Een abonnement op JoVE is vereist om deze inhoud te bekijken. Log in of start vandaag met uw gratis proefperiode.

Methodenartikel

Vaststelling van een coloproctitis-kankermodel bij muizen en evaluatie van het therapeutisch effect van de Chinese geneeskunde

2.1K weergaven

DOI:

10.3791/66045

13 oktober 2023

In dit artikel

Samenvatting

Dit protocol biedt een muismodel van ulceratieve coloproctitis-geassocieerde colorectale kanker geïnduceerd door azomethaan in combinatie met dextraansulfaatnatrium. Het model werd gebruikt om de werkzaamheid van traditionele Chinese geneeswijzen bij de preventie en behandeling van colorectale kanker te evalueren.

Samenvatting

Colorectale kanker (CRC) is een veel voorkomende maligniteit van het spijsverteringsstelsel en is wereldwijd de derde meest voorkomende maligniteit geworden en de tweede belangrijkste doodsoorzaak als gevolg van maligniteit. Ulceratieve coloproctitis (CU) is een precancereuze laesie en UC-geassocieerde CRC (UC-CRC) is het meest voorkomende subtype van CRC. Daarom is een redelijk UC-CRC-model de hoeksteen en garantie voor de ontwikkeling van nieuwe geneesmiddelen. Traditionele Chinese geneeskunde (TCM) wordt veel gebruikt bij de behandeling van UC-CRC vanwege de goede werkzaamheid. Als een klassiek tonicum voorschrift van TCM, is Liujunzi afkooksel (LJZD) veel gebruikt bij de behandeling van UC-CRC. In deze studie werd een UC-CRC-model opgesteld door azomethaan en dextraansulfaatnatrium te combineren, en werd de LJZD toegediend. De gegevens bevestigden dat LJZD de overgang naar kanker bij UC-CRC effectief kan remmen door gebruik te maken van het lichaamsgewicht van de muis, de colorectale lengte, pathologische en ontstekingsfactoren, de colorectale barrièrefunctie en kankermarkers. Dit protocol biedt een systeem voor het evalueren van de werkzaamheid van TCM bij de preventie en behandeling van UC-CRC.

Inleiding

Colorectale kanker (CRC) is een veel voorkomende gastro-intestinale maligniteit, de derde meest voorkomende maligniteit en de op één na meest voorkomende doodsoorzaak ter wereld, goed voor 10% van de wereldwijde kankerincidentie en 9.4% van de totale kankergerelateerde sterfte 1,2. Genetische factoren, chronische ontstekingen, vetrijke voeding, diabetes en abnormale darmflora zijn risicofactoren voor CRC 3,4. Onder hen is inflammatoire darmziekte, met name ulceratieve coloproctitis (CU), een duidelijke risicofactor voor CRC

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Protocol

De dierproef is goedgekeurd door de Ethische Commissie van de Changchun University of Chinese Medicine (Recordnummer: 2021214). Specifieke pathogeenvrije C57BL/6J-muizen (8-10 weken, gewicht 18-22 g), mannetjes en vrouwtjes, werden gehuisvest in onafhankelijk geventileerde kooien bij 22 °C en een relatieve luchtvochtigheid van 65%. De muizen begonnen het experiment na 7 dagen adaptief eten, waarbij ze vrije toegang hadden tot water en voeding.

1. Bereiding van geneesmiddelen

  1. Voorbereiding van LJZD
    OPMERKING: Het gebruikte Chinese medicijn is gekocht bij het Affiliated Hospital van de Changchun University of Chi....

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Resultaten

Het afkooksel van LJZD werd bereid volgens de samenstellingsverhouding van geneesmiddelen in tabel 1 en de afkookmethode van TCM in figuur 1A. Volgens het tijdstip aangegeven in figuur 1B werden muizen op de 7edag intraperitoneaal geïnjecteerd met 1 mg/ml AOM en kregen muizen vrije toegang tot drinkwater met 2% DSS in de 3e, 6e en 9eweek. Het UC-CRC-muismodel werd met succes vastgesteld in de15e

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Discussie

CRC is een van de meest voorkomende vormen van kanker ter wereld, met ongeveer 1.148.000 nieuwe gevallen en meer dan 576.000 sterfgevallen per jaar. CRC kan worden onderverdeeld in drie typen op basis van verschillende oorzaken, waaronder erfelijk, sporadisch en UC-CRC31. De incidentie van CRC bij patiënten met inflammatoire darmziekten zoals CU is significant hoger dan die in de algemene bevolking. CU stimuleert de ontwikkeling van CRC via de ontstekingskankerroute, die verschilt van de typische .......

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Openbaarmakingen

De auteurs hebben niets te onthullen.

Dankbetuigingen

Dit werk werd ondersteund door het Jilin Provincial Department of Science and Technology (YDZJ202201ZYTS181).

....

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Materialen

Lijst van materialen gebruikt in dit artikel
NaamBedrijfCatalogusnummerOpmerkingen
AzoxymethaneSigmaA5486
5-amino salicylic acidKuihua Pharmaceuticals Group Jiamusi Luling Pharmaceutical Co., Ltd3819413
C57BL/6J muizenLiaoning Changsheng Biotechnology Co., LtdNO 210726210100853716
DekglasJiangsu Shitai Experimental Equipment Co., Ltd10212432C
DAB-kleurinkitJiangsu Shitai Experimental Equipment Co., Ltd2005289
Ontwateringsmachine Wuhan Junjie Electronics Co., LtdJJ-12J
Dextransulfaat natriumDalian Meilun Biotechnology Co., LtdMB5535
InbeddingsmachineWuhan Junjie Electronics Co., LtdJB-P5
Hematoxyline-eosine kleurstofWuhan Hundred Degree Biotechnology Co., LtdB1000
IL-6Jiangsu Meimian Industrial Co., LtdMM-0163M2
IsofluraanRWD Life Science Co., LtdR510-22-10
KI67 primaire antistofGoogle Biotechnology IncGB121141
Neutrale gomWuhan Hundred Degree Biotechnology Co., Ltd10004160
ObjectglaasjeJiangsu Shitai Experimental Equipment Co., Ltd10212432A
Occludin primaire antistofAffnityDF7504
Orthostatisch optisch microscoopNikonNikon Eclipse CI
Pathologische microtoomShanghai Leica Instrument Co., LtdRM2016
ZO-1 primaire antistofAbcamab221547

Referenties

  1. Sung, H., et al. Global cancer statistics 2020: GLOBOCAN estimates of incidence and mortality worldwide for 36 Cancers in 185 Countries. CA Cancer J Clin. 71 (3), 209-249 (2021).
  2. Tsai, K. Y., et al.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Herprints en machtigingen

Trefwoorden

UC CRC muismodelLiujunzi decoctTraditionele Chinese Geneeskundecolorectale kankerazoxymethaan DSS modeltherapeutische evaluatie5 aminosalicylzuurziekteactiviteitsindexisolatie van colorectaal weefsel