Methodenartikel

Snelle detectie van virulentie en typering van Helicobacter pylori met behulp van Quantum Dot-labeltechnologie

DOI:

10.3791/67792

⸱

13 juni 2025

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Laboratory Medicine, Guangdong Provincial People's Hospital (Guangdong Academy of Medical Sciences), Southern Medical University

* These authors contributed equally

In dit artikel

Samenvatting

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Van de talrijke diagnostische methoden voor Helicobacter pylori kan kwantumdot-immunofluorescentie Helicobacter pylori snel typen en detecteren, wat een basis vormt voor klinische behandelingsbeslissingen. Dit artikel geeft een gedetailleerde inleiding tot de toepassingswaarde van quantum dot-technologie bij de typering en detectie van Helicobacter pylori.

Samenvatting

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

We presenteren een methode op basis van quantum dot-labelingtechnologie voor het snel detecteren van de virulentie van Helicobacter pylori en het uitvoeren van typering, met als doel de beperkingen van conventionele diagnostische methoden te overwinnen en een basis te bieden voor gepersonaliseerde klinische behandeling. Er is een kit ontworpen met behulp van de sandwichmethode met dubbel antigeen. Dit omvatte een reeks nauwgezette stappen, waaronder het opzetten van bufferreactiesystemen en het uitvoeren van activerings- en koppelingsprocessen voor antigeen-antilichaamreacties tijdens de voorbereiding van de kit. Daarnaast waren er specifieke procedures voor het verzamelen, verwerken en testen van monsters om de infectiestatus en het virulentietype van Helicobacter pylori te bepalen. Door datamodellen op te zetten voor verschillende resultaten (negatief, type II en type I) werd de effectiviteit van de quantum dot-technologie bij typedetectie geverifieerd. In het geval van negatieve monsters waren er zwakke of geen significante signaalwaarden in relevante detectiegebieden. Voor type II-monsters werd een specifiek patroon van positieve en negatieve signaalwaarden voor verschillende antilichamen waargenomen, en voor type I-monsters werd een afzonderlijke reeks positieve signaalwaarden genoteerd die overeenkwamen met de belangrijkste antilichamen. Bovendien heeft de toepassing ervan in onderzoeken met betrekking tot chronische gastritis en maagkanker de waarde ervan aangetoond als screeningsindicator. De op quantum dot gebaseerde methode heeft voordelen zoals verbeterde gevoeligheid en specificiteit in vergelijking met traditionele diagnostische methoden. Het wordt echter ook geconfronteerd met uitdagingen, zoals mogelijke gevolgen van de opslagtijd van monsters en relatief hoge kosten. Desalniettemin wordt verwacht dat het, met voortdurende technologische innovaties, in de toekomst een belangrijkere rol zal spelen op biomedisch gebied voor de detectie van Helicobacter pylori en de diagnose van gerelateerde ziekten.

Inleiding

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Helicobacter pylori (H. pylori) is een Gram-negatieve bacterie die voorkomt tussen het pylorusslijmvlies en de submucosa van het maagantrum 1,2. In 1994 classificeerde de Wereldgezondheidsorganisatie/het Internationaal Agentschap voor Kankeronderzoek (WHO/IARC) het als kankerverwekkend van klasse I. Afhankelijk van of ze vacuolaire cytotoxine A (VacA) en cytotoxine-gerelateerde gen A (CagA) toxinen tot expressie brengen, worden ze onderverdeeld in twee typen: type I H. pylori-infectie virulente stam: virulenter en schadelijker voor patiënten. Nauw verwant aan de incidentie van maag- en darmzweren en maagkanker, omvat Type II H. pylori-infectie stammen met een lage virulentie met een zwakke pathogeniteit, die zich over het algemeen manifesteert als milde indigestie 3,4. Onderzoekers hebben ontdekt dat het infectiepercentage van type I hoger is dan dat van type II, waarbij de infectiepercentages van type I en type II respectievelijk 72.4% en 27.6% zijn5. Snelle detectie van H. pylori-typen, vooral het onderscheid tussen type I en type II, is cruciaal voor klinische behandeling en ziektepreventie.

Chronische gastritis veroorzaakt door H. pylori-infectie kan leiden tot ernstige aandoeningen van het spijsverteringsstelsel, zoals atrofische gastritis, maagzweer, adenocarcinoom van de maag en slijmvliesgeassocieerd lymfoïde weefsel (MALT) lymfoom bij geïnfecteerde patiënten 6,7,8. De Global Burden of Disease Study van 2014 voorspelt dat vanaf 2010elk jaar ongeveer 3,5 sterfgevallen per 100.000 mensen zullen worden veroorzaakt door maagzweren. Uit onderzoeksrapporten bleek dat bijna 800.000 nieuwe gevallen van maagkanker wereldwijd in 2018 verband hielden met H. pylori-infectie 10. In de afgelopen jaren hebben studies aangetoond dat H. pylori-infectie ook nauw verwant is aan neurologische aandoeningen, hart- en vaatziekten, diabetes, enz. H. pylori-infectie is een wereldwijd probleem voor de volksgezondheid geworden. Daarom is een nauwkeurige detectie van H. pylori-infectie belangrijk voor de detectie van gerelateerde ziekten. Behandeling is cruciaal, waardoor nauwkeurige detectie van H. pylori een onderzoekshotspot is.

Aangezien het infectiepercentage van H. pylori hoog is in China, is tijdige en nauwkeurige detectie van H. pylori-infectie nuttig voor vroege detectie en behandeling en heeft het een positieve betekenis voor de preventie en behandeling van maagkanker. Er zijn verschillende methoden voor het detecteren van H. pylori-infectie, waaronder invasieve methoden zoals snelle ureasetest (RUT), gekleurde microscopie van delen van maagslijmvliesweefsel, endoscopie en C13- of C14-ureumademtest. (UBT), H. pylori ontlastingsantigeentest (SAT) en andere niet-invasieve methoden 11,12,13. Deze detectiemethoden hebben bepaalde beperkingen. Het histologisch onderzoek kan bijvoorbeeld vals-negatieve resultaten opleveren vanwege de kwaliteit en grootte van het biopsiemonster dat op de biopsieplaats is geselecteerd; de ademtest kan worden beïnvloed door het recente gebruik van antibiotica of protonpompremmers (PPI) door de patiënt en de invloed van verschillende beïnvloedende factoren 11,14,15. Gezien de beperkingen van traditionele methoden, zoals tijdrovende en onvoldoende gevoeligheid en specificiteit, heeft de ontwikkeling van snelle diagnostische methoden op basis van quantum dot immunofluorescentie (QD-IF) een groot toepassingspotentieel laten zien op het gebied van bioassays16,17. QD-IF-analyse introduceert quantum dot fluorescerende sondes om specifieke detectie van moleculaire doelen te bereiken door specifieke binding aan moleculaire doelen18,19.

Quantum dots zijn halfgeleider nanodeeltjes met een straal kleiner dan of dicht bij de Bohr-excitonstraal, meestal 1 tot 10 nm. Quantum dots worden gebruikt als fluorescerende sondes. Fluorescentiesignalen worden gegenereerd door opwindende kwantumdots en kwantitatieve gegevens worden verkregen door het apparaat te meten. De voordelen zijn onder meer een breed scala aan excitatiegolflengten, smalle emissiegolflengten, instelbare fluorescentiegrootte, hoge gevoeligheid, goede optische stabiliteit, lange fluorescentielevensduur, grote Stokes-verschuiving en hoge kwantumfluorescentie-efficiëntie. Quantum dots overwinnen de tekortkomingen van andere markers, zoals een korte luminescentietijd, nauwkeurige omgevingsvereisten, slechte herhaalbaarheid, slechte stabiliteit (zoals fluorescerende kleurstoffen), enzyminactivatie en lage gevoeligheid. Quantum dot fluorescentie immunoassay combineert de voordelen van quantum dot fluorescentie immunoassay en biomarker fluorescentie immunoassay en heeft de voordelen van eenvoud, snelheid, hoge specificiteit en hoge gevoeligheid20,21.

Traditionele diagnostische hulpmiddelen voor de detectie van H. pylori, waaronder bacteriecultuur, ureumademtest en serologische tests, hebben hun eigen beperkingen. Bacteriecultuur is tijdrovend en vereist strikte laboratoriumomstandigheden, wat vaak resulteert in een relatief lage gevoeligheid als gevolg van de kieskeurige groeivereisten van H. pylori. De ureumademtest kan onder bepaalde omstandigheden vals-negatieve resultaten opleveren, zoals recent gebruik van antibiotica of protonpompremmers 22,23,24. Serologische tests kunnen in sommige gevallen alleen blootstelling in het verleden aangeven in plaats van de huidige infectiestatus, en ze missen het vermogen om onderscheid te maken tussen verschillende virulentietypen van de ziekteverwekker.

Quantum Dot Immunofluorescentie (QD-IF)-technologie daarentegen is naar voren gekomen als een veelbelovend alternatief. QD-IF combineert de uitstekende optische eigenschappen van quantum dots, zoals hoge fluorescentie-intensiteit, smalle emissiespectra en goede fotostabiliteit, met de specificiteit van immunologische reacties. Dit maakt een snelle en gevoelige detectie van H. pylori-antigenen of antilichamen in biologische monsters mogelijk. Bovendien heeft het het unieke voordeel dat het in staat is om tegelijkertijd het virulentietype van de infecterende stam te identificeren, wat traditionele methoden moeilijk kunnen bereiken. Door deze leemte in het diagnostische proces op te vullen, heeft QD-IF-technologie een groot potentieel om een revolutie teweeg te brengen in de manier waarop we H. pylori-infecties diagnosticeren en behandelen, waardoor meer gepersonaliseerde en effectieve medische interventies mogelijk worden.

Over het algemeen is er een dringende klinische behoefte aan een niet-invasieve, effectieve diagnostische methode die H. pylori-infectie en zijn virulentietypen (type I en type II) tegelijkertijd kan detecteren. Dit artikel heeft tot doel de QD-IF-methode te gebruiken om de aanwezigheid van H. pylori-infectie in weefselmonsters te evalueren en een snelle en nauwkeurige methode te construeren voor het detecteren van H. pylori-infectietypes . Snelle detectie van H. pylori-infectie en zijn virulentietypes is van groot belang voor het bereiken van precisiegeneeskunde, het verbeteren van de behandelingseffecten, het verminderen van het risico op gerelateerde ziekten en het voorkomen van maagkanker. Het biedt een wetenschappelijke theoretische basis voor klinisch personeel om nauwkeurige detectiemethoden voor H. pylori-infectie te kiezen.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Deze studie (KY2025-191-01) werd uitgevoerd in overeenstemming met de richtlijnen van de ethische commissie voor menselijk onderzoek van het Guangdong Provincial People's Hospital (Guangdong Academy of Medical Sciences), Southern Medical University. Dit artikel voldoet aan de aanvraag voor vrijstelling van geïnformeerde toestemming.

OPMERKING: Deze studie heeft tot doel kwantumdot-technologie te gebruiken om een kit te ontwerpen en te ontwikkelen om te diagnosticeren of de bloedsoorten van de deelnemers Helicobacter pylori urease (Urease)-antilichamen, vacuolaire cytotoxine A (VacA)-antilichamen en cytotoxine-gerelateerde gen A (CagA) ) toxine-antilichamen bevatten om te bepalen of H. pylori is geïnfecteerd en of de geïnfecteerde stam type I of type II is. Deze ontworpen kit maakt gebruik van een sandwichmethode met dubbel antigeen om Helicobacter pylori Urease-antilichamen, CagA-antilichamen en VacA-antilichamen te meten. Wanneer het testmonster met de doelstof aan het monsterkussen wordt toegevoegd, stroomt het via sifonwerking door het kwantumkussen en het membraan, waardoor een vastefase-antigeen-antilichaamcomplex wordt gevormd. Na het spotten worden respectievelijk de detectielijn en de massa gelezen door de analysator. De signaalwaarde van de controlelijn wordt gebruikt om de negatieve en positieve status van het Uase-antilichaam, CagA-antilichaam en VacA-antilichaam te bepalen op basis van de T/C-signaalwaarden van elk van de drie antilichamen. Het ontwerpschema wordt weergegeven in figuur 1.

figure-protocol-1
Figuur 1: Schematisch diagram van de H. pylori-typetestkaart . De figuur geeft de structuur en samenstelling van de testkaart weer. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.

1. Voorbereiding van de kit

  1. Oprichting van QDs-2-(n-morfine) ethaansulfonzuur (MES) bufferreactiesysteem
    1. Breng de oorspronkelijke QD-oplossing in evenwicht met kamertemperatuur (RT). Aspireer vervolgens 1000 μL en voeg een gelijk volume 2x MES-oplossing toe (de uiteindelijke MES-concentratie was 10 mmol/L).
    2. Meng, schud en sonificeer gedurende 30 s tot 3 min.
  2. Activering
    1. Voeg 20 mg/ml 1-ethyl-3- (3-dimethylaminopropyl)carbodiimide (EDC)/N-hydroxysuccinimide (NHS) toe aan het QDs-MES-buffersysteem in een verhouding van 10:1. Meng, schud en sonificeer het gedurende 3 minuten.
    2. Plaats de bereide oplossing gedurende 15 minuten in een waterbad van 37 °C en centrifugeer gedurende 20 minuten bij 13.000 × g .
    3. Verwijder het bovenstaande uit de gecentrifugeerde oplossing en los het opnieuw op met 1x MES-oplossing. Blaas de oplossing herhaaldelijk met een pipet, schud het om het gelijkmatig te mengen en sonificeer het gedurende 3 minuten.
    4. Plaats de bovenstaande oplossing gedurende 15 minuten in een waterbad van 37 °C en centrifugeer gedurende 20 minuten bij 13.000 × g .
  3. Koppeling
    1. Voeg 0,03 mg Urease-antigeen, CagA-antigeen, VacA-antigeen en geitenanti-muis IgG toe aan 1000 μL van de activeringsoplossing, pipetteer de punt herhaaldelijk, schud en sonificeer gedurende 3 min.
    2. Doe de bovenstaande oplossing in een waterbad van 37 °C en laat gedurende 3 uur reageren.
  4. Sluiting en opslag
    1. Voeg 100 μl blokkeeroplossing toe (aanvullende tabel 1) en incubeer gedurende 1 uur.
    2. Centrifugeer de geblokkeerde oplossing gedurende 15 minuten bij 13.000 × g .
    3. Verwijder het bovenstaande uit de gecentrifugeerde oplossing, voeg 750 μl reconstitutieoplossing toe (aanvullende tabel 1), pipetteer, schud en sonificeer herhaaldelijk gedurende 5 minuten en bewaar bij 4 °C.

2. Voorbereiding van gecoate platen

  1. Bereiding van kwantumpads
    1. Verdun het met quantum dot gelabelde H. pylori-antigeencomplex 1:5 met een quantum dot-verdunningsbuffer om de vereiste hoeveelheid te bereiden op basis van de batchproductie.
    2. Neem het kwantumkussen en spuit met behulp van een filmspuit gelijkmatig een bepaalde hoeveelheid H. pylori-antigeencomplex met het kwantumdot-label op het kussen en droog het gedurende 30 minuten bij 37 °C.
  2. Membraan voorbereiding
    1. Gebruik de afdrukbuffer om de controlelijn en de coatingmaterialen van de testlijn te verdunnen en bereid de vereiste hoeveelheid voor op basis van het batchproductievolume.
    2. Plak het nitrocellulosemembraan op de plaat van polyvinylchloride (PVC), gebruik een filmkrasgouden sproeier om de kwaliteitscontrolelijn en testlijnmaterialen gelijkmatig op het membraan te coaten en droog gedurende 24 uur bij 57 °C.

3. Vergadering

  1. Plak de kwantum- en monsterpads achtereenvolgens op de met film beklede PVC-plaat.

4. In reepjes snijden

  1. Gebruik een stripsnijder om het geassembleerde grote bord in teststrips te snijden.

5. Binnenverpakking

  1. Voltooi de verpakking volgens de samenstellingsvereisten van de kit.
    NOTITIE: De componenten van de kit zijn als volgt: (i) Testkaart: Deze bestaat uit een teststripomhulsel en een teststrip. De teststrip bestaat uit een PVC-plaat, een monsterkussen, een kwantumpad (een antigeencomplex gelabeld met kwantumdots; het complex bevat Urease-antigeen, CagA-antigeen, VacA-antigeen en muis IgG), een nitrocellulosemembraan (het detectiegebied is gefixeerd met VacA-antigeen, CagA-antigeen en Urease-antigeen (recombinante antigeen eukaryote expressie), en het kwaliteitscontrolegebied is gecoat met geitenanti-muis IgG (geitenpoly-antilichaam)), en absorberend papier. Verschillende verpakkingsspecificaties hebben verschillende hoeveelheden testkaarten. Voor het reagens van één persoon is één testkaart nodig. (ii) SD-kaart: 1 stuk/doos. Testkaart en beveiligde digitale (SD) kaartcomponenten uit verschillende batches testkits mogen niet worden gemengd.

6. Verwerking van monsters

OPMERKING: Raadpleeg voor het verzamelen van monsters de operationele procedures van het National Clinical Laboratory.

  1. Verzamel bloed in een separatiegelbuisje. Zorg ervoor dat hemolyse wordt voorkomen.
  2. Test het afgescheiden serummonster binnen 4 uur bij kamertemperatuur (RT). Als het niet op tijd kan worden getest, bewaar het monster dan gedurende 3 dagen bij 2-8 °C. Voor lange termijn (binnen 1 jaar), afsluiten en bewaren onder -20 °C.
  3. Herstel de samples naar RT en meng ze grondig voor gebruik.
    OPMERKING: Bevroren en ontdooide monsters moeten voor gebruik volledig zijn ontdooid en het aantal vries-dooicycli mag niet langer zijn dan vijf. Herhaalde bevriezing van ontdooide monsters kan ertoe leiden dat de analyt verslechtert en moet worden vermeden. Ernstige chylus- en hemolysemonsters hebben ook invloed op de test en moeten worden vermeden.

7. Procedure voor de test

  1. Haal de reagenskit en kwaliteitscontrolematerialen eruit om in evenwicht te komen met RT.
  2. Voorbereiding van het monster: Centrifugeer de volbloedmonsters bij 1467 g gedurende 10 minuten.
  3. Controleer of het lotnummer van de SD-kaart overeenkomt met dat van de reagensset. Plaats de SD-kaart in het instrument voor automatische kalibratie.
  4. Schakel het instrument en de operationele computer in. Start de aangewezen software en selecteer de testmodule . Kies Initialisatie-instellingen om het instrument te initialiseren en wacht tot het klaar is.
  5. Ga naar het reagensgebied van het instrument en verwijder de sleuf van de testkaart. Open de reagenskit en selecteer het gewenste aantal testkaarten.
  6. Open de foliezakjes van de testkaarten en plaats ze in de gleuf volgens de aangegeven richting. Plaats de kaartsleuf terug in het reagensgebied van het instrument.
  7. Kwaliteitscontrole (QC) testen
    1. Selecteer in de testmodule de optie Handmatige invoer. Klik op Informatie-invoer en voer de specifieke QC-materiaalinformatie in. Klik op Genereren. Plaats de QC-materialen in het daarvoor bestemde monsterrek en zorg voor de juiste volgorde en oriëntatie.
    2. Klik op Test starten om QC-testen te starten. De monsternaald van het instrument zuigt 80 μl van het monster op en doseert het verticaal in de monsterput. Het instrument begint automatisch met timen na het doseren van het monster. Na 15 minuten voert het instrument detectie uit, leest de meetwaarden en voert de resultaten uit.
  8. Voorbeeldtesten: Selecteer in de testmodule de optie Bidirectionele LIS. Plaats de te testen monsters in het daarvoor bestemde monsterrek en zorg voor de juiste volgorde en oriëntatie. Klik op Test starten. Het instrument zal op dezelfde manier 80 μL monster van elk opzuigen en deze identiek verwerken aan het QC-proces.
  9. Zodra het testen is voltooid, verwijdert u de gebruikte testkaarten uit het instrument en gooit u ze weg als medisch afval.

8. Kwaliteitscontrole

  1. H. pylori negatief: Controleer en zorg ervoor dat de resultaten van Helicobacter pylori-negatieve referentieproducten, namelijk Urease-antilichaam, CagA-antilichaam en VacA-antilichaam, allemaal negatief zijn.
  2. H. pylori type II-infectie: Controleer en zorg ervoor dat het referentieproduct Helicobacter pylori type II, dat wil zeggen het Urease-antilichaam, positief is en dat de resultaten van het CagA-antilichaam en het VacA-antilichaam allemaal negatief zijn.
  3. H. pylori type I-infectie: Controleer en zorg ervoor dat het referentieproduct van Helicobacter pylori type I, d.w.z. Urease-antilichaam, positief is, CagA-antilichaam en/of VacA-antilichaam, positief is.

9. Analyse van de resultaten

  1. Type II-infectie met zwakke of niet-toxigene stammen: Wanneer de Urease-antilichaammeting positief is en de CagA-antilichaam- en VacA-antilichaammetingen negatief zijn, interpreteer dit dan als een infectie met een zwakke of niet-toxigene H. pylori-stam .
  2. Type I-infectie met hoogpathogene toxineproducerende stammen: Wanneer de Urease-antilichaammeting positief is, en ofwel het CagA-antilichaam ofwel de VacA-antilichaamwaarde positief is, of beide positief zijn, interpreteer het dan als een infectie met een hoogpathogene H. pylori-toxineproducerende stam.
  3. Negatief: Wanneer de metingen van het Urease-antilichaam, het CagA-antilichaam en het VacA-antilichaam allemaal negatief zijn, interpreteer het dan als geen infectie met H. pylori-stammen .
  4. Ongeldig: Wanneer het instrument het resultaat als ongeldig beoordeelt, controleer dan op onjuiste werking of storing in de reagenskit en probeer de procedure opnieuw.

10. Kalibratie van de fluorescentie-analysator

  1. Zet eerst de analysator aan en laat hem ongeveer 15 minuten opwarmen om de prestaties te stabiliseren. Plaats vervolgens de door de fabrikant verstrekte kalibratiestandaard in de monsterhouder.
  2. Ga vervolgens naar de kalibratiefunctie op de interface van de analysator en start het proces. De analysator detecteert automatisch de fluorescentie van de standaard en past de interne parameters dienovereenkomstig aan om overeen te komen met de vooraf ingestelde referentiewaarden.
  3. Verwijder daarna de kalibratiestandaard en plaats een leeg monster om te controleren of de metingen binnen het acceptabele bereik liggen.
  4. Door deze stappen regelmatig te herhalen volgens het aanbevolen schema, blijft de nauwkeurigheid van de analysator behouden voor betrouwbare metingen.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Resultaten

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Figuur 2 toont het werkingsprincipe van de quantum dot fluorescentie immunoanalyzer. Het bestaat voornamelijk uit een excitatielichtbron, een ontvangende lichtbron, een foto-elektrische conversiecircuitmodule, een signaalverwerkingscircuit, een AD-waardeconversiecircuit en een signaalverwerkingsberekeningsmodule; De excitatielichtbron genereert fluorescerende markeringen. Het absorbeert monochromatisch licht met een vergelijkbare golflengte, en het monochrom...

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Discussie

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

De huidige diagnostische methoden voor Helicobacter pylori zijn voornamelijk onderverdeeld in twee categorieën: invasief en niet-invasief26. Methoden zoals snelle ureasetest (RUT), histologie, moleculaire biologie en bacteriecultuur hebben beperkingen op het gebied van invasiviteit, gevoeligheid, specificiteit, tijdsdruk, kosten, apparatuurvereisten, monsterbehandeling en realtime monitoring. Gebruikelijker zijn snelle in-vitrodiagnostiek met beh...

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Openbaarmakingen

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

De auteurs verklaren geen belangenconflicten.

Dankbetuigingen

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Dit onderzoek werd gefinancierd door het Guangdong Provincial Basic and Applied Basic Research Fund Project (Grant No.: 2021A1515220022, 2022A1515220023).

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Materialen

Lijst van materialen gebruikt in dit artikel
NaamBedrijfCatalogusnummerOpmerkingen
1-(3-dimethylaminopropyl) -3-ethylcarbodiimide hydrochloride(EDC)Sigma25952-53-85 g/fles
2-(n-morfine) eethaansulfonzuur (MES)Sigma145224-94-8100 g/fles
CentrifugeSigma3K15
Fluorescentie Immuno AnalyzerGuangzhou Labsim Biotech Co.,LtdGuangdong Provincie Medisch Apparaat Registratienummer 2017221743
Helicobacter pylori Type Test Kit Chongqing iSIA BIO-Technology Co., LtdNationaal medisch apparaat registratienummer 20203400330QDs Immunofluorescence Methode
Natriumzout van N-hydroxythiosuccinimide (NHS)Sigma106627-54-71 g/fles

Referenties

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Tacconelli, E., et al. research and development of new antibiotics: WHO priority list of antibioticresistant bacteria and tuberculosis. Lancet Infect Dis. 18 (3), 318-327 (2018).
  2. Kamboj, A. K., et al. Helicobacter pylori: past, present, and future of treatment. Mayo Clin Proc. 92 (4), 599-604 (2017).
  3. Yamaoka, Y. Disease mechanisms: Helicobacter pylori virulence factors. Nat Rev Gastroenterol Hepatol. 7 (11), 629-641 (2010).
  4. Sharndama, H. C., Mba, I. E. Helicobacter pylori: an updated overview on its virulence and pathogenesis. Braz J Microbiol. 53 (1), 33-50 (2022).
  5. Lin, Y., et al. Infection status of type I and type II Helicobacter pylori in areas with high incidence of gastric cancer and its impact on gastrin and pepsinogen levels. World J Gastroenterol. 26 (25), 3673-3685 (2020).
  6. Li, Y. H., et al. Global prevalence of Helicobacter pylori infection from 1980 to 2022: a systematic review and metaanalysis. Lancet Gastroenterol Hepatol. 8 (6), 553-564 (2023).
  7. Karbalaei, M., Keikha, M. Rescue effect of lactobacillicontaining bismuth regimen on Helicobacter pylori treatment failure. New Microbiol New Infect. 42, 100904(2021).
  8. Malfertheiner, P., et al. Helicobacter pylori infection. Nat Rev Dis Primers. 9 (1), 19(2023).
  9. Stewart, B., et al. Global burden of disease requiring emergency surgery. Br J Surg. 101 (1), e9-e22 (2014).
  10. de Martel, C., et al. The global burden of cancer attributable to infection in 2018: a global incidence analysis. Lancet Glob Health. 8 (2), e180-e190 (2020).
  11. Godbole, G., et al. Review: diagnosis of Helicobacter pylori infection. Helicobacter. 25 (S1), e12735(2020).
  12. Lee, Y. C., et al. Diagnosis and treatment of Helicobacter pylori infection. Annu Rev Med. 73 (1), 183-195 (2022).
  13. Fischbach, W., Malfertheiner, P. Helicobacter pylori infection. Ger Int Med J. 115, 429-436 (2018).
  14. Zhang, C., et al. Survey on the quantitative detection of serum Helicobacter pylori antibodies in clinical laboratories in my country. J Clin Lab Anal. 36 (1), e24069(2021).
  15. Wan, W. S., et al. Improving the detection rate of Helicobacter pylori in chronic gastritis biopsies: a comparative analysis of H&E, methylene blue, WarthinStarry, immunohistochemistry, and quantum dot immunohistochemistry. Front Oncol. 13, 1229871(2023).
  16. Bodo, J., et al. Quantitative in situ detection of phosphoproteins in fixed tissues using quantum dot technology. J Histochem Cytochem. 57 (7), 701-708 (2009).
  17. Chen, C., et al. Quantum dotbased immunofluorescence technology for quantitative determination of HER2 expression in breast cancer. Biomaterials. 30 (15), 2912-2918 (2009).
  18. Kuang, H., et al. Recent developments in quantum dot analytical applications. TrAC Trends Anal Chem. 30 (10), 1620-1636 (2011).
  19. Park, Y., et al. Medically transformable quantum dots for biosensing and imaging. J Photochem Photobiol C Photochem Rev. 30, 51-70 (2017).
  20. SanmartinMatalbobs, J., et al. Semiconductor quantum dots as target analytes: properties, surface chemistry and detection. Chem Detect Nanomaterials. 12 (14), 2501(2022).
  21. Katan, C., Mercier, N., Even, J. Quantum and dielectric confinement effects in lowerdimensional hybrid perovskite semiconductors. Chem Rev. 119 (5), 3140-3192 (2019).
  22. Chinese Medical Association Branch of Health Management. Physical examination population 13C expert consensus on technical specifications for urea breath tests. Health Exam Manag. 2 (2), 94-96 (2021).
  23. National Clinical Medical Research Center for Digestive Diseases. Expert consensus on clinical application of Helicobacter pyloriurea breath test (2020). Chin J Health Manag. 14 (2020), 510-513 (2020).
  24. Zhang, Y., et al. The influence factors of Helicobacter pylori infection were detected by urea breath test. Chin J Clin Gastroenterol. 32 (3), 197-202 (2020).
  25. Lin, B., et al. Diagnostic value of gastric function triad and Helicobacter pylori typing in chronic gastritis and gastric cancer. Labeled Immunoassays Clin Med. 30 (1), 74-76 (2023).
  26. Cardos, A. I., et al. Evolution of diagnostic methods for Helicobacter pylori infection: from traditional tests to hightech, advanced sensitivity and identification tools. Diagnostics. 12 (508), 1-23 (2022).
  27. Ding, S. Z., et al. Chinese consensus report on familybased Helicobacter pylori infection control and management (2021 edition). Gut. 71 (2), 238-253 (2021).
  28. Wan, W., et al. Comparison of quantum dot immunofluorescence histochemistry and conventional immunohistochemistry in detecting Helicobacter pylori infection in paraffinembedded tissue of gastric biopsy. J Mol Histol. 52, 461-466 (2021).
  29. Zhou, Y., et al. Development of a fast and sensitive doubleantigen sandwich lateral flow immunoassay based on quantum dot nanobeads and its clinical performance in detecting SARSCoV2 total antibodies. Sens Actuators B Chem. 343, 130139(2021).
  30. Liu, H., et al. Consistency analysis of highsensitivity cardiac troponin I in peripheral blood and venous blood using quantum dot immunofluorescence method and its clinical application in acute myocardial infarction. J Chest Dis. 14 (4), 1267-1274 (2022).
  31. Xirong, W., et al. Development of quantum dotbased lateral flow immunoassay test strips for rapid and sensitive detection of SARSCoV2 neutralizing antibodies. Sci Rep. 13, 22253(2023).
  32. Purwidyantri, A., et al. Programmable graphenebased microfluidic sensor for DNA detection. Sens Actuators B Chem. 367, 132044(2022).
  33. Lee, K. S., Wagner, M., Stocker, R. Ramanbased sorting of microbial cells to link functions to their genes. Microb Cell. 7 (3), 62-65 (2020).
  34. Hu, C., et al. Design and fabrication of carbon dots for energy conversion and storage. Chem Soc Rev. 48 (8), 2315-2337 (2019).

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Herprints en machtigingen

Toestemming aanvragen om de tekst of afbeeldingen van dit JoVE-artikel te hergebruiken

Toestemming aanvragen

Trefwoorden

Detectie van Helicobacter Pylorivirulentietypingantigeen antilichaambindingimmunochromatografische reagentiadubbele antigeensandwichscreening op chronische gastritisbiomarkers voor maagkankerreceiver operating characteristicdiagnostische sensitiviteit

Gerelateerde artikelen