Een abonnement op JoVE is vereist om deze inhoud te bekijken. Log in of start vandaag met uw gratis proefperiode.
Methodenartikel
Hier wordt ovariële weefsel-eicel-in-vitro-maturatie (OTO-IVM) gepresenteerd, een toegankelijke techniek binnen een laboratorium voor medische geassisteerde voortplanting (MAR) die realistische extra opties voor vruchtbaarheidsbehoud biedt aan patiënten die cryopreservatie van eierstokweefsel nodig hebben.
Vitrificatie van rijpe eicellen is de standaardbehandeling om de vruchtbaarheid te behouden bij vrouwen met een risico op onvruchtbaarheid. Cryopreservatie van eierstokweefsel (OTC) is echter nog steeds de enige optie om de vruchtbaarheid te behouden bij vrouwen die dringend met een gonadotoxische behandeling moeten beginnen of bij prepuberale kinderen. Tijdens de voorbereiding van de ovariële cortex op cryopreservatie wordt medullair weefsel verwijderd. Groeiende antrale follikels bevinden zich op de grens van de cortex-medullaire interface van de eierstok en worden tijdens dit proces verbroken, waardoor hun cumulus-eicelcomplex (COC) vrijkomt. Door het medium en het gefragmenteerde medullaire weefsel grondig te inspecteren, kunnen deze onrijpe cumulus-eicelcomplexen worden geïdentificeerd zonder de OTC-procedure te verstoren. De van eierstokweefsel afgeleide onrijpe eicellen kunnen met succes in vitro worden gerijpt, waardoor een extra bron van gameten ontstaat voor het behoud van de vruchtbaarheid. Als OTC wordt uitgevoerd in of nabij een medisch geassisteerd voortplantingslaboratorium, kunnen alle noodzakelijke hulpmiddelen voor in-vitrorijping (IVM) en eicelvitrificatie bij de hand zijn. Bovendien heeft de patiënt bij remissie en kinderwens meerdere opties voor vruchtbaarheidsherstel: transplantatie van eierstokweefsel of embryotransfer na de inseminatie van verglaasde/verwarmde eicellen. Daarom kan oeicel-in-vitrorijpatie in de eierstokken (OTO-IVM) een waardevolle aanvullende techniek voor het behoud van vruchtbaarheid zijn.
Opties voor vruchtbaarheidsbehoud (FP) voor vrouwen die gepland zijn voor gonadotoxische behandeling, geslachtsaanpassende therapie of vrouwen met een genetische aanleg voor voortijdig ovariumfalen, zijn afhankelijk van de gezondheid en leeftijd van de patiënt, het beschikbare tijdsbestek, het type behandeling, de voorkeur van de patiënt en FP-procedures die beschikbaar zijn bij het vruchtbaarheidscentrum van keuze. Vitrificatie van rijpe eicellen verkregen na stimulatie van de eierstokken met gonadotrofinen en eicelpunctie in een laboratoriumcyclus met medische geassisteerde voortplanting (MAR) wordt beschouwd als de voorkeursoptie v....
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
De huidige studie over OTO-IVM is goedgekeurd door het lokale Ethisch Comité van UZ-Brussel (addendum van project 2008/068 en project 2022/303). Alle patiënten ondertekenden schriftelijke geïnformeerde toestemming. Elke patiënt werd individueel beoordeeld door een arts die gespecialiseerd is in reproductieve geneeskunde, een navigator-verpleegkundige en de verwijzende oncoloog om het optimale FP-behandelplan samen te stellen, rekening houdend met de voorkeuren van de patiënt14. Kortom, patiënten die in aanmerking komen voor OTC hebben dringend FP nodig en zijn jonger dan 36 jaar of14 jaa....
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
In het afgelopen decennium kregen 98 patiënten die een ovariëctomie of ovariële biopsie voor OTC ondergingen ook OTO-IVM aangeboden. De hier gepresenteerde resultaten zijn een update van het klinische programma zoals eerder gepubliceerd 7,13. Onrijpe eicellen verkregen tijdens de verwerking van eierstokweefsel werden in vitro gerijpt, voornamelijk gedurende 30 uur. Om praktische redenen of vanwege de lage rijping werd ec.......
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
De prioriteit van de FP-procedure is altijd het manipuleren en bevriezen van de ovariële cortex volgens het standaard operatieprotocol dat in de kliniek is gevalideerd. Een nadeel van FP is het ontbreken van een standaard protocol dat beschikbaar is in de gepubliceerde literatuur met betrekking tot OTC en OTO-IVM. Het is moeilijk om de efficiëntie en validiteit van de technieken en aanpassingen te beoordelen, aangezien er een groot tijdsverschil is tussen bevriezing/vitrificatie en ontdo.......
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
De auteurs hebben geen concurrerende financiële belangen.
Dit werk werd uitgevoerd in het IVF-laboratorium van Brussels IVF, Universitair Ziekenhuis van de VUB, Brussel. De auteurs willen alle leden van het IVF-laboratoriumteam in Brussel bedanken voor hun hoge vaardigheden, nauwkeurigheid en flexibiliteit die nodig zijn om een eenheid voor het behoud van vruchtbaarheid op te zetten binnen een MAR-laboratorium.
....Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
| Naam | Bedrijf | Catalogusnummer | Opmerkingen |
|---|---|---|---|
| 1000 µL filter tips | Eppendorf/VWR International | 613-6780 | COC-zoekopdracht |
| Benchtop Cooler | Fisher Scientific | 15-350-54 | Het deksel van de Benchtop Cooler wordt gebruikt om het weefsel voor te bereiden, de Benchtop Cooler-buishouder om cryovials met vriesmedium gekoeld te houden |
| Corning Cell culture dish, non-treated, 100 mm | Corning/VWR International | 430591 | Schaal voor ovarieelweefsel voorbereiding |
| CryoSure-DMSO | WAK Chemicals | 0482 | Cryoprotector voor ovarieelweefsel cryobewaring |
| Cumulase | Origio/CooperSurgical | 16125000A | recombinant human hyaluronidase enzym voor cumulus cel verwijdering na IVM |
| Decontaminatie spray: Suprox | Medipure LTD | MP016 | Desinfectieoplossing voor aseptische hantering met bactericide en sporicide werking |
| Disposable scalpels | Swann-Morton | 0511 | Ovarieelweefsel voorbereiding |
| Falcon 14 mL Round Bottom Polystyrene Test Tube, with Snap Cap, Sterile | Falcon/VWR International | BDAA352057 | Medium container |
| Falcon Cell strainer 70 µm | Falcon/VWR International | 352350 | Filter voor het elimineren van besmetting door rode bloedcellen en COC-zoekopdracht |
| Freeze control Ampoule Cryochamber and Temperature Controller | Cryologic | CL-8800i CC60AS | Langzaam vriesapparaat |
| FSH: Menopur 75 IU | Ferring | BE197504 | Follicule Stimulerend Hormoon: Supplement voor IVM medium |
| Handling pipette 290-310 µm | Vitrolife | 15538 | COC-zoekopdracht: zachte overdracht van COC zonder beschadiging van oöcyte-cumulus cel connectiviteit |
| hCG: Brevactid 5000 IE | Ferring | 5008001036 | Human Chorionic Gonadotropin: Supplement voor IVM medium |
| High security tube | CryoBioSystem | 022252 | cryovial, thermisch verzegeld voor veilige cryobewaring |
| HSA-solution | Vitrolife | 10064 | Huis serum Albumine: supplement voor IVM medium |
| Leibovitz's L-15 medium | Life Technologies Europe | 31415-029 | Handling medium voor ovarieelweefsel voorbereiding |
| MediCult IVM system | Origio/CooperSurgical | 82214010 | medium voor IVM bevattend zowel LAG als IVM medium. IVM medium dient te worden aangevuld zoals gedetailleerd in het protocol |
| METZENBAUM fino scissors 140 mm | Chirurgical Maintenance | VIZ08280314 | Medium grootte schaar voor initiële medullaire verwijdering |
| Nunc 4-well dishes for IVF | Nunc/VWR International | 144444 | COC-collectie tijdens COC-zoekopdracht en IVM-kweek |
| Nunc Invitro fertilization Petri Dish with Vented Lid, 60 mm, Non-Pyrogenic, Sterile | Thermo Scientific/VWR | NUNC150270 | Schaal voor COC-zoekopdracht |
| Oocyte handling medium : Flushing Medium with heparin | Origio/CooperSurgical | 10765060 | Zoekmedium voor COC-zoekopdracht |
| Ovoil | Vitrolife | 10029 | olie voor IVM-kweek |
| Penicillin/Streptomicin mix | Life Technologies Europe | 15140-148 | Supplement voor OTC handling medium |
| Scissors, curved, 150 mm long, 20 mm blade | Chirurgical Maintenance | VIREBST999-SC | Kleine schaar voor resterende medullaire verwijdering |
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Dit artikel is gepubliceerd
Video binnenkort beschikbaar