Methodenartikel

Uitgebreide aanpak voor microbiële isolatie van Hidradenitis Suppurativa-tunnels

DOI:

10.3791/67630

⸱

7 februari 2025

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Dr. Phillip Frost Department of Dermatology and Cutaneous Surgery, University of Miami Miller School of Medicine

* These authors contributed equally

In dit artikel

Samenvatting

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

We demonstreren een methode om kieskeurige en anaërobe organismen met succes te isoleren uit cutane sinuskanalen (tunnels) in weefsels die zijn weggesneden van patiënten met Hidradenitis Suppurativa.

Samenvatting

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Hidradenitis Suppurativa (HS) is een slopende aandoening die wordt gekenmerkt door pijnlijke knobbeltjes en abcessen, die zich ontwikkelen tot sinuskanalen (tunnels) in de huidlagen van de huid, wat aanzienlijk ongemak, stinkende afscheiding, misvorming, contracturen en littekens veroorzaakt, die de kwaliteit van leven ernstig verminderen. HS wordt in verband gebracht met veranderingen in het huidmicrobioom, die van invloed zijn op de immuunregulatie en de afweer van de huid tegen schadelijke bacteriën. Ondanks de prevalentie blijft de bijdrage van het HS-microbioom aan de pathologie van de ziekte en de beperkte respons op de behandeling grotendeels onbekend. Tot op heden hebben meerdere 16S rRNA-sequencingstudies op HS-weefsel alleen granulariteit op genusniveau bereikt, waarbij een toename van Gram-negatieve anaëroben en een afname van huidcommensalen worden geïdentificeerd. Een beter begrip van microbiële dysbiose bij personen met HS is essentieel voor het optimaliseren van behandelingsstrategieën. Dit vereist een tweeledige aanpak voor het beoordelen van het HS-microbioom, inclusief de isolatie van bacteriesoorten, die vaak onderbenut worden in translationele studies gericht op huidaandoeningen. Het isoleren van individuele micro-organismen uit HS-weefsel is cruciaal voor het ophelderen van de rol van bacteriën in de pathogenese van HS. Hier belichten we reproduceerbare methoden om anaërobe pathogenen met succes te isoleren uit HS-tunnelweefsel, wat de eerste en meest kritische stap is in het begrijpen van de bacteriële rol in HS. Deze methode maakt de weg vrij voor gericht onderzoek naar microbiële bijdragen aan HS en voor het ontwikkelen van effectievere, gepersonaliseerde behandelingsstrategieën die de complexe microbiële belasting van deze chronische aandoening aanpakken.

Inleiding

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Hidradenitis Suppurativa (HS) is een veel voorkomende dermatologische aandoening die wordt gekenmerkt door knobbeltjes en abcessen die zich ontwikkelen naar sinuskanalen (tunnels) gevormd in de dermale en onderhuidse lagen van de huid, die aanzienlijke pijn veroorzaken, etterende afscheiding, misvorming en slopende psychosociale gevolgen veroorzaken 1,2. HS treft onevenredig veel vrouwen en personen met een gekleurde huid, meestal in de late adolescentie of vroege volwassenheid2. De ernstige fysieke symptomen van de aandoening worden verergerd door de diepgaande psychosociale impact, waaronder depressie, angst en sociaal isolement, die de kwaliteit van leven ernstig kunnen verminderen3. HS-tunnels die in het gevorderde stadium van de ziekte worden gevormd, verminderen de kans op respons van patiënten op de momenteel goedgekeurde biologische therapie aanzienlijk, en chirurgische excisie blijft de enige behandelingsbenadering 4,5.

Meerdere studies hebben het microbioom geassocieerd met HS-tunnels gekarakteriseerd, waarbij een prevalentie van anaërobe pathogenen en een verminderde overvloed aan cutanecommensalen 6,7,8 worden aangetoond, met recente studies die Porphyromonas spp. (type I) en Prevotella spp. (IV) in tunnels identificeren, naast andere geslachten9. Een andere studie vond variatie in het HS-microbioom door de diepte van de weefselbemonstering, wat het unieke karakter van de microbiële samenstelling in het tunnelweefsel bevestigt10. Bovendien is aangetoond dat dysbiose de immuunrespons bij HS beïnvloedt, wat de rol van microben in de pathogenese van de ziekte verder impliceert 11,12,13,14. Hoewel langdurige systemische antibioticabehandeling met clindamycine, rifampicine en tetracyclines in gebruik is en een vermindering van het aantal draineertunnels bij getroffen patiënten heeft aangetoond15,16, blijven de gegevens over antibioticaresistente anaërobe pathogenen bij HS onbekend. Tot nu toe is er geen melding gemaakt van het isoleren van bacteriestammen uit HS-tunnels, waardoor studies naar nieuwe antimicrobiële behandelingen en diepgaande evaluatie van de bijdrage van pathogenen aan de pathogenese van de ziekte van HS worden beperkt. Standaardisatie van methoden voor de isolatie van pathogenen zou niet alleen een goed inzicht in de bacteriële rol in de pathogenese van HS mogelijk maken, maar ook de vertaling naar meer gerichte en verbeterde interventies mogelijk maken.

Hier belichten we een methode om micro-organismen met succes te isoleren uit HS-tunnelweefsel. Het isoleren van individuele bacteriesoorten is een cruciale, eerste stap in het begrijpen van hun rol in HS-pathologie. Deze methode maakt de weg vrij voor gericht onderzoek naar microbiële bijdragen aan HS en voor het ontwikkelen van effectievere, gepersonaliseerde behandelingsstrategieën die bacteriële pathogenen bij deze chronische aandoening aanpakken.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Dit protocol is goedgekeurd door de Institutional Review Board (IRB) van de Universiteit van Miami (protocol #20200187). Geïnformeerde toestemming wordt verkregen van patiënten (n = 18, gemiddelde leeftijd ± standaarddeviatie = 30,9 ± 9,4, 12 vrouwen, 6 mannen) gediagnosticeerd met HS-tunnels en/of hun wettelijke voogd(en) voorafgaand aan de procedure na eerdere bespreking van onderzoek om eventuele zorgen of vragen te kunnen beantwoorden.

1. Afname van patiëntenmonsters

  1. Voordat u met weggesneden weefsel omgaat, moet u strikte steriele voorzorgsmaatregelen nemen om het risico op besmetting te minimaliseren. De persoon die met het weefsel omgaat, moet een laboratoriumjas, een gezichtsmasker en een chirurgische pet dragen en steriele handschoenen en steriele instrumenten gebruiken om het weefsel te hanteren.
  2. Om de steriliteit te controleren, dompelt u de pre-geautoclaveerde tang onder in de anaërobe transportflacon voordat u het weefsel verwerkt (Materiaaltabel).
  3. Verzamel huidweefsel, chirurgisch verwijderd door middel van een scalpel of CO2 -laser, van aangetaste gebieden van patiënten met de diagnose HS-tunnels en plaats het onmiddellijk in een steriel petrischaaltje met behulp van een steriele tang voor verdere verwerking.
  4. Identificeer in het operatiecentrum of de polikliniek tunnels in weggesneden weefsel door de huid te onderzoeken met een pre-autoclaverentang, zoals weergegeven in figuur 1A.
  5. Neem 6 mm ponsbiopten door de huid over de volledige dikte van de geïdentificeerde tunnel onmiddellijk na weefselexcisie en dompel onder in de halfvaste gebufferde media met reductiemiddelen in de anaërobe transportflesjes van het systeem om de overleving van anaërobe bacteriesoorten te optimaliseren voor verdere analyse.
  6. Transporteer het tunnelweefsel in de anaërobe flesjes op ijs naar het laboratorium.
  7. Voer voorbeelddocumentatie uit zoals hieronder beschreven.
    1. Verzamel op de dag van de procedure patiëntinformatie, waaronder demografische gegevens, leeftijd, zelfgerapporteerde etniciteit/ras en huidige medicijnen, zonder persoonlijke identificatiegegevens. De lichaamsplaatsen van gereseceerd weefsel vergezellen een lichaamskaart, aangezien HS-tunnels op meerdere lichaamsplaatsen kunnen voorkomen. Maak foto's van uitgesneden weefsel aan beide zijden van het monster voor en na weefselverwerking, waarbij de locatie van de biopsie die uit een tunnel is gegenereerd, wordt gedocumenteerd. Bij aankomst in het laboratorium registreert u de gecodeerde weefselmonsters zonder persoonlijke identificatiegegevens in een elektronische, beveiligde database.

2. HS huid verwerking

  1. Instellen en plateren
    1. Draag een laboratoriumjas en handschoenen en bind het haar vast om besmetting te voorkomen. Voorwarme bloedagarplaten, waaronder Laked Brucella Bloedagar met Kanamycine en Vancomycine (LKV) agar, Trypticase Soja agar (TSA II) 5% Schapenbloed (SB) agar, Brain Heart Infusion (BHI) en Fenylethylalcoholagar (PEA) met 5% SB agar tot 37 °C in een incubator gedurende 10 minuten. Reinig de bioveiligheidskast met 70% ethanol voordat het weefsel wordt verwerkt.
    2. Zodra de agarplaten zijn opgewarmd, labelt u de onderkant of zijkant van de plaat met de gecodeerde monsternaam en de datum. Plaats een geautoclaveerde tang, scalpels, voorgesteriliseerde inoculatielussen en agarplaten in de bioveiligheidskast.
    3. Verwijder de 6 mm ponsbiopsie uit de anaërobe transportflacon met een steriele tang door de tang onder te dompelen in de media. Snijd het weefsel snel in kleine stukjes, elk ongeveer 1 mm2 , met behulp van een steriel scalpel. Plaats het weefsel in een steriele microcentrifugebuis met 500 μL versterkt chloorhoudend medium (RCM) en draai kortstondig.
      OPMERKING: Homogenisatie werd niet gebruikt omdat de monsters gedurende een langere periode zouden worden blootgesteld aan de aërobe omgeving, wat had kunnen leiden tot extra beluchting tijdens het proces en mogelijk verlies van anaërobe bacteriën.
    4. Voer met behulp van een nieuwe steriele lus herhaalde kwadrantstrepen uit van de weefselsuspensie met bacteriële organismen op de TSA II 5% SB-, LKV-, PEA- met 5% SB- en BHI-agarplaten.
    5. Gebruik de resterende gehakte weefselsuspensie om glycerolvoorraden te maken door 20% v/v steriele glycerol en 80% v/v weefselsuspensie toe te voegen in een cryobuis. Bewaar de glycerolvoorraden bij 80 °C. In het geval van beperkte levensvatbaarheid van geïsoleerde bacteriën, kunnen weefselvoorraden worden gebruikt om de isolatie te herhalen.
    6. Plaats alle platen in de broedmachine bij 37 °C in een anaërobe kamer die is afgesloten met een CO2 -verpakking. Controleer de platen elke 2-3 dagen, verwacht de groei van anaëroben 7-14 dagen na het plateren. Documenteer de morfologieën van kolonies door platen te fotograferen.
  2. Weefselbank
    1. Gebruik een ponsbiopsie van 8 mm om extra huidmonsters over de volledige dikte door de tunnel en weg van de tunnel te verzamelen voor Formalin Fixed Paraffin Embedded (FFPE) -monster en histologische evaluatie, aangezien een groter weefselmonster meer kans heeft om de volledige tunnel vast te leggen.
    2. Bewaar extra 6 mm ponsbiopten voor DNA (snap bevroren), RNA (later in RNA) en eiwitisolatie (snap bevroren).
  3. Onderhoud van de kolonie
    1. Zodra kolonies op de originele platen zijn waargenomen, fotografeer je platen en let je op de verschillende morfologie van de kolonies17. Verwacht in het algemeen 10-15 verschillende koloniemorfologieën (zie Figuur 1).
    2. Bereid voorverwarmde LKV-, BHI-, ERWTEN-, erwten- en TSA II-agarplaten van 5% SB voor (materiaaltabel). Label elk plaatetiket met de voorbeeld-ID, de locatie van de biopsie en de datum.
    3. Pak met behulp van een steriele pipetpunt een enkele kolonie op en strijk deze in een zigzagbeweging op hetzelfde type plaat waarop deze werd gedetecteerd. Gebruik vervolgens dezelfde pipetpunt met de kolonie als sjabloon voor een 16s rDNA PCR-amplificatie en volg de onderstaande stappen.
    4. Herhaal stap 2.3.3 met behulp van de kolonies die uit alle soorten agarplaten zijn geselecteerd, met een nieuwe steriele pipetpunt en een andere enkelvoudige kolonie met een andere morfologie dan de oorspronkelijke plaat. Nogmaals, gebruik onmiddellijk na het strepen de pipetpunt met de resterende kolonie om deze onder te dompelen in een speciaal PCR-plaatputje, omdat dit een sjabloon voor PCR-amplificatie zal bieden.
    5. Herhaal de stappen 2.3.3-2.3.4 voor elke afzonderlijke kolonie totdat alle kolonies met specifieke morfologieën in alle vier de soorten agarplaten zijn gestreept en de bijbehorende PCR-putjes gelijktijdig zijn geëoculeerd.
    6. Bewaar de nieuw geplateerde agarplaten in de broedmachine bij 37 °C in een anaërobe kamer die is afgesloten met een CO2 -verpakking. Zodra de kolonies groeien, moet u de zuiverheid van de geïsoleerde kolonie verzekeren voordat u de bacterievoorraden bewaart (zie hieronder). Als de geplateerde kolonies niet uniform zijn, herhaal dan stap 2.3.3. Voer het herplatingsproces elke 4-5 dagen uit, afhankelijk van de groei van de kolonie, totdat de kolonies er uniform uitzien.
  4. Identificatie van bacteriesoorten door 16s rDNA kolonie amplicon sequencing
    1. Bereid een PCR-plaat voor met een mastermix bestaande uit 2,5 μL 10 μM 16S rDNA V1-V3 forward (5' AGAGTTTGATTCCTGGCTCAG-3') en reverse primers (5' AGAGTTTGATTCCTGGCTCAG-3'; 10 μM), 12,5 μL 2x Master Mix polymerase en 10 μL microbieel DNA-vrij water per putje voor een totaal volume van 25 μL per kolonie.
    2. Bereken het volume van een PCR-mastermix dat nodig is voor amplificatie van alle geselecteerde kolonies, negatieve controle (geen sjabloon) en positieve controle - elke laboratoriumstam kan worden gebruikt; we gebruiken vaak Staphylococcus aureus USA300.
    3. Breng een PCR-plaat naar de bioveiligheidskast en dek de putjes af om besmetting te voorkomen. Gebruik een enkele kolonie van een steriele pipetpunt voor het plateren. Breng de kolonie onmiddellijk opnieuw in suspensie door rigoureus in de aangewezen put te wervelen met de voorgevulde mastermix. Gebruik dezelfde pipetpunt voor zowel het subkweken als het bemonsteren voor PCR.
    4. Herhaal stap 2.4.3 voor alle enkelvoudige HS-kolonies en positieve controle.
    5. Voer PCR uit met het volgende protocol: 95 °C gedurende 5 minuten voor de eerste denaturatie die nodig is om de geselecteerde kolonie te lyseren, gevolgd door 40 cycli van 95 °C gedurende 15 s, 54 °C gedurende 1 minuut, gebruik van de laatste cyclus van 4 °C is optioneel. Een thermocycler kan ook worden gebruikt met dezelfde programma-instellingen.
    6. Voer gelelektroforese uit met geamplificeerde qPCR-producten om de grootte van het amplicon te verifiëren, die naar verwachting 311 bp zal zijn (Figuur 2). Zuiver met succes het 16s rDNA-fragment met de PCR-zuiveringskit volgens de instructies van de fabrikant.
    7. Stuur het gezuiverde PCR-product voor 16S ribosomale RNA Sanger-sequencing met behulp van 16S rDNA V1-V3 voorwaartse en omgekeerde primers.
  5. Bacteriële voorraden
    OPMERKING: De kieskeurige anaëroben staan bekend om hun beperkte levensvatbaarheid op de agarplaten.
    1. Om het behoud van de stam te garanderen voordat sequencingresultaten worden verkregen, die de identiteit van de soort zullen bevestigen, genereert u agarplaten van een enkele kolonie en bevestigt u de zuiverheid om voorraden te genereren. Genereer voorraden rechtstreeks vanaf de agarplaat parallel aan de optimalisatie van de groeiomstandigheden in de vloeibare media.
    2. Om de voorraad te bereiden van de plaat die in stap 2.3 is gegenereerd, gebruikt u een steriele inoculeringslus van 6 mm om zoveel mogelijk uniforme kolonies op te pakken. Resuspendeer vervolgens bacteriën krachtig in 800 μL RCM met 20% steriele glycerol in cryobuisjes en bewaar ze bij -80 °C om een bacterievoorraad te creëren.
      OPMERKING: Deze stap zorgt voor tijdige bewaring van kieskeurige pathogenen voordat karakterisering wordt verkregen door sequentiegegevens.
    3. Optimaliseer de groei van de vloeibare cultuur en het genereren van voorraden uit een enkele kolonie zodra de classificatie van de stam is bevestigd.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Resultaten

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

In deze studie beschrijven we een protocol voor de isolatie en karakterisering van anaërobe bacteriën uit HS-tunnels. Dit protocol is nieuw en opmerkelijk voor het creëren van het potentieel om de functie en virulentie van deze bacteriën te testen met behulp van in vitro, ex vivo en in vivo huidinfectiemodellen om ons begrip van de microbiële bijdrage aan de pathogenese van HS te vergroten. Eerst identificeerden we de tunnels van de gereseceerde huid door ze te...

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Discussie

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

In deze studie presenteren we een nieuwe methode voor het isoleren en onderhouden van bacteriën die HS-tunnels koloniseren. Deze reproduceerbare methode zal niet alleen toelaten om de stammen die aanwezig zijn in deze pathologische structuren diepgaand te karakteriseren, maar het zal ook latere functionele studies mogelijk maken om de rol van specifieke microben in de pathogenese van HS te onderzoeken. De kritieke stappen van het protocol omvatten weefselverzameling en transport in anaër...

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Openbaarmakingen

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

De auteurs melden geen belangenverstrengeling.

Dankbetuigingen

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Dit werk werd ondersteund door R01AR083385 (IP, MTC, HLT), P50MD017347 (TG, IP, HLT) en HS Foundation Danby Research Grant (TG). Dit werk werd bovendien ondersteund door NIH-subsidie 1S1OD023579-01 voor het VS120 Slide Scanner-huis aan de University of Miami Miller School of Medicine Analytical Imaging Core Facility.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Materialen

Lijst van materialen gebruikt in dit artikel
NaamBedrijfCatalogusnummerOpmerkingen
6mm punch biospyINTEGRA33-36Andere leveranciers kunnen worden gebruikt
8mm punch biospyINTEGRA33-37Andere leveranciers kunnen worden gebruikt
Agarose Sigma AldrichA9539Andere leveranciers kunnen worden gebruikt
Anaerobe kamers BD260672
Anaerob Transport MediaAnaerobic SystemsAS-911
Brain heart Infusion AgarAnaerobic SystemsAS-6426
CO2 gaspakBD260678
Difco Reinforced Clostridial MediumBD218081
GlycerolSIGMAG5516-1LAndere leveranciers kunnen worden gebruikt
Hard shell PCR platenBIO-RADHSP9601Andere leveranciers kunnen worden gebruikt
Incubator VWRSymphonyElke gekalibreerd incubator kan worden gebruikt
InoculatieslingersVWR76544-926Andere leveranciers kunnen worden gebruikt
LKV agarHARDY DiagnosticsA60
Microbiële DNA-vrije waterQiagen338132
Nunc CryoTubeThermo scientific 377267Andere leveranciers kunnen worden gebruikt
PCR (CFX Connect Real Time System)BIO-RADCFX Connect Optics Module Reguliere Themocycler kan worden gebruikt 
PEA agar HARDY DiagnosticsA93
Q5 High Fidelity 2X Master MixBioLabsM0492S
QIAquick PCR-zuiveringskitQIAGEN28104
Versterkte clostridia mediaBD218081
Thin ForcepsMillipore SigmaF4017Andere leveranciers kunnen worden gebruikt
Trypticase Soy Agar (TSA II) met 5% schapenbloedThermo scientific221261

Referenties

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Gonzalez-Lopez, M. A. Hidradenitis suppurativa. Med Clin. 162 (4), 182-189 (2024).
  2. Revankar, R., Murrell, D. F., Murase, J. E. Shedding light on the impact of hidradenitis suppurativa on women and their families: A focus of the international journal of women's dermatology. Int J Womens Dermatol. 7 (5Part B), 661-663 (2021).
  3. Gooderham, M., Papp, K. The psychosocial impact of hidradenitis suppurativa. J Am Acad Dermatol. 73 (5 Suppl 1), S19-S22 (2015).
  4. Frew, J. W., et al. Clinical response rates, placebo response rates, and significantly associated covariates are dependent on choice of outcome measure in hidradenitis suppurativa: A post hoc analysis of pioneer 1 and 2 individual patient data. J Am Acad Dermatol. 82 (5), 1150-1157 (2020).
  5. Bechara, F. G., et al. Efficacy and safety of adalimumab in conjunction with surgery in moderate to severe hidradenitis suppurativa: The sharps randomized clinical trial. JAMA Surg. 156 (11), 1001-1009 (2021).
  6. Williams, S. C., Frew, J. W., Krueger, J. G. A systematic review and critical appraisal of metagenomic and culture studies in hidradenitis suppurativa. Exp Dermatol. 30 (10), 1388-1397 (2021).
  7. Guet-Revillet, H., et al. The microbiological landscape of anaerobic infections in hidradenitis suppurativa: A prospective metagenomic study. Clin Infect Dis. 65 (2), 282-291 (2017).
  8. Riverain-Gillet, E., et al. The surface microbiome of clinically unaffected skinfolds in hidradenitis suppurativa: A cross-sectional culture-based and 16s rrna gene amplicon sequencing study in 60 patients. J Invest Dermatol. 140 (9), 1847-1855.e6 (2020).
  9. Ring, H. C., et al. The microbiome of tunnels in hidradenitis suppurativa patients. J Eur Acad Dermatol Venereol. 33 (9), 1775-1780 (2019).
  10. Pardo, L. M., et al. Bacterial microbiota composition in hidradenitis suppurativa differs per skin layer. J Invest Dermatol. 144 (2), 426-430.e5 (2024).
  11. Jiang, S. W., Whitley, M. J., Mariottoni, P., Jaleel, T., Macleod, A. S. Hidradenitis suppurativa: Host-microbe and immune pathogenesis underlie important future directions. JID Innov. 1 (1), 100001(2021).
  12. Navrazhina, K., et al. Epithelialized tunnels are a source of inflammation in hidradenitis suppurativa. J Allergy Clin Immunol. 147 (6), 2213-2224 (2021).
  13. Williams, S. C., et al. Gram-negative anaerobes elicit a robust keratinocytes immune response with potential insights into hs pathogenesis. Exp Dermatol. 33 (5), e15087(2024).
  14. Chopra, D., et al. Innate immunity and microbial dysbiosis in hidradenitis suppurativa - vicious cycle of chronic inflammation. Front Immunol. 13, 960488(2022).
  15. Van Straalen, K. R., et al. External validation of the ihs4-55 in a european antibiotic-treated hidradenitis suppurativa cohort. Dermatology. 239 (3), 362-367 (2023).
  16. Molinelli, E., et al. Systemic antibiotic therapy in hidradenitis suppurativa: A review on treatment landscape and current issues. Antibiotics. 12 (6), 978(2023).
  17. Andersson, T., Lood, R. 16S rRNA sequencing: A PCR-based technique to identify bacterial species. JoVE Sci Edu Database Microbiol. , e10510(2023).
  18. Nebo, I. D., Frew, J. W., Gudjonsson, J. E., Petukhova, L. Tissue comparability and bias in hidradenitis suppurativa transcriptomic studies. Proc Natl Acad Sci. 121 (23), e2404503121(2024).
  19. Naik, H. B., Piguet, V. Standardizing hidradenitis suppurativa skin microbiome research: The methods matter. J Invest Dermatol. 140 (9), 1688-1690 (2020).
  20. Ocker, L., Abu Rached, N., Seifert, C., Scheel, C., Bechara, F. C. Current medical and surgical treatment of hidradenitis suppurativa-a comprehensive review. J Clin Med. 11 (23), 7240(2022).
  21. Zouboulis, C. C., Hou, X., Von Waldthausen, H., Zouboulis, K. C., Hossini, A. M. Hs 3d-seboskin model enables the preclinical exploration of therapeutic candidates for hidradenitis suppurativa/acne inversa. Pharmaceutics. 15 (2), 619(2023).
  22. Koumaki, D., et al. Antimicrobial resistance trends in hidradenitis suppurativa lesions. J Clin Med. 13 (14), 4246(2024).

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Herprints en machtigingen

Toestemming aanvragen om de tekst of afbeeldingen van dit JoVE-artikel te hergebruiken

Toestemming aanvragen

Trefwoorden

Huidmicrobioomanaerobe pathogenenisolatie van bacteri le soortenmicrobi le dysbiosehuidaandoeningengramnegatieve anaerobenhuidcommensalen16S rRNA sequencing
Video binnenkort beschikbaar

Gerelateerde artikelen