Biofilms - bacteriekolonies ingebed in een zelfuitgescheiden matrix van extrapolymere stoffen (EPS) - zijn alomtegenwoordig in natuurlijke poreuze media, zoals bodems en watervoerende lagen1, en technische en medische toepassingen, zoals bioremediatie2, waterfiltratie3 en medische hulpmiddelen4. De biofilmmatrix bestaat uit polysacchariden, eiwitvezels en extracellulair DNA5,6 en is sterk afhankelijk van de micro-organismen, de beschikbaarheid van voedingsstoffen en de omgevingscondities7. Toch zijn de functies van de matrix universeel; Het vormt de steiger van de biofilmstructuur, beschermt de microbiële gemeenschap tegen mechanische en chemische spanningen en is grotendeels verantwoordelijk voor de reologische eigenschappen van de biofilms5.
In poreuze media kan de groei van biofilms de poriën verstoppen, waardoor de zogenaamde bioclogging ontstaat. De ontwikkeling van biofilms wordt geregeld door de vloeistofstroom en poriegrootte, gedefinieerd als de afstand tussen twee pilaren, van het poreuze medium 8,9,10. Zowel de poriegrootte als de vloeistofstroom regelen het transport van voedingsstoffen en lokale schuifkrachten. Op zijn beurt verstopt de groeiende biofilm de poriën, wat de snelheidsverdeling van de vloeistof 11,12,13, het massatransport en de hydraulische geleidbaarheid van het poreuze medium beïnvloedt 14,15. De veranderingen in hydraulische geleidbaarheid worden weerspiegeld door verhoogde druk in gesloten systemen16,17,18,19. Huidige microfluïdische studies in biofilmontwikkeling en bioclogging richten zich op het bestuderen van de impact van stroomsnelheden in homogene geometrieën16,20 (d.w.z. met een enkelvoudige poriegrootte) of heterogene poreuze media12,21,22. Om echter de effecten van stroomsnelheden en poriegrootte op de ontwikkeling van biofilms en de daaruit voortvloeiende drukveranderingen in het bioclogeerde poreuze medium te ontwarren, is een zeer controleerbaar en veelzijdig experimenteel platform nodig dat de studie van verschillende poreuze mediageometrieën en omgevingscondities parallel mogelijk maakt.
De huidige studie introduceert een microfluïdisch platform dat drukmetingen combineert met gelijktijdige beeldvorming van de evoluerende biofilm in het poreuze medium. Vanwege de gasdoorlaatbaarheid, biocompatibiliteit en flexibiliteit in het kanaalgeometrieontwerp, is een microfluïdisch apparaat gemaakt van polydimethylsiloxaan (PDMS) een geschikt hulpmiddel voor het bestuderen van biofilmontwikkeling in poreuze media. Microfluïdica maken het mogelijk om de fysische en chemische omstandigheden (bijv. vloeistofstroom en nutriëntenconcentratie) met hoge precisie te beheersen om de omgeving van microbiële habitats na te bootsen23. Verder kunnen microfluïdische apparaten eenvoudig worden afgebeeld met micrometrische resolutie met behulp van een optische microscoop en gekoppeld aan online metingen (bijvoorbeeld de lokale druk).
In dit werk richten de experimenten zich op het bestuderen van de impact van poriegrootte in een homogeen poreus medium analoog onder gecontroleerde opgelegde stromingsomstandigheden. De stroom van een kweekmedium wordt opgelegd met behulp van een spuitpomp en het drukverschil door het microfluïdische kanaal wordt gelijktijdig gemeten met druksensoren. Biofilmontwikkeling wordt geïnitieerd door het zaaien van een planktoncultuur van Bacillus subtilis in het microfluïdische kanaal. Regelmatige beeldvorming van de evoluerende biofilm en beeldanalyse maakt het mogelijk om porieschaal opgeloste informatie over de oppervlaktedekking onder verschillende experimentele omstandigheden te verkrijgen. De gecorreleerde informatie over drukverandering en de mate van bioclogging levert cruciale input voor permeabiliteitsschattingen van bioclogged poreuze media.