Een abonnement op JoVE is vereist om deze inhoud te bekijken. Log in of start vandaag met uw gratis proefperiode.

Methodenartikel

Draagbare op papier gebaseerde immunoassay gecombineerd met smartphone-applicatie voor colorimetrische en kwantitatieve detectie van dengue NS1-antigeen

2.7K weergaven

⸱

DOI:

10.3791/66130

⸱

26 januari 2024

 ,  ,  , 
1Department of Pharmacy, Faculty of Mathematics and Natural Sciences, Universitas Islam Indonesia, 2School of Bioresources and Technology, King Mongkut's University of Technology Thonburi, 3Department of Otolaryngology, Phramongkutklao Hospital and College of Medicine, 4Sensor Technology Laboratory, Pilot Plant Development and Training Institute, King Mongkut's University of Technology Thonburi, 5Biosciences and Systems Biology Research Team, National Center for Genetic Engineering and Biotechnology, National Sciences and Technology Development Agency at King Mongkut's University of Technology Thonburi

In dit artikel

Samenvatting

Om tegemoet te komen aan dringende behoeften op het gebied van dengue-diagnostiek, introduceren we hier een in de smartphone-app geïntegreerd Dengue NS1 Paper-based Analytical Device (DEN-NS1-PAD) voor het kwantificeren van de Dengue NS1-antigeenconcentratie in klinische serum-/bloedmonsters. Deze innovatie verbetert de behandeling van dengue door te helpen bij de klinische besluitvorming in verschillende zorgomgevingen, zelfs in omgevingen met beperkte middelen.

Samenvatting

Infectie met het denguevirus (DENV), die wordt overgedragen door Aedes-muggen , is een groot probleem voor de volksgezondheid in tropische en subtropische landen. Met een jaarlijkse incidentie van ongeveer 10 miljoen gevallen en 20.000-25.000 sterfgevallen, vooral onder kinderen, is er dringend behoefte aan praktische diagnostische hulpmiddelen. De aanwezigheid van dengue niet-structureel proteïne 1 (NS1) tijdens vroege infectie is in verband gebracht met het vrijkomen van cytokines, vasculaire lekkage en endotheeldisfunctie, waardoor het een potentiële marker is voor ernstige dengue.

Op papier gebaseerde immunoassays zoals lateral flow assays (LFA's) en microfluïdische op papier gebaseerde analytische apparaten (PAD's) hebben aan populariteit gewonnen als diagnostische tests vanwege hun eenvoud, snelheid, goedkoopheid, specificiteit en interpretatiegemak. Conventionele op papier gebaseerde immunoassays voor de detectie van dengue NS1 zijn echter meestal gebaseerd op visuele inspectie, wat alleen kwalitatieve resultaten oplevert. Om deze beperking aan te pakken en de gevoeligheid te verbeteren, hebben we een zeer draagbare NS1-denguedetectietest voorgesteld op een op papier gebaseerd analytisch apparaat (PAD), namelijk DEN-NS1-PAD, dat een smartphone-applicatie integreert als een colorimetrische en kwantitatieve lezer. Het ontwikkelingssysteem maakt directe kwantificering van NS1-concentraties in klinische monsters mogelijk.

Serum- en bloedmonsters van patiënten werden gebruikt om de prestaties van het systeemprototype te demonstreren. De resultaten werden onmiddellijk verkregen en kunnen worden gebruikt voor klinische beoordeling, zowel in goed uitgeruste zorginstellingen als in omgevingen met beperkte middelen. Deze innovatieve combinatie van een op papier gebaseerde immunoassay met een smartphone-applicatie biedt een veelbelovende aanpak voor verbeterde detectie en kwantificering van dengue NS1-antigeen. Door de gevoeligheid te vergroten tot buiten de mogelijkheden van het blote oog, heeft dit systeem een groot potentieel voor het verbeteren van de klinische besluitvorming bij de behandeling van dengue, met name in afgelegen of achtergestelde gebieden.

Inleiding

Infectie met het knokkelkoortsvirus (DENV) is de snelst verspreidende door muggen overgedragen ziekte1, en meer dan 390 miljoen mensen zijn besmet met 96 miljoen symptomatische infecties, 2 miljoen gevallen van ernstige ziekte en meer dan 25,000 sterfgevallen per jaar in de wereld 1,2. Volgens de Wereldgezondheidsorganisatie (WHO) lopen naar schatting 3,9 miljard mensen risico op dengue; ~70% woont in landen in Azië-Pacific en voornamelijk in Zuidoost-Azië3. In 2019 bedroeg het aantal dengue-gevallen dat aan de WHO werd gemeld 4.2 miljoen, en Thailand droeg ten minste 136,000 dengue-gevallen en 144 overlijdensgevallen bij aan dengue-infectie4. De dengue-uitbraak in Thailand vindt plaats tijdens het regenseizoen, van april tot december, in zowel stedelijke als landelijke gebieden, vooral in het noordoostelijke gebied.

DENV-infecties hebben verschillende klinische manifestaties, variërend van subklinische symptomen, milde knokkelkoorts (DF) tot ernstige knokkelkoorts hemorragische koorts (DHF). Het belangrijkste kenmerk van een ernstige DHF-aandoening is een verhoogde vasculaire permeabiliteit, gevolgd door shock en orgaandisfunctie1. Het begrijpen van de moleculaire route die het vasculaire lek kan veroorzaken, is erg belangrijk bij het ontwikkelen van effectieve denguebehandelingen. Dengue niet-structureel eiwit 1 (NS1) is een uitgescheiden glycoproteïne tijdens vroege virusinfectie 5,6 en functioneert als een cofactor voor virale RNA-replicatie7. NS1 kan de afgifte van cytokines veroorzaken en bijdragen aan vasculaire lekkage door zich te binden aan toll-like receptor 4 (TLR4) en endotheliale glycocalyx 8,9. In vitro onderzoek heeft aangetoond dat NS1 interageert met endotheelcellen en apoptose induceert. Deze aandoening kan bijdragen aan endotheeldisfunctie en vasculair lek10. NS1-antigeenspiegels, gecorreleerd met seruminterleukine (IL)-10-spiegels, waren significant verhoogd bij patiënten met ernstige klinischeziekte11. Dengue NS1 draagt ook bij aan de pathogenese van de ziekte door IL-10 te induceren en DENV-specifieke T-celresponsen te onderdrukken12,13. Bovendien was dengue NS1-eiwit gerelateerd aan ernstige klinische ziekte, en de concentratie van NS1 > 600 ng ml-1 in de eerste 3 dagen van de ziekte werd geassocieerd met de ontwikkeling van DHF14.

De persistentie van het dengue NS1-antigeen bij patiënten met DHF kan worden gebruikt als een marker van ernstige dengue6. Er zijn verschillende methoden om NS1 in klinische monsters te detecteren, zoals enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) en de snelle test15. De gouden standaard voor het meten van de concentratie van NS1-eiwitten in een klinische setting is de ELISA-methode. De ELISA-methode is echter duur en vereist geschoold personeel en laboratoriumfaciliteiten16. Daarom is de ontwikkeling van technologie voor het detecteren en kwantificeren van NS1-eiwitten in de point-of-care-test (POCT) nog steeds aan de gang. In het afgelopen decennium zijn op papier gebaseerde immunoassays zoals lateral flow assays (LFA's) en microfluïdische op papier gebaseerde analytische apparaten (μPAD's) populair geworden als diagnostische tests vanwege hun eenvoud, snelheid, goedkoopheid en specificiteit 17,18,19. In een op papier gebaseerde immunoassay zijn verschillende labels gebruikt om signalen te genereren, zoals gouden nanodeeltjes (AuNP's)20, magnetische nanodeeltjes21,22, kwantumdots23 en fluorescentiematerialen 24,25. AuNP's zijn de meest voorkomende labels die worden gebruikt in op papier gebaseerde immunoassays vanwege hun lage productiekosten, productiegemak, stabiliteit en eenvoudige uitlezing. Momenteel worden laterale flow-assays (LFA's) voor dengue NS1 beroemd gebruikt in de klinische setting26,27. Conventionele LFA-labeldetectie maakt echter vaak gebruik van het blote oog en levert alleen kwalitatieve resultaten op.

In het afgelopen decennium zijn wereldwijd meer dan 5 miljard smartphones op grote schaal gebruikt en er is potentieel voor de ontwikkeling van draagbare detectie 28,29. Smartphones hebben multifunctionele capaciteiten zoals ingebouwde fysieke sensoren, multi-core processors, digitale camera's, USB-poorten, audiopoorten, draadloze en applicatiesoftware, waardoor ze geschikt zijn voor gebruik in verschillende biosensorplatforms30. Bovendien maken draadloze technologieën het mogelijk om gegevens snel te verzenden en kunnen ze worden gebruikt voor real-time en on-site monitoring31. Mudanyali et al. combineerden de op papier gebaseerde immunoassay en smartphones om een draagbaar, apparatuurvrij, snel, goedkoop en gebruiksvriendelijk POCT-platform voor malaria, tuberculose en HIV32 te ontwikkelen. Ling et al. rapporteerden een laterale flowtest in combinatie met een smartphonecamera om alkalische fosfatase-activiteit in melk kwantitatief te detecteren33. Hou et al. ontwikkelden ook een op smartphones gebaseerd, dual-modality beeldvormingssysteem voor kwantitatieve signalen van kleur of fluorescentie in de laterale flow-assay34. Bovendien kan het gebruik van de smartphone als colorimetrische en kwantitatieve lezer de gevoeligheid verbeteren, terwijl het blote oog de aanwezigheid van het doel niet met vertrouwen kan melden35.

De DEN-NS1-PAD 36,37,38 (hierna het apparaat genoemd) is een doorbraak in de denguediagnostiek en biedt een draagbare en efficiënte oplossing. Met behulp van met was bedrukte microfluïdische technologie op basis van papier, kwantificeert dit apparaat NS1 met hoge gevoeligheid en specificiteit door middel van beeldverwerking. Om de bruikbaarheid verder te vergroten, hebben we een gebruiksvriendelijke smartphone-app ontwikkeld voor colorimetrisch en kwantitatief lezen. Klinische validatie met behulp van patiëntmonsters uit Thaise ziekenhuizen onderstreept de onmiddellijke impact ervan op real-time patiëntbeoordeling. Onze innovatie markeert een cruciale vooruitgang in gestroomlijnd point-of-care-denguebeheer en belooft een revolutie teweeg te brengen in de diagnostiek in zorglandschappen met beperkte middelen.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Protocol

De Ethische Commissie van de Institutional Review Board, Royal Thai Army Medical Department, Phramongkutklao Hospital, Bangkok, Thailand (IRBRTA 1218/2562) heeft goedkeuring verleend. Bij het uitvoeren van dit onderzoek hebben we alle noodzakelijke ethische voorschriften nageleefd.

1. Apparaatfabricage van de op papier gebaseerde immunoassay

OPMERKING: Het op papier gebaseerde immunoassay-apparaat is vervaardigd volgens eerder vastgestelde methoden 36,37 en Thaise patentaanvraag nr. 19010081638.

  1. Ontwerp en patroontekening: Ontwerp het papieren analyseapparaat (Figuur 1A,B) met 18 PAD-waspatronen op een computer.
    OPMERKING: Het ontwerp is specifiek en bedoeld voor papier van A5-formaat. Het aantal PAD's is gerelateerd aan het formaat van het papier, zoals de gebruiker nodig heeft.
  2. Print het ontworpen patroon op het cellulosepapier met behulp van een wasprinter (Table of Materials).
  3. Smelt het met was bedrukte papier in een laboratoriumoven gedurende 75 s bij 150 °C. Bewaar het vervolgens in een silicadoos totdat u het nodig heeft voor de volgende stappen.
  4. Breng 0,5 μL 0,025% poly-L-lysine (PLL) aan op zowel de test- als de controlegebieden. Incubeer bij kamertemperatuur (RT) gedurende 2 minuten in een silicabox en verwarm vervolgens gedurende 5 minuten in de oven op 65 °C.
  5. Breng 0,5 μL van 1 μg μL-1 geitenanti-muis IgG-antilichaam aan op het controlegebied en 0,5 μL van 1 μg μL-1 van het vangantilichaam op het testgebied. Laat de druppels 30 minuten drogen in een silicageldoos op RT.
  6. Breng 2 μL van de blokkeerbuffer aan op het monstergebied, 3 μL op het geconjugeerde gebied en 2 μL op het detectiegebied. Laat de druppels 30 minuten drogen bij RT in een silicageldoos.
  7. Breng 2 μL gouden nanodeeltjes-antilichaamcomplex (AuNPs-Ab)-oplossing aan op het geconjugeerde gebied en laat het 30 minuten drogen in een silicageldoos bij RT.

2. Assemblage van de op papier gebaseerde immunoassay

  1. Verwijder voorzichtig de beschermfolie aan de achterkant van de zelfklevende plastic rugkaart om de lijm bloot te leggen.
  2. Lijn het behandelde cellulosepapier uit met de zelfklevende plastic rugkaart en druk de twee lagen stevig op elkaar.
    NOTITIE: Vermijd het aanraken van het hydrofiele veld om het risico op besmetting of schade aan het apparaat te minimaliseren.
  3. Breng een plastic folie aan om het papier te coaten en druk ze samen.
  4. Knip het gewenste apparaat met een schaar uit vellen volledig geassembleerde apparaten.
  5. De DEN-NS1-PAD's (Figuur 1C) zijn nu klaar voor gebruik. Bewaar ze voor langdurige stabiliteit bij 4 °C.

3. Bereiding van het AuNPs-Ab-conjugaat

OPMERKING: De AuNPs-Ab is opgesteld zoals eerder beschreven door Prabowo et al.36.

  1. Combineer 10 μL van 1 mg ml−1 anti-NS1-antilichaam in PBS, 1 ml 40 nm AuNPs-colloïde en 0,1 ml 0,1 ml boraatbuffer van 0,1 M (pH 8,5).
  2. Draai het mengsel gedurende 60 minuten op 50 tpm en incubeer bij RT.
  3. Breng 0,1 ml van 10 mg ml−1 BSA aan in BBS, draai met 50 tpm en incubeer gedurende 15 minuten bij RT.
  4. Centrifugeer de oplossing bij 20.187 × g en 4 °C gedurende 30 min.
  5. Pipetteer en scheid het supernatans voorzichtig van de neergeslagen AuNPs-Ab.
  6. Resuspendeer de AuNPs-Ab in 500 μL BBS en dispergeer het met behulp van sonicatie.
  7. Herhaal de centrifugatie bij 20.187 × g en 4 °C gedurende 30 min.
    OPMERKING: Herhaal de dispersie- en centrifugatieprocessen 3x.
  8. Voeg 50 μL van de geconjugeerde buffer toe aan de suspensie, zodat deze klaar is voor toepassing op het geconjugeerde gebied.

4. Ontwikkeling van mobiele applicaties

  1. Beeldverwerking en ontwikkeling van machine learning
    1. Verzamel een dataset voor een beeldmodel onder toezicht door meer dan 900 autofocusbeelden van DEN-NS1-PAD's te verzamelen, waarbij verschillende omstandigheden worden vastgelegd, zoals verschillende concentraties, cameramerken (12-13 megapixels), rotaties (90° en 180°) en verlichtingsinstellingen. Streef naar 30 afbeeldingen onder elke specifieke voorwaarde.
    2. Label de grondwaarheid door twee interessegebieden te identificeren en te annoteren als de test- en controlegebieden binnen de verzamelde afbeeldingen voor begeleid leren.
    3. Ontwerp een algoritme om de achtergrondstrook te identificeren. Lokaliseer de middellijn tussen de test- en controlegebieden, bereken het middelpunt en stel een vierkant gebied vast dat evenredig is met de gemiddelde grootte van de twee hoofdgebieden met behoud van dezelfde rotatierichting.
    4. Maak een afbeeldingssegmentatiemodel met behulp van de gegevensset en grondwaarheidslabels uit stap 4.1.1 en 4.1.2 om een afbeeldingssegmentatiemodel te trainen voor het identificeren van de interessegebieden.
  2. Applicatie-algoritme
    1. Pas het getrainde afbeeldingssegmentatiemodel toe op nieuwe afbeeldingen om de test-, besturings- en achtergrondgebieden automatisch te lokaliseren.
    2. Gebruik basisbeeldverwerkingstechnieken om één intensiteitswaarde te verkrijgen voor elk van de drie interessegebieden (test, controle en achtergrond).
    3. Transformeer de afbeelding in een 3D-arrayweergave (y, x-kanaal) om toegang te krijgen tot pixelwaarden.
    4. Converteer de afbeelding naar grijswaarden door het gemiddelde van RGB-waarden te berekenen en inversie toe te passen met de formule (255-x).
    5. Normaliseer de waarden van het test- en controlegebied door de waarde van het achtergrondgebied af te trekken.
    6. Gebruik de vooraf vastgestelde kalibratiecurve om de concentratie NS1 te berekenen.
    7. Classificeer de resultaten als positief of negatief op basis van een afkapwaarde van 0,1103 afgeleid van de genormaliseerde grijswaardenintensiteiten37.

5. Kalibratiecurve en gevoeligheden

  1. Bereid het NS1-monster voor in menselijk serum voor kalibratie met concentraties van 0, 0,1, 0,2, 0,4, 0,6, 0,8 en 1,0 μg ml-1.
  2. Breng 50 μl van elke concentratie aan op het monstergebied en voer de metingen in drievoud uit.
  3. Laat de monsters volledig in het apparaat trekken, wat 20-30 minuten kan duren om resultaten te verkrijgen.
  4. Maak beelden van het apparaat met een digitale camera of smartphone na 5 minuten incubatie.
  5. Analyseer de test- en controlegebieden met behulp van ImageJ en een aangepaste mobiele applicatie.
  6. Construeer de kalibratiecurve op basis van gegevens van ImageJ en de mobiele applicatie.
  7. Bereken de limiet van blanco (LOB), de detectielimiet (LOD) en de limiet van kwantificering (LOQ) met behulp van onderstaande vergelijkingen (1-3):
    LOB = Gemiddelde van de blancogegevens + 1:645* ð (standaarddeviatie van blancogegevens) (1)
    LOD = LOB +1:645*ð (standaarddeviatie van de laagste concentratiegegevens) (2)
    LOQ = Gemiddelde van blanco gegevens + 10*ð (standaarddeviatie van blanco gegevens) (3)

6. Het uitvoeren van een op papier gebaseerde immunoassay met klinische monsters

  1. Verzamel en verwerk 300 μL perifeer bloed van 30 patiënten op de eerste dag van ziekenhuisopname in paarse EDTA-buisjes, volgens goede klinische praktijken.
  2. Centrifugeer het bloed bij 2.884 × g en 4 °C gedurende 20 min.
  3. Breng de vloeibare component (plasma) met behulp van een pipet over in een schoon polypropyleen buisje.
  4. Bewaar het plasma onmiddellijk in de vriezer bij −20 °C voor verdere analyse.
  5. Breng 20 μL plasma aan op het monstergebied bovenop het apparaat. Voeg vervolgens 30 μL wasbuffer toe (0,05% v/v Tween 20 in 1x fosfaatgebufferde zoutoplossing).
  6. Laat het monster volledig in het apparaat trekken, wat 20-30 minuten kan duren om de resultaten te verkrijgen.
  7. Maak beelden van het apparaat met een digitale camera of smartphone na 5 minuten incubatie bij kamertemperatuur.
  8. Analyseer de test- en controlegebieden met behulp van ImageJ en een aangepaste mobiele applicatie.

7. Kwantificering met mobiele applicatie

OPMERKING: De intensiteit van de op papier gebaseerde immunoassay wordt geanalyseerd in de mobiele applicatie (Figuur 2).

  1. Open de ontwikkelde mobiele applicatie op de smartphone.
  2. Selecteer Camera gebruiken of Uploaden vanuit galerij om de gegevensbron te kiezen of te uploaden. Doe dit door middel van camera-opname of door een afbeelding uit de galerij van het apparaat te selecteren.
  3. Navigeer naar het analytische gedeelte en tik op de knop Analyseren op het scherm.
  4. Wacht tot de toepassing de gegevens analyseert en de resultaten weergeeft.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Resultaten

Het selecteren van een fabricagemethode is van cruciaal belang om reproduceerbare testprestaties te garanderen in op papier gebaseerde immunoassay-apparaten. In onze studie onderzochten we verschillende productieprocessen en materialen in de context van het demonstreren van een op papier gebaseerde immunoassay. Onze gekozen methode maakt gebruik van een wasprintsysteem om hydrofobe barrières te creëren in op papier gebaseerde microfluïdische apparaten. Deze aanpak onderscheidt zich door zijn eenvoud, snelheid en consiste...

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Discussie

Een van de belangrijke ontwerpparameters voor een op smartphones gebaseerd lezersysteem is de mogelijkheid om reproduceerbare beeldverwerking van monsters te bieden. In dit onderzoek werden voor de eenvoud en het gemak de beelden gemaakt van drie verschillende smartphonemerken met 12-13 MP-camera's zonder gebruik te maken van een beelddoos of accessoires. Variabele omstandigheden voor het vastleggen van afbeeldingen, zoals de resolutie van de camera, de opnametijd van het beeld, de lichtomstandigheden en de omgeving, kun...

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Openbaarmakingen

De auteurs hebben geen belangenconflicten om bekend te maken.

Dankbetuigingen

M.H.P. is dankbaar voor het onderzoeksfonds van de Universitas Islam Indonesia (UII). De auteurs betuigen hun dankbaarheid aan de heer Nutchanon Ninyawee voor zijn waardevolle expertise en hulp tijdens de ontwikkeling van de mobiele applicatie en zijn bijdragen aan het manuscript. Verder waarderen de auteurs de financiële steun van Thailand Science Research and Innovation (TSRI), Basic Research Fund: Fiscal year 2023 (projectnr. FRB660073/0164) in het kader van het programma Smart Healthcare van King Mongkut's University of Technology Thonburi.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Materialen

Lijst van materialen gebruikt in dit artikel
NaamBedrijfCatalogusnummerOpmerkingen
Materialen
0.1 M fosfaatgebufferde zoutoplossing (PBS, pH 7,2) 
BBS bevattend 0,1% Tween 20, 10% sucrose en 1% caseïne  de behandeling van het conjugaatgebied en blokkeringsbuffer
Boor-gebufferde zoutoplossing (BBS) (25 mM natriumboraat en 150 mM natriumchloride bij pH 8,2) aangevuld met 1% BSA de wasbuffer tijdens het conjugatieproces AuNPs met het antilichaam
BoorzuurMerck10043-35-3
Rundserumalbumine fractie V (BSA)  PAA Lab GmbH (Duitsland)K41-001 
CaseïneMerck9005-46-3
Chromatografiepapier Graad 2 GE Healthcare3002-911 
Doorzichtige laminaatfilm3M (Kantoorartikelen)
DinatriumwaterstoffosfaatMerck7558-79-4
Dubbelzijdige tapeKantoorartikelen
Geiten-anti-muis IgG-antilichaam MyBiosource (VS)MBS435013
Gouden nanodeeltjes (40 nm)  Serve Science Co., Ltd. (Thailand)
Menselijke IgG polyklonaal antilichaam  MerckAG711-M
Muis dengue NS1 monoklonaal antilichaam MyBiosource (VS)MBS834415
Muis dengue NS1 monoklonaal antilichaam MyBiosource (VS)MBS834236
NS1 serotype 2 antigenenMyBiosource (VS)MBS 568697
PBS 1X bevattend 0,1% Tween 20 werd gebruikt als telutiebuffer
Kunststof achterkaart 10x30 cmPacific Biotech Co., Ltd. (Thailand)
Poly-L-lysine (PLL)Sigma AldrichP4832
KaliumchlorideMerck104936
KaliummonofosfaatMerck104877
NatriumchlorideMerck7647-14-5
Natriumtetraboraat Sigma Aldrich1303-96-4
SucroseMerck57-50-1
Tween 20Sigma Aldrich9005-64-5
Instrumenten
CytationTM 5 multimode readerBioTek
Mobiele telefoonsHuawei Y7, iPhone 11, Samsung a20
FotoscannerEpson Perfection V30
OvenMemmert
Wasdrukprinter Xerox ColorQube 8880-PS
Software
Could AutoML Vision Object Detection documentatieGoogle Cloud
ImageJNationaal Instituut voor Gezondheid, Bethesda, MD, VS
Inkscape 0.91 Software

Referenties

  1. Cattarino, L., Rodriguez-Barraquer, I., Imai, N., Cummings, D. A. T., Ferguson, N. M. Mapping global variation in dengue transmission intensity. Science Translational Medicine. 12 (528), 1-11 (2020).
  2. World Health Organization (WHO). Treatment, prevention and control global strategy for dengue prevention and control. , WHO, Geneva. 1-34 (2012).
  3. WHO Dengue and severe dengue. , https://www.who.int/news-room/fact-sheets/detail/dengue-and-severe-dengue (2020).
  4. Department of Disease Control Ministry of Health Thailand. Weekly Disease Forecast Dengue. , (2020).
  5. Malavige, G. N., Ogg, G. S. Pathogenesis of vascular leak in dengue virus infection. Immunology. 151 (3), 261-269 (2017).
  6. Paranavitane, S. A., et al. Dengue NS1 antigen as a marker of severe clinical disease. BMC Infectious Diseases. 14 (1), 570(2014).
  7. Muller, D. A., Young, P. R. The flavivirus NS1 protein: Molecular and structural biology, immunology, role in pathogenesis and application as a diagnostic biomarker. Antiviral Research. 98 (2), 192-208 (2013).
  8. Modhiran, N., et al. Dengue virus NS1 protein activates cells via Toll-like receptor 4 and disrupts endothelial cell monolayer integrity. Science Translational Medicine. 7 (304), 304ra102(2015).
  9. Glasner, D. R., et al. Dengue virus NS1 cytokine-independent vascular leak is dependent on endothelial glycocalyx components. PLOS Pathogens. 13 (11), e1006673(2017).
  10. Lin, C. -F., et al. Antibodies from dengue patient sera cross-react with endothelial cells and induce damage. Journal of Medical Virology. 69 (1), 82-90 (2003).
  11. Adikari, T. N., et al. Dengue NS1 antigen contributes to disease severity by inducing interleukin (IL)-10 by monocytes. Clinical and Experimental Immunology. 184 (1), 90-100 (2016).
  12. Malavige, G. N., et al. Suppression of virus specific immune responses by IL-10 in acute dengue infection. PLoS Neglected Tropical Diseases. 7 (9), e2409(2013).
  13. Malavige, G. N., et al. Serum IL-10 as a marker of severe dengue infection. BMC Infectious Diseases. 13 (1), 341(2013).
  14. Libraty, D. H., et al. High circulating levels of the dengue virus nonstructural protein NS1 early in dengue illness correlate with the development of dengue hemorrhagic fever. The Journal of Infectious Diseases. 186 (8), 1165-1168 (2002).
  15. World Health Organization (WHO) and the Special Programme for Research and Tropical Diseases (TDR). Dengue: guidelines for diagnosis, treatment, prevention and control -- New edition. , https://www.who.int/publications-detail-redirect/9789241547871 (2009).
  16. Axelrod, T., Eltzov, E., Marks, R. S. Capture-layer lateral flow immunoassay: a new platform validated in the detection and quantification of dengue NS1. ACS Omega. 5 (18), 10433-10440 (2020).
  17. Kim, S. -W., Cho, I. -H., Lim, G. -S., Park, G. -N., Paek, S. -H. Biochemical-immunological hybrid biosensor based on two-dimensional chromatography for on-site sepsis diagnosis. Biosensors and Bioelectronics. 98, 7-14 (2017).
  18. Fu, Q., et al. Development of a novel dual-functional lateral-flow sensor for on-site detection of small molecule analytes. Sensors and Actuators B: Chemical. 203, 683-689 (2014).
  19. Dzantiev, B. B., Byzova, N. A., Urusov, A. E., Zherdev, A. V. Immunochromatographic methods in food analysis. TrAC Trends in Analytical Chemistry. 55, 81-93 (2014).
  20. Hu, J., et al. Advances in paper-based point-of-care diagnostics. Biosensors and Bioelectronics. 54 (4), 585-597 (2014).
  21. Zhong, Y., et al. Gold nanoparticles based lateral flow immunoassay with largely amplified sensitivity for rapid melamine screening. Microchimica Acta. 183 (6), 1989-1994 (2016).
  22. Figueredo, F., Garcia, P. T., Cortón, E., Coltro, W. K. T. Enhanced analytical performance of paper microfluidic devices by using Fe 3 O 4 nanoparticles, MWCNT, and graphene oxide. ACS Applied Materials & Interfaces. 8 (1), 11-15 (2016).
  23. Bahadır, E. B., Sezgintürk, M. K. Lateral flow assays: Principles, designs and labels. TrAC - Trends in Analytical Chemistry. 82, 286-306 (2016).
  24. He, M., Liu, Z. Paper-based micro fluidic device with upconversion fluorescence assay. Analytical Chemistry. 85, 11691-11694 (2013).
  25. Derikvand, F., Yin, D. L. T., Barrett, R., Brumer, H. Cellulose-based biosensors for esterase detection. Analytical Chemistry. 88 (6), 2989-2993 (2016).
  26. Kumar, S., Bhushan, P., Krishna, V., Bhattacharya, S. Tapered lateral flow immunoassay-based point-of-care diagnostic device for ultrasensitive colorimetric detection of dengue NS1. Biomicrofluidics. 12 (3), 034104(2018).
  27. Sinawang, P. D., Rai, V., Ionescu, R. E., Marks, R. S. Electrochemical lateral flow immunosensor for detection and quantification of dengue NS1 protein. Biosensors and Bioelectronics. 77, 400-408 (2016).
  28. Zhang, D., Liu, Q. Biosensors and bioelectronics on smartphone for portable biochemical detection. Biosensors and Bioelectronics. 75, 273-284 (2016).
  29. Preechaburana, P., Suska, A., Filippini, D. Biosensing with cell phones. Trends in Biotechnology. 32 (7), 351-355 (2014).
  30. Laksanasopin, T., et al. A smartphone dongle for diagnosis of infectious diseases at the point of care. Science Translational Medicine. 7 (273), 273re1(2015).
  31. Kim, J., et al. Noninvasive alcohol monitoring using a wearable tattoo-based iontophoretic-biosensing system. ACS Sensors. 1 (8), 1011-1019 (2016).
  32. Mudanyali, O., et al. Integrated rapid-diagnostic-test reader platform on a cellphone. Lab on a Chip. 12 (15), 2678(2012).
  33. Yu, L., Shi, Z., Fang, C., Zhang, Y., Liu, Y., Li, C. Disposable lateral flow-through strip for smartphone-camera to quantitatively detect alkaline phosphatase activity in milk. Biosensors and Bioelectronics. 69, 307-315 (2015).
  34. Hou, Y., et al. Smartphone-based dual-modality imaging system for quantitative detection of color or fluorescent lateral flow immunochromatographic strips. Nanoscale Research Letters. 12 (1), 291(2017).
  35. You, D. J., Park, T. S., Yoon, J. -Y. Cell-phone-based measurement of TSH using Mie scatter optimized lateral flow assays. Biosensors and Bioelectronics. 40 (1), 180-185 (2013).
  36. Prabowo, M. H., Chatchen, S., Rijiravanich, P. Dengue NS1 detection in pediatric serum using microfluidic paper-based analytical devices. Analytical and Bioanalytical Chemistry. 412, 2915-2925 (2020).
  37. Prabowo, M. H., et al. Clinical evaluation of a developed paper-based Dengue NS1 rapid diagnostic test for febrile illness patients. International Journal of Infectious Diseases. 107, 271-277 (2021).
  38. Preparation and detection method for the diagnostic device of dengue NS1 detection in serum, cell medium, and buffer. Thai Patent. , 1901000816 (2019).
  39. Kong, T., et al. Accessory-free quantitative smartphone imaging of colorimetric paper-based assays. Lab on a Chip. 19 (11), 1991-1999 (2019).
  40. Jung, Y., Heo, Y., Lee, J. J., Deering, A., Bae, E. Smartphone-based lateral flow imaging system for detection of food-borne bacteria E. coli O157:H7. Journal of Microbiological Methods. 168, 105800(2020).
  41. Chen, G., et al. Improved analytical performance of smartphone-based colorimetric analysis by using a power-free imaging box. Sensors and Actuators B: Chemical. 281, 253-261 (2019).
  42. Kim, H., et al. Smartphone-based low light detection for bioluminescence application. Scientific Reports. 7 (1), 40203(2017).
  43. Kim, H., Awofeso, O., Choi, S., Jung, Y., Bae, E. Colorimetric analysis of saliva-alcohol test strips by smartphone-based instruments using machine-learning algorithms. Applied Optics. 56 (1), 84(2017).
  44. Qin, Q., et al. Algorithms for immunochromatographic assay: review and impact on future application. The Analyst. 144 (19), 5659-5676 (2019).
  45. Yan, W., et al. Machine learning approach to enhance the performance of MNP-labeled lateral flow immunoassay. Nano-Micro Letters. 11 (1), 7(2019).
  46. Srisa-Art, M., Boehle, K. E., Geiss, B. J., Henry, C. S. Highly sensitive detection of Salmonella typhimurium using a colorimetric paper-based analytical device coupled with immunomagnetic separation. Analytical Chemistry. 90 (1), 1035-1043 (2018).
  47. Santiago, G. A., et al. Performance of the Trioplex real-time RT-PCR assay for detection of Zika, dengue, and chikungunya viruses. Nature Communications. 9 (1), 1391(2018).
  48. Lanciotti, R. S., Calisher, C. H., Gubler, D. J., Chang, G. J., Vorndam, A. V. Rapid detection and typing of dengue viruses from clinical samples by using reverse transcriptase-polymerase chain reaction. Journal of Clinical Microbiology. 30 (3), 545-551 (1992).
  49. Yang, X., et al. Design and development of polysaccharide hemostatic materials and their hemostatic mechanism. Biomaterials Science. 5 (12), 2357-2368 (2017).
  50. Li, H., Han, D., Pauletti, G. M., Steckl, A. J. Blood coagulation screening using a paper-based microfluidic lateral flow device. Lab Chip. 14 (20), 4035-4041 (2014).
  51. Nilghaz, A., Shen, W. Low-cost blood plasma separation method using salt functionalized paper. RSC Advances. 5 (66), 53172-53179 (2015).
  52. Ataullakhanov, F. I., Pohilko, A. V., Sinauridze, E. I., Volkova, R. I. Calcium threshold in human plasma clotting kinetics. Thrombosis Research. 75 (4), 383-394 (1994).
  53. Pamies, R., et al. Aggregation behaviour of gold nanoparticles in saline aqueous media. Journal of Nanoparticle Research. 16 (4), 2376(2014).
  54. Christau, S., Moeller, T., Genzer, J., Koehler, R., Von Klitzing, R. Salt-induced aggregation of negatively charged gold nanoparticles confined in a polymer brush matrix. Macromolecules. 50 (18), 7333-7343 (2017).
  55. Abe, K., Kotera, K., Suzuki, K., Citterio, D. Inkjet-printed paperfluidic immuno-chemical sensing device. Analytical and Bioanalytical Chemistry. 398 (2), 885-893 (2010).
  56. Sameenoi, Y., Nongkai, P. N., Nouanthavong, S., Henry, C. S., Nacapricha, D. One-step polymer screen-printing for microfluidic paper-based analytical device (µPAD) fabrication. The Analyst. 139 (24), 6580-6588 (2014).
  57. Mora, M. F., et al. Patterning and modeling three-dimensional microfluidic devices fabricated on a single sheet of paper. Analytical Chemistry. 91 (13), 8298-8303 (2019).
  58. Ng, J. S., Hashimoto, M. Fabrication of paper microfluidic devices using a toner laser printer. RSC Advances. 10 (50), 29797-29807 (2020).
  59. Pal, S., et al. Multicountry prospective clinical evaluation of two enzyme-linked immunosorbent assays and two rapid diagnostic tests for diagnosing dengue fever. Journal of Clinical Microbiology. 53 (4), 1092-1102 (2015).

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Herprints en machtigingen

Meer artikelen verkennen

Detectie van Dengue NS1Colorimetrische DetectieMicrofluïdisch Papieren ApparaatGoudnanodeeltjesconjugaatAnalyse van BloedmonstersLateral Flow AssayBeeldanalyse
Draagbare op papier gebaseerde immunoassay gecombineerd met smartphone-applicatie voor colorimetrische en kwantitatieve detectie van dengue NS1-antigeen
Neem contact met ons op
Aanbevelen aan de bibliotheek

Privacy

Gebruiksvoorwaarden

Beleidsoverzicht

Copyright © 2026 MyJoVE Corporation. Alle rechten voorbehouden.