Een abonnement op JoVE is vereist om deze inhoud te bekijken. Log in of start vandaag met uw gratis proefperiode.

Methodenartikel

Fabricage van Ti3C2 MXene Microelectrode Arrays voor In Vivo Neural Recording

13.5K weergaven

DOI:

10.3791/60741

12 februari 2020

In dit artikel

Samenvatting

We beschrijven hier een methode voor het fabriceren van Ti3C2 MXene micro-elektrode arrays en ze te gebruiken voor in vivo neurale opname.

Samenvatting

Implanteerbare micro-elektrode technologieën zijn op grote schaal gebruikt om neurale dynamiek op de microschaal op te helderen om een dieper begrip van de neurale onderbouwing van hersenziekten en letsel te krijgen. Aangezien elektroden worden geminiaturiseerd tot de schaal van individuele cellen, beperkt een overeenkomstige stijging van de interfaceimpedantie de kwaliteit van geregistreerde signalen. Bovendien zijn conventionele elektrodematerialen stijf, wat resulteert in een significante mechanische mismatch tussen de elektrode en het omringende hersenweefsel, wat een ontstekingsreactie uitlokt die uiteindelijk leidt tot een verslechtering van de prestaties van het apparaat. Om deze uitdagingen het hoofd te bieden, hebben we een proces ontwikkeld om flexibele micro-elektroden te fabriceren op basis van Ti3C2 MXeen, een recent ontdekt nanomateriaal dat opmerkelijk hoge volumesvochtcapaciteit, elektrische geleidbaarheid, oppervlaktefunctionaliteit en verwerkbaarheid in waterige dispersies bezit. Flexibele arrays van Ti3C2 MXeen micro-elektroden hebben opmerkelijk lage impedantie als gevolg van de hoge geleidbaarheid en hoge specifieke oppervlakte van de Ti3C2 MXeen films, en ze hebben bewezen uitstekend gevoelig te zijn voor het opnemen van neuronale activiteit. In dit protocol beschrijven we een nieuwe methode voor micropatterning Ti3C2 MXeen in micro-elektrodearrays op flexibele polymere substraten en schetsen we het gebruik ervan voor in vivo micro-elektrocorticografie-opname. Deze methode kan gemakkelijk worden uitgebreid tot MXene elektrode arrays van willekeurige grootte of geometrie voor een reeks andere toepassingen in bio-elektronica te creëren en het kan ook worden aangepast voor gebruik met andere geleidende inkten naast Ti3C2 MXeen. Dit protocol maakt eenvoudige en schaalbare fabricage van micro-elektroden uit op oplossingen gebaseerde geleidende inkten mogelijk, en maakt het specifiek mogelijk om de unieke eigenschappen van hydrofiele Ti3C2 MXeen te benutten om veel van de barrières te overwinnen die de wijdverbreide adoptie van koolstofgebaseerde nanomaterialen voor neurale micro-elektroden op basis van koolstof lang hebben belemmerd.

Inleiding

Inzicht in de fundamentele mechanismen die ten grondslag liggen aan neurale circuits, en hoe hun dynamiek worden veranderd bij ziekte of letsel, is een cruciaal doel voor het ontwikkelen van effectieve therapieën voor een breed scala van neurologische en neuromusculaire aandoeningen. Micro-elektrode technologieën zijn op grote schaal gebruikt om neurale dynamiek op fijne ruimtelijke en temporele schalen op te helderen. Het verkrijgen van stabiele opnames met een hoge signaal-ruisverhouding (SNR) van microschaalelektroden is echter bijzonder uitdagend gebleken. Aangezien de afmetingen van de elektroden worden gereduceerd tot de aanpak van cellulaire schaal, een overeen....

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Protocol

Alle in vivo procedures in overeenstemming met de National Institutes of Health (NIH) Guide for the Care and Use of Laboratory Animals en werden goedgekeurd door het Institutional Animal Care and Use Committee (IACUC) van de Universiteit van Pennsylvania.

1. Synthese van Ti3C2 MXeen

OPMERKING: De reactieprocedures beschreven in deze sectie zijn bedoeld voor gebruik in een chemische rookkap. Waspassen die in deze procedure zijn opgenomen, zijn bedoeld om te worden gebruikt met gebalanceerde centrifugebuizen. Al het geproduceerde afval wordt beschouwd als gevaarlijk afval en moet op de ....

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Resultaten

Voorbeeld van micro-ECoG-gegevens die zijn geregistreerd op een MXene-micro-elektrodearray, wordt weergegeven in figuur 5. Na toepassing van de elektrodearray op de cortex, werden duidelijke fysiologische signalen onmiddellijk zichtbaar op de opname-elektroden, met ongeveer 1 mV amplitude ECoG-signalen die op alle MXene-elektroden verschenen. Krachtspectra van deze signalen bevestigden de aanwezigheid van twee hersenritmes die vaak werden waargenomen bij ratten onder ketamine-dexmedetomidine.......

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Discussie

De in dit protocol beschreven mxeensynthese- en delaminatieprocedure (HF/HCl/LiCl) is gebaseerd op de MILD etsbenadering die gebruik maakte van een LiF/HCl (in situ HF) etchant medium26. De MILD-benadering zorgt ervoor dat grote Ti3C2 vlokken (meerdere μm in zijdelingse grootte) spontaan worden gedelamineerd tijdens het wassen zodra pH ~5−6 is bereikt. In vergelijking met etsen met HF alleen, resulteert dit in materiaal met een hogere kwaliteit en verbeterde materiaaleigensch.......

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Openbaarmakingen

De auteurs hebben niets te onthullen.

Dankbetuigingen

Dit werk werd ondersteund door de National Institutes of Health (subsidie nr. R21-NS106434), de Citizens United for Research in Epilepsie Taking Flight Award, de Mirowski Family Foundation en Neil en Barbara Smit (F.V.); de National Science Foundation Graduate Research Fellowship Program (verlenen nee. DGE-1845298 aan N.D. en B.M.); het Army Research Office (Cooperative Agreement Number W911NF-18-2-0026 to K.M.); en door het Amerikaanse leger via het Surface Science Initiative Program in het Edgewood Chemical Biological Center (PE 0601102A Project VR9 naar Y.G. en K.M.). Dit werk werd gedeeltelijk uitgevoerd in het Singh Center for Nanotechnology, dat wordt ondersteun....

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Materialen

Lijst van materialen gebruikt in dit artikel
NaamBedrijfCatalogusnummerOpmerkingen
00-90 schroefMcMaster-Carr90910A630Schroef rond waaraan de aardedraad is gewikkeld
128ch stimulatie-/opnamecontrollerIntan TechnologiesEen onderdeel van het neurale opnamesysteem.
175 mL polypropyleen (PP) kegelvormige centrifugeerbuisjesFalconREF: 352076Gebruikt voor wassen
18-positie 0,5 mm pitch ZIF-connectorMolex505110-1892Gebruikt om de flexibele Parylene micro-elektrode array te koppelen met de PCB-adapterkaart.
18-positie dubbele rij mannelijke nano-miniatuur (.025"/.64mm) connectorOmnetics Connector CorporationA79008-001Gebruikt om de PCB-adapterkaart te koppelen met de opname-headstage.
3ML wegwerpbare plastic set afgemeten pipettenRienarRienar-3ML-20PCSGebruikt voor het overbrengen van etsmiddel of MXene-oplossingen
50 mL polypropyleen (PP) kegelvormige centrifugeerbuisFalconREF: 352070Gebruikt voor wassen en grootteselectie
Al etsmiddel Type ATransene060-0026000-QTVoor het verwijderen van de Al etsmaskerlaag na de laatste Parylene-C etch.
Aluminiumpoeder, -325 Mesh, 99,5% (op basis van metalen), deeltjesgrootte < 44 µmAlfa AesarCAS: 7429-90-5Gebruikt voor MAX-synthese
AutoCAD-softwareAutodesk Inc.Ontwerpsoftware voor het tekenen van fotomaskers. Gratis alternatieven zijn DraftSight en LayoutEditor.
Gebufferd oxide-etsmiddel 6:1JT Baker1178-03Voor het verwijderen van de SiO2-laag om MXene-elektrodecontacten aan het einde van de fabricageprocedure bloot te leggen.
Buprenorfine SRWildlife PharmaceuticalsAnalgetica voor rattenchirurgie
CentrifugeHermleBenchmark Z 446Gebruikt voor wassen en grootteselectie
DexdomitorMidwest Veterinary Supply193.13250.3Anesthesie voor rattenchirurgie
BoorboorFine Science Tools19007-07Boren voor boor
Elektrische boorForedomK.1070Micromotorboor voor craniotomieën
Elektronenbundel verdamperKurt J. Lesker CompanyGebruikt om Ti, Au en SiO2 te verdampen tijdens fabricage. De meeste universiteits schone kamers hebben deze of een soortgelijk gereedschap.
AardedraadA-M Systems781500Koperen zilverdraad
Headspace-flesje, glasSupelcoREF: 27298Gebruikt voor het opslaan van MXene-oplossingen
Zoutzuur (12,1N)Fisher ScientificCAS: 7647-01-0Corrosief; etsmateriaal
Fluorwaterstoffzuur, (48-51% oplossing in H2O)AcrosCAS: 7664-39-3Etsmateriaal
Jupiter II RIE-systeemMarch Plasma Systems Inc.Planair RIE-etssysteem gebruikt om het Parylene-C te etten met behulp van O2 plasma. De meeste universiteits schone kamers hebben een vergelijkbaar planair RIE-etssysteem.
Kapton standaard polyimide tape, 1/4"DuPontGebruikt om dikte toe te voegen aan het Au-bondingpadgebied van de flexibele Parylene micro-elektrode array voor inbrenging in de ZIF-connector.
KetamineZiekenhuis van de Univ. van Penn.Anesthesie voor rattenchirurgie
KLA P-7 Stylus ProfilometerKLA CorporationGebruikt om 2D-profielen te meten om volledige ets door de opofferlaag parylene-C in stap 2.4.2 te bevestigen. De meeste universiteits schone kamers hebben deze of een vergelijkbaar stylus profilometer-gereedschap.
Lithiumboorchloride, 99% voor analyse, watervrijAcrosCAS: 7447-41-8Hygroscopisch; delaminatiemateriaal
MA6 masker alignerKarl Suss Microtec AGGebruikt om elk fotomasker uit te lijnen op het patroon op de wafer en de wafer bloot te stellen aan UV-licht. De meeste universiteits schone kamers hebben deze of een soortgelijk gereedschap.
Micro-90 reinigingsoplossingInternational Products CorporationM-9050-12Gebruikt als de anti-hechtlaag om het verwijderen van de opofferlaag Parylene-C mogelijk te maken om het MXene te patroon
NR71-3000p fotoresistFuturrex Inc.NR71-3000pNegatieve fotoresist gebruikt om Ti/Au-sporen en MXene-patronen in de apparaten te definiëren.
Oftalmisch zalfMidwest Veterinary Supply193.63200.3Om hoornvliesdroging tijdens de chirurgie te voorkomen
Parylene-depositionssysteemSpecialty Coating SystemsGebruikt om dunne conforme films van Parylene-C te verdampen
Parylene-C dimerSpecialty Coating Systems980130-c-01lbeFlexibele polymeer gebruikt als onderste en bovenste passivatielagen voor de flexibele MXene-apparaten
Fotomaskers (chroom op sodakalkglas)Universiteit van PennsylvaniaOnze fotomaskers zijn geproduceerd in de schone kamer van de universiteit met behulp van een Heidelberg DWL66+ laserwriter-systeem, maar verschillende leveranciers produceren fotomaskers op basis van geleverde ontwerpbestanden.
PovidonjooplossingMedlineMDS093901Om infectie rond de incisie van de hoofdhuid te helpen voorkomen
Gedrukte circuitbord (PCB)Advanced CircuitsGebruikt om een koppeling te maken tussen de MXene-elektrode array en de meetelektronica zoals de potentiostaat en het Intan opnamesysteem. Advanced Circuits en andere leveranciers produceren en assembleren PCB's op basis van de geleverde ontwerpbestanden.
RD6

Referenties

  1. Ludwig, K. A., et al. Poly(3,4-ethylenedioxythiophene) (PEDOT) polymer coatings facilitate smaller neural recording electrodes. Journal of Neural Engineering. 8 (1), 014001(2011).
  2. Polikov, V. S., Tresco, P. A., Reichert, W. M.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Herprints en machtigingen

Tags

In vivo registratiefotolithografieParylene C substraatelektronenstraalevaporatiezuurstofplasma etsenoplosmiddelgebaseerde inktenflexibele elektronicaneurale interfaces