Een abonnement op JoVE is vereist om deze inhoud te bekijken. Log in of start vandaag met uw gratis proefperiode.

Methodenartikel

Inactivatie van pathogenen via zichtbaar-licht fotolyse van riboflavine-5′-fosfaat

2.1K weergaven

⸱

DOI:

10.3791/63531

⸱

6 april 2022

 ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Biotechnology, Ming Chuan University, 2Department of Tourism and Leisure, Hsing Wu University, 3Department of Science Education and Application, National Taichung University of Education, 4Department of Soil and Environmental Sciences, National Chung Hsing University

In dit artikel

Samenvatting

Hier presenteren we een protocol om pathogene bacteriën te inactiveren met reactieve zuurstofsoorten geproduceerd tijdens fotolyse van flavine mononucleotide (FMN) onder blauwe en violette lichtbestraling van lage intensiteit. FMN-fotolyse is aangetoond als een eenvoudige en veilige methode voor sanitaire processen.

Samenvatting

Riboflavine-5'-fosfaat (of flavine mononucleotide; FMN) is gevoelig voor zichtbaar licht. Verschillende verbindingen, waaronder reactieve zuurstofsoorten (ROS), kunnen worden gegenereerd uit FMN-fotolyse bij bestraling met zichtbaar licht. De ROS gegenereerd uit FMN-fotolyse zijn schadelijk voor micro-organismen, waaronder pathogene bacteriën zoals Staphylococcus aureus (S. aureus). Dit artikel presenteert een protocol voor het deactiveren van S. aureus, als voorbeeld , via fotochemische reacties met FMN onder bestraling van zichtbaar licht. Het superoxideradicaal anion (figure-abstract-1) gegenereerd tijdens de FMN-fotolyse wordt geëvalueerd via nitroblauw tetrazolium (NBT) reductie. De microbiële levensvatbaarheid van S. aureus die wordt toegeschreven aan reactieve figure-abstract-2 soorten werd gebruikt om de effectiviteit van het proces te bepalen. De bacteriële inactivatiesnelheid is evenredig met de FMN-concentratie. Violet licht is efficiënter in het inactiveren van S. aureus dan blauw lichtbestraling, terwijl het rode of groene licht geen FMN-fotolyse veroorzaakt. Het huidige artikel demonstreert FMN-fotolyse als een eenvoudige en veilige methode voor sanitaire processen.

Inleiding

Riboflavine-5′-fosfaat (FMN) wordt gevormd door fosforylering op de riboflavine 5′-positie van de ribityl side-chain en is vereist door alle flavoproteïnen voor tal van cellulaire processen om energie te genereren. Het speelt ook de rol van vitamine voor sommige functies in het menselijk lichaam1. FMN is ongeveer 200 keer beter oplosbaar in water dan riboflavine2.

De antibacteriële fotodynamische inactivatie (aPDI) van bacteriën is een efficiënte manier om resistentie tegen bacteriën te beheersen 3,4 omdat het niet afhankelijk is van de modus van bacteriële resistentie. Klinisch wordt aPDI gebruikt om wekedeleninfecties te behandelen om de infectie van de nosocomiale huid als gevolg van multiresistente bacteriën te verminderen 5,6,7,8,9. aPDI produceert ook celdood door reactieve zuurstofsoorten (ROS) te genereren. ROS, zoals superoxideradicalen (figure-introduction-1), singletzuurstof, hydroxylradicalen (•OH) en peroxylradicalen, zijn vrije radicalen of moleculen die reactieve zuurstofbevatten 10,11,12 en normaal gesproken reactief zijn13. Net als DNA-schade die wordt veroorzaakt door ROS, zijn membraanperoxidatie en vernietiging van endotheelcellen ook nadelige biochemische reacties die worden toegeschreven aan ROS in cellen12.

Het gebruik van aPDI voor pathogene bacteriën omvat een zichtbare of UV-lichtbron om micro-organismen te inactiveren in aanwezigheid van chemische verbindingen, zoals methylthioniniumchloride14, PEI-ce6-conjugaat 15, porfyrine16, titaandioxide17, toluidineblauw O18 en zinkoxide nanodeeltjes19. Toluidineblauw O en methyleenblauw zijn fenothiaziniumkleurstoffen en methyleenblauw heeft toxische eigenschappen. Zinkoxide nanodeeltjes en UV-bestraling zijn gekoppeld aan nadelige gezondheids- en milieueffecten. Als zodanig verdient de exploitatie van een betrouwbare, veilige en eenvoudige fotosensitizer via fotolyse onder zichtbare bestraling verder onderzoek.

De micronutriënt, riboflavine of FMN, is niet giftig en wordt inderdaad gebruikt voor de productie van voedsel of voeding20. Zowel FMN als riboflavine zijn zeer gevoelig voor lichtbestraling2. Onder UV 1,2,21,22,23 en blauw licht bestraling 10,24 bereiken deze twee verbindingen een aangeslagen toestand. De geactiveerde riboflavine of FMN die wordt geproduceerd door fotolyse wordt gepromoveerd tot zijn triplettoestand en ROS worden tegelijkertijdgegenereerd 2,25. Kumar et al. rapporteerden dat riboflavine geactiveerd door UV-licht selectief verhoogde schade veroorzaakt aan het guaninegedeelte van DNA in pathogene micro-organismen26. Onder bestraling door UV-licht wordt aangetoond dat fotodynamisch geactiveerd riboflavine de generatie van 8-OH-dG, een biomarker voor oxidatieve stress, in dubbelstrengs DNA27 bevordert. Er wordt gemeld dat S. aureus en E. coli worden gedeactiveerd door ROS tijdens riboflavine of FMN-fotolyse 10,24,28. Een eerdere studie van de auteurs toonde aan dat de fotolytische reacties met riboflavine en FMN kristalviolet, een triarylmethaankleurstof en een antibacterieel middel dat het grootste deel van het antimicrobiële vermogen van kristalviolet 28 genereert figure-introduction-2enelimineert, verminderen. Wanneer flavine adenine dinucleotide of FMN wordt bestraald door blauw licht, produceren de resulterende ROS apoptose in HeLa-cellen voor hun vergiftiging in vitro29. Met behulp van fotochemische behandeling in aanwezigheid van riboflavine inactiveerden Cui et al. lymfocyten door hun proliferatie en cytokineproductie te remmen30.

De fotolyse van riboflavine wordt gebruikt voor de inactivatie van bloedpathogenen door UV10,24, maar bloedbestanddelen kunnen worden aangetast bij UV-lichtbestraling30. Er wordt ook gemeld dat bloedplaatjes blootgesteld aan UV geleidelijk de prestaties van de activeringsmarkers P-selectin en LIMP-CD63 op hun membranen verbeteren. De cytotoxiciteit van UV en hoge intensiteit bestraling moet worden onderzocht en een fotosensitizer die ongecompliceerd en veilig is tijdens een FMN-fotoreactie met zichtbaar licht zou van groot nut zijn.

Licht van kortere golflengten heeft meer energie en heeft veel meer kans om ernstige schade aan cellen te veroorzaken. In aanwezigheid van een geschikte fotosensitizer kan bestraling met violet licht met lage intensiteit pathogene micro-organismen remmen. De fotosensibilisatie en het genereren van figure-introduction-3 FMN bij bestraling met violet licht is dus belangrijk om te bestuderen, om de route te bepalen waarmee ROS van FMN-fotolyse de inactivatie van bacteriën verhoogt.

Antimicrobiële controle is een veel voorkomend probleem en de ontwikkeling van nieuwe antibiotica duurt vaak tientallen jaren. Na bestraling met violet licht kan foto-inactivatie die wordt bemiddeld door FMN milieupathogene bacteriën vernietigen. Deze studie presenteert een effectief antimicrobieel protocol in vitro met violet licht voor het aansturen van FMN-fotolyse en dus het figure-introduction-4 genereren van aPDI. De microbiële levensvatbaarheid van S. aureus wordt gebruikt om de haalbaarheid van FMN-geïnduceerde aPDI te bepalen.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Protocol

1. Fotolyse systeem instellen

  1. Monteer zes light-emitting diodes (LED) (DC 12 V) aan de binnenkant van een ondoorzichtige plastic beker (8 cm x 7 cm) zoals weergegeven in figuur 1 om een fotolysesysteem op te zetten31.
  2. Voeg reactanten (zie hieronder) toe aan de glazen reageerbuizen (13 mm in diameter en 100 mm hoog) en zet de buisjes aan de bovenkant van de beker vast zoals aangegeven in figuur 1. Plaats de proefopstelling in een ruimte met een constante temperatuur van 25 ± 3 °C.
  3. Bewaak en registreer de temperatuur van testeenheden gedurende de fotolytische reacties door een infraroodthermometer.
    OPMERKING: Figuur 2 toont de emissiespectra voor blauwe, groene, rode en violette lichten, zoals geregistreerd met een gekalibreerde UV-Vis optische spectrometer. De golflengten die overeenkomen met het absorptiemaximum voor blauwe, groene, rode en violette LED-lampen die in de studie worden gebruikt, zijn respectievelijk 465, 529, 632 en 405 nm. De LED-chips kunnen het apparaat verwarmen tijdens bestralingsexperimenten. Het hele fotoreactiesysteem in elk experiment werd daarom in een ruimte geplaatst waar de temperatuur constant werd gehouden op 25 ± 3 °C.

2. Het effect van de lichtgolflengte op de fotolyse van FMN (figuur 3)

  1. Bereid een 0,1 mM FMN-oplossing in 100 mM kaliumfosfaatbuffer (PB) (pH 7,8). Stel FMN-monsters (elk 3 ml) gedurende 5 minuten bloot aan blauw, groen, rood of violet licht met een intensiteit van 10 W/m2 . Houd 3 ml FMN-oplossing in het donker als controle.
  2. Registreer de absorptie van bestraalde FMN-monsters in het bereik van 250-750 nm met behulp van een UV / zichtbare spectrofotometer.

3. Nitroblauw tetrazolium (NBT) reductiemethode om te detecteren figure-protocol-1 (figuur 4).

OPMERKING: De NBT-reductiemethode die hier wordt gebruikt, is enigszins gewijzigd ten opzichte van de test voor riboflavine-fotoreactie. De NBT-reductiemethode wordt gebruikt om het niveau van figure-protocol-2 gegenereerde FMN-fotolyse te evalueren. Het fotochemisch geëxciteerde FMN wordt eerst door L-methionine gereduceerd tot een semichinon, dat vervolgens een elektron aan zuurstof doneert dat aanleiding geeft tot figure-protocol-331. De as-gegenereerde figure-protocol-4 reduceert NBT tot formazan, die een karakteristieke absorptie heeft bij 560 nm32.

  1. Voeg 109,3 mg L-methionine toe aan 73,3 ml PB (100 mM; pH 7,8). Vortex de oplossing om de L-methionine op te lossen.
  2. Nadat de L-methionine volledig is opgelost, voegt u 10 mg NBT-poeder en 1,53 ml 0,117 mM FMN toe aan de oplossing. Voor elke 1 ml van de toegepaste reactieoplossing (d.w.z. een mengsel van FMN, L-methionine en NBT) zijn de uiteindelijke concentraties FMN, methionine en NBT respectievelijk 2,4 x 10-6 M, 1,0 x 10-2 M en 1,6 x 10-4 M.
  3. Stel de reactieoplossing (1 ml) gedurende 1-5 minuten bloot aan blauwe of violette LED-lichtstraling bij 10 W/m2 .
  4. Detecteer de figure-protocol-5 soort (uit de absorptie bij 560 nm) geproduceerd door de fotochemische reactie, die NBT vermindert en formazan produceert.

4. Levensvatbaarheid van S. aureus na FMN-fotolyse (figuur 5)

  1. Breng een kolonie S. aureus (BCRC 10451) van een gekweekte plaat over in 10 ml Lysogeny-bouillon in een 15 ml met schroefdeksel bedekte reageerbuis. Kweek in een shaker bij 37 °C gedurende 16 uur.
  2. Breng 0,5 ml van de cultuur over in een centrifugebuis van 1,5 ml. Voeg gesteriliseerd water toe aan de centrifugebuis om de cultuur te verdunnen tot een optische dichtheid van 0,5 bij 600 nm (OD600) (~ 6 x 107 CFU / ml).
  3. Breng 0,5 ml van de cultuur over naar een centrifugebuis van 1,5 ml, centrifugeer bij 14.000 x g gedurende 10 minuten en decanteer het supernatant om een celpellet te verkrijgen.
  4. Voeg 1 ml FMN-gebufferde oplossing (30, 60 en 120 μM FMN in PB) toe aan de celpellets verkregen zoals in stap 4.3, en vortex. Voeg voor bestraalde controle alleen 1 ml PB toe.
  5. Breng elk van de levensvatbare bacteriële celoplossingen met alleen 30 μM FMN en PB over in glazen buizen en bestraal ze met violet licht bij 10 W/m2 gedurende 30 minuten.
  6. Breng elk van de levensvatbare bacteriële celoplossingen met 30, 60 en 120 μM FMN en PB alleen over in glazen buizen en bestraal ze met blauw licht bij 20 W/m2 gedurende 120 min. Plaats een andere glazen buis met 1 ml levensvatbare bacteriële celoplossing met 120 μM FMN en bestraal deze met blauw licht bij 20 W/m2 gedurende 60 minuten.
  7. Stel reageerbuizen in zoals beschreven in stap 4.5 en 4.6 en bedek ze met dikke aluminiumfolies. Deze buizen dienen als donkere bedieningselementen.
  8. Houd de bestralingskamer (evenals de donkere bedieningselementen) in een koelcel op 9 ± 1 °C gedurende de bestralingsperiode van 30-120 minuten.
    OPMERKING: Warmte die vrijkomt door LED-lampen kan niet worden genegeerd, omdat de LED-chips die in de beker zijn geplaatst, het fotoreactiesysteem kunnen verwarmen tijdens bestralingsexperimenten. De experimenten werden daarom uitgevoerd in een koelcel met een temperatuur van 9 ± 1 °C.
  9. Breng na bestraling 0,2 ml van elk van de reactieoplossingen over op een Luria agar (LA) plaat. Verdeel de bacteriën over de plaat met een L-vormige glazen staaf en incubeer een nacht bij 37 °C.
  10. Bereken het aantal levensvatbare platen en de inactivatiesnelheden van S. aureus na nachtelijke groei.
    OPMERKING: De inactivatiesnelheid van S. aureus wordt berekend als de procentuele reductie, die gelijk is aan [1 -I / D] ×100%, waarbij I en D respectievelijk het aantal CFU's in het bestraalde monster en de donkere controle aangeven. De procentuele reductie wordt gedefinieerd als een negatieve waarde van het inactiveringspercentage.

5. Detectie van figure-protocol-6 in S. aureus (figuur 6)

  1. Bereid de S. aureusmonsters voor zoals beschreven in stap 4.
  2. Verdun de bacteriële dichtheid van de monsters met gesteriliseerd water tot een optische dichtheid van 0,5 bij 600 nm (OD600, ~ 6 x 106 CFU / ml). Breng 0,5 ml van de cultuur over in een centrifugebuis van 1,5 ml. Centrifugeer bij 14.000 x g gedurende 10 minuten en decanteer het supernatant om een celpellet te verkrijgen.
  3. Voeg 0,1093 g L-methionine, 0,1 g NBT en 25 ml FMN (400, 240 of 120 μM) toe aan 75 ml PB. Voor elke 1 ml van de toegepaste reactant zijn de eindconcentraties van FMN, methionine en NBT respectievelijk 100 (60 of 30) x 10-6 M, 7,3 x 10-3 M en 1,2 x 10-3 M.
  4. Voeg 1 ml van elke reactante oplossing (d.w.z. met verschillende FMN-concentraties) toe aan de celpellets die zijn verkregen zoals in stap 5.2. Bestraal de oplossingen door violet licht op 10 W/m2 gedurende 10 min.
  5. Centrifugeer het mengsel op 14.000 x g gedurende 10 minuten en decanteer het supernatant. Resuspendeer de pellet in 1 ml dimethylsulfoxide (DMSO) om de gereduceerde NBT te extraheren. Detecteer de geproduceerde figure-protocol-7 soorten uit de absorptie bij 560 nm.

6. Statistische analyse

  1. Druk gegevens uit als gemiddelde ± standaarddeviatie (SD) van drie onafhankelijke tests.
  2. Pas een homoscedastische t-test met twee monsters toe om te evalueren of twee metingen verschillend zijn. p-waarden < 0,05 worden als statistisch significant beschouwd.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Resultaten

Effect van lichtgolflengte op FMN
De absorptiespectra van 0,1 mM FMN die wordt bestraald met blauwe, groene, rode en violette LED's zijn weergegeven in figuur 3. Er zijn twee pieken voor FMN (372 nm en 444 nm) voor de donkere controle. Groen en rood licht hebben geen effect omdat veranderingen in de spectra onbeduidend zijn. Aan de andere kant wordt de respectieve absorptie van FMN bij 444 nm verminderd met respectievelijk ongeveer 19% en 34% na blauwe en violette lichtbe...

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Discussie

Een fotosensitizer verhoogt de fotochemische reactie van chemische verbindingen om ROS te genereren. Pathogene micro-organismen kunnen worden geïnactiveerd door lichtbestraling in aanwezigheid van fotosensitizers. Deze studie bepaalt de aPDI van S. aureus als gevolg van ROS gegenereerd door violette lichtbestraling van een exogene fotosensitizer, FMN.

Zoals te zien is in figuur 3, is voor FMN de absorptie bij 444 nm aanzienlijk verminderd na 5 minuten bes...

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Openbaarmakingen

De auteurs verklaren geen belangenconflicten.

Dankbetuigingen

De auteurs zijn Dr. Tak-Wah Wong en Mr. Zong-Jhe Hsieh dankbaar voor hun steun bij experimenten.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Materialen

Lijst van materialen gebruikt in dit artikel
NaamBedrijfCatalogusnummerOpmerkingen
Blue, green and red LED lightsVita LED Technologies Co., Tainan, TaiwanDC 12 V 5050
Dimethyl SulfoxideSigma-Aldrich, St. Louis, MO190186
Infrared thermometerRaytek Co. Santa Cruz, CAMT4
LB brothDifco Co., NJ
L-MethionineSigma-Aldrich, St. Louis, MO1.05707
NBTBio Basic, Inc. Markham, Ontario, Canada
Power supplyChina tech Co., New Taipei City, TaiwanYP30-3-2
Riboflavin 5′-phosphateSigma-Aldrich, St. Louis, MOR7774
RNaseNew England BioLabs, Inc. Ipswich, MA
Solar power meterTenmars Electronics Co., Taipei, TaiwanTM-207
Staphylococcus aureus subsp. aureusBioresource Collection and Research Center (BCRC), Hsinchu, Taiwan10451
UV-Vis optical spectrometerOcean Optics, Dunedin, FLUSB4000
UV-Vis spectrophotometerHitachi High-Tech Science Corporation, Tokyo, JapanU-2900
Violet LEDLong-hui Electronic Co., LTD, Dongguan, China

Referenties

  1. Jian, H. L., Cheng, C. W., Chen, L. Y., Liang, J. Y. The photochemistry of riboflavin. MC-Transaction on Biotechnology. 3, 1-11 (2011).
  2. Lin, Y., Eitenmiller, R. R., Landen, W. O. Riboflavin. Vitamin analysis for the health and food sciences. , CRC Press. 329-360 (2008).
  3. Xie, L. J., Wang, R. L., Wang, D., Liu, L., Cheng, L. Visible-light-mediated oxidative demethylation of N(6)-methyl adenines. Chemical Communications. 53 (77), 10734-10737 (2017).
  4. Tim, M. Strategies to optimize photosensitizers for photodynamic inactivation of bacteria. Journal of Photochemistry and Photobiology B: Biology. 150, 2-10 (2015).
  5. Maisch, T., et al. Photodynamic inactivation of multi-resistant bacteria (PIB) - a new approach to treat superficial infections in the 21st century. Journal of the German Society of Dermatology. 9 (5), 360-366 (2011).
  6. Hamblin, M. R. Antimicrobial photodynamic inactivation: a bright new technique to kill resistant microbes. Current Opinion in Microbiology. 33, 67-73 (2016).
  7. Del Rosso, J. Q. Oral Doxycycline in the management of acne vulgaris: Current perspectives on clinical use and recent findings with a new double-scored small tablet formulation. The Journal of Clinical and Aesthetic Dermatology. 8 (5), 19-26 (2015).
  8. Wong, T. W., et al. Photodynamic inactivation of methicillin-resistant Staphylococcus aureus by indocyanine green and near infrared light. Dematologica Sinica. 36 (1), 8-15 (2018).
  9. Yuann, J. M. P., et al. Effects of free radicals from doxycycline hyclate and minocycline hydrochloride under blue light irradiation on the deactivation of Staphylococcus aureus, including a methicillin-resistant strain. Journal of Photochemistry and Photobiology B: Biology. 226, 112370(2022).
  10. Liang, J. Y., Cheng, C. W., Yu, C. H., Chen, L. Y. Investigations of blue light-induced reactive oxygen species from flavin mononucleotide on inactivation of E. coli. Journal of Photochemistry and Photobiology B: Biology. 143, 82-88 (2015).
  11. Yang, M. J., et al. Effects of blue-light-induced free radical formation from catechin hydrate on the inactivation of Acinetobacter baumannii, Including a carbapenem-resistant strain. Molecules. 23 (7), 1631(2018).
  12. Yuann, J. M. P., et al. A study of catechin photostability using photolytic processing. Processes. 9 (2), 293(2021).
  13. Yuann, J. M. P., Wang, J. S., Jian, H. L., Lin, C. C., Liang, J. Y. Effects of Clinacanthus nutans (Burm. f) Lindau leaf extracts on protection of plasmid DNA from riboflavin photoreaction. MC-Transaction on Biotechnology. 4 (1), 45-59 (2012).
  14. Rineh, A., et al. Attaching NorA efflux pump inhibitors to methylene blue enhances antimicrobial photodynamic inactivation of Escherichia coli and Acinetobacter baumannii in vitro and in vivo. Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters. 28 (16), 2736-2740 (2018).
  15. Dai, T., et al. Photodynamic therapy for Acinetobacter baumannii burn infections in mice. Antimicrobial Agents and Chemotherapy. 53 (9), 3929-3934 (2009).
  16. Nitzan, Y., Ashkenazi, H. Photoinactivation of Acinetobacter baumannii and Escherichia coli B by a cationic hydrophilic porphyrin at various light wavelengths. Current Microbiology. 42 (6), 408-414 (2001).
  17. Tseng, C. C., et al. Altered susceptibility to the bactericidal effect of photocatalytic oxidation by TiO2 is related to colistin resistance development in Acinetobacter baumannii. Applied Microbiology and Biotechnology. 100 (19), 8549-8561 (2016).
  18. Boluki, E., et al. Antimicrobial activity of photodynamic therapy in combination with colistin against a pan-drug resistant Acinetobacter baumannii isolated from burn patient. Photodiagnosis and Photodynamic Therapy. 18, 1-5 (2017).
  19. Yang, M. Y., et al. Blue light irradiation triggers the antimicrobial potential of ZnO nanoparticles on drug-resistant Acinetobacter baumannii. Journal of Photochemistry and Photobiology B, Biology. 180, 235-242 (2018).
  20. Code of Federal Regulations. , Available from: https://www.gpo.gov/fdsys/pkg/CFR-2009-title21-vol6/pdf/CFR-2009-title21-vol6-sec582-5695.pdf (2022).
  21. Lu, C. Y., et al. Generation and photosensitization properties of the oxidized radical of riboflavin: a laser flash photolysis study. Journal of Photochemistry and Photobiology B, Biology. 52 (1-3), 111-116 (1999).
  22. Sato, K., et al. The primary cytotoxicity in ultraviolet-a-irradiated riboflavin solution is derived from hydrogen peroxide. The Journal of Investigative Dermatology. 105 (4), 608-612 (1995).
  23. Tripathi, A. K., et al. Attenuated neuroprotective effect of riboflavin under UV-B irradiation via miR-203/c-Jun signaling pathway in vivo and in vitro. Journal of Biomedical Science. 21 (1), 39(2014).
  24. Liang, J. Y., et al. Blue light induced free radicals from riboflavin on E. coli DNA damage. Journal of Photochemistry and Photobiology B, Biology. 119, 60-64 (2013).
  25. Ottaway, P. B. The Technology of Vitamins in Food. , Chapman and Hall. London. Ch. 5 233-244 (1993).
  26. Kumar, V., et al. Riboflavin and UV-light based pathogen reduction: extent and consequence of DNA damage at the molecular level. Photochemistry and Photobiology. 80 (1), 15-21 (2004).
  27. Ito, K., Inoue, S., Yamamoto, K., Kawanishi, S. 8-Hydroxydeoxyguanosine formation at the 5'site of 5'-GG-3'sequences in double-stranded DNA by UV radiation with riboflavin. Journal of Biological Chemistry. 268 (18), 13221-13227 (1993).
  28. Liang, J. Y., Yuann, J. M. P., Hsie, Z. J., Huang, S. T., Chen, C. C. Blue light induced free radicals from riboflavin in degradation of crystal violet by microbial viability evaluation. Journal of Photochemistry and Photobiology B, Biology. 174, 355-363 (2017).
  29. Yang, M. Y., Chang, C. J., Chen, L. Y. Blue light induced reactive oxygen species from flavin mononucleotide and flavin adenine dinucleotide on lethality of HeLa cells. Journal of Photochemistry and Photobiology B, Biology. 173, 325-332 (2017).
  30. Cui, Z., Huang, Y., Mo, Q., Wang, X., Qian, K. Inactivation of lymphocytes in blood products using riboflavin photochemical treatment with visible light. Photochemistry and Photobiology. 84 (5), 1195-1200 (2008).
  31. Wong, T. W., Cheng, C. W., Hsieh, Z. J., Liang, J. Y. Effects of blue or violet light on the inactivation of Staphylococcus aureus by riboflavin-5′-phosphate photolysis. Journal of Photochemistry and Photobiology B: Biology. 173, 672-680 (2017).
  32. Russell, L. F., Vanderslice, J. T. Comprehensive review of vitamin B2 analytical methodology. Journal of Micronutrient Analysis. 8, 257-310 (1990).
  33. Cheng, C. W., Chen, L. Y., Chou, C. W., Liang, J. Y. Investigations of riboflavin photolysis via coloured light in the nitro blue tetrazolium assay for superoxide dismutase activity. Journal of Photochemistry and Photobiology B: Biology. 148, 262-267 (2015).
  34. Huang, S. T., et al. Effects of 462 nm light-emitting diode on the inactivation of Escherichia coli and a multidrug-resistant by tetracycline photoreaction. Journal of Clinical Medicine. 7 (9), 278(2018).
  35. Barua, M. G., Escalada, J. P., Bregliani, M., Pajares, A., Criado, S. Antioxidant capacity of (+)-catechin visible-light photoirradiated in the presence of vitamin B2. Redox Report: Communications in Free Radical Research. 22 (6), 282-289 (2017).
  36. Castillo, C., Criado, S., Díaz, M., García, N. A. Riboflavin as a sensitiser in the photodegradation of tetracyclines. Kinetics, mechanism and microbiological implications. Dyes and Pigments. 72 (2), 178-184 (2007).
  37. Huvaere, K., Sinnaeve, B., Van Bocxlaer, J., Skibsted, L. H. Flavonoid deactivation of excited state flavins: reaction monitoring by mass spectrometry. Journal of Agricultural and Food Chemistry. 60 (36), 9261-9272 (2012).
  38. Massad, W. A., Bertolotti, S., Garcia, N. A. Kinetics and mechanism of the vitamin B2-sensitized photooxidation of isoproterenol. Photochemistry and Photobiology. 79 (5), 428-433 (2004).
  39. Maclean, M., MacGregor, S. J., Anderson, J. G., Woolsey, G. High-intensity narrow-spectrum light inactivation and wavelength sensitivity of Staphylococcus aureus. FEMS Microbiology Letters. 285 (2), 227-232 (2008).
  40. Huang, S. T., et al. The influence of the degradation of tetracycline by free radicals from riboflavin-5'-phosphate photolysis on microbial viability. Microorganisms. 7 (11), 500(2019).
  41. Maisch, T., et al. Fast and effective photodynamic inactivation of multiresistant bacteria by cationic riboflavin derivatives. PLoS One. 9 (12), 111792(2014).
  42. Grijzenhout, M., et al. Ultraviolet-B irradiation of platelets induces a dose-dependent increase in the expression of platelet activation markers with storage. British Journal of Haematology. 83 (4), 627-632 (1993).

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Herprints en machtigingen

Tags

RiboflavinefotolyseInactivering door zichtbaar lichtFlavinmononucleotideStaphylococcus aureusReactieve zuurstofsoortenDetectie van superoxide-radicalenNBT-reductieBestraling met violet lichtBacteriële inactiveringFotosensibilisatortherapie
Inactivatie van pathogenen via zichtbaar-licht fotolyse van riboflavine-5′-fosfaat
Neem contact met ons op
Aanbevelen aan de bibliotheek

Privacy

Gebruiksvoorwaarden

Beleidsoverzicht

Copyright © 2026 MyJoVE Corporation. Alle rechten voorbehouden.