We beschrijven de gedetailleerde chirurgische ingrepen van calvariale hechting-benige composietdefecten bij ratten, naast het onderzoek naar de korte- en langetermijnprognoses van het model. We streven ernaar een gestandaardiseerd model te construeren voor het ontwikkelen van hechtregeneratieve therapieën.
Een abonnement op JoVE is vereist om deze inhoud te bekijken. Log in of start vandaag met uw gratis proefperiode.
Methodenartikel
De vaststelling van calvariale hechting-benige composietdefecten bij ratten: een gestandaardiseerd model voor onderzoek naar hechtingsregeneratieve therapie
In dit artikel
Samenvatting
Samenvatting
Grootschalige calvariale defecten vallen vaak samen met verstoring van de schedelhechting, wat leidt tot stoornissen in het herstel van calvariale defecten en de ontwikkeling van de schedel (dit laatste komt voor in de zich ontwikkelende schedel). Het ontbreken van een gestandaardiseerd model belemmert echter de vooruitgang bij het onderzoeken van hechtregeneratieve therapieën en vormt een uitdaging voor het uitvoeren van vergelijkende analyses in verschillende onderzoeken. Om dit probleem aan te pakken, beschrijft het huidige protocol het gedetailleerde modelleringsproces van calvariale hechtdraad-benige composietdefecten bij ratten.
Het model werd gegenereerd door rechthoekige gaten van 4,5 mm × 2 mm over de coronale hechtingen over de volledige dikte te boren. De ratten werden geëuthanaseerd en de schedelmonsters werden postoperatief verzameld op dag 0, week 2, week 6 en week 12. μCT-resultaten van monsters die onmiddellijk na de operatie werden verzameld, bevestigden de succesvolle vaststelling van het hechting-benige composietdefect, waarbij de coronale hechting en de aangrenzende botweefsels werden verwijderd.
Gegevens uit de 6een 12epostoperatieve week toonden een natuurlijke genezingsneiging aan om het defect te sluiten. Histologische kleuring bevestigde deze trend verder door verhoogde gemineraliseerde vezels en nieuw bot in het defectcentrum te tonen. Deze bevindingen duiden op progressieve hechtingsfusie in de loop van de tijd na calvariale defecten, wat het belang van therapeutische interventies voor hechtingsregeneratie onderstreept. We verwachten dat dit protocol de ontwikkeling van hechtregeneratieve therapieën zal vergemakkelijken, waardoor nieuwe inzichten worden geboden in het functionele herstel van calvariale defecten en het verminderen van nadelige gevolgen die gepaard gaan met hechtingsverlies.
Inleiding
Schedelhechtingen zijn dichte vezelige verbindingen tussen schedelbeenderen, die fungeren als gewrichten om lichte schedelbewegingen te vergemakkelijken en een beschermend kussen te bieden voor de hersenen onder druk1. In de afgelopen jaren heeft meer onderzoek de cruciale rol van craniale hechtingen bij de ontwikkeling van de schedel, craniofaciale homeostase en het inherente osteo-herstellendepotentieel 2,3,4,5,6,7,8 benadrukt. Tijdens perioden van groei en ontwikkeling fungeren craniale hechtingen als de belangrijkste groeicentra in de schedel4. Nieuwe botvorming vindt plaats aan de osteogene fronten aan beide zijden van de hechtingen, terwijl de cellen in de hechtingen een ongedifferentieerde mesenchymale toestand behouden, wat zorgt voor een evenwichtige schedelexpansie naast hersengroei1. Het verlies van schedelhechtingen op dit moment resulteert in een discrepantie tussen de groei van de schedel en de hersenen, wat leidt tot ernstige problemen zoals hersenletsel, hydrocephalus, verhoogde intracraniale druk en cognitieve disfunctie 3,9.
Bovendien spelen craniale hechtingen een cruciale rol bij het bepalen van de prognose van calvariale defecten 5,7,10. Het regeneratieve potentieel over het calvariale oppervlak is ongelijk verdeeld, waarbij schedelnaden opmerkelijk superieure mogelijkheden vertonen in vergelijking met niet-hechtdraadregio's10,11. Eén studie geeft aan dat de snelheid van genezing van calvariale defecten omgekeerd evenredig is met de afstand tussen de schedelhechting en de plaats van de verwonding10. In het bijzonder leidt het verwijderen van coronale en sagittale hechtingen tot de niet-genezing van pariëtale botdefecten7, wat de noodzaak van hechtingsregeneratie bij calvariale defecten benadrukt. De focus van de huidige studies ligt echter voornamelijk op het herstel van de craniale botstructuur, terwijl de regeneratie van hechtmesenchym wordt verwaarloosd.
Wat de vooruitgang in de regeneratie van hechtingen betreft, zijn veelbelovende resultaten waargenomen met de transplantatie van hechtdraadbevattende botflappen, mesenchymale stamcellen (MSC's) en kunstmatige biomaterialen. Toen botflappen met hechtingen werden getransplanteerd in calvariale defecten, integreerden ze met succes en genazen ze, in tegenstelling tot die zonder hechtingen die non-union vertoonden en een onvermogen om periosteum, dura mater ofosteocyten te vormen. Evenzo vergemakkelijkte de implantatie van MSC's afkomstig van beenmerg in sagittale hechting-benige composietdefecten de vorming van hechtdraadachtige openingen12. Merk op dat een recente studie de realisatie van hechtdraadregeneratie met Gli1+ MSC's benadrukte, waardoor intracraniale drukregeling, correctie van schedelmisvorming en verbeterde neurocognitieve functie mogelijkis13. Naarmate regeneratieve geneeskunde en biomedische technologie zich ontwikkelen, richten onderzoekers zich steeds meer op biomaterialen voor weefselmanipulatie vanwege hun aanpasbare en aanpasbare eigenschappen14. Met name van polytetrafluorethyleenmembranen is bewezen dat ze effectief zijn bij het gelijktijdig reconstrueren van schedelbot en hechtmesenchym15,16.
craniofaciaal onderzoek mist echter gevestigde modellen voor het verkennen van mesenchymale regeneratieve therapieën met hechtingen, in tegenstelling tot relatief volwassen modellen bij het herstellen van andere weefsels zoals botten, huid, kraakbeen en spieren17. Het ontbreken van een gestandaardiseerd model beperkt de studie van hechtregeneratieve therapieën en maakt het een uitdaging om vergelijkende analyses uit te voeren in verschillende onderzoeken. Daarom heeft onze studie een praktisch en reproduceerbaar calvariaal hechting-benig composietdefect van de rat vastgesteld. Door middel van deze methode streven we ernaar om geschikte klinische interventies te ontwikkelen voor craniale hechtdraadreconstructie, waarbij we nieuwe perspectieven bieden op het functionele herstel van calvariale defecten en het verminderen van ongunstige resultaten als gevolg van hechtingsverlies.
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Protocol
Alle dierproeven in deze studie zijn beoordeeld en goedgekeurd door de Ethische Commissie van de West China School of Stomatology, Sichuan University (WCHSIRB-D-2021-597). In totaal werden 12 (3 ratten op elk van de vier tijdstippen) Sprague-Dawley (SD) ratten (mannetje, 300 g, 8 weken oud) verkregen van een commerciële bron (zie Materiaaltabel).
1. Preoperatieve voorbereiding
- Chirurgische artikelen
- Bereid chirurgische instrumenten voor die worden weergegeven in afbeelding 1A, waaronder een gebogen pincet, een steriel wegwerpscalpel, een periostale lift, een irrigatienaald, wattenbolletjes, een handstuk met lage snelheid, een chirurgische motor, ronde boren met tandheelkunde met lage snelheid (Figuur 1B, respectievelijk 1.2 mm en 0.8 mm diameter), een naaldhouder, 3-0 monofilamenthechtingen en een rechte schaar.
- Sterilisatie en desinfectie
- Steriliseer de instrumenten vooraf door stoomsterilisatie (125-135 °C, 20-25 min).
- Gebruik ethanol om warmtegevoelige medische apparatuur, zoals elektrische scheerapparaten, te steriliseren.
- Gebruik steriele medische niet-geweven stoffen om het operatieplatform te bedekken en desinfecteer de omgeving met 75% ethanol.
- Anesthesie
- Bereid dieren voor op een operatie met een acclimatisatieperiode van 1 week.
- Injecteer de ratten intraperitoneaal met xylazine (10 mg/kg) en ketamine (100 mg/kg) 20 minuten voor de operatie voor anesthesie of gebruik een geschikt anesthesieprotocol om algemene anesthesie te bereiken.
OPMERKING: De ketamine-xylazine-verdovingscocktail die intraperitoneaal bij ratten wordt toegediend, treedt doorgaans binnen 10-15 minuten in werking en bereikt ongeveer 35-40 minuten na injectie de piekanesthesie. Om onderkoeling tijdens de narcose te voorkomen, kunnen ratten het beste op een verwarmingskussen worden geplaatst. - Dien een preoperatieve subcutane injectie van carprofen toe in een dosis van 5 mg/kg om analgesie te bieden.
- Gebruik de "teenknijpmethode" om te bepalen of de ratten al dan niet bij bewustzijn zijn en reageren.
2. Chirurgisch proces
- Voorbereiding van de locatie
- Plaats de rat in een buikligging met zijn kop op natuurlijke wijze verticaal uitgestrekt, zonder dat er speciale hulpmiddelen of beperkingen nodig zijn om deze houding aan te houden (Figuur 2A).
- Breng veterinaire zalf, d.w.z. vaseline, aan op de ogen van de rat om uitdroging van het hoornvlies te voorkomen.
- Verwijder het haar van de hoofdhuid tussen de neusbrug en het cervicale wervelkolomgewricht met een elektrisch scheerapparaat (Figuur 2B). Desinfecteer het operatiegebied in cirkelvormige bewegingen vanuit het midden met 2% jodoforoplossing gevolgd door 75% ethanol. Gebruik een chirurgisch laken om de rug van het dier en de vacht rond de incisie te bedekken.
- Opening van de operatieplaats
- Maak vanaf het middelpunt van het neusbeen een incisie in de lengterichting van de huid met een wegwerpscalpel van 2 cm langs de middellijn van de schedel (Figuur 2C).
- Maak met een scalpel een periostale incisie in de middellijn en spiegel het beginpunt en de omvang van de huidlaag (Figuur 2D). Til vervolgens het periosteum aan beide zijden van de incisie voorzichtig op met een periostale lift (Figuur 2E1) om pariëtale botten, frontale botten en coronale hechtingen bloot te leggen (Figuur 2E2).
OPMERKING: Zorg er bij het insnijden van het periost voor dat u de schedelhechtingen niet beschadigt om overmatig bloeden tijdens het snijden te voorkomen. Adequate blootstelling van de coronale hechting is van het grootste belang voor de volgende procedures. - Spoel de wond af met een zoutoplossing en droog het operatiegebied af met wattenbolletjes.
- Oprichting van het model voor hechtingsbenige composietdefecten
- Stel de chirurgische motor in op 35.000 tpm door aan de knop te draaien (Figuur 1A, gele pijl) en zet vervolgens de schakelaar aan (Figuur 1A, witte pijl).
- Begin vanaf elk punt op de coronale hechting en oefen verticale kracht uit met behulp van een ronde boor met een diameter van 1.2 mm totdat een gevoel van doorbraak wordt gevoeld.
OPMERKING: Beveel het middelpunt van de coronale hechting aan (aangegeven met gele pijlen in figuur 2E2) als startpunt voor penetratie. Bij het slijpen moeten tandboren loodrecht op het schedeloppervlak worden gehouden. Wees voorzichtig om niet door te gaan met boren nadat u de volledige dikte van de schedel hebt doorgedrongen om verdere schade aan de ratten te voorkomen, inclusief hersenbeschadiging of hersenbloeding. - Beweeg de boor vanaf het penetratiepunt zijwaarts langs de coronale hechtdraad om een ongeveer 4 mm lange positioneringsgroef te creëren (Figuur 2F1). Verwijder botweefsel met de boor aan beide zijden van de positioneringsgroef om in eerste instantie een rechthoekig defect van volledige dikte te vormen (Figuur 2F2).
- Gebruik een ronde boor met een diameter van 0,8 mm om details te verfijnen (Figuur 2G1), waarbij rechte hoeken worden geslepen en defectmarges worden gladgestreken, om uiteindelijk een standaard rechthoekig defect te bereiken van 2 mm breed en 4,5 mm lang (Figuur 2G2).
OPMERKING: Om volledige verwijdering van de coronale hechting te bereiken met behoud van de sagittale en frontale hechtingen bij 300 g SD-ratten, is de maximaal haalbare defectlengte ongeveer 4,5 mm. Rekening houdend met de breedte van de coronale hechting in de anterieure-posterieure richting (aanvullende figuur S1), werd de defectbreedte vastgesteld op 2 mm. - Maak twee defecten over de linker- en rechterhelft van de coronale hechting voor zelfvergelijking.
- Zorg voor continue irrigatie van de zoutoplossing tijdens de boorprocedure om thermische schade aan de schedel en de hersenen te voorkomen. Gebruik ondertussen wattenbolletjes om het operatiegebied te drogen.
- Verificatie van de afmetingen van het monster
- Controleer regelmatig de lengte en breedte van de defecten met behulp van een schuifmaat (Figuur 2H1, H2) om consistentie in alle monsters te garanderen.
- Sluiting van de operatieplaats
- Sluit de huid met 3-0 monofilament hechtingen (Figuur 2I).
- Onmiddellijke postoperatieve in vivo microcomputertomografie (μCT)
- Voer indien mogelijk in vivo μCT-scans uit op alle ratten onmiddellijk na de operatie om het succes van de chirurgische ingreep te bevestigen en de trends in het herstel van defecten voor elk individu te volgen.
3. Postoperatieve zorg
- Dien, volgens de protocollen voor dierverzorging, indien nodig na de operatie gevestigde pijnstillers toe, bijvoorbeeld carprofen (5 mg/kg, subcutaan gebruik).
- Breng de ratten over naar een constant verwarmingskussen (37 °C) voor postoperatief herstel.
- Eenmaal volledig bij bewustzijn, verplaats je de ratten naar hun woonkooi met schoon beddengoed.
OPMERKING: Houd de ratten na de operatie continu in de gaten. Laat ze niet onbeheerd achter totdat ze sternale lighouding kunnen behouden. Houd geopereerde ratten geïsoleerd van anderen totdat ze volledig hersteld zijn. - Voer analgesiebeheer en postoperatieve monitoring uit gedurende 24 uur, gevolgd door dagelijkse beoordelingen gedurende de eerste week na de operatie. Houd de ratten daarna minimaal 1-2x per week in de gaten.
4. Monsterverzameling en gegevensanalyse
- Voorbereiding van het monster
- Verzamel schedelmonsters op postoperatieve dag 0, week 2, week 6 en week 12. Euthanaseer de ratten door CO2 -inhalatie.
- Fixeer de monsters in 4% paraformaldehyde bij 4 °C gedurende 24 uur voordat ze verder worden geanalyseerd.
- μCT-evaluatie
- Voer μCT-scans uit op schedelbeenderen van postoperatieve dag 0, week 6, week 12 met de volgende scanparameters: röntgenbuispotentiaal, 70 kVp; Röntgenintensiteit, 0,2 mA; filter, AL 0,5 mm; integratietijd, 1 x 300 ms; en voxelgrootte, 10 μm.
- Verkrijg 3D-reconstructie- en dwarsdoorsnedebeelden met beeldverwerkingssoftware (zie Materiaaltabel).
- Meet het resterende defectvolume en voer statistische analyses uit met bijbehorende software (zie Materiaaltabel).
- Histologische kleuring
- Ontkalk de schedelbeenderen in 12% (m/v) ethyleendiaminetetra-azijnzuuroplossing (pH = 7,2) bij 4 °C gedurende 6 weken.
OPMERKING: Ontkalk de monsters door de oplossing elke 3 dagen te vervangen. Gebruik een shaker om het proces te versnellen. Voltooiing wordt aangegeven wanneer een naald van 25 G gemakkelijk door het monster dringt. - Ga verder met uitdroging, paraffine-inbedding en voorbereiding van secties van 6 μm met behulp van standaardprotocollen18.
- Voer histologische analyse uit met behulp van hematoxyline en eosine (H&E) en Masson's trichrome kleuring volgens kitprotocol18.
- Ontkalk de schedelbeenderen in 12% (m/v) ethyleendiaminetetra-azijnzuuroplossing (pH = 7,2) bij 4 °C gedurende 6 weken.
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Resultaten
In deze studie werd het calvariale hechting-benige composietdefect van de rat vastgesteld door een rechthoekig gat van 4,5 mm x 2 mm over de coronale hechting te boren. De chirurgische schematische illustratie en het onderzoeksstroomschema zijn weergegeven in figuur 3. Het 3D-beeld en de dwarsdoorsnede van postoperatieve 0-dagmonsters, d.w.z. monsters die onmiddellijk na de operatie werden verzameld, bevestigden de succesvolle creatie van een calvariaal defe...
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Discussie
Conventionele modellen met calvariale defecten, al dan niet met craniale hechtingen, concentreren zich voornamelijk op het herstel van hard weefsel, waarbij vaak de vitale regeneratie van hechtmesenchym wordt verwaarloosd19,20. In onderzoek naar hechtingsregeneratie resulteerden eerdere modellen, zoals die van Mardas et al.15,16, waarbij een trephineboor werd gebruikt om een cirkelvormig defect van 5 mm ov...
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Openbaarmakingen
De auteurs hebben geen belangenconflicten te melden.
Dankbetuigingen
Deze studie werd ondersteund door de National Natural Science Foundation of China 82100982 (F.L.), 82101000 (H.W.), 82001019 (B.Y.), Science and Technology Department of Sichuan Province 2022NSFSC0598 (B.Y.), 2023NSFSC1499 (H.W.) en Research Funding van West China School/Hospital of Stomatology Sichuan University (RCDWJS2021-5). Figuur 3 is gemaakt met Biorender.com.
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Materialen
| Naam | Bedrijf | Catalogusnummer | Opmerkingen |
|---|---|---|---|
| 4% paraformaldehyde | Biosharp | BL539A | |
| 2% Iodophor-oplossing | Chengdu Jinshan Chemical Reagent Co., Ltd. | Geen | |
| 75% Ethanol | Chengdu Jinshan Chemical Reagent Co., Ltd. | Geen | |
| Wattenschijfjes | Haishi Hainuo Group Co., Ltd. | Geen | |
| Wattenstaafjes | Lakong Medical Devices Co., | Geen | |
| Gebogen pincetten | Chengdu Shifeng Co., Ltd. | Geen | |
| Dataviewer en Ctan software voor beoordelingen van resterend defectvolume | Bruker | Geen | |
| Tandheelkundige laagsnelheids ronde boren | Dreybird Medical Equipment Co., Ltd. | RA3-012 RA1-008 | |
| Wegwerp steriele scalpel | Hangzhou Huawei Medical Supplies Co., Ltd. | Geen | |
| Wegwerpspuiten (22 G) | Chengdu Shifeng Co., Ltd. | SB1-089(IX) | |
| Elektrisch scheerapparaat | JASE | BM320210 | |
| Ethyleen Diamine Tetraacetisch Zuur (EDTA) | BioFroxx | 1340GR500 | |
| Hematoxyline en Eosine Kleurkit | Biosharp | BL700B | |
| Irrigatienaald (23 G) | Sichuan New Century Medical Polymer Products Co., Ltd. | Geen | |
| Laagsnelheids handapparaat | Guangzhou Dental Guard Technology Co., Ltd. | Geen | |
| Masson’s Trichrome Kleurkit | Solarbio | G1340 | |
| Medische niet-geweven stoffen | Henan Yadu Industrial Co., Ltd. | Geen | |
| Micro-computed tomography (µCT) | Scanco Medical AG | µCT45 | |
| Mimics 20.0 voor doorsnedebeelden | Materialise | Geen | |
| Naaldhaakjes | Chengdu Shifeng Co., Ltd. | Geen | |
| Periostale elevator | Chengdu Shifeng Co., Ltd. | Geen | |
| Fysiologische zoutoplossing | Sichuan Kelun Pharmaceutical Co., Ltd. | Geen | |
| Scanco medische visualizer-software voor 3D-beeldreconstructie | Scanco Medical AG | Geen | |
| SPSS Statistics 20.0 voor statistische analyse | IBM | Geen | |
| Sprague-Dawley-ratten | Byrness Weil Biotech Ltd | Geen | |
| Rechte schaar | Chengdu Shifeng Co., Ltd. | Geen | |
| Chirurgische motor | MARATHON | N3-140232 | |
| Chirurgische hechtdraden (3-0 monofilament) | Hangzhou Huawei Medical Supplies Co., Ltd. | Geen |
Referenties
- Li, B., et al. Cranial suture mesenchymal stem cells: insights and advances. Biomolecules. 11 (8), 1129(2021).
- Opperman, L. A. Cranial sutures as intramembranous bone growth sites. Dev Dyn. 219 (4), 472-485 (2000).
- Lenton, K. A., Nacamuli, R. P., Wan, D. C., Helms, J. A., Longaker, M. T. Cranial suture biology. Curr Top Dev Biol. 66 (4), 287-328 (2005).
- Slater, B. J., et al. Cranial sutures: A brief review. Plast Reconstr Surg. 121 (4), 170-178 (2008).
- Zhao, H., et al. The suture provides a niche for mesenchymal stem cells of craniofacial bones. Nat Cell Biol. 17 (4), 386-396 (2015).
- Maruyama, T., Jeong, J., Sheu, T. -J., Hsu, W. Stem cells of the suture mesenchyme in craniofacial bone development, repair and regeneration. Nat Commun. 7 (1), 10526(2016).
- Wilk, K., et al. Postnatal calvarial skeletal stem cells expressing PRX1 reside exclusively in the calvarial sutures and are required for bone regeneration. Stem Cell Reports. 8 (4), 933-946 (2017).
- Doro, D. H., Grigoriadis, A. E., Liu, K. J. Calvarial suture-derived stem cells and their contribution to cranial bone repair. Front Physiol. 8, 956(2017).
- Kajdic, N., Spazzapan, P., Velnar, T. Craniosynostosis-recognition, clinical characteristics, and treatment. Bosn J Basic Med Sci. 18 (2), 110-116 (2018).
- Park, S., Zhao, H., Urata, M., Chai, Y. Sutures possess strong regenerative capacity for calvarial bone injury. Stem Cells Dev. 25 (23), 1801-1807 (2016).
- Quarto, N., Behr, B., Longaker, M. T. Opposite spectrum of activity of canonical Wnt signaling in the osteogenic context of undifferentiated and differentiated mesenchymal cells: Implications for tissue engineering. Tissue Eng Part A. 16 (10), 3185-3197 (2010).
- Kaku, M., et al. Mesenchymal Stem Cell-Induced Cranial Suture-Like Gap in Rats. Plast Reconstr Surg. 127 (1), 69-77 (2011).
- Yu, M., et al. Cranial suture regeneration mitigates skull and neurocognitive defects in craniosynostosis. Cell. 184 (1), e18 243-256 (2021).
- Koons, G. L., Diba, M., Mikos, A. G. Materials design for bone-tissue engineering. Nat Rev Mater. 5 (8), 584-603 (2020).
- Mardas, N., Kostopoulos, L., Karring, T. Bone and suture regeneration in calvarial defects by e-PTFE-membranes and demineralized bone matrix and the impact on calvarial growth: an experimental study in the rat. J Craniofac Surg. 13 (3), 453-462 (2002).
- Kostopoulos, L., Karring, T. Regeneration of the sagittal suture by GTR and its impact on growth of the cranial vault. J Craniofac Surg. 11 (6), 553-561 (2000).
- Mosaddad, S. A., Hussain, A., Tebyaniyan, H. Exploring the use of animal models in craniofacial regenerative medicine: A narrative review. Tissue Eng Part B Rev. , (2023).
- Tan, X., et al. PgC3Mg metal-organic cages functionalized hydrogels with enhanced bioactive and ROS scavenging capabilities for accelerated bone regeneration. J Mater Chem B. 10 (28), 5375-5387 (2022).
- Yazdanian, M., et al. Fabrication and properties of βTCP/Zeolite/Gelatin scaffold as developed scaffold in bone regeneration: in vitro and in vivo studies. Biocybern Biomed Eng. 40 (4), 1626-1637 (2020).
- Soufdoost, R. S., et al. In vitro and in vivo evaluation of novel Tadalafil/β-TCP/Collagen scaffold for bone regeneration: A rabbit critical-size calvarial defect study. Biocybern Biomed Eng. 39 (3), 789-796 (2019).
- Russell, W. P., Russell, M. R. Anatomy, head and neck, coronal suture. StatPearls. , (2022).
- Menon, S., et al. Skeletal stem and progenitor cells maintain cranial suture patency and prevent craniosynostosis. Nat Commun. 12 (1), 4640(2021).
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Herprints en machtigingen
