Methodenartikel
Een methode met behulp van groene koffievruchten (GFs) werd ontwikkeld om de toxiciteit van insecticiden tegen de koffiebessenboorder (CBB) te testen. Insecticiden of giftige stoffen werden aangebracht op gedesinfecteerde GFs voor of na CBB-besmetting. Insectensterfte, afstotendheid en voortplantingsvermogen, naast andere parameters, werden geëvalueerd.
Voorafgaand aan het aanbevelen van insecticiden om de koffiebessenboorder (CBB) Hypothenemus hampei te behandelen, is het waardevol om de mortaliteit en afstotendheid van deze insecticiden tegen volwassen insecten of hun impact op de reproductieve output te kennen. Momenteel beschikbare methoden beoordelen echter alleen de sterfte bij volwassenen, waardoor de selectie van nieuwe insecticiden met een ander werkingsmechanisme wordt beperkt. In dit werk werden verschillende experimentele methoden onderzocht om de verschillende effecten op het CBB onder laboratoriumomstandigheden te identificeren. Hiervoor werden groene koffievruchten (GFs) verzameld en gedesinfecteerd door onderdompeling in natriumhypochlorietoplossing gevolgd door UV-lichtbestraling. Tegelijkertijd werden CBB-volwassenen uit een kolonie gedesinfecteerd door onderdompeling in natriumhypochlorietoplossing. Om de bescherming van fruit (pre-besmetting) te beoordelen, werden de vruchten in plastic dozen geplaatst en werden de insecticiden aangebracht. Vervolgens werden de CBB-volwassenen vrijgelaten met een snelheid van twee CBB's per GF. De GF's werden onder gecontroleerde omstandigheden achtergelaten om CBB-besmetting en overleving na 1, 7, 15 en 21 dagen te evalueren. Om de werkzaamheid van insecticiden na CBB-besmetting (postinfestatie) te evalueren, werden CBB-volwassenen vrijgegeven aan de GFs in een verhouding van 2: 1 gedurende 3 uur bij 21 ° C. Aangetaste vruchten met CBB-volwassenen met hun buik gedeeltelijk blootgesteld werden geselecteerd en in 96-well racks geplaatst, en de CBB's die in de vruchten boren, werden direct behandeld. Na 20 dagen werden de vruchten ontleed en werden de biologische CBB-stadia in elke vrucht geregistreerd. De GFs dienden als substraten die natuurlijke omstandigheden nabootsen om toxische, chemische en biologische insecticiden tegen de CBB te evalueren.
De koffiebessenboorder (CBB), Hypothenemus hampei, werd voor het eerst gedetecteerd in 1988 in Colombia en is sindsdien uitgegroeid tot de belangrijkste plaagsoort van het koffiegewas. CBB-vrouwtjes laten de geboortevrucht al bevrucht achter, op zoek naar nieuwe vruchten geleid door de vluchtige chemicaliën die ze 1,2 uitstoten. Een volledige cyclus wordt binnen 23 dagen3 bij een temperatuur van 25 °C voltooid. De cyclus begint met het stichtende vrouwtje dat het zaad penetreert en eieren legt in het fruitendosperm. De afgesloten larven eten het zaad op. Als de vruchten op dit....
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
OPMERKING: Dit protocol behandelt verschillende methoden om verschillende effecten op de CBB onder laboratoriumomstandigheden te identificeren.
1. Fruitwinning
2. Fruitdesinfectie20
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
De resultaten toonden aan dat de CBB-vrouwtjes de vruchten herkenden, en afhankelijk van de kenmerken van het vruchtoppervlak en de uitgestoten geuren, begonnen de CBB-vrouwtjes de vruchten binnen 3 uur bij 21 °C te penetreren of te boren.
Het effect van een insecticide op de CBB bij toepassing op de koffievruchten (pre-besmettingsprocedure) na 24 uur en na verloop van tijd is weergegeven in figuur 4. De twee insecticiden (alkaloïde emulsie bij 5% en 6%) veroorzaa.......
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
In dit protocol zijn desinfectie van de vruchten en de insecten kritieke stappen. Wanneer vruchten uit het veld in het laboratorium worden gebruikt, vertonen ze vaak een hoge besmetting en uitdroging, omdat micro-organismen en mijten aanwezig zijn in de opperhuid 7,15,16. Daarom zal het gebruik van fruit of insecten die niet zijn gedesinfecteerd insectensterfte veroorzaken als gevolg van besmetting veroorzaakt door micro-organis.......
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Geen van de auteurs heeft belangenconflicten te melden.
De auteurs spreken hun dank uit aan de Nationale Federatie van Koffietelers van Colombia, de assistenten van de afdeling Entomologie (Diana Marcela Giraldo, Gloria Patricia Naranjo), Experiment Station Naranjal en Jhon Félix Trejos.
....Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
| Naam | Bedrijf | Catalogusnummer | Opmerkingen |
|---|---|---|---|
| Beaker with spout, low form 500 mL | BRAND PP | BR87826 | |
| Benchtop Shaker | New Brunswick Scientific Innova 4000 Incubator Shaker | ||
| Dishwashing liquid soap-AXION | Colgate-Palmolive | AXION | |
| Hood; Horizontal Laminar Flow Station | Terra Universal | Poedergecoat staal, 1930 mm B x 1118 mm D x 1619 mm H, 120 V (https://www.terrauniversal.com/hood-horizontal-laminar-flow-station-9620-64a.html) | |
| Insects CBB | BIOCAFE | (http://avispitas.blogspot.com/p/biocafe.html). | |
| Multi Fold White paper towels | Familia | 73551 | |
| Preval Spray unit | Preval Merck | Z365556-1KT | https://www.sigmaaldrich.com/CO/es/product/sigma/z365556?gclid=Cj0KCQiAweaNBhDEARIsAJ 5hwbfZOy1TWGj6huatFtRQt AzOyHe5-oBiKnOUK2T1exuuk WwJLdvxkvsaAjoYEALw_wcB |
| Reversible Racks 96-Well | heathrowscientific | HEA2345A | https://www.heathrowscientific.com/reversible-racks-96-well-i-hea2345a |
| Scalpel blades N 11 | Merck | S2771-100EA | |
| Scalpel handles N3 | Merck | S2896-1EA | |
| Sodium Hypochloride | The clorox company | Clorox | |
| Stereo Microscope | Zeiss | Stemi 508 | https://www.zeiss.com/microscopy/int/products/stereo-zoom-microscopes/stemi-508.html |
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Toestemming aanvragen om de tekst of afbeeldingen van dit JoVE-artikel te hergebruiken
Toestemming aanvragen