$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
Cystommetrie en EUS-EMG-activiteitstracering werden gebruikt om de gegevens te analyseren. De continue cystometriemethode omvat het inspuiten van zoutoplossing in de blaas en het gelijktijdig meten van de druk- en volumeveranderingen in de blaas. Om VV te meten, werd 0,4 ml zoutoplossing toegediend met een snelheid van 0,01 ml/min en werd urine gedurende 40 minuten in een dop verzameld. Het residu na de urinelozing (PVR) kan worden verkregen door de zoutoplossing door de katheter op te zuigen. Bij normale muizen zonder lijm was de som van VV en RV vaak minder dan 0,4 ml. Na het experiment was de vacht in de buik en rond de meatus nat door de opname van urine (Figuur 3A). Na het aanbrengen van een dunne laag lijm om kleine vachten te bedekken, bleek de som van VV en RV 0,4 ml te zijn en was er geen nat gebied (Figuur 3B,C).
De resulterende cystometrietraceringen leverden een gedetailleerde analyse op van verschillende parameters, waaronder de maximale contractiedruk van de ledige blaas (27,2 cmH2O), de contractieduur (16,26 s) en het intercontractie-interval (4,48 min). Tegelijkertijd hadden we een goede registratie van intravesicale druk en EUS-EMG-signalen bij muizen, zoals weergegeven in figuur 4.
Veel urodynamische metingen van muizen worden onder narcose uitgevoerd14. Hoewel dit een handige methode lijkt om de ruis van elektrische signalen en het verlies van urine als gevolg van de beweging van het dier te verminderen, is het essentieel om te bedenken dat de verdovingsmiddelen de urinestroom kunnen beïnvloeden, wat kan leiden tot onnauwkeurige of onbetrouwbare resultaten15. Daarom is urodynamische registratie bij wakkere dieren populairder om resultaten te verkrijgen die dichter bij de fysiologische toestand liggen. De urodynamische registratie bij wakkere dieren begint meestal na een periode van 40-50 minuten van herstel van isofluraan16. Dit proces omvat het nauwlettend in de gaten houden van de muizen om ervoor te zorgen dat ze ontspannen en comfortabel zijn zonder dat anesthesie nodig is. Door middel van verschillende experimenten is waargenomen dat de beweging van een bewuste muis urodynamische signalen 5,14 kan beïnvloeden, wat leidt tot onnauwkeurige metingen van specifieke parameters zoals lekpuntdruk, VV en VE17. Als gevolg hiervan hebben we een methode geïmplementeerd door bewuste muizen gedeeltelijk in bedwang te houden om betrouwbaardere urodynamische resultaten te garanderen. Maar zelfs met beperkte terughoudendheid hebben de bewuste muizen het nog steeds moeilijk wanneer ze onmiddellijk wakker worden uit de anesthesie, wat ook kan leiden tot loslating of onstabiel contact tussen de elektrodehaak en de EUS en een aanzienlijke ruis kan veroorzaken in de EUS-EMG-signalen. Zoals te zien is in figuur 3B, hebben we, om deze artefacten te minimaliseren, gekozen voor de aanpak om de elektroden met lijm te bevestigen aan het uitgangspunt van de huid. Deze methode is effectief gebleken bij het minimaliseren van de beweging van elektroden en de daaropvolgende artefacten die ze kunnen produceren.

Figuur 1: Verplaatsing van de elektromyografie-elektroden. Implantatie van elektroden (gele asterisk) bilateraal in de externe urethrale spier (EUS; zwarte pijlen). Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.

Figuur 2: Fixatie van de wakkere muis. Na implantatie van katheter en elektroden werd de muis op de plaat vastgehouden voor stabiliteit tijdens urodynamische opname. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.

Figuur 3: Abdominale en meatusgebieden na urodynamische opname. (A) Een groot nat gebied (omlijnd door een rode streepjeslijn) werd gezien in de buik en genitale regio's. (B) Droge, waterdichte buik- en genitale gebieden werden na opname gemaakt met cyanoacrylaatlijm (gevormd door een rode streepjeslijn). (C) Een urinedruppel (gele pijl) vormde zich tijdens de urodynamische opname bij de meatus en bleef lange tijd als druppel zonder door de huid en vacht te worden opgenomen. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.

Figuur 4: Representatieve sporen van cystometrie en externe urethrale sluitspierelektromyografie (EUS-EMG) bij een wakkere en ingetogen vrouwelijke muis. (A) Spoor A: Gelijktijdige opnames van continu cystometrogram (CMG) en EUS-EMG (respectievelijk bovenste en onderste sporen). (B) Spoor B is het uitgebreide deel van spoor A, aangegeven door een rechthoekig vak met verschillende tijdschalen. Tijdens de mictiefase viel intermitterend mictie samen met verlagingen van de intravesicale druk in de CMG-registratie (bovenste spoor; pijlen), die optrad tijdens perioden met lage toniën en vermindering van EUS-EMG-activiteit (onderste spoor; pijlen). Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.