Een abonnement op JoVE is vereist om deze inhoud te bekijken. Log in of start vandaag met uw gratis proefperiode.

Methodenartikel

Stereotaxische chirurgische benadering van micro-injecteren van de caudale hersenstam en het bovenste cervicale ruggenmerg via de Cisterna Magna bij muizen

11.8K weergaven

DOI:

10.3791/63344

21 januari 2022

In dit artikel

Samenvatting

Stereotaxische chirurgie om hersenlocaties bij muizen te targeten, omvat vaak toegang via de schedelbotten en wordt geleid door schedeloriëntatiepunten. Hier schetsen we een alternatieve stereotaxische benadering om de caudale hersenstam en het bovenste cervicale ruggenmerg te richten via de cisterna magna die afhankelijk is van directe visualisatie van hersenstamoriëntatiepunten.

Samenvatting

Stereotaxische chirurgie om hersenlocaties bij muizen te targeten, wordt meestal geleid door schedeloriëntatiepunten. Toegang wordt vervolgens verkregen via braamgaten die door de schedel worden geboord. Deze standaardbenadering kan een uitdaging zijn voor doelen in de caudale hersenstam en de bovenste cervicale navelstreng vanwege specifieke anatomische uitdagingen, omdat deze locaties ver verwijderd zijn van schedeloriëntatiepunten, wat leidt tot onnauwkeurigheid. Hier schetsen we een alternatieve stereotaxische benadering via de cisterna magna die is gebruikt om zich te richten op discrete gebieden van belang in de caudale hersenstam en de bovenste cervicale koord. De cisterna magna strekt zich uit van het achterhoofdsbeen tot de atlas (d.w.z. het tweede wervelbeen), is gevuld met hersenvocht en wordt bedekt door dura mater. Deze benadering biedt een reproduceerbare toegangsweg tot geselecteerde structuren van het centrale zenuwstelsel (CZS) die anders moeilijk te bereiken zijn vanwege anatomische barrières. Bovendien maakt het directe visualisatie van hersenstamoriëntatiepunten in de nabijheid van de doellocaties mogelijk, waardoor de nauwkeurigheid toeneemt bij het leveren van kleine injectievolumes aan beperkte gebieden van belang in de caudale hersenstam en de bovenste cervicale koord. Ten slotte biedt deze aanpak de mogelijkheid om het cerebellum te vermijden, wat belangrijk kan zijn voor motorische en sensomotorische studies.

Inleiding

Standaard stereotaxische chirurgie om hersenplaatsen bij muizen te targeten1 omvat gewoonlijk fixatie van de schedel met behulp van een set oorstaven en een mondbalk. Coördinaten worden vervolgens geschat op basis van referentieatlassen 2,3 en schedeloriëntatoren, namelijk bregma (het punt waar de hechtingen van de frontale en pariëtale botten samenkomen) of lambda (het punt waar de hechtingen van de pariëtale en occipitale botten samenkomen; Figuur 1A,B). Via een braamgat in de schedel boven het geschatte doel kan vervolgens het doelgebied worden bereikt, hetzij voor levering van micro-injecties of instrumentatie met canules of optische vezels. Door variatie in de anatomie van deze hechtingen en fouten in de lokalisatie van bregma of lambda 4,5 varieert de positie van nulpunten ten opzichte van de hersenen van dier tot dier. Hoewel kleine fouten in de targeting, die het gevolg zijn van deze variabiliteit, geen probleem zijn voor grote of nabijgelegen doelen, is hun impact groter voor kleinere interessegebieden die ver verwijderd zijn van de nulpunten in de anteroposterior- of dorsoventrale vlakken en / of bij het bestuderen van dieren van verschillende grootte als gevolg van leeftijd, stam en / of geslacht. Er zijn verschillende extra uitdagingen die uniek zijn voor de medulla oblongata en het bovenste cervicale koord. Ten eerste zijn kleine veranderingen in anteroposteriorcoördinaten geassocieerd met significante veranderingen in dorsoventrale coördinaten ten opzichte van de dura, als gevolg van de positie en vorm van het cerebellum (figuur 1Bi)2,6,7. Ten tweede bevindt het bovenste cervicale koord zich niet in de schedel2. Ten derde maakt de schuine positie van het achterhoofdsbeen en de bovenliggende laag nekspieren2 de standaard stereotaxische benadering nog uitdagender voor structuren die zich in de buurt van de overgang tussen de hersenstam en het ruggenmerg bevinden (figuur 1Bi). Ten slotte zijn veel doelen van belang voor de caudale hersenstam en cervicale navelstreng klein2, waarvoor nauwkeurige en reproduceerbare injectiesnodig zijn 8,9.

Een alternatieve aanpak via de cisterna magna omzeilt deze problemen. De cisterna magna is een grote ruimte die zich uitstrekt van het achterhoofdsbeen tot de atlas (figuur 1A, d.w.z. het tweede wervelbeen)10. Het is gevuld met hersenvocht en bedekt met dura mater10. Deze ruimte tussen het achterhoofdsbeen en de atlas opent zich bij het anteroflexen van het hoofd. Het is toegankelijk door te navigeren tussen de bovenliggende gepaarde buiken van de longus capitis spier, waardoor het dorsale oppervlak van de caudale hersenstam wordt blootgesteld. Regio's van belang kunnen dan worden gericht op basis van de oriëntatiepunten van deze regio's zelf als ze zich in de buurt van het dorsale oppervlak bevinden; of door de obex te gebruiken, het punt waar het centrale kanaal uitkomt in de IV-ventrikel, als nulpunt voor coördinaten om diepere structuren te bereiken. Deze aanpak is met succes gebruikt bij verschillende soorten, waaronder de rat11, kat12, muis 8,9 en niet-menselijke primaat13 om zich te richten op de ventrale ademhalingsgroep, medullaire mediale reticulaire formatie, de kern van het solitaire kanaal, gebied postrema of hypoglossale kern. Deze aanpak wordt echter niet op grote schaal gebruikt, omdat het kennis van anatomie, een gespecialiseerde toolkit en meer geavanceerde chirurgische vaardigheden vereist in vergelijking met de standaard stereotaxische benadering.

Hier beschrijven we een stapsgewijze chirurgische aanpak om de hersenstam en het bovenste cervicale koord te bereiken via de cisterna magna, oriëntatiepunten te visualiseren, het nulpunt in te stellen (figuur 2) en doelcoördinaten te schatten en te optimaliseren voor stereotaxische afgifte van micro-injecties in de discrete hersenstam- en ruggenmerggebieden van belang (figuur 3). Vervolgens bespreken we de voor- en nadelen van deze aanpak.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Protocol

De auteur verklaart dat het protocol de richtlijnen volgt van het Institutional Animal Care and Use Committee in het Beth Israel Deaconess Medical Center.

1. Voorbereiding van chirurgische instrumenten en stereotaxisch frame

OPMERKING: De operatie wordt uitgevoerd onder aseptische omstandigheden. De steriliteit wordt gehandhaafd met behulp van de steriele tiptechniek.

  1. Installeer de stereotaxische arm met een micropipette of spuit gevuld met een injecteerbaar product naar keuze (adeno-geassocieerd virus (AAV) of conventionele tracer) op het stereotaxische frame en bereid de muisadapter voor (figuur 2A).
  2. Bereid geautoclaveerde chirurgische instrumenten (materiaaltafel) voor en plaats ze op een steriel oppervlak.

2. Anesthesie inductie en muis voorbereiding

  1. Zet O2 aan op 0,5 l/min en stel de isofluraanverdamper in op 4,0, zorg ervoor dat de O2-stroom naar de inductiebox gaat.
    LET OP: Zorg ervoor dat de isofluraan inductiedoos in een kap is geplaatst en dat de isofluraan van de operatieplaats wordt verwijderd.
  2. Plaats de muis (10 weken oude reu C57BL/6J) in de inductiekamer.
  3. Zodra de ademhaling is vertraagd, opent u de inductiekamer en tilt u de muis iets op. Gebruik tondeuses om het haar van hoofd tot schouders te verwijderen.

3. Positionering van de muis in het stereotaxische frame

  1. Beweeg de muis naar het stereotaxische frame en plaats de neus in een flexibele neuskegel. Zorg er in dit stadium voor dat de O2-stroom nu naar de neuskegel wordt geleid.
  2. Plaats de muis in het stereotaxische frame met alleen oorstaven.
    OPMERKING: Zorg ervoor dat de oorstaven gelijkmatig zijn en dat het hoofd waterpas staat.
  3. Anteroflex de kop van de muis in een hoek van 90° door de neus handmatig te begeleiden. Om deze positie te bevestigen, plaatst u een plastic barrière tussen de oorbalkstijlen van de muisadapter, parallel aan de pilaren. Het platte deel van de schedel dient als referentie, vergelijkbaar met de platte schedelbenadering in conventionele stereotaxische chirurgie.
    OPMERKING: Buig het hoofd niet te veel (d.w.z. voorbij een hoek van 90° tussen het vlak van het frontale schedelbot en het vlak van het oppervlak van de tafel), omdat dit de luchtstroom door de bovenste luchtwegen belemmert. Als de luchtstroom wordt belemmerd, verplaatst u de muis, zorg ervoor dat het lichaam onder de stam wordt ondersteund en dat een plastic kaart wordt ingesteld op 90 ° tussen het vlak van het frontale schedelbot en het vlak van het oppervlak van de tafel zoals beschreven in figuur 2A, C.
  4. Plaats het verwarmingskussen onder de muis en zorg er vervolgens voor dat de nek en de rest van het lichaam op hetzelfde niveau zijn geplaatst (d.w.z. op ongeveer 180 ° of evenwijdig aan de tafel). De gereedschapskist die de veerschaar vasthoudt, kan worden gebruikt om het lichaam naar deze positie te tillen.
    OPMERKING: Deze stap is belangrijk omdat de caudale hersenstam en de bovenste cervicale navelstreng afhankelijk van de positie bewegen, in tegenstelling tot meer rostrale delen van het CZS die op hun plaats worden gehouden door de schedel.
  5. Injecteer een enkele dosis van 4 mg/kg Meloxicam slow-release (SR) subcutaan (s.c.) bij een volume van 2 μL/g lichaamsgewicht en breng glijmiddel op de ogen.
  6. Reinig de chirurgische incisieplaats eerst met een 70% alcoholvoorbereidingspad, vervolgens met een betadine-preppad en vervolgens opnieuw met een alcoholvoorbereidingspad en laat drogen.
  7. Plaats een gordijn onder het lichaam.
  8. Desinfecteer de handen en trek steriele handschoenen aan.
  9. Plaats een gordijn op de operatieplaats.

4. Chirurgie om toegang te krijgen tot de cisterna magna

  1. Zorg ervoor dat de muis op de juiste manier wordt verdoofd door in de tenen te knijpen of de hoornvliesreflex te controleren.
  2. Isofluraan verlagen tot onderhoudsniveaus (2.0).
  3. Maak een incisie van 1-1,2 cm met chirurgisch mes # 10 van de rand van het achterhoofdsbeen naar de schouders in één vloeiende beweging.
  4. Maak een incisie in de middellijn raphe van de trapezius spier. Dit stelt de gepaarde longus capitis spieren bloot.
    OPMERKING: Bij muizen is de trapeziusspier een zeer dunne, bijna transparante spier. Zorg ervoor dat u in de middellijn blijft en snijd niet in de onderliggende spieren, omdat dit onnodige bloedingen zal veroorzaken.
  5. Plaats beide retractorhaken tussen de gepaarde longus capitis spieren, de ene naar links en de andere naar rechts. Het gewicht van de hemostaten zorgt voor spanning aan de retractorhaken die kunnen worden gewijzigd door de positie van de hemostaten opnieuw aan te passen.
  6. Plaats de chirurgische microscoop op zijn plaats om het chirurgische veld beter te visualiseren.
  7. Gebruik de stompe laminectomietang om de linker- en rechterbuik van de gepaarde longus capitis spier te scheiden, te beginnen bij het achterhoofd, waar de middellijn gemakkelijk zichtbaar is. Leid de stompe tang over het bot van het achterhoofd in de middellijn naar beneden naar waar het de cisternal dura mater ontmoet en ga dan verder over de dura mater naar de atlas.
    OPMERKING: Het is niet nodig om door de gepaarde longus capitis spieren te snijden, omdat niets ze bij elkaar houdt in de middellijn; dit zal onnodige bloedingen veroorzaken.
  8. Verplaats de retractors en pas de spanning aan door de hemostaten te herpositioneren, waardoor het zicht op de cisterna magna wordt geopend.
  9. Gebruik de stompe laminectomietang om de spieren verder in de middellijn te scheiden om een goed kijkvenster van de hersenstam en het cerebellum te krijgen.
  10. Herhaal stap 4,7-4,9 indien nodig totdat het cerebellum en de hersenstam onder de dura in beeld komen.
  11. Gebruik stompe laminectomietangen, maak de dura van de kleine strengen bindweefsel vrij door de tang van de middellijn in een laterale richting te bewegen, totdat er een duidelijk zicht is op de hersenstam en om meer laterale ruimte te creëren, zoals nodig voor het doelwit.

5. Opening van het stortbakmembraan

  1. Gebruik de schuine Dumont-tang (#4/45) om de dura te grijpen, die zich uitstrekt van het achterhoofdsbeen tot de atlas. Pak de dura bij het achterhoofdsbeen en gebruik de veerschaar om een kleine opening (~0,5 tot 1,5 mm) in de dura te maken.
    OPMERKING: Op deze rostrale locatie is de ruimte tussen de hersenstam en de bovenliggende dura het breedst, waardoor er voldoende ruimte is voor veilige manipulatie van de dura.
  2. Gebruik de veerschaar om de dura op te tillen en de dura verder te openen. De grootte van het venster is afhankelijk van het doel.
    OPMERKING: Een groter venster is nodig bij het maken van meerdere longitudinale injecties of bilaterale injecties; een klein venster is voldoende bij het maken van enkele unilaterale of middellijninjecties.
  3. Zodra de dura is geopend, voert u overtollig hersenvocht af met een steriele cue tip.

6. Identificatie van oriëntatiepunten en nulpunt

  1. Bekijk het dorsale oppervlak van de hersenstam met gedetailleerde oriëntatiepunten door de open dura. De obex, het punt waar het centrale kanaal uitkomt in de IV-ventrikel, is het standaard voorste-achterste en middelmatige nulpunt.

7. Doelcoördinaten

OPMERKING: Voor verschillende doelen hebben we een lijst met standaardcoördinaten opgenomen met anterieure posterieure (AP) en mediolaterale (ML) coördinaten ten opzichte van nulpunts bregma- en cisterna magna-coördinaten met AP- en ML-coördinaten ten opzichte van nulpunt obex om de overgang tussen methodologieën te vergemakkelijken (tabel 1). Dorsoventral (DV) coördinaten zijn relatief ten opzichte van het oppervlak van de hersenen of het cerebellum (standaard benadering) of het oppervlak van de hersenstam of bovenste cervicale koord (cisterna magna benadering) op het punt van AP en ML entry. Planning moet worden gedaan voorafgaand aan de operatie.

  1. Gebruik de drie sets coördinaten om het doel te bepalen: AP, ML en DV. Vanwege de hoofdpositie varieert de relatieve oriëntatie van hersenstamstructuren per locatie.
    1. Voor doelafstand >0,4 mm van caudaal tot obex (figuur 1B, groen) voert u het volgende uit.
      1. AP: Gebruik een standaard stereotaxische referentieatlas (bijv. Paxinos en Franklin atlas2) of weefselreeksen die in het dwarsvlak zijn gesneden om de AP-afstand tussen obex en het doel te schatten.
      2. ML: Gebruik een standaard stereotaxische referentieatlas of weefselreeks die in het dwarsvlak is gesneden om de ML-afstand tussen obex en het doel te schatten.
      3. DV: Schattingscoördinaten ten opzichte van het oppervlak van de hersenen of het cerebellum op het AP- en ML-doelpunt. Gebruik een standaard stereotaxische referentieatlas of weefselreeks die in het dwarsvlak is gesneden om de afstand tussen het hersenstamoppervlak op de gewenste AP- en ML-coördinaten en het doel te schatten.
    2. Voor doelafstand <0,4 mm van caudaal tot de obex (figuur 1B, oranje) voert u het volgende uit.
      1. AP: Pas coördinaten aan om rekening te houden met anteroflexie van de hersenstam. Voor ventrale en rostrale coördinaten zal het AP-hersenstamingangspunt meer caudaal zijn ten opzichte van de doel-AP-coördinaat in het standaardvlak.
      2. ML: Leid doelcoördinaten af van een standaard stereotaxische referentieatlas of weefselreeks die in het dwarsvlak is gesneden. Coördinaten zijn relatief ten opzichte van de gevisualiseerde middellijn op het doel-AP-niveau.
      3. DV: Schattingscoördinaten ten opzichte van het oppervlak van de hersenstam op het AP- en ML-doelpunt. Pas DV aan om rekening te houden met anteroflexie van de hersenstam. Voor ventrale en rostrale coördinaten zullen de DV-coördinaten groter zijn dan de afstand tot het dorsale oppervlak van de hersenstam in het standaardvlak.

8. Injectie van het doelwit

  1. Laat de pipet of spuit op het doel zakken met behulp van de stereotaxische arm en injecteer de oplossing zoals bij standaard stereotaxische benaderingen. Laat na de injectie 1-5 minuten op zijn plaats om een naaldspoor te voorkomen bij gebruik van volumes tussen 3-50 nL. Til vervolgens de pipet of spuit op met behulp van de stereotaxische arm.
  2. Herhaal stap 8.1. voor meerdere doelen.

9. Sluiting van het operatieveld

  1. Verwijder de haken voorzichtig uit het operatieveld. De gepaarde longus capitis spieren zullen terugvallen in een neutrale positie, die de cisterna magna volledig bedekt. Sluit de trapeziusspier en dura mater niet in de middellijn omdat ze te kwetsbaar zijn om hechtingen vast te houden.
  2. Sluit de huid met drie nylon of polypropyleen hechtingen (5-0 of 6-0).

10. Postoperatieve zorg

  1. Schakel isofluraan uit en verwijder de muis uit het stereotaxische frame. Plaats de muis in een schone kooi op een verwarmingskussen en observeer totdat hij wakker is en beweegt.
  2. Controleer de gezondheidsstatus, het gewicht en de hechtingen op postoperatieve dagen 1-3. Verwijder hechtingen op dag 10 als ze nog niet zijn verwijderd.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Resultaten

De cisterna magna-benadering maakt het mogelijk om caudale hersenstam- en bovenste cervicale koordstructuren aan te pakken die anders moeilijk te bereiken zijn via standaard stereotaxische benaderingen of gevoelig zijn voor inconsistente targeting. De operatie om de cisterna magna te bereiken vereist incisies van de huid, een dunne laag trapeziusspier en opening van de dura mater en wordt daarom goed verdragen door muizen. Het is vooral efficiënt en minder invasief bij het richten op meerdere (longitudinaal vers...

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Discussie

Standaard stereotaxische chirurgie vertrouwt vaak op schedeloriëntatiepunten om de coördinaten van doellocaties in het CZS1 te berekenen. Doellocaties zijn dan toegankelijk via braamgaten die door de schedel worden geboord1. Deze methode is niet ideaal voor de caudale hersenstam, omdat de doellocaties zich ver van de schedeloriëntatiepunten in de anteroposterior- en dorsoventrale vlakken2 bevinden en omdat de anatomie van de schedel en boven...

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Openbaarmakingen

De auteurs hebben niets te onthullen.

Dankbetuigingen

Dit werk werd ondersteund door R01 NS079623, P01 HL149630 en P01 HL095491.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Materialen

Lijst van materialen gebruikt in dit artikel
NaamBedrijfCatalogusnummerOpmerkingen
Alcohol padMed-Vet InternationalSKU: MDS090735Zhuidvoorbereiding voor de preventie van chirurgische wondinfecties
Angled forceps, Dumont #5/45FST11251-35alleen om dura vast te grijpen
Betadine padMed-Vet InternationalSKU:PVP-PADhuidvoorbereiding voor de preventie van chirurgische wondinfecties
Cholera toxin subunit-b, Alexa Fluor 488/594 conjugateThermo Fisher Scientific488: C34775, 594: C22842Fluorescent tracer
ClippersWahlModel MC3, 28915-10voor het scheren van vacht bij de chirurgische plek
Electrode holder with corner clampKopf1770om een glazen pijpje vast te houden
FlowmeterGilmont instrumentsmodel # 65 MMom de stroom van isofluraan en zuurstof naar de muis op het chirurgische vlak te reguleren
Fluorescent microspheres, polystyreneThermo Fisher ScientificF13080Fluorescent tracer
Heating padStoelting53800Mthermoregulatie
Induction chamber with port hook up kitMidmark Inc93805107 92800131kamer die de initiële anesthesie biedt
Insulin SyringeExelint International26028om saline en pijnstiller toe te dienen
IsofluraneMed-Vet InternationalSKU:RXISO-250inhalant anestheticum
Isoflurane Matrix VIP 3000 vaporizerMidmark Inc91305430apparaat voor de levering van inhalant anestheticum
Laminectomy forceps, Dumont #2FST11223-20alleen om dura schoon te maken
Medical air, compressedLindeUN 1002gebruikt met stimulator & PicoPump voor het leveren van lucht voor nauwkeurige oplossingsinjectie
Meloxicam SRZoo Pharm LLCLot # MSR2-211201pijnstiller
Microhematocrit borosilicate glass pre calibrated capillary tubeGlobe Scientific Inc51628voor transfectie van materiaal naar aangegeven coördinaten
Mouse adaptorStoelting0051625adapting rat stereotaxic frame for mouse surgery
Needle holder, Student Halsted- Mosquito HemostatsFST91308-12voor het naaien
Oxygen regulatorLife Support ProductsS/N 909328, lot 092109zuurstofniveaus regelen vanuit zuurstofpomp
Oxygen tank, compressedLindeUSP UN 1072geleverd samen met isofluraan anesthesie
Plastic cardniet van toepassingniet van toepassingelke stevige plastic kaart, gesneden om in het stereotactische frame te passen (bijv. ID-kaart)
Pneumatic PicoPump ( of soortgelijk)World Precision Instruments (WPI)SYS-PV820Voor nauwkeurige oplossingsinjectie
Saline, sterielMountainside Medical EquipmentH04888-10om lichaamsvloeistoffen te vervangen die verloren gaan tijdens de operatie
Scalpel handle, #3FST10003-12om scalpel vast te houden
Scissors, WagnerFST14070-12om polypropyleennaad te knippen
Spring scissors, Vannas 2.5mm with accompanying boxFST15002-08schaar alleen om dura te openen, doos om lichaam te heffen
Stereotactic micromanipulatorKopf1760-61bevestigd aan elektrodehouder om positie aan te passen op basis van coördinaten
Stereotactic 'U' frame assembly and intracellular base plateKopf1730-B, 1711frame voor chirurgie
Sterile cotton tipped applicatorsPuritan25-806 10WCbloed absorberen van het operatieveld
Sterile non-fenestrated drapesHenry Schein9004686voor steriel chirurgisch veld
Sterile opthalmic ointmentPuralubeP1490oculaire smering
Stimulator & TubingGrass Medical InstrumentsS44om gecontroleerde gedrukte lucht te leveren voor nauwkeurige oplossingsinjectie
Surgical Blade #10Med-Vet InternationalSKU: 10SSvoor huidsnede
Surgical forceps, Extra fine GraefeFST11153-10om huid vast te houden
Surgical glovesMed-Vet InternationalMSG2280Zvoor aseptische chirurgie
Surgical microscopeLeicaModel M320/ F12voor 5X-40X vergroting van het chirurgische gebied
Suture 5-0 polypropyleneOasisMV-8661om de huid te sluiten
Tegaderm3M3M ID 70200749250zorgt voor steriele barrière
Universal Clamp and stand postKopf1725bevestigd aan stereotactische U-frame en intracellulaire basisplaat
Wound hook with hartman hemostatsFST18200-09, 13003-10om spieren te scheiden en chirurgisch venster te bieden

Referenties

  1. JoVE. Rodent Stereotaxic Surgery. JoVE Science Education Database. , Neuroscience (2021).
  2. Paxinos, G., Franklin, K. B. J. The Mouse Brain in Stereotaxic Coordinates. , Academic Press. (2001).
  3. Lein, E. S., et al. Genome-wide atlas of gene expression in the adult mouse brain. Nature. 445 (7124), 168-176 (2007).
  4. Rangarajan, J. R., et al. Image-based in vivo assessment of targeting accuracy of stereotactic brain surgery in experimental rodent models. Scientific Reports. 6 (1), 38058(2016).
  5. Blasiak, T., Czubak, W., Ignaciak, A., Lewandowski, M. H. A new approach to detection of the bregma point on the rat skull. Journal of Neuroscience Methods. 185 (2), 199-203 (2010).
  6. Popesko, P., Rajtova, V., Horak, J. A Colour Atlas of the Anatomy of Small Laboratory Animals, Volume 2: Rat, Mouse and Golden Hamster. 2, Wolfe Publishing Ltd. (1992).
  7. Allen Mouse Brain Atlas. Allen Institute for Brain Science. , Available from: https://mouse.brain-map.org/experiment/thumbnails/100042147?image_type=atlas (2004).
  8. Vanderhorst, V. G. J. M. Nucleus retroambiguus-spinal pathway in the mouse: Localization, gender differences, and effects of estrogen treatment. The Journal of Comparative Neurology. 488 (2), 180-200 (2005).
  9. Yokota, S., Kaur, S., VanderHorst, V. G., Saper, C. B., Chamberlin, N. L. Respiratory-related outputs of glutamatergic, hypercapnia-responsive parabrachial neurons in mice. Journal of Comparative Neurology. 523 (6), 907-920 (2015).
  10. Anselmi, C., et al. Ultrasonographic anatomy of the atlanto-occipital region and ultrasound-guided cerebrospinal fluid collection in rabbits (Oryctolagus cuniculus). Veterinary Radiology & Ultrasound. 59 (2), 188-197 (2018).
  11. Herbert, H., Moga, M. M., Saper, C. B. Connections of the parabrachial nucleus with the nucleus of the solitary tract and the medullary reticular formation in the rat. The Journal of Comparative Neurology. 293 (4), 540-580 (1990).
  12. Vanderhorst, V. G., Holstege, G. Caudal medullary pathways to lumbosacral motoneuronal cell groups in the cat: evidence for direct projections possibly representing the final common pathway for lordosis. The Journal of Comparative Neurology. 359 (3), 457-475 (1995).
  13. Vanderhorst, V. G., Terasawa, E., Ralston, H. J., Holstege, G. Monosynaptic projections from the nucleus retroambiguus to motoneurons supplying the abdominal wall, axial, hindlimb, and pelvic floor muscles in the female rhesus monkey. The Journal of Comparative Neurology. 424 (2), 233-250 (2000).
  14. Wall, N. R., Wickersham, I. R., Cetin, A., De La Parra, M., Callaway, E. M. Monosynaptic circuit tracing in vivo through Cre-dependent targeting and complementation of modified rabies virus. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 107 (50), 21848-21853 (2010).
  15. Krashes, M. J., et al. Rapid, reversible activation of AgRP neurons drives feeding behavior in mice. The Journal of Clinical Investigation. 121 (4), 1424-1428 (2011).
  16. Ganchrow, D., et al. Nucleus of the solitary tract in the C57BL/6J mouse: Subnuclear parcellation, chorda tympani nerve projections, and brainstem connections. The Journal of Comparative Neurology. 522 (7), 1565-1596 (2014).
  17. Ung, K., Arenkiel, B. R. Fiber-optic implantation for chronic optogenetic stimulation of brain tissue. Journal of Visualized Experiments: JoVE. (68), e50004(2012).

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Herprints en machtigingen

Trefwoorden

Stereotaxische chirurgieCisterna Magna benaderingbovenste cervicale ruggenmergmicroinjectietechniekhersenstamkenmerkendura materneurochirurgie bij muizennucleus hypoglossusventromediale medulla