Hier presenteren we een gestandaardiseerd SAH-muismodel, geïnduceerd door endovasculaire filamentperforatie, gecombineerd met magnetische resonantiebeeldvorming (MRI) 24 uur na de operatie om de juiste bloedingsplaats te garanderen en andere relevante intracraniale pathologieën uit te sluiten.
Een abonnement op JoVE is vereist om deze inhoud te bekijken. Log in of start vandaag met uw gratis proefperiode.
Methodenartikel
Endovasculair perforatiemodel voor subarachnoïdale bloeding gecombineerd met magnetische resonantie beeldvorming (MRI)
* These authors contributed equally
In dit artikel
Samenvatting
Samenvatting
Het endovasculaire filamentperforatiemodel om subarachnoïdale bloeding (SAH) na te bootsen is een veelgebruikt model - de techniek kan echter een hoog sterftecijfer veroorzaken, evenals een oncontroleerbaar volume van SAH en andere intracraniale complicaties zoals beroerte of intracraniële bloeding. In dit protocol wordt een gestandaardiseerd SAH-muismodel gepresenteerd, geïnduceerd door endovasculaire filamentperforatie, gecombineerd met magnetische resonantiebeeldvorming (MRI) 24 uur na de operatie om de juiste bloedingsplaats te garanderen en andere relevante intracraniale pathologieën uit te sluiten. Kortom, C57BL/6J muizen worden verdoofd met een intraperitoneale ketamine/xylazine (70 mg/16 mg/kg lichaamsgewicht) injectie en in rugligging geplaatst. Na middellijn nekincisie worden de gemeenschappelijke halsslagader (CCA) en halsslagaderbifurcatie blootgesteld en wordt een 5-0 niet-absorbeerbare monofilament polypropyleen hechtdraad retrograde ingebracht in de externe halsslagader (ECA) en in de gemeenschappelijke halsslagader gebracht. Vervolgens wordt het filament in de interne halsslagader (ICA) geïnvagineerd en naar voren geduwd om de voorste hersenslagader (ACA) te perforeren. Na herstel van de operatie ondergaan muizen 24 uur later een 7,0 T MRI. Het bloedingsvolume kan worden gekwantificeerd en gesorteerd via postoperatieve MRI, waardoor een robuuste experimentele SAH-groep de mogelijkheid heeft om verdere subgroepanalyses uit te voeren op basis van de bloedhoeveelheid.
Inleiding
Subarachnoïdale bloeding (SAH) wordt veroorzaakt door de breuk van een intracranieel aneurysma en vormt een levensbedreigende noodsituatie, geassocieerd met aanzienlijke morbiditeit en mortaliteit, goed voor ongeveer 5% van de beroertes 1,2. SAH-patiënten presenteren zich met ernstige hoofdpijn, neurologische disfunctie en progressieve bewustzijnsstoornissen3. Ongeveer 30% van de SAH-patiënten overlijdt binnen de eerste 30 dagen na de eerste bloeding4. Klinisch gezien ervaart 50% van de patiënten vertraagd hersenletsel (DBI) na vroeg hersenletsel. DBI wordt geken....
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Protocol
De experimenten werden uitgevoerd in overeenstemming met de richtlijnen en voorschriften van Landesamt fuer Gesundheit und Soziales (LaGeSo), Berlijn, Duitsland (G0063/18). In deze studie werden C57Bl/6J mannelijke (8-12 weken oude) muizen met een gewicht van 25 ± 0,286 g (gemiddeld ± s.e.m.) gebruikt.
1. Bereiding van dieren
- Induceer anesthesie door ketamine (70 mg/kg) en xylazine (16 mg/kg) intraperitoneaal te injecteren. Handhaaf een normale lichaamstemperatuur, wat bijdraagt aan een snelle inductie van diepe anesthesie. Test op adequate sedatie met een pijnprikkel, zoals een teenknelpunt, en controleer de afwe....
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Resultaten
Mortaliteit
Voor deze studie werden in totaal 92 mannelijke C57Bl/6J-muizen in de leeftijd van 8-12 weken onderworpen aan SAH-operatie; hierin zagen we een algemeen sterftecijfer van 11,9% (n = 12). Mortaliteit trad uitsluitend op binnen de eerste 6-24 uur na de operatie, wat suggereert dat perioperatieve mortaliteit en SAH-bloeding zelf de meest waarschijnlijke bijdragende factoren zijn.
SAH bloedingsgraad
In totaal ontvingen 50 muizen MRI 24 uur postop.......
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Discussie
Samenvattend wordt een gestandaardiseerd SAH-muismodel geïnduceerd door endovasculaire filamentperforatieoperatie gepresenteerd met een kleine invasie, korte operatietijd en acceptabele sterftecijfers. MRI wordt 24 uur postoperatief uitgevoerd om de juiste bloedingsplaats en de uitsluiting van andere relevante intracraniale pathologieën te garanderen. Bovendien hebben we verschillende SAH-bloedingsgraden geclassificeerd en bloedingsvolumes gemeten, waardoor verdere subgroepanalyses op basis van bloedingsgraden mogelijk z.......
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Openbaarmakingen
Geen belangenverstrengeling
Dankbetuigingen
SL werd ondersteund door de Chinese Scholarship Council. KT werd ondersteund door de BIH-MD-beurs van het Berlijnse Instituut voor Gezondheid en de Sonnenfeld-Stiftung. RX wordt ondersteund door het BIH-Charité Clinician Scientist Program, gefinancierd door de Charité-Universitätsmedizin Berlin en het Berlin Institute of Health. We erkennen de steun van de German Research Foundation (DFG) en het Open Access Publication Fund van Charité - Universitätsmedizin Berlin.
....Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Materialen
| Naam | Bedrijf | Catalogusnummer | Opmerkingen |
|---|---|---|---|
| Oogcrème | Bayer | 815529836 | Bepanthen |
| Afbeeldingenanalysesoftware | ImageJ | Gebundeld met Java 1.8.0_172 | |
| Ligatie-naald (5-0) | SMI | Zijde zwart USP | |
| Lichtbron voor microscoop | Zeiss | CL 6000 LED | |
| Ketamine | CP-pharma | 797-037 | 100 mg/mL |
| MRI | Bruker | Pharmascan 70/16 | 7 Tesla |
| MRI-afbeeldingen verworven software | Bruker | Bruker Paravision 5.1 | |
| Paracetamol (40 mg/mL) | bene Arzneimittel | 4993736 | |
| Prolene-filament (5-0) | Erhicon | EH7255 | |
| Scherer | Wella | HS61 | |
| Chirurgisch instrument (Fijne schaar) | FST | 14060-09 | |
| Chirurgisch instrument (tang #1) | AESCULAP | FM001R | |
| Chirurgisch instrument (tang #2) | AESCULAP | FD2855R | |
| Chirurgisch instrument (tang #3) | Hammacher | HCS 082-12 | |
| Chirurgisch instrument (Naaldhouder) | FST | 91201-13 | |
| Chirurgisch instrument (Vannas Spring Schaar) | FST | 15000-08 | |
| Chirurgisch microscoop | Zeiss | Stemi 2000 C | |
| Ventilatiebewaking | Stony Brook | Kleine dierbewaking en gating systeem | |
| Wondsuture (4-0) | Erhicon | CB84D | |
| Xylavet | CP-pharma | 797-062 | 20 mg/mL |
Referenties
- Macdonald, R. L., Schweizer, T. A. Spontaneous subarachnoid haemorrhage. The Lancet. 389 (10069), 655-666 (2017).
- van Gijn, J., Kerr, R. S., Rinkel, G. J. Subarachnoid haemorrhage. The Lancet. 369 (9558), 306-318 (2007).
- Abraham, M. K., Chang, W. -T. W.
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Herprints en machtigingen
