Methodenartikel

Rat Burn Model om cutane thermische verbranding en infectie van volledige dikte te bestuderen

6.9K weergaven

⸱

DOI:

10.3791/64345

⸱

23 augustus 2022

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1UNC Eshelman School of Pharmacy, University of North Carolina at Chapel Hill, 2Department of Biochemistry & Pharmacology, School of Biomedical Sciences, Faculty of Medicine, Dentistry and Health Sciences, The University of Melbourne, 3Department of Microbiology & Immunology, University of North Carolina School of Medicine, 4Department of Surgery, University of North Carolina at Chapel Hill, 5Curriculum in Toxicology and Environmental Medicine, University of North Carolina at Chapel Hill, 6Department of Microbiology, Monash Biomedicine Discovery Institute, Monash University

In dit artikel

Samenvatting

Een model dat het klinische scenario van brandwond en infectie nabootst, is noodzakelijk voor het bevorderen van brandwondenonderzoek. Het huidige protocol demonstreert een eenvoudig en reproduceerbaar rattenbrandinfectiemodel dat vergelijkbaar is met dat bij mensen. Dit vergemakkelijkt de studie van brandwonden en infecties na brandwond voor het ontwikkelen van nieuwe actuele antibioticabehandelingen.

Samenvatting

Brandinductiemethoden worden inconsistent beschreven in rattenmodellen. Een uniform brandwondmodel, dat het klinische scenario weergeeft, is nodig om reproduceerbaar brandwondenonderzoek uit te voeren. Het huidige protocol beschrijft een eenvoudige en reproduceerbare methode om ~20% totale lichaamsoppervlakte (TBSA) brandwonden van volledige dikte bij ratten te creëren. Hier werd een koperen staaf van 22,89 cm2 (5,4 cm diameter) verwarmd tot 97 °C in een waterbad op het huidoppervlak van de rat aangebracht om de brandwond op te wekken. Een koperen staaf met een hoge thermische geleidbaarheid was in staat om de warmte dieper in het huidweefsel af te voeren om een brandwond van volledige dikte te creëren. Histologieanalyse toont verzwakte epidermis met stollingsschade aan de volledige dikte van de dermis en het onderhuidse weefsel. Bovendien is dit model representatief voor de klinische situaties die worden waargenomen bij gehospitaliseerde brandwondenpatiënten na brandwonden, zoals immuunontregeling en bacteriële infecties. Het model kan de systemische bacteriële infectie door zowel Gram-positieve als Gram-negatieve bacteriën samenvatten. Kortom, dit artikel presenteert een gemakkelijk te leren en robuust rattenbrandmodel dat de klinische situaties nabootst, waaronder immuunontregeling en bacteriële infecties, wat van groot nut is voor de ontwikkeling van nieuwe actuele antibiotica voor brandwonden en infecties.

Inleiding

Brandwonden behoren tot de meest verwoestende vormen van trauma, met sterftecijfers die 12% bereiken, zelfs in gespecialiseerde brandwondencentra 1,2,3. Volgens onlangs gepubliceerde rapporten hebben ~ 486.000 brandwondenpatiënten jaarlijks medische zorg nodig in de Verenigde Staten, met bijna 3.500 sterfgevallen 1,2,3,4,5,6. Brandwonden vormen een grote uitdaging voor het immuunsysteem van patiënten en creëren een aanzienlijke open wond, die langzaam geneest, waardoor ze vatbaar zijn voor huid-, long- en systemische kolonisatie met nosocomiale, opportunistische bacteriën. Immuunontregeling in combinatie met de bacteriële infectie is geassocieerd met verhoogde morbiditeit en mortaliteit bij brandwondenpatiënten7.

Een dierlijk brand- en infectiemodel is essentieel voor het bestuderen van de pathogenese van bacteriële infecties na huidbeschadiging en immuunsuppressie geassocieerd met brandwondentrauma. Dergelijke modellen maken het ontwerp en de evaluatie van nieuwe methoden voor de behandeling van bacteriële infecties bij brandwondenpatiënten mogelijk. Ratten en mensen delen vergelijkbare huidfysiologische en pathologische kenmerken die eerder zijn gedocumenteerd8. Bovendien zijn ratten kleiner van formaat, waardoor ze gemakkelijker te hanteren, betaalbaarder en gemakkelijker te verkrijgen en te onderhouden zijn dan grotere diermodellen.

Deze eigenschappen maken ratten een ideaal modeldier om brandwonden en infecties te bestuderen9. Helaas is de techniek voor brandwondinductie inconsistent en vaak minimaal beschreven 10,11,12,13,14. Het huidige protocol is ontworpen om een eenvoudige, kosteneffectieve en reproduceerbare procedure te ontwikkelen voor het creëren van een consistente brandwond van volledige dikte in een rattenmodel dat het klinische scenario simuleert en kan worden gebruikt om immuunsuppressie en bacteriële infectie te evalueren.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Protocol

Alle procedures werden goedgekeurd door de Institutional Animal Care and Use Committee (IACUC) van de Universiteit van North Carolina en werden uitgevoerd in overeenstemming met de vastgestelde richtlijnen. Mannelijke en vrouwelijke Sprague Dawley-ratten (250-300 g) van 7-9 weken oud werden gebruikt voor de experimenten. Alle dieren werden gehuisvest in een licht-donkercyclus van 12 uur met vrije toegang tot voedsel en water ad libitum. Werk altijd samen met uw dierenarts over een pijnstillend plan voorafgaand aan de start van het onderzoek.

1. Ratten voorbereiden op de brandwond

  1. Bereid de dieren 24 uur voor op brandwonden 24 uur voorafgaand aan de brandwond.
  2. Verdoof de rat met 5% isofluraan in 100% zuurstof in een inductiekamer gedurende 5 minuten (stroomsnelheid: 2 L/min) totdat de ademhaling is vertraagd.
  3. Zodra de rat diep verdoofd is (niet reagerend op teenknijpen op alle ledematen), verplaatst u de rat naar een verwarmingskussen in buikligging en vermindert u de isofluraan tot 1,5% zuurstof voor onderhoud door een neuskegel.
  4. Om uitdroging van het hoornvlies na anesthesie en tijdens de procedure te voorkomen, brengt u oogglijmiddel aan op de hoornvliezen van beide ogen met behulp van een applicator met katoenpunt.
  5. Scheer het dorsale gebied van de rat met behulp van een elektrische tondeuse (zie de tabel met materialen) en verwijder zoveel mogelijk haar in een grote rechthoek van de schouderbladen tot aan de basis van de staart (figuur 2A).
  6. Reinig het geschoren gebied met een tissue gedrenkt in zoutoplossing om de losse haren weg te vegen. Breng ontharingslotion aan op het geschoren gebied met behulp van een applicator met katoenpunt en laat het ~ 3 minuten intrekken.
    OPMERKING: Toepassing van de genoemde ontharingslotion gedurende meer dan 3 minuten zal rode uitslag op de huid veroorzaken.
  7. Veeg het gebied twee keer af met een nat gaasspons om de lotion te verwijderen en huidirritatie te voorkomen.
  8. Schakel de isofluraan uit, verwijder de neuskegel en plaats de rat in de herstelkooi.
    OPMERKING: Plaats een verwarmingskussen in de herstelkooi.
  9. Breng het herstelde dier over naar een schone huisvestingskooi voor de brandwondenprocedure van de volgende dag (het kan ~ 10-15 minuten duren voordat de rat herstelt van de anesthesie).

2. Het opwekken van de brandwond bij ratten

  1. Stel op de dag van de verbranding de temperatuur van het waterbad in op 97 °C en plaats alle vier de koperen staven (elk 420 g; Figuur 1) in het waterbad 1 uur voorafgaand aan het brandexperiment om de staafjes gelijkmatig op te laten warmen.
    OPMERKING: De staven moeten in het water worden ondergedompeld. Controleer de nauwkeurigheid van de digitale temperatuurweergave met behulp van een thermometer vóór het experiment.
  2. Verdoof de rat zoals vermeld in rubriek 1.
  3. Zodra de rat niet reageert op teenknijpen op alle ledematen, plaats hem dan op een verwarmingskussen in buikligging met 1,5% isofluraan in zuurstof voor onderhoud (figuur 2A).
  4. Injecteer morfine (20 mg/kg lichaamsgewicht) via de intraperitoneale (i.p.) route voor pijnbestrijding6.
  5. Controleer de temperatuur van het water in het waterbad. Stel de timer in en trek de hittebestendige handschoenen aan.
  6. Haal een verwarmde koperen staaf uit het waterbad en raak deze gedurende 7 s aan op het dorsumgebied van de rat om de brandwond op te wekken.
    OPMERKING: Houd een minimale afstand (10-15 cm) tussen het waterbad en het dier om warmteverlies te minimaliseren en oefen geen druk uit op de staven tijdens het induceren van de verbranding (d.w.z. contact moet worden gehandhaafd door de zwaartekracht).
  7. Breng vier brandwonden aan, met behulp van één staaf per brandplaats, de ene onmiddellijk na de andere om een ongeveer 20% TBSA-brandwond met volledig contact te produceren (figuur 2B).
  8. Na de brandwond reanimeert u het dier door i.p. injectie van ringeroplossing met lactatie (0,1 ml/g lichaamsgewicht).
    OPMERKING: Gebruik een voor de lichaamstemperatuur aangepaste ringeroplossing om de ratten te reanimeren.
  9. Schakel de isofluraan uit, verwijder de neuskegel en plaats de rat op de warmtemat voor herstel.

3. Bereiding van bacterieel entmateriaal en infectie

  1. Streep het ingevroren monster van Pseudomonas aeruginosa PAO1 en Staphylococcus aureus ATCC25923 op Muller Hinton Agar (MHA) platen, 2 dagen voorafgaand aan het brandexperiment.
  2. Selecteer de volgende dag een enkele kolonie gekweekte bacteriën van de plaat en schraap deze met behulp van een inentlus enigszins van de plaat. Plaats het vervolgens in de kweekbuis om 10 ml Muller Hinton Broth (MHB) te enten en een nacht bij 37 °C in een incubatorschudder te kweken.
  3. Op de dag van de verbranding en infectie, centrifugeer de cultuur op 4.000 × g gedurende 5 minuten. Was de pellet met een normale zoutoplossing (0,9% NaCl-oplossing).
  4. Resuspendeer de bacteriële pellet in zoutoplossing en verdun tot 0,1 OD 600nm (optische dichtheid bij600 nm ). Verdun het bacteriële entmateriaal door 200 μL van deze bacteriële suspensie te nemen en te mengen met 800 μL zoutoplossing om het gewenste bacteriële entmateriaal van 2 × 107 CFU / ml te krijgen.
  5. Injecteer 50 μL P. aeruginosa of S. aureus inoculum bereid in de vorige stap (infectiedosis 1 × 106 CFU) in de verdoofde rat 15 minuten na de brandwond, met behulp van een naald van 29 G subcutaan zo dicht mogelijk bij de brandwond.
  6. Na het infecteren van de brandwond, plaatst u de rat op het verwarmingskussen voor herstel. Zodra het dier herstelt (~ 15-20 min), plaats het in een schone kooi.
    OPMERKING: Na de brandwond, huis één rat per kooi. Gebruik water natvoerkorrels om gemakkelijk te kauwen en plaats ze op de vloer van de kooi voor gemakkelijk bereik.
  7. Vul de waterflessen in de kooi met morfine-spiked water (0,4 mg / ml) voor pijnbestrijding.
    OPMERKING: Orale morfine weerspiegelt de klinische situatie met menselijke brandwondenpatiënten. Deze studie gebruikte orale morfine om deze experimenten vergelijkbaar te houden met menselijke brandwondenpatiënten na overleg met het veterinaire personeel bij tal van gelegenheden. Drink- en gewichtslogboeken werden gedurende het hele experiment bijgehouden. Gebruik hetzelfde drinksysteem tijdens alle procedures. Andere analgetica, zoals Buprenorfine, kunnen subcutaan / intraperitoneaal worden toegediend volgens de richtlijnen voor institutionele dierverzorging.
  8. Vul de controlechecklist in en controleer de dieren nauwlettend op angst of ziekte gedurende de gehele duur van het experiment.

4. Evaluatie van het brandwondje

  1. Evalueer de huidverbranding morfologisch in termen van kleur en marge onmiddellijk na de brandwond.
  2. Bevlek de verbrande huid met hematoxyline en eosine (H&E) om de wondstructuur en epitheliale spleet15 te visualiseren (zie stap 5.6 voor monsterverwerking).

5. Nabewerking van rattenmonsters en bacteriële inventarisatie

  1. Euthanaseer de rat op 24, 48 en 72 uur na de verbranding met een overdosis anesthesie.
  2. Neem bloedmonsters van de ratten via een hartpunctie en verzamel ze in een mini-opvangbuisje.
    1. Analyseer volledige bloedtellingen van de bloedmonsters om het effect van brandwondinductie op het immuunsysteem van de gastheer te bepalen.
  3. Oogst huid, onderhuids weefsel, spieren, longen en milt op het moment van euthanasie.
    OPMERKING: Houd een deel (~ 1 cm × 1 cm; met een gewicht van ~ 200-300 mg) van de huid voor H &E-kleuring en een ander deel voor bacteriële inventarisatie.
  4. Verzamel de weefsels in een opvangbuis van 10 ml en plaats ze in een normale zoutoplossing op ijs voor bacteriële opsomming.
  5. Normaliseer het weefselgewicht met een normale zoutoplossing en homogeniseer de monsters met behulp van een weefselhomogenisator (zie de tabel met materialen).
    1. Verdun de weefselhomogenaten serieel in normale zoutoplossing.
    2. Plaat 100 μL onverdund homogenaat en alle verdunningen van elk weefselmonster op cetrimide agarplaten voor monsters verzameld van ratten die besmet zijn met P. aeruginosa.
      OPMERKING: Gebruik mannitol agarplaten voor het plating monsters verzameld van ratten besmet met S. aureus.
    3. Incubeer de platen bij 37 °C in een incubator gedurende 16-18 uur.
    4. Tel de volgende dag de bacteriekolonies op de platen, vermenigvuldig met de verdunningsverhouding om het aantal CFU / ml te krijgen en normaliseer met het gewicht van het weefsel om het CFU / g-weefsel te berekenen.
    5. Gebruik data-analysesoftware om de bacterietellingen in verschillende organen op de verschillende bemonsteringstijdstippen te plotten.
  6. Voer H &E-kleuring van verbrande huid uit om de wondstructuur en epitheliale opening te visualiseren.
    1. Knip met een schaar en een tandtang een huidpleister van 1 cm x 1 cm van het brandwondengebied en dompel deze gedurende 48 uur bij kamertemperatuur onder in een fixatief (10% neutraal gebufferd formaline, NBF).
      OPMERKING: Draai de container om ervoor te zorgen dat alle weefsels volledig zijn ondergedompeld in het fixatief, met het volume van het fixatief 30x het weefselvolume.
    2. Droog het huidweefsel uit met 70% (v/v) ethanol gedurende 72 uur bij kamertemperatuur.
    3. Verwerk de gedehydrateerde monsters in paraffineblokken om de secties te snijden en te kleuren met H &E15.
    4. Breng de gekleurde dia's digitaal in beeld in een diascanner (zie de Materiaaltabel) met behulp van een 40x-objectief.
    5. Analyseer de gescande afbeelding met behulp van software (zie Aanvullend bestand 1 voor de verwerking van de afbeelding voor analyse; zie de materiaaltabel).
    6. Onderzoek alle velden van het gekleurde huidgedeelte om de toestand van de opperhuid, dermis, onderhuids weefsel en skeletspieren te evalueren.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Resultaten

Het hier gepresenteerde protocol is zeer reproduceerbaar en resulteerde in een derdegraads brandwond van volledige dikte bij ratten. De brandwond ziet er wasachtig wit uit na brandwondinductie (figuur 2B). De kleur van het brandwond veranderde van wit naar bruin in de loop van 72 uur na de verbranding (figuur 2B-E).

Histologische analyse bevestigde een brandwond van volledige dikte (diepte >2,61 mm 24...

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Discussie

Verschillende brandwondenmodellen zijn gepresenteerd om de pathofysiologie van brandwonden te bestuderen 8,12,16,17. In de huidige studie gebruikten we een rattenmodel om een eenvoudig en reproduceerbaar protocol te ontwikkelen om een brandwond van volledige dikte te induceren, gevolgd door een bacteriële infectie om een geïnfecteerd brandwondentrauma bij patiënten te simuleren. De keuze van de...

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Openbaarmakingen

De auteurs hebben geen belangenconflicten bekend te maken.

Dankbetuigingen

De auteurs bedanken de afdeling Vergelijkende Geneeskunde aan de Universiteit van North Carolina voor de verstrekking en verzorging van dieren. We bedanken Lauren Ralph en Mia Evangelista in de Pathology Services Core voor deskundige technische assistentie met histopathologie / digitale pathologie, inclusief weefselsectie en beeldvorming. Dit onderzoek werd ondersteund door een onderzoekssubsidie van het Ministerie van Defensie (Award nummer W81XWH-20-1-0500, GR en TV).

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Materialen

Lijst van materialen gebruikt in dit artikel
NaamBedrijfCatalogusnummerOpmerkingen
1 mL spuitBD, USA309597Word gebruikt voor het injecteren van het pijnstiller
1.7 mL MicrotubeOlympus, USA24-282Word gebruikt om morfine te vervoeren
10% NBFVWR, USA16004-115Word gebruikt om het huidstuk voor kleuring te fixeren
30 mL spuitBD, USA302832Word gebruikt voor het injecteren van de lactaat ringer-oplossing
70% ethyl alcoholFischer Scientific, USABP28184
Aperio AT2 Digital Pathology  Slide Scanner met ImageScope softwareAperio, Technologies Inc., Vista, CA, USAn/aScannen van H & E slides en analyse
Cetrimide agar platenBD, USA285420Selectieve media platen voor Pseudomonas aeruginosa groei
Koperen stavenn/an/aWord gebruikt om de brandwond te induceren
WattenstaafjesOMEGA Surgical supply, USA4225-IMCWord gebruikt om oogzalf aan te brengen
Elektrische scheerapparaatOster, USAGolden A5Word gebruikt om de haren aan de rugzijde te verwijderen
OogvochtDechra, UKn/aDe oogbevochtigingsmiddel om langdurige comfort te bieden en droge ogen te voorkomen
Met pluis gevulde onderlagenMedline, USAMSC281225Word gebruikt in de brandwondprocedure
PincetF.S.T.11027-12Word gebruikt om het huidstuk vast te houden
GaasjesOasis, USAPK412Word gebruikt om de aangebrachte nair-crème van de rugzijde te verwijderen 
Hittebestendige handschoenenn/an/aWord gebruikt om de verwarmde koperen staven vast te houden
Hematologie AnalyzerIDEXX laboratories, USAProCyte Dx
InductiekamerKent Scientific, USAvetFlo-0730Word gebruikt om de dieren te verdoven
InsulinespuitBD, USA329461
IsofluraanPivetal, USANDC46066-755-04Word gebruikt om ratten te verdoven om een verlies van bewustzijn te induceren
Isofluraanverdampern/an/a
Lactated ringer's oplossingicumedical, USANDC0990-7953-09Word gebruikt om de ratten te reanimeren
L-vormige spreiderFischer Scientific, USA14-665-230
Mannitol AgarBD, USA211407Selectieve media platen voor Staphylococcus aureus groei
Minicollect buizen (K2EDTA)greiner bio-one, USA450480Word gebruikt om het bloed te verzamelen
MorfineMallinckrodt, UKNDC0406-8003-30Deze pijnstiller werd gebruikt om het onvermogen te induceren om brandwond-pijn te voelen
Muller Hinton BrothBD, USA275730
Muller Hinton II AgarBD, USA211438
Nair haarverwijderingslotionNair, USAn/aWord gebruikt om de resterende haren aan de rugzijde te verwijderen
Naald 23 GBD, USA305193Word gebruikt om de lactaat ringer-oplossing te injecteren
Normale zoutoplossingn/an/a
SpectrofotometerThermoScientific, USAGenesys 30
Sprague-Dawley ratten, mannelijk en vrouwelijkCharles River Labsn/a7-9 weken oud voor brandwondinductie
Chirurgisch schaarF.S.T.14501-14Word gebruikt om het gewenste huidstuk te snijden
WeefselcollectiebuizenGlobe Scientific220101236
Weefsel HomogenisatorKinematica, Inc, USAPOLYTRON PT2100Word gebruikt om de weefselmonsters te homogeniseren
WaterbadFischer Scientific, USAn/aWord gebruikt om de brandwond te induceren
Gewichte verwarmingskussenComfytemp, USAn/aWord gebruikt tijdens de procedure om de lichaamstemperatuur van de rat warm te houden

Referenties

  1. Peck, M., Molnar, J., Swart, D. A global plan for burn prevention and care. Bulletin of the World Health Organization. 87, 802-803 (2009).
  2. American Burn Association. Burn incidence and treatment in the United States: 2011 fact sheet. Chicago: American Burn Association. , (2011).
  3. Miller, S. F., et al. National burn repository 2007 report: a synopsis of the 2007 call for data. Journal of Burn Care & Research. 29 (6), 862-870 (2008).
  4. Kruger, E., Kowal, S., Bilir, S. P., Han, E., Foster, K. Relationship between patient characteristics and number of procedures as well as length of stay for patients surviving severe burn injuries: analysis of the American Burn Association National Burn Repository. Journal of Burn Care & Research. 41 (5), 1037-1044 (2020).
  5. American Burn Association. Burn incidence and treatment in the United States: 2016. Burn Incidence Fact Sheet. Chicago: American Burn Association. , (2016).
  6. Willis, M. L., et al. Plasma extracellular vesicles released after severe burn injury modulate macrophage phenotype and function. Journal of Leukocyte Biology. 111 (1), 33-49 (2022).
  7. Kartchner, L. B., et al. One-hit wonder: late after burn injury, granulocytes can clear one bacterial infection but cannot control a subsequent infection. Burns. 45 (3), 627-640 (2019).
  8. Abdullahi, A., Amini-Nik, S., Jeschke, M. Animal models in burn research. Cellular and Molecular Life Sciences. 71 (17), 3241-3255 (2014).
  9. Cai, E. Z., et al. Creation of consistent burn wounds: a rat model. Archives of Plastic Surgery. 41 (4), 317(2014).
  10. Pessolato, A. G. T., dos Santos Martins, D., Ambrósio, C. E., Mançanares, C. A. F., de Carvalho, A. F. Propolis and amnion reepithelialise second-degree burns in rats. Burns. 37 (7), 1192-1201 (2011).
  11. Gurung, S., Škalko-Basnet, N. Wound healing properties of Carica papaya latex: in vivo evaluation in mice burn model. Journal of Ethnopharmacology. 121 (2), 338-341 (2009).
  12. Eloy, R., Cornillac, A. Wound healing of burns in rats treated with a new amino acid copolymer membrane. Burns. 18 (5), 405-411 (1992).
  13. Upadhyay, N., et al. Safety and healing efficacy of Sea buckthorn (Hippophae rhamnoides L.) seed oil on burn wounds in rats. Food and Chemical Toxicology. 47 (6), 1146-1153 (2009).
  14. El-Kased, R. F., Amer, R. I., Attia, D., Elmazar, M. M. Honey-based hydrogel: In vitro and comparative In vivo evaluation for burn wound healing. Scientific Reports. 7 (1), 1-11 (2017).
  15. Fan, G. -Y., et al. Severe burn injury in a swine model for clinical dressing assessment. Journal of Visualized Experiments. (141), e57942(2018).
  16. Davenport, L., Dobson, G., Letson, H. A new model for standardising and treating thermal injury in the rat. MethodsX. 6, 2021-2027 (2019).
  17. Kaufman, T., Lusthaus, S., Sagher, U., Wexler, M. Deep partial skin thickness burns: a reproducible animal model to study burn wound healing. Burns. 16 (1), 13-16 (1990).
  18. Casal, D., et al. Blood supply to the integument of the abdomen of the rat: a surgical perspective. Plastic and Reconstructive Surgery Global Open. 5 (9), (2017).
  19. Casal, D., et al. A model of free tissue transfer: the rat epigastric free flap. Journal of Visualized Experiments. (119), e55281(2017).
  20. Naldaiz-Gastesi, N., Bahri, O. A., Lopez de Munain, A., McCullagh, K. J., Izeta, A. The panniculus carnosus muscle: an evolutionary enigma at the intersection of distinct research fields. Journal of Anatomy. 233 (3), 275-288 (2018).
  21. Weber, B., et al. Modeling trauma in rats: similarities to humans and potential pitfalls to consider. Journal of Translational Medicine. 17 (1), 1-19 (2019).
  22. Nguyen, J. Q. M., et al. Spatial frequency domain imaging of burn wounds in a preclinical model of graded burn severity. Journal of Biomedical Optics. 18 (6), 066010(2013).
  23. Sobral, C., Gragnani, A., Morgan, J., Ferreira, L. Inhibition of proliferation of Pseudomonas aeruginosa by KGF in an experimental burn model using human cultured keratinocytes. Burns. 33 (5), 613-620 (2007).
  24. Olivera, F., Bevilacqua, L., Anaruma, C., Boldrini Sde, C., Liberti, E. Morphological changes in distant muscle fibers following thermal injury i n Wistar rats. Acta Cirurgica Brasileira. 25, 525-528 (2010).
  25. Davies, J. W. Physiological Responses to Burning Injury. , Academic Press. (1982).
  26. Neely, C. J., et al. Flagellin treatment prevents increased susceptibility to systemic bacterial infection after injury by inhibiting anti-inflammatory IL-10+ IL-12-neutrophil polarization. PloS One. 9 (1), e85623(2014).
  27. Dunn, J. L., et al. Direct detection of blood nitric oxide reveals a burn-dependent decrease of nitric oxide in response to Pseudomonas aeruginosa infection. Burns. 42 (7), 1522-1527 (2016).
  28. Gouma, E., et al. A simple procedure for estimation of total body surface area and determination of a new value of Meeh's constant in rats. Laboratory Animals. 46 (1), 40-45 (2012).
  29. Dawson, N. The surface-area/body-weight relationship in mice. Australian Journal of Biological Sciences. 20 (3), 687-690 (1967).
  30. Moins-Teisserenc, H., et al. Severe altered immune status after burn injury is associated with bacterial infection and septic shock. Frontiers in Immunology. 12, 529(2021).
  31. Robins, E. V. Immunosuppression of the burned patient. Critical Care Nursing Clinics. 1 (4), 767-774 (1989).

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Herprints en machtigingen

Toestemming aanvragen om de tekst of afbeeldingen van dit JoVE-artikel te hergebruiken

Toestemming aanvragen

Trefwoorden

Volledig dikte brandwondbrandwondinfectiemethode voor brandwondinductiebacteri le infectiewondgenezingPseudomonas AeruginosaStaphylococcus Aureustesten van topische antibioticahistologische analyse

Gerelateerde artikelen