In deze studie presenteren we een protocol om een benadering van buischirurgie van Eustachius via het zachte gehemelte bij miniatuurvarkens te onderzoeken. De chirurgische ingreep is eenvoudig, met een korte operatietijd en de wondgenezing is snel; Het is dus een goede keuze voor procedures zoals ballondilatatie van de buis van Eustachius.
Methodenartikel
Endoscopische ballondilatatie van de buis van Eustachius via de zachte gehemeltebenadering bij miniatuurvarkens
* These authors contributed equally
In dit artikel
Samenvatting
Samenvatting
De buis van Eustachius (ET) is een van de meest complexe organen in het menselijk lichaam en de disfunctie ervan kan leiden tot een verscheidenheid aan ziekten. In de afgelopen jaren heeft een toenemend aantal wetenschappers ervoor gekozen om ET-gerelateerde studies uit te voeren met grote proefdieren zoals miniatuurvarkens of schapen, wat veelbelovende resultaten opleverde. Doorgaans worden conventionele endoscopische procedures uitgevoerd via de nasale benadering voor grote proefdieren. Vanwege de langwerpige en smalle neusholte bij deze dieren zijn transnasale operaties echter een uitdaging.
Om dit probleem aan te pakken, hebben we een ET-chirurgiebenadering via het zachte gehemelte onderzocht. Het dier werd in rugligging geplaatst. Na endotracheale intubatie onder algehele narcose werd een mondopener gebruikt om het bovenste gehemelte volledig bloot te leggen. Lokale infiltratie met verdund bijniervocht werd uitgevoerd voor anesthesie van het gebied. Een sikkelmes werd vervolgens gebruikt om een longitudinale incisie in het zachte gehemelte te maken op de kruising van het zachte en harde gehemelte. Na hemostase werd een endoscoop in de nasofarynxholte ingebracht, waardoor de farynxopening van de ET op de achterste zijwand van de neusholte kon worden gevisualiseerd.
Vervolgens werd een gespecialiseerde pusher gebruikt om een ballon in ET te plaatsen. De ballon werd opgeblazen, gedurende 2 minuten op 10 bar gehouden en vervolgens verwijderd. De incisie in het zachte gehemelte werd vervolgens gehecht om een goede uitlijning te garanderen. Het zachte gehemelte genas goed na de operatie. Deze chirurgische benadering is geschikt voor ET-gerelateerde procedures bij grote proefdieren (bijv. miniatuurvarkens, schapen en honden). De chirurgische ingreep is eenvoudig, met een korte operatietijd, en de wondgenezing is snel. Bij endoscopie is de faryngeale opening van de ET zichtbaar en is het dus een goede keuze voor procedures zoals ballondilatatie van de ET.
Inleiding
De buis van Eustachius (ET), een van de meest complexe organen in het menselijk lichaam, is een essentieel onderdeel van het middenoor en speelt een cruciale rol bij het behoud van zijn fysiologische functie1. De fysiologische functies van de ET zijn als volgt 2,3: ten eerste balanceert het de druk in het middenoor. Wanneer zich een negatieve druk vormt in het middenoor als gevolg van gasuitwisseling met het slijmvlies, opent de ET zich met tussenpozen om de druk gelijk te maken aan de atmosferische druk. Dit is essentieel voor het handhaven van de laagste impedantie in het geluidsoverdrachtssysteem van het middenoor, waardoor de meest effectieve overdracht van geluid naar het binnenoor wordt gegarandeerd. Ten tweede vergemakkelijkt het de afvoer van slijm van het middenoor naar de nasopharynx, waardoor de ophoping van vocht en de ontwikkeling van secretoire otitis media wordt voorkomen. Ten derde heeft het een beschermende rol. Onder normale omstandigheden blijft de ET meestal gesloten, waardoor het binnendringen van nasofaryngeale afscheidingen of ziekteverwekkers in het middenoor wordt voorkomen. De oppervlakteactieve stof die door het slijmvlies van de ET wordt uitgescheiden, remt ook microbiële infectie.
Bluestone en Beery4 zijn van mening dat de ET ook een dun halseffect heeft, vergelijkbaar met een kolf, wat ook een mechanisme is dat het beschermende effect van de ET aantoont. Ten vierde heeft het een geluidsbeschermingsfunctie. In gesloten toestand voorkomt de ET dat ademhalings- en slikgeluiden in de luchtwegen het middenoor binnendringen, waardoor interferentie met het gehoor wordt voorkomen. De hierboven genoemde fysiologische functies zijn nauw verbonden met de complexe anatomische structuur van de ET. Momenteel is bekend dat de totale lengte van de menselijke ET ongeveer 31-40 mm is, met een gemiddelde lengte van 36 mm. Anatomisch gezien is het verdeeld in het benige deel, de landengte en het kraakbeenachtige deel. Bij volwassenen staat de ET in horizontale positie onder een hoek van 30-40° en heeft hij een hoek van ongeveer 45° in de sagittale positie. De benige en kraakbeenachtige delen vormen geen rechte lijn, maar hebben een hoek van ~160°. De ET dient als een kanaal tussen de nasopharynx en het middenoor. De structuur omvat ET-kraakbeen dat aan de schedelbasis is bevestigd, de tensor veli palatini-spier, de levator veli palatini-spier, de salpingopharyngeus-spier, de klieren rond de buis van Eustachius en verschillende epitheliale componenten.
ET-disfunctie kan leiden tot verschillende ziekten, zoals abnormale ET-opening, ET-blokkade 5,6 en ET-decubitus. Abnormale ET-opening kan leiden tot symptomen zoals tinnitus en autofonie. ET-blokkade kan de ventilatie- en afvoerfuncties van het middenoor beïnvloeden, wat kan leiden tot ziekten zoals secretoire otitis media of cholesteatoom. ET-decubitus kan aerotitis media veroorzaken.
Kleine dieren worden vaak gebruikt in onderzoeken naar ET, waaronder muizen 7,8,9, ratten10,11, cavia's 12,13,14, eekhoorns 15,16,17,18 en konijnen19,20. Deze dieren zijn kosteneffectief, planten zich snel voort en zijn gemakkelijk te beheren. Na vele jaren van onderzoek is er aanzienlijke vooruitgang geboekt in de studie van de ET-structuur, fysiologische functies en pathologische modellen met behulp van deze dieren. In de toekomst wordt verwacht dat ze cruciale keuzes blijven voor ET-onderzoek.
Het feit dat de ET een zeer klein volume heeft in het lichaam van het dier en dat het nog kleiner is in kleine proefdieren, is echter een groot obstakel waarmee onderzoekers worden geconfronteerd. De structuur en sommige functies van ET bij deze dieren zijn heel anders dan die van mensen, waardoor hun toepassing op het gebied van ET-onderzoek wordt beperkt. In de afgelopen jaren heeft een toenemend aantal wetenschappers grote proefdieren zoals miniatuurvarkens of schapen gebruikt voor onderzoek met betrekking tot de ET 21,22,23,24,25. Ze hebben ontdekt dat deze grote experimentele diermodellen meer geschikt zijn voor ET-studies.
Pracy et al.24 ontdekten dat ET- en middenoorstructuren van miniatuurvarkens sterk lijken op die van mensen, met bijna identieke lengtes en vergelijkbare banen. Deze bevinding komt overeen met de voorlopige resultaten van onze onderzoeksgroep23. Sommige geleerden hebben ook niet-menselijke primaten gebruikt, zoals apen26 en resusapen 27,28,29. Hun buis van Eustachius staat anatomisch, fysiologisch en genetisch dichter bij de mens. Het valt echter niet te ontkennen dat deze dieren duur zijn, moeilijk te verkrijgen zijn en in sommige gevallen kleinere lichaamsafmetingen kunnen hebben, waardoor chirurgische ingrepen moeilijker worden. Deze eigenschappen dragen bij aan de beperkte toepassing van deze dieren in medisch onderzoek.
Het gebruik van grote proefdieren voor ET-onderzoek is de laatste tijd een hotspot op dit gebied. In het verleden werd de conventionele endoscopische transnasale benadering gebruikt voor ET-onderzoek, waarbij de buis van Eustachius werd blootgelegd na het bereiken van de nasopharynx, gevolgd door essentiële procedures. Dit proces lijkt nauw op menselijke ET-chirurgie. De anatomische kenmerken van de neusholte en schedel bij grote dieren verschillen echter van die bij mensen. Dit kan leiden tot uitdagingen zoals een langere duur van de operatie, merkbare nevenschade en vermoeidheid voor de chirurg tijdens de transnasale operatie. Deze problemen kunnen mogelijk van invloed zijn op ET-onderzoek. Om dit probleem aan te pakken, heeft onze onderzoeksgroep ET-chirurgie onderzocht via de zachte gehemeltebenadering en het chirurgische proces verfijnd, dat hieronder wordt geïntroduceerd.
Protocol
Dit onderzoek is uitgevoerd in overeenstemming met de richtlijnen voor de verzorging en het gebruik van proefdieren van de National Institutes of Health en is goedgekeurd door de Ethische Commissie Dierproeven van het PLA General Hospital.
1. Voorbereiding van chirurgische instrumenten
- Mondopener (Figuur 1)
- Maak de openingsinrichting van een roestvrijstalen staaf met een diameter van 2 mm en las de verbinding.
- Zorg ervoor dat het buitenframe rechthoekig van vorm is met een lengte van 30 cm en een breedte van 20 cm. Las twee roestvrijstalen metalen ringen met een diameter van 1 cm in het midden van de korte zijde van het frame.
- Verbind twee gelijkzijdige driehoekige roestvrijstalen metalen frames met een hoogte van 7 cm met de metalen ringen door middel van veren met een lengte van ~3 cm. Haal de boven- en onderkaken van het miniatuurvarken door de twee driehoeken en bevestig de kaken eraan. De driehoekige metalen ringen scheiden, onder invloed van veerkracht, de boven- en onderkaak van het miniatuurvarken, waardoor het operatiegebied op het zachte gehemelte bloot komt te liggen.
- Oprolmechanisme (Figuur 2)
- Wijzig het oprolmechanisme op de basis van het origineel dat wordt weergegeven in de materiaaltabel. Stel de hoek van de twee randen van het oorspronkelijke oprolmechanisme in op de hoek die wordt weergegeven in afbeelding 2 om het openen van de incisie te vergemakkelijken.
- Ballonduwer (Figuur 3)
- Wijzig de pusher die in deze studie is gebruikt op de basis van de originele. Snijd een deel van de bovenkant van de pusher af, houd deze ~3 mm en stel het uiteinde in op 140° om het duwen van de ballon in de buis van Eustachius te vergemakkelijken.
OPMERKING: Andere chirurgische instrumenten staan vermeld in de materiaaltabel.
- Wijzig de pusher die in deze studie is gebruikt op de basis van de originele. Snijd een deel van de bovenkant van de pusher af, houd deze ~3 mm en stel het uiteinde in op 140° om het duwen van de ballon in de buis van Eustachius te vergemakkelijken.
2. Proefdieren en anesthesie
- Selecteer gezonde, 10 maanden oude, vrouwelijke Bama-varkens met een gewicht van 25 kg en vast ze 1 dag voor de procedure.
- Tiletamine en zolazepam toedienen via intramusculaire injectie in een dosering van 10-15 mg/kg.
- Plaats het varken in rugligging op de operatietafel, intueer de luchtpijp, sluit het varken aan op een beademingsapparaat en handhaaf de anesthesie met isofluraan met een debiet van 2 l/min. Bewaak het zuurstofgehalte in het bloed (>90%), ademhalingsfrequentie (15-20/min) en hartslag (60-120 slagen/min)30. Controleer op het verdwijnen van de hoornvliesreflex om succesvolle anesthesie te bevestigen en gebruik medische tape om de ogen gesloten te houden om uitdroging te voorkomen.
3. Chirurgische ingrepen (Figuur 4)
- Gebruik een mondopener (Figuur 1) om de bovenkaak naar beneden te fixeren aan de onderkant van de mondopener. Bind de tong samen met de onderkaak en hang deze omhoog aan de bovenrand van de mondopener. Bevestig het puntje van de tong met een steriel gaasje aan de onderkaak. Open de bek van het varken volledig en stel het bovenste gehemelte bloot tot 3 cm achter de kruising van het zachte en harde gehemelte.
- Desinfecteer de mondholte en de omliggende huid met jodium, vooral de overgang van het zachte en harde gehemelte. Plaats een steriel laken en sluit een 0° endoscoop van 14 cm lang en 3 mm diameter aan op een camerasysteem met hoge resolutie.
- Gebruik onder de verlichting en geleiding van de endoscoop de wijsvinger om de overgang van het zachte en harde gehemelte te bereiken en zoek de positie van de incisie in het zachte gehemelte (1 cm achter de kruising, 2-3 mm naar de chirurgische zijde van de mediane hechting van het bovenste gehemelte). Gebruik 1 ml adrenaline-injectie met een concentratie van 0,02% voor lokale infiltratie, waarbij de hele lagen van het ingesneden zachte gehemelte worden bedekt.
- Gebruik een sikkelmes om een verticale incisie naar beneden te maken op de bovengenoemde locatie. Een gevoel van doorbraak geeft aan dat het zachte gehemelte is doorgesneden en de neusholte is bereikt. De incisielengte is ongeveer 5-7 mm.
OPMERKING: De neerwaartse incisie moet verticaal zijn omdat het zachte gehemelte dik is, en als de richting wordt veranderd, kan deze naar binnen snijden in de submucosa van het neustussenschot of naar buiten in de submucosa van de zijwand van de neusholte. Of het nu naar binnen of naar buiten afwijkt, het kan een uitdaging zijn om eenmaal in de submucosa te navigeren, wanneer deze onder een endoscoop wordt waargenomen. - Gebruik na de incisie een zelfgemaakt oprolmechanisme (Figuur 2) om het open te trekken, week een klein gaasje in adrenaline-injectie met een concentratie van 0,1% en steek het onmiddellijk in de incisie. Observeer de incisie gedurende 2-3 minuten. Over het algemeen is er geen duidelijke bloeding, maar als de bloeding hevig is en de endoscopische observatie beïnvloedt, gebruik dan met adrenaline doordrenkte gaasstrips totdat het bloeden stopt.
- Gebruik het zelfgemaakte oprolmechanisme om de incisie volledig te openen en de diepe structuren van het zachte gehemelte bloot te leggen.
OPMERKING: Als het volledig is geopend, kan de opening van de proximale nasale nasale wand worden gezien door middel van endoscopie. Als de opening niet zichtbaar is, kan de incisie te ondiep zijn of in de submucosa van de zijwand van de neusholte of de submucosa van het neustussenschot zijn gesneden, die verder kan worden aangepast afhankelijk van de diepte van de incisie. - Breng de endoscoop in de incisie in om de structuren aan de achterkant van de neusholte en nasopharynx te visualiseren, en de farynxopening van ET werd onderzocht.
OPMERKING: De farynxopening van ET bevindt zich over het algemeen aan de achterkant van de zijwand van de neusholte en ziet eruit als een licht halvemaanvormige kleine spleet. De morfologie van het kraakbeen van de achterwand van de farynxopening kan ook worden waargenomen. - Gebruik een speciaal ontworpen miniatuur varkensballonduwer (zelfgemaakt) (Figuur 3) of een gebogen zuigapparaat voor het verkennen van de keelholteopening van ET, een diepere spleet met een neerwaartse en buitenwaartse route.
- Installeer een ballonkatheter met een aangebrachte lengte van 35.5 cm, een ballonlengte van 2 cm en een dilatatiediameter van 3 mm op de pusher terwijl u de schroeven vastdraait. Nadat u de speciaal ontworpen miniatuur varkensballonschuiver in de ET hebt geplaatst, draait u de bevestigingsschroef los, duwt u de ballon voorzichtig naar binnen, zet u deze onder druk tot 10 bar en houdt u deze 2 minuten vast. Laat daarna de druk van de ballon los en trek de ballon er samen met de duwer langzaam uit.
- Onder endoscopisch onderzoek van de keelholteopening en nasopharynx, voer volgende procedures uit als er geen hevige bloeding is. Na het desinfecteren van de incisie in het zachte gehemelte, voert u de hechting uit om deze weer op één lijn te brengen met de 4# nylon hechtdraad.
OPMERKING: Hechtingen met volledige of gedeeltelijke dikte kunnen worden gebruikt. Over het algemeen zijn 1-2 steken voldoende. Het slijmvlies van de incisie is aangepast voor een goede uitlijning om wondgenezing te vergemakkelijken.
4. Postoperatieve zorg
- Verwijder de mondopener en het verbandgaasje. Plaats het varken in een zijligging met de tong uit de bek getrokken om te voorkomen dat de tong naar achteren valt en de luchtwegen blokkeert. Houd het dier nauwlettend in de gaten totdat het volledig wakker is om verwondingen door bewusteloze bewegingen te voorkomen.
- Plaats het miniatuurvarkentje terug in een individuele kooi.
- Dien postoperatief één dosis antibiotica toe, vast het dier 1 dag en dien orale antibiotica toe gedurende 6 dagen.
Resultaten
Deze studie voerde ballondilatatie van de ET uit via de zachte gehemeltebenadering op 53 miniatuurvarkens, die werden gebruikt om het effect van ballondilatatie op ET-slijmvlies te onderzoeken. Ballonnen werden voor alle proefdieren met succes in het ET-lumen ingebracht en soepel verwijd, en de verwachte chirurgische doelen werden bereikt. Van de proefdieren herstelden 50 varkens goed na de operatie, met volledige wondgenezing en succesvolle operatie. Het genezingspercentage van de incisie was 94,34%. Een week na de operatie bleven de hechtingen intact en sloot de incisie goed (Figuur 5). Vier weken na de operatie, tijdens het afnemen van monsters, ontdekten we dat hechtingen op natuurlijke wijze waren afgevallen en dat de genezing goed herstelde. Er waren bijna geen incisiesporen zichtbaar (Figuur 6). De incisies in het zachte gehemelte van de andere drie dieren vertoonden 1 week na de operatie verschillende gradaties van genezing, wat leidde tot de vorming van fistels van het zachte gehemelte (Figuur 7).
De zachte gehemeltebenadering voor ET-chirurgie bleek handig te zijn en er werd een goed zicht op de farynxopening van ET bereikt. Het resulteerde in minimale lokale weefselschade, controleerbare bloedingen, soepele ballondilatatieprocedures, korte operatietijd (gemiddeld 15-20 minuten) en snelle postoperatieve genezing. Er waren geen complicaties aangegeven.
Figuur 1: Diagram van zelfgemaakte frame-type mondopener. De afmetingen worden weergegeven in de afbeelding. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.
Figuur 2: Oprolmechanisme. Wanneer de dilatator in de incisie wordt ingebracht, zal de elasticiteit van de twee lange zijden het weefsel aan beide zijden uitrekken, waardoor het operatiegebied onder de incisie beter kan worden blootgesteld. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.
Figuur 3: Ballonduwer. Wanneer de metalen ring aan de achterkant wordt ingedrukt, duwt het metalen blok in het rode gebied de ballon uit de buis van de pusher en in de buis van Eustachius. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.
Figuur 4: Chirurgisch proces van ballonverwijding van de buis van Eustachius via de benadering van het zachte gehemelte. (A) Chirurgisch gebied en positie van de incisie; De stippellijn geeft de positie van de incisie aan. (B) Lokale infiltratie-injectie van adrenaline. (C) Incisie met een sikkelmes. (D) Morfologie na incisie. (E) De incisie wordt getrokken door een afleider en voor hemostase wordt een met adrenaline doordrenkt gaasje gebruikt. (F) Observeren van de positie van de faryngeale opening van ET door de incisie in het zachte gehemelte; de gestippelde contouren geven de faryngeale opening van ET aan. (G) Inbrengen van de endoscoop in de nasopharynx en blootleggen van de faryngeale opening van de buis van Eustachius; de gestippelde contouren geven de faryngeale opening van ET aan; (H) Ballonduwer bij de faryngeale opening van ET; het inbrengen van een ballon in het lumen van ET; de witte pijl geeft de faryngeale opening van ET aan. (I) Drukregeling van de ballon voor dilatatie van de buis van Eustachius; de witte pijl geeft de verwijding van ET aan. (J) Hechting van de incisie en aanhechting van het slijmvlies. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.
Figuur 5: Een week na de operatie bij dieren die genezing vertonen. De hechting blijft intact en de incisie is goed genezen. De gestippelde contouren geven de genezen incisie aan. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.
Figuur 6: Vier weken na de operatie. Tijdens het afnemen van het monster wordt de incisie onderzocht. Hechtingen zijn er van nature afgevallen en de genezing is uitstekend. De gestippelde contouren geven de genezen incisie aan. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.
Figuur 7: Een week na de operatie bij dieren die geen genezing vertoonden. De incisie werd gesloten en er vormde zich een onregelmatig pseudomembraan en fistel op het oppervlak, waarbij enkele hechtingen eraf vielen. De gestippelde contouren gaven de zachte gehemelte fistel aan. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.
Figuur 8: Miniatuur CT-scan van varkenskop (sagittale sectie). (A) Gebogen neusholte. De gele verticale lijn aan de rechterkant van de afbeelding is de schaalbalk en de gele horizontale lijn eronder is 5 cm, die de lengte van een deel van het zachte gehemelte aangeeft, wat aangeeft dat de lengte van het zachte gehemelte bij miniatuurvarkens meer dan 5 cm bedraagt. (B) Diagram van het inbrengen van endoscopie in de neusholte. Wrijving tussen endoscopie en neusslijmvlies bij het inbrengen in de neusholte. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.
Figuur 9: Miniatuur CT-scan van varkenskop (dwarsdoorsnede). (A-C) Normale miniatuur CT van varkenskop, geen schaduwen met hoge dichtheid gevonden in bilaterale middenoor- en mastoïdholtes (rode pijl). (D) De linker hamulus van het pterygoïde proces van miniatuurvarken A werd doorgesneden en 3 maanden na de operatie werd een CT-scan uitgevoerd. Er werd geen schaduw met een hoge dichtheid gevonden in de mastoïdholte van het middenoor (rode pijl). (E) Miniatuurvarken B onderging ballondilatatie van de linker buis van Eustachius via de zachte gehemelteroute. 3 maanden na de operatie werd een CT-scan uitgevoerd en er werd geen schaduw met hoge dichtheid waargenomen in de mastoïdholte van het middenoor (rode pijl). (F) Miniatuurvarken C werd onderworpen aan cauterisatie van de linker buis van Eustachius en een maand na de operatie werd een CT-scan uitgevoerd. Een schaduw met verhoogde dichtheid (gele pijl) was zichtbaar in de mastoïdholte van het linker middenoor. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.
Discussie
ET, dat de nasopharynx en het middenoor verbindt, speelt een cruciale rol bij het reguleren van de druk in het middenoor en is betrokken bij de pathogenese van otitis media25. Om de functie van ET uitgebreid te bestuderen, hebben onderzoekers zich uitgebreid van kleine diermodellen naar andere modellen zoals knaagdieren of resusapen. Momenteel zijn er meerdere onderzoeken waarbij schapen of miniatuurvarkens zijn gebruikt. Door middel van CT-scans en driedimensionale structuren bevestigden Miller et al. dat de anatomie van de buis van Eustachius bij Blackfaced Sheep sterk lijkt op die bij mensen22. Pohl et al. verifieerde de haalbaarheid van de behandeling van disfunctie van ET door een stent in ET21 van het schaap te implanteren.
Miniatuurvarkens, gekenmerkt door een klein formaat, vroege geslachtsrijpheid, snelle voortplanting en gemakkelijk te beheren varkens, zijn steeds populairder geworden als grote diermodellen in medisch onderzoek24. Eerdere studies van ons team gaven aan dat miniatuurvarkens dienen als uitstekende modellen voor de studie van het middenoor en het binnenoor 30,31,32, gezien hun morfologische en functionele overeenkomsten met mensen. Er zijn opmerkelijke prestaties geleverd bij het onderzoeken van de morfologie, elektrofysiologische kenmerken, ontwikkeling van het binnenoor33,34, genexpressie in het auditieve systeem35, genregulatie 36,37,38 en gentransformatie39,40. Tegelijkertijd is er diepgaand onderzoek gedaan op het gebied van de ET-functie. Om de ET-structuur en -functie effectiever te onderzoeken, hebben we daarom de nieuwe chirurgische benadering met miniatuurvarkens verkend.
Bij het onderzoek naar chirurgische benaderingen gebruikten we in eerste instantie de transnasale benadering23, een conventionele benadering voor alle operaties met grote dieren waarbij ET25 betrokken is. Vervolgens probeerden we de benadering van het harde gehemelte en het zachte gehemelte, en uiteindelijk werd gekozen voor de benadering van het zachte gehemelte. De voor- en nadelen van elke benadering zijn als volgt:
Transnasale aanpak
De transnasale benadering is een conventionele benadering voor klinische onderzoeken en operaties waarbij de ET betrokken is. Vanwege de relatief korte maar ruime menselijke neusholte en de grote ruimte, kan met adrenaline doordrenkt katoen worden gebruikt om het neusslijmvlies te vernauwen, waardoor de doorgang van een endoscoop naar de nasopharynx wordt vergemakkelijkt. De ruime ruimte zorgt voor comfortabele manipulatie, waardoor de operatie relatief eenvoudig is. Bij het uitvoeren van operaties bij grote proefdieren heeft deze aanpak uiteraard de voorkeur.
De voordelen van deze routinematige aanpak zijn dat de anatomische structuur relatief eenvoudig is en dat het gebruik van nasale endoscopie een duidelijke visualisatie mogelijk maakt, waardoor het een bekende keuze is voor operators. De nadelen van deze aanpak zijn ten eerste dat de neusholte bij miniatuurvarkens langwerpig en smal is, wat blijkt uit de CT-resultaten van ons eerdere onderzoek (Figuur 8A)23, waardoor de mobiliteit van instrumenten na diepe insertie wordt beperkt. Manoeuvreren wordt een uitdaging, vooral wanneer een rotatie of gehoekte beweging vereist is, waardoor het opmerkelijk moeilijk is wanneer wordt geprobeerd naar buiten en omhoog te reiken in de farynxopening van ET.
Ten tweede kan er een bloeding uit het neusslijmvlies optreden, wat leidt tot endoscopische lensbesmetting en een onduidelijk zicht op het operatieveld (Figuur 8B). Dit probleem heeft een aanzienlijke invloed op de operatie en er wordt veel tijd besteed aan het inbrengen van de endoscoop in de neusholte, het reinigen van de lens na lensvervuiling en het vervolgens opnieuw inbrengen van de endoscoop. Bovendien leidt langdurige chirurgie tot congestie en zwelling van het nasofarynxslijmvlies, waardoor de vernauwing van de neusholte verergert en het bloedverlies toeneemt. Transnasale operaties duren vaak 3 uur of langer; Gedurende deze periode bevindt de neusholte zich in een staat van continue bloeding, wat resulteert in een lage chirurgische efficiëntie. Langdurige procedures kunnen leiden tot vermoeidheid van de operator en verhoogde schade aan de neusholte, nasopharynx en farynxopening van ET. In ET-experimenten zijn veranderingen in de morfologie en functie van de faryngeale opening kritieke punten voor observatie. Overmatige chirurgische schade aan dit gebied kan de observatieresultaten beïnvloeden en bijgevolg de experimentele conclusies beïnvloeden, die tijdens de operatie zoveel mogelijk moeten worden vermeden.
Harde gehemelte benadering
Het voordeel van deze aanpak is dat de incisie tijdens chirurgische ingrepen dichter bij de voorkant wordt geplaatst, waardoor een grotere orale ruimte mogelijk is. De inzet van het instrument is handig, waardoor de operatie relatief eenvoudig is. Het palatinale slijmvlies is dun en er zijn geen instrumenten nodig.
De nadelen van deze aanpak zijn dat de chirurgische stappen complex zijn en dat apparatuur zoals een aangedreven systeemboor nodig is om het harde gehemelte te openen. Deze complexiteit belemmert de brede toepassing van de aanpak. Het belangrijkste is dat de postoperatieve genezing vaak slecht is, wat leidt tot de vorming van een harde palatinale fistel, die de ET-functie en zelfs de voedingsstatus van de varkens nadelig kan beïnvloeden. Vanwege deze complicaties werd deze aanpak verworpen.
Zachte gehemelte benadering
De voordelen van deze aanpak zijn onder meer duidelijke anatomische lagen met herkenbare oriëntatiepunten. De chirurgische incisie is klein, slechts 5-7 mm, en kan volledig worden blootgesteld voor voldoende hemostase zodat bloedverlies wordt beperkt. De chirurgische ingrepen zijn eenvoudig en na het openen van het zachte gehemelte kan de neusholte vanaf het niveau van de overgang van het zachte en harde gehemelte tot het niveau van de keel worden waargenomen met behulp van een 0° endoscoop, de farynxopening van ET wordt direct blootgesteld. De operatie duurt ongeveer 20 minuten en bekwaam personeel kan deze in iets meer dan 10 minuten voltooien, waardoor de chirurgische efficiëntie toeneemt. Het postoperatieve herstel is snel en de wond geneest binnen 1 week.
De nadelen van deze aanpak zijn dat de incisiepositie tijdens de operatie naar achteren is, wat resulteert in een kleinere mondruimte en de operatie uitdagender maakt. Deze uitdagingen kunnen echter worden overwonnen. Deze benadering omvat het doorsnijden van een deel van de levator veli palatini (LVP) -spier van het zachte gehemelte, wat de functie van de ET kan beïnvloeden.
Om de impact van spierletsel op de functie van de buis van Eustachius uit te sluiten, hebben we gerelateerde onderzoeken uitgevoerd. Eerst hebben we de hamulus van het pterygoïde proces doorgesneden om het contractiele vermogen van de tensor veli palatini (TVP) te verzwakken. Postoperatieve CT-scans werden maandelijks uitgevoerd en aan het einde van 3 maanden werden er geen otitis media gevormd, wat bevestigt dat de functie van de buis van Eustachius niet werd aangetast (Figuur 9A en Figuur 9D). Ten tweede voerden we CT-scans uit op de miniatuurvarkens 3 maanden na het maken van de incisie in het zachte gehemelte, en de resultaten toonden ook geen vorming van otitis media, wat bevestigt dat de functie van de buis van Eustachius niet werd beïnvloed (Figuur 9B en Figuur 9E). Cauterisatie van de buis van Eustachius kan echter de functie van de buis van Eustachius beschadigen, wat leidt tot de vorming van otitis media (Figuur 9C en Figuur 9F). De vergelijking van postoperatieve CT-scans van de drie varkens toonde aan dat de chirurgische route van het zachte gehemelte niet leidde tot de vorming van otitis media bij miniatuurvarkens, wat aangeeft dat deze chirurgische methode de functie van de buis van Eustachius niet beïnvloedde. Bovendien is de lengte van de incisie slechts 5-7 mm, terwijl de lengte van het zachte gehemelte meer dan 5 cm bedraagt, wat een anatomische basis biedt om de functie van de ET niet te beïnvloeden (Figuur 8A). We hebben de incisies ook onmiddellijk gehecht, waarbij de incisie 1 week na de operatie is genezen. Deze bevindingen, zowel van de anatomische structuur als van postoperatieve CT-scans, bevestigen dat de chirurgische incisie geen invloed had op de functie van de ET. Dit kan te wijten zijn aan de verschillende effecten van de TVP en LVP van het varken op de ET in vergelijking met mensen. Bovendien werden de miniatuurvarkens vier weken na de operatie grootgebracht om het herstel van de buis van Eustachius te observeren. Gedurende deze periode traden er geen complicaties op, zoals moeite met eten of ademhalen. Daarom is de benadering van het zachte gehemelte veilig en effectief.
De belangrijkste punten van de chirurgische ingreep voor de benadering van het zachte gehemelte zijn infectiepreventie en kritische anatomische oriëntatiepunten. Voor infectiepreventie ligt de primaire focus op het voorkomen van de vorming van een fistel van het zachte gehemelte. Als het eenmaal gebeurt, kan het de waterinname en voedingsstatus van het varken ernstig beïnvloeden en de ET-functie in gevaar brengen. Het is absoluut noodzakelijk om strikte aseptische procedures te volgen, waarbij wordt gezorgd voor een grondige desinfectie van het operatiegebied, dat het gehele slijmvlies van het bovenste gehemelte, beide zijden van het tandvlees en de tandbogen, delen van het tongoppervlak en de huid rond de mondholte omvat. Bovendien worden antibiotica voorgeschreven tijdens en na de operatie, met dagelijkse orale antibiotica-inname gedurende een week na de operatie.
Kritische anatomische oriëntatiepunten zijn de achterrand van het harde gehemelte en de mediane hechting van het zachte gehemelte. De achterrand van het harde gehemelte bevindt zich op de kruising van het zachte en harde gehemelte en is voelbaar met de wijsvinger. Identificatie van dit herkenningspunt is cruciaal om te voorkomen dat het naar voren snijdt en het risico loopt het harde gehemelte te beschadigen, waardoor het moeilijk wordt om te inciseren of het onmogelijk wordt om na de incisie toegang te krijgen tot de nasopharynx. Achteruit snijden kan overmatige schade aan het zachte gehemelte veroorzaken, wat de lokalisatie van de farynxopening van ET beïnvloedt. Voor de mediane hechting van het zachte gehemelte moet de incisie ongeveer 2-3 mm zijn ten opzichte van de chirurgische zijde van de mediane hechting van het zachte gehemelte. Als u te dicht bij de mediane hechting snijdt, kan dit onbedoeld in het submucosa van het neustussenschot terechtkomen, waardoor de toegang tot de farynxopening van ET wordt belemmerd. Als de incisie te ver van de mediane hechting verwijderd is, bestaat het risico dat het laterale aspect van de nasopharynx dicht bij de nasopharynx ligt, waardoor de farynxopening van ET mogelijk wordt beschadigd. In extreme gevallen kan het zelfs de submucosa van de zijwand binnendringen, waardoor het moeilijk wordt om de farynxopening van ET te lokaliseren en mogelijke schade aan de omliggende weefsels veroorzaakt, wat postoperatief leidt tot diepe weefselinfectie.
Drieënvijftig miniatuurvarkens waren betrokken bij dit onderzoek dat gewijd was aan de studie van de functie van de buis van Eustachius. Naast de zachte gehemelteroute als chirurgische methode, hebben we ook de impact van ballondilatatie op de structuur en functie van de buis van Eustachius en het mechanisme van verwonding en herstelproces van het slijmvlies van de buis van Eustachius bestudeerd. Latere studies omvatten dilatatie met ballonnen van verschillende diameters en de histologische kenmerken van het slijmvlies van de buis van Eustachius op verschillende tijdstippen na dilatatie. Vijftig miniatuurvarkens werden met succes geopereerd voor het hierboven beschreven experimentele onderzoek.
Onze chirurgische aanpak faalde in 3 gevallen. Deze resultaten kunnen worden veroorzaakt door meerdere factoren, waaronder enkele van de volgende. Ten eerste was de locatie van de incisie niet nauwkeurig genoeg, leunend naar de kant van het neustussenschot, zodat de positie van de keelholteopening van de buis van Eustachius niet effectief kon worden waargenomen via de oorspronkelijke incisie. Om de operatie te voltooien, werd de incisie uitgebreid, wat resulteerde in een niet-genezen wond. Ten tweede raakte de slagader gewond tijdens het snijden van het zachte gehemelte, werd de operatietijd verlengd als gevolg van herhaalde hemostase en hechtten de resterende bloedvlekken zich aan de neusholte en dienden als kweekmedium voor het versnellen van de bacteriegroei, wat leidde tot wondinfectie en verminderde genezing. Ten derde was de gehechte diepte onvoldoende en zorgde voedselwrijving tijdens het eten ervoor dat de hechting er vroegtijdig af viel, waardoor de wond niet genas. Hoewel niet-genezing in bepaalde gevallen werd gepresenteerd, was het chirurgische slagingspercentage nog steeds op een hoog niveau.
De beperking van deze studie is dat we geen statistische analyse hebben uitgevoerd van bloedverlies en operatietijd tussen de transnasale en zachte palatinale paden. We gebruikten in eerste instantie de transnasale aanpak, maar vonden de operatie behoorlijk uitdagend. De endoscoop moest herhaaldelijk worden verwijderd om het bloed te reinigen, waardoor de schade aan het neusslijmvlies verder verergerde en de operatie werd bemoeilijkt. Het duurde meer dan 3 uur voordat de ballondilatatie voltooid was. Ondanks dat we de procedure konden voltooien, zijn we deze chirurgische methode niet blijven gebruiken vanwege de ethiek van de dierproeven. Vanwege het beperkte aantal vroege transnasale ingrepen hebben we alleen voorlopige berekeningen gemaakt van de operatietijd. Het waren echter juist de nadelen van een lange operatietijd en overmatig bloeden die ons inspireerden om andere wegen te overwegen om deze problemen te voorkomen en het doel van ballondilatatie van de buis van Eustachius te bereiken.
Concluderend is de chirurgische benadering die in deze studie wordt beschreven zeer geschikt voor het uitvoeren van ET-procedures bij grote dieren zoals miniatuurvarkens, schapen en honden. De techniek wordt gekenmerkt door zijn eenvoud, gemakkelijk leren, korte operatietijd, hoge efficiëntie, minimale weefselbeschadiging en snelle genezing. Directe visualisatie van de faryngeale opening van ET is mogelijk tijdens de operatie en de procedure heeft geen nadelige effecten op de normale functie van ET. Deze benadering faciliteert verschillende ingrepen bij de keelholteopening, waaronder de ballondilatatie die in deze studie wordt genoemd, en is ook van toepassing op andere procedures zoals het plaatsen van ET-stents in andere literatuur.
Openbaarmakingen
De auteurs hebben geen belangenconflicten te melden.
Dankbetuigingen
Deze studie werd gefinancierd door subsidies van het National Key Research and Development Program of China (2023YFC2508400), Beijing Municipal Natural Science Foundation (7212096) en Beijing Nova Program (Z201100006820133)
Materialen
| Naam | Bedrijf | Catalogusnummer | Opmerkingen |
|---|---|---|---|
| Amoxicillin Soluble Powder | Hefei dragon god Animal Pharmaceutical Co., Ltd. | Veterinary Drug License No. 120.51199 | Amoxicillin oplosbare poeder is een antibioticum dat wordt gebruikt in de diergeneeskunde. Het is effectief tegen een breed scala aan bacteriële infecties bij dieren, met name ademhalings- en darminfecties. Gemakkelijk oplosbaar in water, het is handig voor orale toediening aan vee en pluimvee.Om postoperatieve infecties te voorkomen na Eustachische buisballondilatatiechirurgie. |
| Anesthesia Circuit | INSPIRED MEDICAL | YZB/Guangdong 0016-2009 | Het anesthesiecircuit is een systeem van buizen en componenten in een anesthesieapparaat, dat anesthesiegassen aan de patiënt levert en uitgeademde gassen verwijdert. Het zorgt voor een continue stroom van gassen, waardoor een nauwkeurige controle van anesthesieniveaus tijdens chirurgische ingrepen mogelijk is. |
| Anesthesia Machine | Dräger | ARHB-0015 | Een anesthesieapparaat is een medisch apparaat dat wordt gebruikt om anesthesie toe te dienen en te onderhouden tijdens chirurgische ingrepen. Het mengt nauwkeurig gassen en dampen en levert een gecontroleerde stroom anesthesie aan de patiënt terwijl vitale functies worden gemonitord om de veiligheid te garanderen. |
| Balloon Dilatation Catheter | BIOVAS | ETB30200 | Een Eustachische buisballondilatatiekatheter is een gespecialiseerd medisch apparaat dat is ontworpen om Eustachische buisdisfunctie te behandelen. Het heeft een kleine ballon aan de punt, die, wanneer opgeblazen, de Eustachische buis voorzichtig opent en verbreedt, wat helpt bij het herstellen van de normale functie en het verlichten van symptomen. |
| Balloon Pusher | BIOVAS | DYQ42 | Gebruikt in combinatie met een ballondilatatiekatheter, wordt dit apparaat gebruikt tijdens Eustachische buisballondilatatiechirurgie. Het wordt door de neusholte ingebracht tot de opening van de Eustachische buis, waardoor een werkkanaal wordt gecreëerd. Dit leidt de ballonkatheter in de kanaal om de ballondilatatie te voltooien. Na de procedure wordt het uit het kanaal verwijderd samen met de ballondilatatiekatheter. In dit experiment wordt het door het zachte gehemelte ingebracht tot de opening van de Eustachische buis." |
| Cefuroxime Sodium for Injection | SHANDONG RUNZE PHARMACEUTICAL CO., LTD | National Medicine Approval Number H20066112 | Cefuroxim natrium voor injectie is een breed-spectrum antibioticum dat wordt gebruikt om verschillende bacteriële infecties te behandelen. Het is effectief tegen ademhalings-, urine-, huid- en zachte weefselinfecties, werkend door interferentie met de synthese van de bacteriële celwand, waardoor de infectieveroorzakende bacteriën worden geëlimineerd.Om postoperatieve infecties te voorkomen na Eustachische buisballondilatatiechirurgie. |
| Disposable Balloon Inflation Pressure Pump | FERVID | FXB-20-30 | Bij Eustachische buisballondilatatiechirurgie wordt een ballon opblaasdrukpomp voor eenmalig gebruik gebruikt. Dit apparaat regelt nauwkeurig de uitbreiding van de ballon en zorgt voor een veilige en optimale druk tijdens de procedure. Het is essentieel voor het bereiken van effectieve dilatatie terwijl het risico op weefselschade wordt geminimaliseerd. |
| Endoscope | Karl Storz | 7220AA | Bij Eustachische buisballondilatatiechirurgie wordt een endoscoop gebruikt voor directe visualisatie van de Eustachische buis. Dit maakt nauwkeurige geleiding van de ballonkatheter mogelijk, waardoor nauwkeurige plaatsing en dilatatie worden gegarandeerd, cruciaal voor het succes van de procedure en het verminderen van het risico op complicaties.Gebruikt in combinatie met een endoscopisch beeldvormingssysteem. |
| Endoscopic Imaging System | DELON | HD3808 | Bij Eustachische buisballondilatatiechirurgie biedt een endoscopisch beeldvormingssysteem hoogwaardige beelden van de nasale en Eustachische buisgebieden. Dit vergemakkelijkt nauwkeurige ballonplaatsing en expansie, waardoor de effectiviteit van de procedure wordt gegarandeerd terwijl het risico op weefselschade en complicaties wordt geminimaliseerd. |
| Epinephrine Hydrochloride Injection | HENGTONG | Veterinary Drug License No. (2013) 220381220 | Epinefrine hydrochloride-injectie wordt veel gebruikt vanwege zijn vasoconstrictieve eigenschappen, waardoor effectief bloedvaten worden vernauwd om bloedingen te verminderen. Dit maakt het een cruciaal middel bij het controleren van bloedingen, met name tijdens chirurgische ingrepen en bij bepaalde bloedingsstoornissen. |
| Tiletamine Hydrochloride and Zolazepam Hydrochloride Injection | Virbac | Zoletil 50 | Tilidine hydrochloride en naloxone hydrochloride injectie is een medicijn dat een opioïde analgeticum en een opioïde antagonist combineert. Het wordt gebruikt voor ernstige pijnbehandeling, waarbij tilidine pijnverlichting biedt en naloxone het risico op door opioïden veroorzaakte bijwerkingen vermindert, met name respiratoire depressie.Gebruikt voor de anesthesie van experimentele dieren. |
| Trauma Continuous Drainage Suction Device | Shanghai S.MANF | YZB/Shanghai 5094-54-2014 | Een trauma-continue drainage aspirator is een medisch apparaat dat wordt gebruikt voor langdurige zuiging van vloeistoffen uit chirurgische of traumatische wonden. Het helpt om exsudaat en bloed te verwijderen, waardoor het risico op infectie wordt verminderd en het bevorderen van sneller genezen door een schone en droge wondomgeving te handhaven. |
| Xylazine Hydrochloride Injection | Chang shabest biological technology institute CO., LTD. | Veterinary Drug License Number180121777 | Cetirizine hydrochloride injectie wordt gebruikt in experimentele dierenanesthesie voor zijn sedatie-eigenschappen. Het helpt bij het induceren van milde sedatie, waardoor stress en ongemak bij dieren tijdens procedures worden verminderd. De toepassing ervan is cruciaal voor het waarborgen van het welzijn en het minimaliseren van stress bij verschillende dierstudies. |
Referenties
- Smith, M. E., Scoffings, D. J., Tysome, J. R. Imaging of the eustachian tube and its function: A systematic review. Neuroradiology. 58 (6), 543-556 (2016).
- Di Martino, E. F. eustachian tube function tests: An update. Hno. 61 (6), 467-476 (2013).
- Bluestone, C. D. Impact of evolution on the eustachian tube. Laryngoscope. 118 (3), 522-527 (2008).
- Bluestone, C. D., Beery, Q. C. Concepts on the pathogenesis of middle ear effusions. Ann Otol Rhinol Laryngol. 85, 2 Suppl 25 Pt 2 182-186 (1976).
- Derkay, C. S., Bluestone, C. D., Thompson, A. E., Kardatske, D. Otitis media in the pediatric intensive care unit: A prospective study. Otolaryngol Head Neck Surg. 100 (4), 292-299 (1989).
- Bluestone, C. D., Doyle, W. J. Anatomy and physiology of eustachian tube and middle ear related to otitis media. J Allergy Clin Immunol. 81 (5), Pt 2 997-1003 (1988).
- Li, G., et al. Surfactant protein a can affect the surface tension of the eustachian tube and macrophage migration. Laryngoscope. 133 (7), 1726-1733 (2023).
- Kouhi, A., Xia, A., Khomtchouk, K., Santa Maria, P. L. Minimally invasive trans-tympanic eustachian tube occlusion animal model. Int J Pediatr Otorhinolaryngol. 156, 111070(2022).
- Nicholas, B. D., et al. Changes in eustachian tube mucosa in mice after short-term tobacco and e-cigarette smoke exposure. Laryngoscope. 132 (3), 648-654 (2022).
- Kim, Y., et al. Serial histological changes in the cartilaginous eustachian tube in the rat following balloon dilation. PLoS One. 17 (5), e0268763(2022).
- Yang, J., Zhao, C., Chen, P., Zhao, S. Morphological and pathological changes of eustachian tube mucosa in an animal model of eosinophilic otitis media. Braz J Otorhinolaryngol. 88 (5), 701-707 (2022).
- Yu, C., et al. Effect of glucocorticoids on aquaporin-1 in guinea pigs with otitis media with effusion. Exp Ther Med. 5 (6), 1589-1592 (2013).
- Choi, H. S., et al. Functional study of mucus secretion of the eustachian tube in guinea pigs. Otol Neurotol. 31 (5), 817-822 (2010).
- Jang, C. H., Park, H., Choi, C. H., Cho, Y. B., Park, I. Y. Efficacy of transnasal nebulized surfactant on experimental otitis media with effusion in guinea pig. Int J Pediatr Otorhinolaryngol. 74 (1), 71-74 (2010).
- Murrah, K. A., et al. Replication of type 5 adenovirus promotes middle ear infection by streptococcus pneumoniae in the chinchilla model of otitis media. Pathog Dis. 73 (2), 1-8 (2015).
- Novotny, L. A., Mason, K. M., Bakaletz, L. O. Development of a chinchilla model to allow direct, continuous, biophotonic imaging of bioluminescent nontypeable haemophilus influenzae during experimental otitis media. Infect Immun. 73 (1), 609-611 (2005).
- Tong, H. H., Grants, I., Liu, X., Demaria, T. F. Comparison of alteration of cell surface carbohydrates of the chinchilla tubotympanum and colonial opacity phenotype of streptococcus pneumoniae during experimental pneumococcal otitis media with or without an antecedent influenza a virus infection. Infect Immun. 70 (8), 4292-4301 (2002).
- Giebink, G. S. Otitis media: The chinchilla model. Microb Drug Resist. 5 (1), 57-72 (1999).
- Wang, B., Xu, X., Lin, J., Jin, Z. Dynamic rabbit model of ear barotrauma. Aerosp Med Hum Perform. 90 (8), 696-702 (2019).
- Koten, M., et al. Nebulized surfactant as a treatment choice for otitis media with effusion: An experimental study in the rabbit. J Laryngol Otol. 115 (5), 363-368 (2001).
- Pohl, F., et al. Stenting the eustachian tube to treat chronic otitis media - a feasibility study in sheep. Head Face Med. 14 (1), 8(2018).
- Miller, F., et al. Treatment of middle ear ventilation disorders: Sheep as animal model for stenting the human eustachian tube--a cadaver study. PLoS One. 9 (11), e113906(2014).
- An, F. W., et al. Establishment of a large animal model for eustachian tube functional study in miniature pigs. Anat Rec (Hoboken). 302 (6), 1024-1038 (2019).
- Pracy, J. P., White, A., Mustafa, Y., Smith, D., Perry, M. E. The comparative anatomy of the pig middle ear cavity: A model for middle ear inflammation in the human. J Anat. 192, Pt 3 359-368 (1998).
- Oppel, N., et al. Development of an in vivo model for eustachian tube dysfunction). Bioengineering (Basel). 9 (7), (2022).
- Alper, C. M., Swarts, J. D., Doyle, W. J. Prevention of otitis media with effusion by repeated air inflation in a monkey model). Arch Otolaryngol Head Neck Surg. 126 (5), 609-614 (2000).
- Van Cauwenberge, P. animal experiment concerning the relationship between tubal function and nasal resistance. Acta Otorhinolaryngol Belg. 43 (5), 499-513 (1989).
- Casselbrant, M. L., Cantekin, E. I., Dirkmaat, D. C., Doyle, W. J., Bluestone, C. D. Experimental paralysis of tensor veli palatini muscle. Acta Otolaryngol. 106 (3-4), 178-185 (1988).
- Doyle, W. J., Ingraham, A. S., Fireman, P. The effects of intranasal histamine challenge on eustachian tube function. J Allergy Clin Immunol. 76 (4), 551-556 (1985).
- Ji, X., et al. The miniature pig: A large animal model for cochlear implant research. J Vis Exp. (185), e64174(2022).
- Yi, H. J., et al. The temporal bone microdissection of miniature pigs as a useful large animal model for otologic research. Acta Otolaryngol. 134 (1), 26-33 (2014).
- Yi, H., et al. Miniature pigs: A large animal model of cochlear implantation. Am J Transl Res. 8 (12), 5494-5502 (2016).
- Guo, W., et al. The morphology and electrophysiology of the cochlea of the miniature pig. Anat Rec (Hoboken). 298 (3), 494-500 (2015).
- Guo, W., et al. The morphological and functional development of the stria vascularis in miniature pigs. Reprod Fertil Dev. 29 (3), 585-593 (2017).
- Wang, Q., et al. Transcription analysis of cochlear development in minipigs. Acta Otolaryngol. 137 (11), 1166-1173 (2017).
- Chen, L., et al. A de novo silencer causes elimination of mitf-m expression and profound hearing loss in pigs. BMC Biol. 14, 52(2016).
- Hai, T., et al. Pilot study of large-scale production of mutant pigs by enu mutagenesis. Elife. 6, (2017).
- Hai, T., et al. Creation of miniature pig model of human waardenburg syndrome type 2a by enu mutagenesis. Hum Genet. 136 (11-12), 1463-1475 (2017).
- Ma, Y., et al. Transplantation of human umbilical cord mesenchymal stem cells in cochlea to repair sensorineural hearing. Am J Transl Res. 8 (12), 5235-5245 (2016).
- Shi, X., et al. Adeno-associated virus transformation into the normal miniature pig and the normal guinea pigs cochlea via scala tympani. Acta Otolaryngol. 137 (9), 910-916 (2017).
Herprints en machtigingen
Dit artikel is gepubliceerd
Video binnenkort beschikbaar