Een abonnement op JoVE is vereist om deze inhoud te bekijken. Log in of start vandaag met uw gratis proefperiode.

Methodenartikel

Bron en route van pyrrolizidine alkaloïde besmetting in thee monsters

2.6K weergaven

⸱

DOI:

10.3791/64375

⸱

28 september 2022

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Key Laboratory of Agri-food Safety of Anhui Province, School of Resource & Environment, Anhui Agricultural University, 2State Key Laboratory of Tea Plant Biology and Utilization, School of Tea and Food Science & Technology, Anhui Agricultural University, 3Key Laboratory of Tea Quality and Safety & Risk Assessment, Tea Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Ministry of Agriculture, 4Department of Molecular Biosciences and Bioengineering, University of Hawaii at Manoa

In dit artikel

Samenvatting

Het huidige protocol beschrijft de besmetting van pyrrolizidine alkaloïden (PA's) in theemonsters van PA-producerend onkruid in theetuinen.

Samenvatting

Giftige pyrrolizidine-alkaloïden (PA's) worden aangetroffen in theemonsters, die een bedreiging vormen voor de menselijke gezondheid. De bron en route van PA-besmetting in theemonsters zijn echter onduidelijk gebleven. In dit werk werd een adsorberende methode in combinatie met UPLC-MS/MS ontwikkeld om 15 PA's te bepalen in het onkruid Ageratum conyzoides L., A. conyzoides rhizospherische grond, verse theebladeren en gedroogde theemonsters . De gemiddelde terugvorderingen varieerden van 78% -111%, met relatieve standaardafwijkingen van 0,33% -14,8%. Vijftien paar A. conyzoides en A. conyzoides rhizosferische bodemmonsters en 60 verse theebladmonsters werden verzameld uit de Jinzhai-theetuin in de provincie Anhui, China, en geanalyseerd voor de 15 PA's . Niet alle 15 PA's werden gedetecteerd in verse theebladeren, behalve intermedine-N-oxide (ImNO) en senecionine (Sn). Het gehalte aan ImNO (34,7 μg/kg) was groter dan dat van Sn (9,69 μg/kg). Bovendien waren zowel ImNO als Sn geconcentreerd in de jonge bladeren van de theeplant, terwijl hun gehalte lager was in de oude bladeren. De resultaten gaven aan dat de PA's in thee werden overgedragen via het pad van PA-producerend onkruid-grond-verse theebladeren in theetuinen.

Inleiding

Als secundaire metabolieten beschermen pyrrolizidine-alkaloïden (PA's) planten tegen herbivoren, insecten en ziekteverwekkers 1,2. Tot nu toe zijn meer dan 660 PA's en PA-N-oxiden (PANO's) met verschillende structuren gevonden in meer dan 6.000 plantensoorten wereldwijd 3,4. PA-producerende planten komen vooral voor in de families Asteraceae, Boraginaceae, Fabaceae en Apocynaceae 5,6. PA's worden gemakkelijk geoxideerd tot onstabiele dehydropyrrolizidine-alkaloïden, die een sterke elektrofielheid hebben en nucleofielen zoals DNA en eiwitten kunnen aanvallen, wat resulteert in levercelnecrose, veneuze occlusies, cirrose, ascites en andere symptomen 7,8. Het belangrijkste doelorgaan van PA-toxiciteit is de lever. PA's kunnen ook long-, nier- en andere orgaantoxiciteit en mutagene, carcinogene en ontwikkelingstoxiciteit veroorzaken 9,10.

Gevallen van menselijke en dierlijke vergiftiging zijn in veel landen gemeld door de inname van traditionele kruiden, supplementen of thee die PA's bevatten of de indirecte besmetting van voedingsmiddelen zoals melk, honing of vlees (giftig door inname van weidegrond die PA's bevat)11,12,13. De bevindingen van de Europese Autoriteit voor voedselveiligheid (EFSA) geven aan dat stoffen zoals (kruiden)thee een belangrijke bron van menselijke blootstelling aan PA's/PANO'szijn 14. Theemonsters produceren geen PA's, terwijl PA-producerende planten vaak worden aangetroffen in theetuinen (bijv. Emilia sonchifolia, Senecio angulatus en Ageratum conyzoides)15. Eerder werd vermoed dat de thee tijdens het plukken en verwerken besmet kon zijn met PA's uit hun producerende fabrieken. PA's werden echter ook gedetecteerd in sommige met de hand geplukte theebladeren (d.w.z. geen PA-producerende planten), wat suggereert dat er andere routes of bronnen van besmetting moeten zijn16. Een co-teeltexperiment van jakobskruiskruid (Senecio jacobaea) met melissa (Melissa officinalis), pepermunt (Mentha piperita), peterselie (Petroselinum crispum), kamille (Matricaria recutita) en nasturtium (Tropaeolum majus) planten werd uitgevoerd, en de resultaten toonden aan dat PA's werden gedetecteerd in al deze planten17. Er is geverifieerd dat PA's inderdaad worden overgedragen en uitgewisseld tussen levende planten via bodem18,19. Van Wyk et al.20 vonden dat rooibosthee (Aspalathus linearis) ernstig verontreinigd was op onkruidrijke locaties en PA's van hetzelfde type en dezelfde verhouding bevatte. Er werden echter geen PA's gedetecteerd in rooibosthee op onkruidvrije locaties.

Op dit moment wordt ultra-high performance vloeistofchromatografie tandem massaspectrometrie (UPLC-MS/MS) met hoge selectiviteit en gevoeligheid op grote schaal gebruikt bij de kwalitatieve en kwantitatieve analyse van PA's in landbouwproducten en levensmiddelen21,22. De monsterbehandelingsmethode bestaat meestal uit vaste fase extractie (SPE) of de QuEChERS (Quick Easy Cheap Effective Rugged Safe) reiniging van complexe voedselmatrices extracten, die de hoogst mogelijke gevoeligheid12,19 kunnen verkrijgen. Robuuste analysemethoden die de detectie en kwantificering van PA's in complexe matrices zoals aarde, onkruid en verse theebladeren mogelijk maken, ontbreken echter nog steeds.

Deze studie analyseerde 15 PA's in gedroogde theemonsters, verse theebladeren, onkruid en onkruid rhizosferische bodemmonsters met UPLC-MS / MS in combinatie met een adsorberende zuiveringsmethode. Bovendien werden 15 gepaarde onkruid- en onkruid rhizosferische bodemmonsters en 60 verse theebladmonsters verzameld van vijf bemonsteringslocaties in de Jinzhai-theetuin in de provincie Anhui, China, en werden geanalyseerd op 15 PA's. Deze resultaten kunnen een onderzoeksmethode en enige informatie over de bron en route van PA's (verontreiniging) in theemonsters opleveren om de kwaliteit en veiligheid van thee te waarborgen.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Protocol

Voor dit onderzoek werden de volgende onkruidsoorten verzameld: Ludwigia prostrata Roxb., Murdannia triquetra (Wall. ex C. B. Clarke) Bruckn., Ageratum conyzoides L., Chenopodium ambrosioides, Trachelospermum jasminoide (L.) Lem., Ageratum conyzoides L., Emilia sonchifolia (L.) DC, Ageratum conyzoides L., en Crassocephalum crepidioides (Benth.) S. Moore. De verse theebladeren werden geplukt uit de variëteit van Longjing 43 # theebomen en de gedroogde theemonsters waren commercieel verkrijgbare thee verwerkt volgens het productieproces van groene thee (zie tabel met materialen).

1. Monsterverzameling

  1. Verzamel 40 echte monsters.
    1. Verzamel 10 onkruiden, 10 bodems en 10 verse theebladeren willekeurig uit meerdere theetuinen.
      OPMERKING: Voor dit onderzoek werd de grond bemonsterd op een diepte van 20 cm met een monsterhoeveelheid van 200 g.
    2. Verzamel willekeurig 10 gedroogde theeproducten (250 g) uit een supermarkt.
  2. Verzamel monsters van onkruid, aarde en verse theebladeren om de besmettingsbron van PA's in thee te bestuderen.
    1. Stel vijf bemonsteringspunten in dezelfde theetuin in, met drie replica's op elk punt.
    2. Verzamel Ageratum conyzoides L. onkruidmonsters met het hoogste PA-gehalte dat vaak wordt aangetroffen in theetuinen.
      OPMERKING: De steekproefhoeveelheid was 250 g voor dit onderzoek.
    3. Verzamel de bodemmonsters.
      OPMERKING: De bodemmonsters waren A. conyzoides rhizosferische grond op een diepte van 20 cm met een monsterhoeveelheid van 200 g.
    4. Verzamel de verse theebladeren van verschillende delen van de theeplanten, waaronder een knop met twee bladeren, een knop met drie bladeren, een knop met vier bladeren en volwassen bladeren.
      OPMERKING: De monsterhoeveelheid was 250 g.

2. Monsterbehandeling

  1. Behandel de monsters voor volgens de onderstaande stappen.
    1. Maal de gedroogde thee- en grondmonsters met een molen, haal de verpulverde monsters door een zeef met 200 mazen en bewaar ze bij −20 °C.
      OPMERKING: De gedroogde thee was een in de handel verkrijgbaar theeproduct (zie tabel met materialen), dus het werd direct geplet en gezeefd voor opslag. De bodemmonsters (200 g) werden op een geventileerde plaats in het donker geplaatst om ongeveer een week aan de lucht te drogen.
    2. Homogeniseer de wiet en verse theebladeren met een homogenisator en bewaar ze bij −20 °C.
  2. Voer een monsterbehandeling uit van de gedroogde theeproducten, verse theebladeren en onkruid.
    1. Weeg 1,00 g van elk monster af (gedroogde theeproducten, verse theebladeren en onkruid) en plaats het in een centrifugebuis van 50 ml.
    2. Voeg 10 ml zwavelzuuroplossing van 0,1 mol/l en vortex toe gedurende 2 minuten voor vastefase-extractie (met behulp van SPE-patroon, zie materiaaltabel) en 1 minuut voor adsorbenszuivering. Voer ultrasone extractie23 uit gedurende 15 minuten en centrifugeer vervolgens gedurende 10 minuten met een snelheid van 9.390 x g bij kamertemperatuur.
      OPMERKING: Het vermogen van de ultrasone oscillator was 290 W, de oscillatiefrequentie was 35 kHz en de temperatuur was ingesteld op 30 °C.
    3. Breng het supernatant over in een centrifugebuis van 50 ml met een druppelaar met plastic punt.
    4. Volg de bovenstaande stappen om de extractie eenmaal te herhalen. Combineer de twee supernatanten.
      1. Activeer de SPE-patronen met 5 ml methanol en 5 ml gedeïoniseerd water. Voeg 10 ml supernatant toe aan de vooraf geactiveerde patroon en voer het monsterreiniging uit.
      2. Nadat het niveau van de monsteroplossing de bovenste laag patronen heeft bereikt, elueert u de analyten met 5 ml 1% mierenzuuroplossing en vervolgens 5 ml methanol. Gooi het eluaat weg.
      3. Elueer met 5 ml methanol (met 0,5% ammoniakwater), filtreer het eluaat door een membraanfilter van 0,22 μm en analyseer met UPLC-MS/MS (zie materiaaltabel).
    5. Voer het opschonen van monsters uit met adsorbentia.
      1. Neem 2 ml van het supernatant (stap 2.2.4) in een centrifugebuis van 10 ml gevuld met de adsorbentia van GCB:PSA:C18 (10 mg:20 mg:15 mg, zie materiaaltabel), vortex gedurende 1 minuut en centrifugeer gedurende 8 minuten bij kamertemperatuur bij 9.390 x g .
      2. Laat 1 ml van het supernatant door een membraanfilter van 0,22 μm lopen vóór analyse door UPLC-MS/MS.
  3. Voer de behandeling van de bodemmonsters uit.
    1. Weeg een bodemmonster van 1,00 g af. Plaats het in een centrifugebuis van 50 ml en voeg 0,1 ml 0,1 mol/l trinatriumcitraatoplossing toe (zie materiaaltabel) om de pH-waarde van de bodem aan te passen naar 6,0.
    2. Laat 2 minuten staan en voeg vervolgens 10 ml 0,1 mol / L zwavelzuur-methanoloplossing, vortex gedurende 2 minuten en schud gedurende 30 minuten toe en voer vervolgens ultrasone extractie gedurende 30 minuten uit.
    3. Centrifugeer gedurende 10 minuten op 9.390 x g en breng het supernatant over in een centrifugebuis van 50 ml met een druppelaar met plastic punt.
    4. Volg de bovenstaande stappen om de extractie te herhalen en combineer het supernatant twee keer.
      OPMERKING: De zuiveringsmethode was dezelfde als in stap 2.2.5.1 en stap 2.2.5.2.

3. Instrumentele analyse

  1. Detecteer de 15 PA's in gedroogde theemonsters, verse theebladeren, wiet en aarde (monsters uit stap 2) met behulp van een in de handel verkrijgbaar UPLC-MS/MS-systeem (2,1 mm x 100 mm, 1,8 μm) (zie materiaaltabel).
  2. Stel de kolomtemperatuur in op 40 °C, het debiet op 0,250 ml/min en het injectievolume op 3 μl.
  3. Stel de mobiele fase A in: methanol (met 0,1% mierenzuur + 1 mmol/L ammoniumformiaat) en mobiele fase B: water (met 0,1% mierenzuur + 1 mmol/L ammoniumformiaat).
  4. Stel een gradiëntretrelutieprocedure in: 10% A van 0,0 min tot 0,25 min, 10%-30% A van 0,25 min tot 6,0 min, 30%-40% A van 6,0 min tot 9,0 min, 40%-98% A van 9,0 min tot 9,01 min die 1,9 min werd vastgehouden en 98%-100% A van 11,0 min tot 11,1 min die 2,9 min werd vastgehouden.
  5. Stel de massaspectrometerparameters in: ionisatiemodus, elektrospraypositieve ionenbron (ESI +); verstuiver druk, 7,0 bar; capillaire spanning, 4,0 kV; taps toelopend gat terugblaasstroom, 150 L/h; oplosmiddelgasstroom, 800 l/h; temperatuur van het oplosmiddel, 400 °C; impactgasstroom, 0,25 ml/min.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Resultaten

De geoptimaliseerde adsorberende zuiverings- en analysemethode van 15 PA's in gedroogde theemonsters, verse theebladeren, onkruid en aarde werd vastgesteld en vergeleken met de veelgebruikte zuiveringsmethode met behulp van de SPE-cartridge. De resultaten toonden aan dat de terugwinningen van de 15 PA's in gedroogde theemonsters, wiet en verse theebladeren met behulp van de SPE-patroon 72% -120% waren, terwijl die met adsorbenszuivering 78% -98% was (figuur 1). De terugwinningen van de 15 PA...

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Discussie

Het huidige werk was bedoeld om een effectieve, gevoelige methode te ontwikkelen om de besmettingsroutes en bronnen van PA's in theemonsters te onderzoeken, evenals de distributie van PA's in verschillende delen van de theeplanten. In deze studie werden echter slechts 15 PA's met succes gescheiden op de chromatografische kolom, wat een zeer klein aantal is in vergelijking met het grote aantal alkaloïden in plantensoorten 3,4. Dit had niet alleen te maken met de v...

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Openbaarmakingen

De auteurs hebben niets te onthullen.

Dankbetuigingen

Dit werk werd ondersteund door de National Natural Scientific Foundation of China (32102244), het National Agricultural Products Quality and Safety and Risk Assessment Project (GJFP2021001), de Natural Scientific Foundation of Anhui Province (19252002) en de USDA (HAW05020H).

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Materialen

```html
Lijst van materialen gebruikt in dit artikel
NaamBedrijfCatalogusnummerOpmerkingen
Acetonitrile (99.9%)Tedia Company,Inc.21115197CAS No:75-05-8
Ammonia (25%-28%)Wuxi Zhanwang Chemical Reagent Co., Ltd.181210CAS No:1336-21-6
Ammonium formate (97.0%)Anpel Laboratory Technologies (Shanghai)G0860050CAS No:540-69-2
Carbon-GCBCNWB7760030120-400 MESH, 10g. per box 
Centrifuge Z 36 HKHERMLEZ36HK30000 rpm (min:10 rpm), Afmetingen (B x H x D): 71,5 cm× 42 cm × 51 cm
Commercieel verkrijgbaar theeproductLvming, Qingshan, Luyuchun, Changling, Huixing, Wuyunjian, Heshengchunlosse theeGroene thee
Europine N-oxid (EuNO) (98.0%)BioCrick323256CAS No:65582-53-8
Europine (Eu) (98.0%)BioCrick98222CAS No:570-19-4
Formate (98.0%)AladdinE2022005CAS No:64-18-6
HC-C18CNWD211006040-63 μm,100g.per box
Heliotrine (He) (98.0%)BioCrick906426CAS No:303-33-3
Heliotrine-N-oxide (HeNO) (98.0%)BioCrick22581CAS No:6209-65-0
High speed centrifuge TG16-WScence203158000Max:16000 r/min, 330 × 390 × 300 mm (L × B × H), Capaciteit: 6 × 50 mL
HSS T3 columnWaters186004976ACQUITY UPLC HSS T3 (2,1 × 100 mm 1,8 μm)
Intermedine (Im) (98.0%)BioCrick114843CAS No:10285-06-0
Intermedine-N-oxide (ImNO) (98.0%)BioCrick340066CAS No:95462-14-9
Jacobine (Jb) (98.0%)BioCrick132282048CAS No:6870-67-3
Jacobine-N-oxide (JbNO) (98.0%)ChemFacesCFN00461CAS No:38710-25-7
Methyl Alcohol (99.9%)Tedia Company,Inc.21115100CAS No:67-56-1
PSAAgelaP19-0083340-60 μm, 60 Å 100g.per box
Retrorsine (Re) (98.0%)BioCrick5281743CAS No:480-54-6
Retrorsine-N-oxide (ReNO) (98.0%)BioCrick5281734CAS No:15503-86-3
Senecionine (Sc) (98.0%)BioCrick5280906CAS No:130-01-8
Senecionine-N-oxide (ScNO) (98.0%)BioCrick5380876CAS No:13268-67-2
Seneciphylline N-oxid (SpNO) (98.0%)BioCrick6442619CAS No:38710-26-8
Seneciphylline (Sp) (98.0%)BioCrick5281750CAS No:480-81-9
Senkirkine (Sk) (98.0%)BioCrick5281752CAS No:2318-18-5
SPE PCXAgilent Technologies12108206Cation Mixed Mode, 6 mL
Sulfuric acid (97%)Wuxi Zhanwang Chemical Reagent Co., Ltd.1003019CAS No:7664-93-9
Trisodium citrateSinpharm Chemical Reagent Co., Ltd.20121009CAS No:6132-04-3
Ultrasonic cleanerSupmileKQ-600BInwendige sleufmaat: 500 × 300 × 150 mm; Capaciteit: 22,5 L
UPLC-xevoTQMSWatersZPLYY-003Triple four-stage rod mass analyzer, Waters Alliance 2695/Waters ACQUITY UPLC Liquid Phase System
Water bath thermostat oscillatorGuoyu instrumentSHY-2AHSOscillatietijden:  60-300 keer/min, Constante temperatuurbereik: kamertemperatuur tot 100 °C
```

Referenties

  1. Schramm, S., Kohler, N., Rozhon, W. Pyrrolizidine alkaloids: Biosynthesis, biological activities and occurrence in crop plants. Molecules. 24 (3), 498(2019).
  2. EFSA Panel on Contaminants in the Food Chain (CONTAM). Scientific opinion on pyrrolizidine alkaloids in food and feed. EFSA Journal. 9 (11), 134(2011).
  3. Ma, C., et al. Determination and regulation of hepatotoxic pyrrolizidine alkaloids in food: A critical review of recent research. Food and Chemical Toxicology. 119, 50-60 (2018).
  4. Keuth, O., Humpf, H. U., Fürst, P. Pyrrolizidine Alkaloids: Analytical Challenges. Encyclopedia of Food Chemistry. Melton, L., Shahidi, F., Varelis, P. 1, Elsevier. 348-355 (2019).
  5. Huang, D. Y., et al. Pyrrolizidine alkaloids and its source analysis in tea. Journal of Food Safety & Quality. 9 (2), 229-236 (2018).
  6. Liang, A. H., Ye, Z. G. General situation of the toxicity researches on Senecio. China Journal of Chinese Materia Medica. 31 (2), 93-97 (2006).
  7. Li, Y. H., et al. Proteomic study of pyrrolizidine alkaloid-induced hepatic sinusoidal obstruction syndrome in rats. Chemical Research in Toxicology. 28 (9), 1715-1727 (2015).
  8. Jia, Z. J., et al. Catalytic enantioselective synthesis of a pyrrolizidine-alkaloid-inspired compound collection with antiplasmodial activity. The Journal of Organic Chemistry. 83, 7033-7041 (2018).
  9. Yang, M., et al. First evidence of pyrrolizidine alkaloid N-oxide-induced hepatic sinusoidal obstruction syndrome in humans. Archives of Toxicology. 91 (12), 3913-3925 (2017).
  10. Chen, Z., Huo, J. R. Hepatic veno-occlusive disease associated with toxicity of pyrrolizidine alkaloids in herbal preparations. Netherlands Journal of Medicine. 68 (6), 252-260 (2010).
  11. Mattocks, A. R. Chemistry and Toxicology of Pyrrolizidine Alkaloid. , Academic Press. London, UK. (1986).
  12. Picron, J. F., Herman, M., Van Hoeck, E., Goscinny, S. Analytical strategies for the determination of pyrrolizidine alkaloids in plant based food and examination of the transfer rate during the infusion process. Food Chemistry. 266, 514-523 (2018).
  13. Kowalczyk, E., Kwiatek, K. Application of the sum parameter method for the determination of pyrrolizidine alkaloids in teas. Food Additives & Contaminants: Part A. 37 (4), 622-633 (2020).
  14. EFSA Panel on Contaminants in the Food Chain (CONTAM). Risks for human health related to the presence of pyrrolizidine alkaloids in honey, tea, herbal infusions and food supplements. EFSA Journal. 15 (7), 04908(2017).
  15. Han, H., et al. Pyrrolizidine alkaloids in tea: A review of analytical methods, contamination levels and health risk. Food Science. 42 (17), 255-266 (2021).
  16. Nowak, M., et al. Interspecific transfer of pyrrolizidine alkaloids: An unconsidered source of contaminations of phytopharmaceuticals and plant derived commodities. Food Chemistry. 213, 163-168 (2016).
  17. Selmar, D., et al. Transfer of pyrrolizidine alkaloids between living plants: A disregarded source of contaminations. Environmental Pollution. 248, 456-461 (2019).
  18. Izcara, S., et al. Miniaturized and modified QuEChERS method with mesostructured silica as clean-up sorbent for pyrrolizidine alkaloids determination in aromatic herbs. Food Chemistry. 380, 132189(2022).
  19. Izcara, S., Casado, N., Morante-Zarcero, S., Sierra, I. A miniaturized QuEChERS method combined with ultrahigh liquid chromatography coupled to tandem mass spectrometry for the analysis of pyrrolizidine alkaloids in oregano samples. Foods. 9 (9), 1319(2020).
  20. Van Wyk, B. E., Stander, M. A., Long, H. S. Senecio angustifolius as the major source of pyrrolizidine alkaloid contamination of rooibos tea (Aspalathus linearis). South African Journal of Botany. 110, 124-131 (2017).
  21. Johnson, A. E., Molyneux, R. J., Merrill, G. B. Chemistry of toxic range plants. Variation in pyrrolizidine alkaloid content of Senecio, Amsinckia, and Crotalaria species. Journal of Agricultural and Food Chemistry. 33 (1), 50-55 (1985).
  22. Vrieling, K., de Vos, H., van Wijk, C. A. M. Genetic analysis of the concentrations of pyrrolizidine alkaloids in Senecio jacobaea. Phytochemistry. 32 (5), 1141-1144 (1993).
  23. Han, H. L., et al. Development, optimization, validation and application of ultra high performance liquid chromatography tandem mass spectrometry for the analysis of pyrrolizidine alkaloids and pyrrolizidine alkaloid N-oxides in teas and weeds. Food control. 132, 108518(2022).
  24. Bodi, D., et al. Determination of pyrrolizidine alkaloids in tea, herbal drugs and honey. Food Additives & Contaminants: Part A. 31 (11), 1886-1895 (2014).
  25. European Union Commission. Commission Regulation (EU) 2020/2040 of 11 December 2020 amending Regulation (EC) No 1881/2006 as regards maximum levels of pyrrolizidine alkaloids in certain foodstuffs. Official Journal of the European Union. 14 (12), 1-4 (2020).

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Herprints en machtigingen

Tags

PyrrolizidinealkaloïdentheeverontreinigingUPLC-MS/MSadsorptiezuiveringvaste-fase-extractiebodemmonsteranalyseintermedine-N-oxidedetectie van senecionineanalyse van theebladerentransferroute van alkaloïden
Bron en route van pyrrolizidine alkaloïde besmetting in thee monsters
Neem contact met ons op
Aanbevelen aan de bibliotheek

Privacy

Gebruiksvoorwaarden

Beleidsoverzicht

Copyright © 2026 MyJoVE Corporation. Alle rechten voorbehouden.