro-ECoG-gegevens die zijn geregistreerd op een MXene-micro-elektrodearray, wordt weergegeven in figuur 5. Na toepassing van de elektrodearray op de cortex, werden duidelijke fysiologische signalen onmiddellijk zichtbaar op de opname-elektroden, met ongeveer 1 mV amplitude ECoG-signalen die op alle MXene-elektroden verschenen. Krachtspectra van deze signalen bevestigden de aanwezigheid van twee hersenritmes die vaak werden waargenomen bij ratten onder ketamine-dexmedetomidine.......
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
De in dit protocol beschreven mxeensynthese- en delaminatieprocedure (HF/HCl/LiCl) is gebaseerd op de MILD etsbenadering die gebruik maakte van een LiF/HCl (in situ HF) etchant medium26. De MILD-benadering zorgt ervoor dat grote Ti3C2 vlokken (meerdere μm in zijdelingse grootte) spontaan worden gedelamineerd tijdens het wassen zodra pH ~5−6 is bereikt. In vergelijking met etsen met HF alleen, resulteert dit in materiaal met een hogere kwaliteit en verbeterde materiaaleigensch.......
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
De auteurs hebben niets te onthullen.
Dit werk werd ondersteund door de National Institutes of Health (subsidie nr. R21-NS106434), de Citizens United for Research in Epilepsie Taking Flight Award, de Mirowski Family Foundation en Neil en Barbara Smit (F.V.); de National Science Foundation Graduate Research Fellowship Program (verlenen nee. DGE-1845298 aan N.D. en B.M.); het Army Research Office (Cooperative Agreement Number W911NF-18-2-0026 to K.M.); en door het Amerikaanse leger via het Surface Science Initiative Program in het Edgewood Chemical Biological Center (PE 0601102A Project VR9 naar Y.G. en K.M.). Dit werk werd gedeeltelijk uitgevoerd in het Singh Center for Nanotechnology, dat wordt ondersteun....
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
| Naam | Bedrijf | Catalogusnummer | Opmerkingen |
|---|---|---|---|
| 00-90 schroef | McMaster-Carr | 90910A630 | Schroef rond waaraan de aardedraad is gewikkeld |
| 128ch stimulatie-/opnamecontroller | Intan Technologies | Een onderdeel van het neurale opnamesysteem. | |
| 175 mL polypropyleen (PP) kegelvormige centrifugeerbuisjes | Falcon | REF: 352076 | Gebruikt voor wassen |
| 18-positie 0,5 mm pitch ZIF-connector | Molex | 505110-1892 | Gebruikt om de flexibele Parylene micro-elektrode array te koppelen met de PCB-adapterkaart. |
| 18-positie dubbele rij mannelijke nano-miniatuur (.025"/.64mm) connector | Omnetics Connector Corporation | A79008-001 | Gebruikt om de PCB-adapterkaart te koppelen met de opname-headstage. |
| 3ML wegwerpbare plastic set afgemeten pipetten | Rienar | Rienar-3ML-20PCS | Gebruikt voor het overbrengen van etsmiddel of MXene-oplossingen |
| 50 mL polypropyleen (PP) kegelvormige centrifugeerbuis | Falcon | REF: 352070 | Gebruikt voor wassen en grootteselectie |
| Al etsmiddel Type A | Transene | 060-0026000-QT | Voor het verwijderen van de Al etsmaskerlaag na de laatste Parylene-C etch. |
| Aluminiumpoeder, -325 Mesh, 99,5% (op basis van metalen), deeltjesgrootte < 44 µm | Alfa Aesar | CAS: 7429-90-5 | Gebruikt voor MAX-synthese |
| AutoCAD-software | Autodesk Inc. | Ontwerpsoftware voor het tekenen van fotomaskers. Gratis alternatieven zijn DraftSight en LayoutEditor. | |
| Gebufferd oxide-etsmiddel 6:1 | JT Baker | 1178-03 | Voor het verwijderen van de SiO2-laag om MXene-elektrodecontacten aan het einde van de fabricageprocedure bloot te leggen. |
| Buprenorfine SR | Wildlife Pharmaceuticals | Analgetica voor rattenchirurgie | |
| Centrifuge | Hermle | Benchmark Z 446 | Gebruikt voor wassen en grootteselectie |
| Dexdomitor | Midwest Veterinary Supply | 193.13250.3 | Anesthesie voor rattenchirurgie |
| Boorboor | Fine Science Tools | 19007-07 | Boren voor boor |
| Elektrische boor | Foredom | K.1070 | Micromotorboor voor craniotomieën |
| Elektronenbundel verdamper | Kurt J. Lesker Company | Gebruikt om Ti, Au en SiO2 te verdampen tijdens fabricage. De meeste universiteits schone kamers hebben deze of een soortgelijk gereedschap. | |
| Aardedraad | A-M Systems | 781500 | Koperen zilverdraad |
| Headspace-flesje, glas | Supelco | REF: 27298 | Gebruikt voor het opslaan van MXene-oplossingen |
| Zoutzuur (12,1N) | Fisher Scientific | CAS: 7647-01-0 | Corrosief; etsmateriaal |
| Fluorwaterstoffzuur, (48-51% oplossing in H2O) | Acros | CAS: 7664-39-3 | Etsmateriaal |
| Jupiter II RIE-systeem | March Plasma Systems Inc. | Planair RIE-etssysteem gebruikt om het Parylene-C te etten met behulp van O2 plasma. De meeste universiteits schone kamers hebben een vergelijkbaar planair RIE-etssysteem. | |
| Kapton standaard polyimide tape, 1/4" | DuPont | Gebruikt om dikte toe te voegen aan het Au-bondingpadgebied van de flexibele Parylene micro-elektrode array voor inbrenging in de ZIF-connector. | |
| Ketamine | Ziekenhuis van de Univ. van Penn. | Anesthesie voor rattenchirurgie | |
| KLA P-7 Stylus Profilometer | KLA Corporation | Gebruikt om 2D-profielen te meten om volledige ets door de opofferlaag parylene-C in stap 2.4.2 te bevestigen. De meeste universiteits schone kamers hebben deze of een vergelijkbaar stylus profilometer-gereedschap. | |
| Lithiumboorchloride, 99% voor analyse, watervrij | Acros | CAS: 7447-41-8 | Hygroscopisch; delaminatiemateriaal |
| MA6 masker aligner | Karl Suss Microtec AG | Gebruikt om elk fotomasker uit te lijnen op het patroon op de wafer en de wafer bloot te stellen aan UV-licht. De meeste universiteits schone kamers hebben deze of een soortgelijk gereedschap. | |
| Micro-90 reinigingsoplossing | International Products Corporation | M-9050-12 | Gebruikt als de anti-hechtlaag om het verwijderen van de opofferlaag Parylene-C mogelijk te maken om het MXene te patroon |
| NR71-3000p fotoresist | Futurrex Inc. | NR71-3000p | Negatieve fotoresist gebruikt om Ti/Au-sporen en MXene-patronen in de apparaten te definiëren. |
| Oftalmisch zalf | Midwest Veterinary Supply | 193.63200.3 | Om hoornvliesdroging tijdens de chirurgie te voorkomen |
| Parylene-depositionssysteem | Specialty Coating Systems | Gebruikt om dunne conforme films van Parylene-C te verdampen | |
| Parylene-C dimer | Specialty Coating Systems | 980130-c-01lbe | Flexibele polymeer gebruikt als onderste en bovenste passivatielagen voor de flexibele MXene-apparaten |
| Fotomaskers (chroom op sodakalkglas) | Universiteit van Pennsylvania | Onze fotomaskers zijn geproduceerd in de schone kamer van de universiteit met behulp van een Heidelberg DWL66+ laserwriter-systeem, maar verschillende leveranciers produceren fotomaskers op basis van geleverde ontwerpbestanden. | |
| Povidonjooplossing | Medline | MDS093901 | Om infectie rond de incisie van de hoofdhuid te helpen voorkomen |
| Gedrukte circuitbord (PCB) | Advanced Circuits | Gebruikt om een koppeling te maken tussen de MXene-elektrode array en de meetelektronica zoals de potentiostaat en het Intan opnamesysteem. Advanced Circuits en andere leveranciers produceren en assembleren PCB's op basis van de geleverde ontwerpbestanden. | |
| RD6 |
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.