Methodenartikel

Doxycycline geladen collageen-Chitosan composiet steiger voor de versnelde genezing van diabetische wonden

4.3K weergaven

⸱

DOI:

10.3791/62184

⸱

21 augustus 2021

 ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Pharmaceutics, JSS College of Pharmacy, JSS Academy of Higher Education & Research, 2Department of Pharmaceutical Sciences, School of Pharmacy, North Dakota state university, 3Department of Pharmacology, JSS College of Pharmacy, JSS Academy of Higher Education & Research

In dit artikel

Samenvatting

De voorbereide DOX-CL steiger voldeed aan de vereisten van een ideaal DW-verband in mechanische sterkte, porositeit, waterabsorptie, afbraaksnelheid, aanhoudende afgifte, antibacteriële, biocompatibiliteit en ontstekingsremmende eigenschappen, die als essentieel worden beschouwd voor het herstel van beschadigd weefsel in DWs.

Samenvatting

Een belangrijke complicatie van diabetes mellitus zijn diabetische wonden (DW). De langdurige fase van ontsteking bij diabetes belemmert de verdere stadia van een verwonding die leidt tot vertraagde wondgenezing. We selecteerden doxycycline (DOX), als een potentieel medicijn naar keuze, vanwege de antibacteriële eigenschappen samen met de gerapporteerde ontstekingsremmende eigenschappen. De huidige studie is gericht op het formuleren van DOX geladen collageen-chitosan niet-gekruiste (NCL) & crosslinked (CL) steigers en evalueren van hun genezingsvermogen bij diabetische aandoeningen. Het karakteriseringsresultaat van steigers laat zien dat de DOX-CL steiger een ideale porositeit, een lage zwelling & afbraaksnelheid en een aanhoudende afgifte van DOX heeft in vergelijking met de DOX-NCL steiger. De in vitro studies tonen aan dat de DOX-CL steiger biocompatibel was en de celgroei verbeterde in vergelijking met cl steiger behandelde en controlegroepen. De antibacteriële studies hebben aangetoond dat de DOX-CL steiger effectiever was dan de CL steiger tegen de meest voorkomende bacteriën gevonden in DW. Met behulp van het streptozotocine en vetrijke dieet-geïnduceerde DW model, een significant (p≤0.05) snellere snelheid van wondcontractie in de DOX-CL steiger behandelde groep werd waargenomen in vergelijking met die in CL steiger behandelde en controlegroepen. Het gebruik van de DOX-CL steiger kan een veelbelovende aanpak blijken te zijn voor lokale behandeling voor DW's.

Inleiding

Diabetes mellitus (DM) is een aandoening waarbij het falen van het lichaam om insuline af te leveren of te reageren op de resultaten ervan bij abnormale vertering van ongecompliceerde suikers een toename van de bloedglucose 1tot gevolg heeft . De meest opeenvolgende en verpletterende verstrengeling van DM is de diabetische wond (DW). Ongeveer 25% van de patiënten met DM heeft de mogelijkheid om een DW op te bouwen in hun leven 1. De gehinderde genezing van DW is geaccrediteerd voor een triopathie van DM: immunopathie, vasculopathie en neuropathie. Wanneer DW onbehandeld blijft, kan dit leiden tot de ontwikkeling van gangreen, waardoor het betrokken orgaan wordt verwijderd 2.

Tal van behandelingen, zoals het instrueren van de patiënten (de wond dagelijks inspecteren, de wond reinigen, activiteiten vermijden die druk op de wond creëren, periodieke glucosecontrole, enz.), het beheersen van hun bloedglucose, wonddebridement, drukaflossing, medische procedure, hyperbare zuurstoftherapie en geavanceerde therapieën zijn in de praktijk 3,4. De meeste van deze geneesmiddelen voldoen niet aan alle voorwaarden die van vitaal belang zijn voor DW-zorg in het licht van de multifactoriële pathofysiologische aandoeningen en onverwachte uitgaven in verband met deze geneesmiddelen 5. Hoewel de DW pathogenese multifactorieel is, wordt de aanhoudende ontsteking met ongepast weefselbeheer verklaard als de werkelijke reden voor vertraagde genezing in DWs 5,6.

Verhoogde niveaus van inflammatoire en pro-inflammatoire mediatoren in DW resulteren in verminderde groeifactoren die verantwoordelijk zijn voor vertraagde wondgenezing 2,6. Onjuiste vorming van extracellulaire matrix (ECM) in DWs is geaccrediteerd voor verhoogde niveaus van matrix metalloproteinases (MMP's) die verantwoordelijk zijn voor de snelle afbraak van gevormde ECM. In MMP's wordt MMP-9 gerapporteerd als een belangrijke intermediair die verantwoordelijk is voor langdurige ontsteking en snelle ECM-afbraak 7. Er wordt gesteld dat lokale behandeling met een ontstekingsremmend geneesmiddel dat de verhoogde niveaus van MMP-9 verlaagt, cutane homeostase, kaderregeling en een betere genezing van DWs 8,9opnieuw vaststelt .

Doxycycline (DOX), een MMP-9-remmer, werd gekozen om de verhoogde niveaus van MMP-9 te onderdrukken, een belangrijke ontstekingsbemiddelaar die verantwoordelijk is voor aanhoudende ontsteking in DWs 10,11,12. Bovendien bezit DOX antioxidant (produceren vrije hydroxy- en fenoxyradicalen die zich kunnen binden met reactieve zuurstofsoorten) 13 en anti-apoptotisch (remmen caspaseexpressie en mitochondriale stabilisatie) 14 activiteiten die essentieel zijn voor de behandeling van DW. Er is gekozen voor de opstelling van kaders die DOX, collageen (COL) en chitosan (CS) bevatten. De keuze van COL hangt af van de manier waarop het helpt bij het bieden van het noodzakelijke kader dat verantwoordelijk is voor mechanische sterkte en weefselregeneratie 15. Aan de andere kant is CS structureel homologe glycosaminoglycan, geassocieerd met verschillende wondgenezingsfasen. Er wordt ook gemeld dat CS een significante antibacteriële eigenschap heeft 15. Daarom is de COL/CS steiger van DOX geformuleerd om de langdurige ontsteking te onderdrukken, gevolgd door het ondersteunen van de matrixvorming voor succesvolle wondgenezing in DM-omstandigheden.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Protocol

Alle uitgevoerde dierprocedures werden goedgekeurd door de institutionele ethische commissie voor dieren van het JSS College of Pharmacy, Ooty, India.

1. Bereiding van dox geladen poreuze steigers door vriesdroogmethode

  1. Voeg 1,2 g COL toe aan 100 ml water (bijv. Millipore) en houd apart voor zwelling.
  2. Roer de gezwollen COL-dispersie 's nachts bij 2000 tpm om volledige oplossing van COL te garanderen.
  3. Bereid CS-oplossing door ongeveer 0,8 g CS op te lossen in 100 ml 1% azijnzuur.
  4. Roer de CS-oplossing 's nachts bij 2000 tpm om een gelijkmatige dispersie te garanderen.
  5. Meng DOX (1% w/v), gevolgd door CS-oplossing, tot de COL-oplossing en roer gedurende 30 min.
  6. Filtreer het verkregen fysische mengsel met een mousselinedoek om de deeltjes te verwijderen.
  7. Vries het verkregen filtraat gedurende ongeveer 24 uur in bij -85 °C ± 4 °C.
  8. Lyophiliseer het diepvriesmengsel bij -85 °C ± 4 °C gedurende 72 uur.
  9. Bewaar de verkregen steigers in een desiccator voor verdere analyse 16,17.

2. Crosslinking van steiger

  1. Los MES (0,488 g) op in 50 ml water.
  2. Week 50 mg van de DOX-geladen steiger gedurende 30 minuten in 20 ml van de MES-buffer.
  3. Meng 19,5 ml MES-buffer met 0,1264 g EDC en 0,014 g NHS in een apart bekerglas.
  4. Dompel de steiger gedurende 4 uur onder in het buffermengsel om crosslinking te bereiken 16.
  5. Bewaar de DOX geladen crosslinked (CL) en niet-gekruiste steigers (NCL) voor verdere evaluatie.

3. Karakterisering van steigers

  1. Morfologisch onderzoek met behulp van een scanning elektronenmicroscopie (SEM)
    1. Karakteriseer de steigers voor morfologische analyse met behulp van SEM (1 cm × 1 cm × 0,5 cm).
    2. Bevlek de doorsnede en het buitenoppervlak van de steiger met de delicate laag goud (~ 150 Å).
    3. Leg het fotografische beeld vast bij de excitatiespanning van 5 kV en 10 kV.
    4. Plaats de monsters in aluminium stubs en omsluit ze met het goud op ongeveer 9 V.
    5. Meet de steiger met SEM met de verhoogde resolutie bij 10 kV.
  2. Porositeitsbepaling
    1. Meet de porositeit van de steigers met behulp van de vloeistofverplaatsingsmethode (ethanol) 18.
    2. Bereken de porositeit van de steigers met behulp van de onderstaande formules.
      figure-protocol-1
      Ww = Nat gewicht van de steiger
      Wd = Drooggewicht van de steiger
      Wv = Volume van de steiger
  3. Bepalen van het waterabsorptievermogen
    1. Meet het droge gewicht van de steiger.
    2. Incubeer de gewogen steiger bij 37 °C gedurende 24 uur in fosfaatbufferoplossing (PBS) pH 7,4.
    3. Verwijder de overtollige PBS over de steiger met filterpapier.
    4. Meet het waterabsorptievermogen met behulp van de onderstaande formules 17.
      figure-protocol-2
      WS = Percentage waterabsorptie
      W1=Nat gewicht van de steiger
      W0= Drooggewicht van de steiger
  4. Steigerdegradatie
    1. Incubeer de steiger (1cm x 1cm) bij 37 °C gedurende 7 dagen in een PBS van pH 7,4 die lysozymen bevat.
    2. Was de steiger om eventuele aanhechtingsionen op het oppervlak te verwijderen.
    3. Vries de gewassen steiger in 17.
    4. Bereken de afbraaksnelheid met behulp van formules.
      figure-protocol-3
      Ww = Begingewicht van de steiger
      Wd = Gewicht van de steiger na vriesdrogen
  5. In vitro release studies
    1. Bepaal het afgiftegedrag van de DOX van de steiger met behulp van de dialysezakmethode.
    2. Verdeel de steiger in een paar milliliter gesimuleerd wondvocht (pH 7,4) en breng het over in een dialysezak.
    3. Sluit de uiteinden van de membraanzak goed en dompel onder in de 500 ml gesimuleerde wondvloeistofoplossing.
    4. Roer de wondvloeistofoplossing met de dialysezak bij 200-250 tpm.
    5. Verzamel de supernatantoplossing en vervang deze met een gelijke hoeveelheid verse bufferoplossing met bepaalde tijdsintervallen.
    6. Bepaal het percentage DOX-afgifte van de steigers in de supernatantoplossing met behulp van een UV-zichtbare spectrometer bij 240 nm.

4. In vitro antibacteriële studies

  1. Bepaal de minimale remmende concentratie (MIC) van de CL- en DOX-CL-steigers tegen de S. aureus, S. epidermis, E. coli, P. aeruginosa met behulp van de microbouillonverdunningsmethode.
  2. Bereid de bacterieculturen voor met Mueller-Hinton bouillon in een verhouding van 1:1000 om 0,5 McFarland troebelheid te verkrijgen.
  3. Voeg D-glucose (800 mg/dl) toe aan de bacterieculturen voor hyperglycatie 19,20.
  4. Gehakt en solubiliseer de CL en DOX-CL in DMSO (negatieve controle).
  5. Verdun de hyperglycated bacteriële suspensie (100 μL) en testmonsters (100 μL steigeroplossing) in 96 putplaat.
  6. Incubeer de plaat bij 37 °C gedurende 20-24 uur.
  7. Neem de absorptie op bij een golflengte van 600 nm 21.

5. In vitro biocompatibiliteitsstudies

  1. Evalueer de biocompatibiliteit van de voorbereide steigers met behulp van MTT [(3-(4, 5 dimethylthiozol-2 yl) -2, 5-difenyltetrazoliumbromide)] test.
  2. Steriliseer de steigers van standaard afmeting en plaats ze in 24 putplaten.
  3. Voeg 3T3-L1 cellen toe aan de 24 putplaat en bebroed gedurende 72 uur.

6. In vivo dierproeven

  1. Inductie van DM en excisiewond
    1. Voed het dier gedurende twee weken met een vetrijk dieet en dien een enkele dosis streptozotocine (STZ) (50 mg/kg lichaamsgewicht) in citraatbufferoplossing intraperitoneaal toe aan Wistar albinoratten (180-200 g) voor de inductie van diabetes type 2.
    2. Kies de dieren met een constante bloedglucose van 250 mg/dl voor het onderzoek.
    3. Randomiseer de geselecteerde dieren voor de inductie van excisiewonden.
    4. Verdoof de diabetische ratten met behulp van diethylether (5 ml werd toegevoegd aan de eerder verzadigde anesthesiekamer) en bevestig met behulp van de teenknijpmethode en slijmvlieskleur.
    5. Scheer het dorsale gebied (dorsale thoracale, lumbale regio) met behulp van een aseptische trimmer en messen (A40).
    6. Steriliseer het geschoren gebied met een alcoholisch wattenstaafje.
    7. Verwijder de huid (2 x 2 cm2 en een diepte van 1 mm) met een aseptisch chirurgisch A40-mes op het geschoren gebied om een open wond te creëren.
    8. Verdeel de dieren in drie groepen (Groep 1- Ziektebestrijding (Controle), Groep 2- CL steiger (Placebo), Groep 3- DOX CL steiger), elke groep bestaande uit 6 ratten.
    9. Breng de CL- en DOX CL-steigers aan met behulp van chirurgische tape en bedek de controlegroep gedurende 21 dagen met steriel gaas.
    10. Traceer het wondgebied op een steriel OHP-vel en meet de procentuele vermindering van de wond met behulp van de rastermethode op dag 0, 7, 14 en 21 voor alle groepen.
    11. Bereken het percentage wondreductie met behulp van de onderstaande formules.
      figure-protocol-4

7. Histopathologische studies

  1. Isoleer het genezen wondgebied op dag 7, 14 en 21, bewaar in formalineoplossing (10%).
  2. Doorsnede van de weefsels met behulp van een microtome om een dikte van 6 μm te verkrijgen.
  3. Monteer de secties op een glazen glijbaan en vlek met Hematoxyline en eosine 17.
  4. Leg de beelden vast onder 40x vergroting met behulp van een digitale microscoop.

8. Hydroxyproline schatting

  1. Isoleer het genezen wondgebied op dag 0, 7, 14 en 21 voor evaluatie.
  2. Schatting van het hydroxyprolinegehalte volgens de procedure beschreven door Reddy G et al., 1996 22.

9. Elisa-test

  1. Schat de MMP-9-niveaus met behulp van de Elisa-kit volgens de instructies van de fabrikant.
  2. Isoleer de weefselmonsters van het genezen wondgebied op dag 21 en gehakt met behulp van een weefselhomogenisator.
  3. Centrifugeer het verkregen homogenaat en verzamel het supernatant.
  4. Verdun het supernatant 100 keer met behulp van een testbuffer.
  5. Scan de plaat met een meervoudige plaatlezer.

10. Statistische analyse

  1. Vertegenwoordig de verkregen resultaten als Gemiddelde ± SD.
  2. Voer de statistische analyse uit met behulp van Graph pad prisma v5.01.
  3. Bereik de statistische significantie met behulp van One Way Analysis of Variance (ANOVA) en Dunnet's post hoc test.
  4. Beschouw de waarden met p≤0,05 als significant.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Resultaten

Karakterisering van de DOX geladen NCL en CL steiger
Bij visueel onderzoek bleek de NCL- en CL-steiger crème van kleur te zijn. Bovendien lijken beide steigers op een spons, stijf en inelastisch wanneer ze fysiek worden onderzocht. Sem-afbeeldingen van de NCL- en CL-steigers zijn weergegeven in figuur 1. Uit de figuur bleek duidelijk dat er een afname was in poriegrootte na crosslinking door het vormen van intermoleculaire verbindingen. Ook bleken de porositeit van de NCL...

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Discussie

Het belangrijkste doel van deze studie was om het effect van DOX geladen COL-CS steiger op DW genezing bij ratten te bepalen. CL en NCL werden voorbereid en geëvalueerd in termen van morfologie, zwellingsindex, kinetiek in vitro afgifte en biocompatibiliteit.

Karakterisering van de DOX geladen NCL en CL steiger
De voorbereide steigers bleken poreus te zijn met onderling verbonden poriën. Deze onderling verbonden poriën verzekeren de poreuze, sponsachtige aard die helpt bij ...

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Openbaarmakingen

De auteurs verklaren dat ze geen concurrerende financiële belangen hebben.

Dankbetuigingen

De auteurs danken Dr. Ashish D Wadhwani. (Universitair docent en hoofd van de afdeling farmaceutische biotechnologie, JSS College of Pharmacy, Ooty, India) voor het assisteren bij in vitro cel levensvatbaarheidsstudies.

De auteurs willen het Department of Science and Technology - Fund for Improvement of Science and Technology Infrastructure in Universities and Higher Educational Institutions (DST-FIST), New Delhi, bedanken voor het ondersteunen van onze afdeling.

De auteurs willen ook Mr. Sanju bedanken. S en Mr Sriram. Narukulla M. Pharm studenten voor hun steun in de videoshoot.

Dit onderzoek werd ondersteund door de JSS Academy of Higher Education &Research (JSSAHER).

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Materialen

Lijst van materialen gebruikt in dit artikel
NaamBedrijfCatalogusnummerOpmerkingen
1-ethyl-(3-3-dimethyl aminopropyl) carbodiimide hydrochloride (EDC)Merck Millipore, Mumbai, IndiaE7750
2-(N-morpholino) ethane sulfonic acid (MES)Merck Millipore, Mumbai, India137074
3-(4, 5 dimethyl thiazole-2 yl) -2, 5-diphenyl tetrazolium bromide (MTT)Thermo Fisher, Mumbai, IndiaM6494
Diepvriezer verticaalLabline Instruments, Kochi, India
DialysezakMerck Millipore, Mumbai, IndiaD6191-Avg. flat width 25 mm (1,0 inch), MWCO 12.000 Da
DoxycyclineSigma chemicals Co. Ltd, Mumbai, IndiaD9891
Elisa kitR&D SystemsRMP900
Escherichia coli (E. coli)National Collection of Industrial Microorganisms, Pune, IndiaNCIM 2567
EthanolMerck Millipore, Mumbai, India100983
Lyofilisaat-SZ042Sub-Zero lab instruments, Chennai, India
Mechaanse roerder-RQ-122/DRemi laboratory instruments, Mumbai, India
Chitosan met gemiddeld molecuulgewichtSisco Research Laboratories Pvt. Ltd., Mumbai, India18824
Microtoom-RM2135Leica, U.K
Muis embryonale fibroblastcellen (3T3-L1)National Centre for Cell Sciences, Pune, India
Meervoudige platenlezer -Inifinte M200 ProTecan Instruments, Zwitserland
N-hydroxy succinimide (NHS)Sigma chemicals Co. Ltd, Mumbai, India130672
Pseudomonas aeruginosa (P. aeruginosa)National Collection of Industrial Microorganisms, Pune, IndiaNCIM 2036
Scanning Electron Microscopy (SEM)-S-4800Hitachi, India
Natriumhydroxide (NaOH) pelletsQualigen fine chemicals, Mumbai, IndiaQ27815
Staphylococcus aureus (S. aureus)National Collection of Industrial Microorganisms, Pune, IndiaNCIM 5022
Staphylococcus epidermis (S. epidermis)National Collection of Industrial Microorganisms, Pune, IndiaNCIM 5270
Streptozotocine (STZ)Sisco Research Laboratories Pvt. Ltd., Mumbai, India14653
Type-1 rat CollageenSigma chemicals Co. Ltd, Mumbai, IndiaC7661
Ultraviolet–zichtbaar spectroscopie-1700Shimadzu

Referenties

  1. International Diabetes Federation. IDF Diabetes Atlas, 9th edn. , Brussels, Belgium. Available from: https://www.diabetesatlas.org (2019).
  2. Falanga, V. Wound healing and its impairment in the diabetic foot. The Lancet. 366 (9498), 1736-1743 (2005).
  3. Frykberg, R. G., Banks, J. Challenges in the treatment of chronic wounds. Advances in Wound Care. 4 (9), 560-582 (2015).
  4. Alexiadou, K., Doupis, J. Management of diabetic foot ulcers. Diabetes Therapy. 3 (1), 1-15 (2012).
  5. Karri, V. V. S. R., et al. Current and emerging therapies in the management of diabetic foot ulcers. Current Medical Research and Opinion. 32 (3), 519-542 (2016).
  6. Sanapalli, B. K., et al. Human beta defensins may be a multifactorial modulator in the management of diabetic wound. Wound Repair and Regeneration. 28 (3), 416-421 (2020).
  7. Caley, M. P., Martins, V. L., O'Toole, E. A. Metalloproteinases and wound healing. Advances in Wound Care. 4 (4), 225-234 (2015).
  8. Reiss, M. J., et al. Matrix metalloproteinase-9 delays wound healing in a murine wound model. Surgery. 147 (2), 295-302 (2010).
  9. Gill, S. E., Parks, W. C. Metalloproteinases and their inhibitors: regulators of wound healing. The International Journal of Biochemistry & Cell Biology. 40 (6-7), 1334-1347 (2008).
  10. Stechmiller, J., Cowan, L., Schultz, G. The role of doxycycline as a matrix metalloproteinase inhibitor for the treatment of chronic wounds. Biological Research for Nursing. 11 (4), 336-344 (2010).
  11. Griffin, M. O., Fricovsky, E., Ceballos, G., Villarreal, F. Tetracyclines: a pleitropic family of compounds with promising therapeutic properties. Review of the literature. American Journal of Physiology-Cell Physiology. 299 (3), 539-548 (2010).
  12. Burns, F., Stack, M., Gray, R., Paterson, C. Inhibition of purified collagenase from alkali-burned rabbit corneas. Investigative Ophthalmology & Visual Science. 30 (7), 1569-1575 (1989).
  13. Kraus, R. L., et al. Antioxidant properties of minocycline: neuroprotection in an oxidative stress assay and direct radical-scavenging activity. Journal of Neurochemistry. 94 (3), 819-827 (2005).
  14. Yrjänheikki, J., Keinänen, R., Pellikka, M., Hökfelt, T., Koistinaho, J. Tetracyclines inhibit microglial activation and are neuroprotective in global brain ischemia. Proceedings of the National Academy of Sciences. 95 (26), 15769-15774 (1998).
  15. Moura, L. I., Dias, A. M., Carvalho, E., de Sousa, H. C. Recent advances on the development of wound dressings for diabetic foot ulcer treatment-a review. Acta Biomaterialia. 9 (7), 7093-7114 (2013).
  16. Natarajan, J., et al. Nanostructured Lipid Carriers of Pioglitazone Loaded Collagen/Chitosan Composite Scaffold for Diabetic Wound Healing. Advances in Wound Care. 8 (10), 499-513 (2019).
  17. Karri, V. V. S. R., et al. Curcumin loaded chitosan nanoparticles impregnated into collagen-alginate scaffolds for diabetic wound healing. International Journal Of Biological Macromolecules. 93, Part B 1519-1529 (2016).
  18. Hsieh, W. -C., Chang, C. -P., Lin, S. -M. Morphology and characterization of 3D micro-porous structured chitosan scaffolds for tissue engineering. Colloids and Surfaces B: Biointerfaces. 57 (2), 250-255 (2007).
  19. Xie, Y., Chen, J., Xiao, A., Liu, L. Antibacterial activity of polyphenols: structure-activity relationship and influence of hyperglycemic condition. Molecules. 22 (1913), 1-11 (2017).
  20. Geerlings, S. E., Brouwer, E. C., Gaastra, W., Verhoef, J., Hoepelman, A. I. Effect of glucose and pH on uropathogenic and non-uropathogenic Escherichia coli: studies with urine from diabetic and non-diabetic individuals. Journal of Medical Microbiology. 48 (6), 535-539 (1999).
  21. Eloff, J. N. A sensitive and quick microplate method to determine the minimal inhibitory concentration of plant extracts for bacteria. Planta Medica. 64 (8), 711-713 (1998).
  22. Reddy, G. K., Enwemeka, C. S. A simplified method for the analysis of hydroxyproline in biological tissues. Clinical Biochemistry. 29 (3), 225-229 (1996).
  23. Charulatha, V., Rajaram, A. Influence of different crosslinking treatments on the physical properties of collagen membranes. Biomaterials. 24 (5), 759-767 (2003).
  24. Rehakova, M., Bakoš, D., Vizarova, K., Soldán, M., Jurícková, M. Properties of collagen and hyaluronic acid composite materials and their modification by chemical crosslinking. Journal of Biomedical Materials Research: An Official Journal of The Society for Biomaterials and The Japanese Society for Biomaterials. 30 (3), 369-372 (1996).
  25. Chang, M. -Y., et al. Doxycycline enhances survival and self-renewal of human pluripotent stem cells. Stem Cell Reports. 3 (2), 353-364 (2014).
  26. Dovi, J. V., He, L. K., DiPietro, L. A. Accelerated wound closure in neutrophil-depleted mice. Journal of Leukocyte Biology. 73 (4), 448-455 (2003).
  27. Lindeman, J. H., Abdul-Hussien, H., van Bockel, J. H., Wolterbeek, R., Kleemann, R. Clinical Perspective. Circulation. 119 (16), 2209-2216 (2009).
  28. Zhang, C., Gong, W., Liu, H., Guo, Z., Ge, S. Inhibition of matrix metalloproteinase-9 with low-dose doxycycline reduces acute lung injury induced by cardiopulmonary bypass. International Journal Of Clinical And Experimental Medicine. 7 (12), 4975-4982 (2014).

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Herprints en machtigingen

Toestemming aanvragen om de tekst of afbeeldingen van dit JoVE-artikel te hergebruiken

Toestemming aanvragen

Trefwoorden

Wondgenezing bij diabetescollageen chitosaan scaffoldafgifte van doxycyclinegecrosslinkte scaffoldbereiding van de scaffoldvertraagde afgifte van geneesmiddelenontstekingsremmende eigenschappenantibacteri le activiteitwondcontractie

Gerelateerde artikelen