Methodenartikel

Unilaterale longvolumeanalyse met behulp van micro-CT voor verbeterde beoordeling van longfibrose in preklinische modellen

DOI:

10.3791/67837

⸱

20 juni 2025

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1State Key Laboratory of Respiratory Diseases, National Clinical Research Center for Respiratory Diseases, Guangzhou Institute of Respiratory Health, the First Affiliated Hospital of Guangzhou Medical University, 2Guangzhou National Laboratory, 3Second Department of Elderly Respiratory, Guangdong Provincial People's Hospital (Guangdong Academy of Medical Sciences), Southern Medical University, Guangdong Provincial Geriatric Institute

* These authors contributed equally

In dit artikel

Samenvatting

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Hier presenteren we een protocol om micro-computertomografie (micro-CT) te gebruiken om geventileerde gebieden te kwantificeren in een unilateraal bleomycine-geïnduceerd longfibrosemodel via intratracheale instillatie aan de laesiezijde.

Samenvatting

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Longfibrose (PF) is een progressieve en onomkeerbare interstitiële longziekte die wordt gekenmerkt door een slechte prognose en beperkte behandelingsopties. Het traditionele muismodel van longfibrose geïnduceerd door intratracheale instillatie van bleomycine kan leiden tot een ongelijke verdeling van geneesmiddelen en hoge sterftecijfers. De verfijnde unilaterale intratracheale instillatiemethode voor toediening van bleomycine bij muizen maakt het mogelijk om een meer uniform en gecontroleerd longfibrosemodel te creëren, wat een betere simulatie van de ziekte bij mensen oplevert. Hier presenteren we een protocol om micro-computertomografie (micro-CT) te gebruiken om geventileerde gebieden te kwantificeren in een unilateraal bleomycine-geïnduceerd longfibrosemodel via intratracheale instillatie aan de laesiezijde. Deze benadering maakt het mogelijk om het totale longvolume en de geventileerde longgebieden te kwantificeren, wat een gevoelige en nauwkeurige meting van ziekteprogressie en behandelingsrespons oplevert. Deze studie omvat anesthesie, nauwkeurige toediening van geneesmiddelen, micro-CT-scans en nabewerking met behulp van 3D Slicer-software voor beeldanalyse. De unilaterale longvolumeanalyse na behandeling met bleomycine toonde een significante vermindering van het longvolume aan in vergelijking met controles. De trichrome kleuring van Masson bevestigde de aanwezigheid en verhoogde afzetting van collageen bij de met BLM behandelde muizen. Hierin evalueerden we longfibrose in preklinische modellen door eenzijdige longvolumetrische analyse uit te voeren met behulp van micro-CT, waardoor onderzoekers een nauwkeurige en grondige beoordelingsmethode kregen voor het evalueren van therapeutische interventies in PF-studies.

Inleiding

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Longfibrose (PF) is een verwoestende en onomkeerbare longziekte met beperkte behandelmethoden. De wereldwijde incidentie van PF varieert van 1 tot 13 per 100.000 personen, waarbij een significante toename van de prevalentie wordt waargenomen bij het vorderen van de leeftijdvan 1 jaar. Ondanks aanzienlijke inspanningen in de afgelopen decennia blijft het therapeutische landschap voor PF beperkt, met slechts twee antifibrotische middelen, nintedanib en pirfenidon, die momenteel zijn goedgekeurd voor de behandeling van PF2. De onderliggende pathogenese van longfibrose is zeer complex en omvat verschillende aspecten van moleculaire en cellulaire fysiologie3. Experimentele in vivo diermodellen, geïnduceerd door verschillende agentia, zijn momenteel essentiële instrumenten voor het onderzoeken van pathogene mechanismen en ziektefenotypes.

Het door bleomycine geïnduceerde longfibrose-muismodel, toegediend via intratracheale instillatie, wordt uitgebreid erkend voor het ophelderen van de onderliggende cellulaire en moleculaire mechanismen en voor het identificeren van potentiële therapeutische doelen4. De asymmetrische en niet-selectieve distributie van intratracheaal ingedruppeld bleomycine kan echter leiden tot hoge sterftecijfers, voornamelijk als gevolg van inhomogene fibrose en bilateraal longletsel 5,6. Om dit probleem aan te pakken, hebben we een unilaterale intratracheale toedieningsbenadering voorgesteld om een gelijkmatige toediening van experimentele middelen in de linkerlong te garanderen en om het pathologische proces dat wordt waargenomen bij PF-patiënten beter na te bootsen 7,8,9. Bovendien kan de unilaterale toedieningstechniek ook worden gebruikt om geneesmiddelen te evalueren die gelokaliseerde distributie vereisen of voor andere experimentele interventies gericht op een specifieke long.

In preklinische modellen is microcomputertomografie (micro-CT) steeds waardevoller geworden voor het onderzoeken van longpathologieën en heeft het bewezen een krachtig hulpmiddel te zijn voor longitudinale studies, dat in staat is om kwalitatieve en kwantitatieve gegevens te verstrekken om de ziekteprogressie en de respons op therapie-interventies te volgen10. Micro-CT is gebruikt om het totale volume, geventileerde en niet-geventileerde gebieden, bronchiale morfologie en weefseldichtheid te evalueren. Op basis van onze eerdere studies hebben we een nieuwe beeldvormingsmethode ontwikkeld waarbij micro-CT werd gebruikt om het unilaterale longvolume te analyseren en de fibroseniveaus te beoordelen in een muizenmodel van longfibrose 7,8,9. Deze methode maakt het mogelijk om beluchte longgebieden te kwantificeren, wat een nauwkeurigere en gevoeligere maatstaf biedt voor ziekteprogressie en respons op behandeling.

Deze studie introduceert een unilaterale beademde longvolumeanalysemethode die is afgeleid van micro-CT-scans bij muizen die met bleomycine zijn behandeld. Deze innovatieve methode biedt een nauwkeurigere en uitgebreidere beoordeling van longfibrose, waardoor de manier waarop we de werkzaamheid van therapeutische interventies in preklinische studies evalueren, mogelijk verandert. Deze studie draagt bij aan een uitstekende verfijning in de analyse van preklinische longfibrosemodellen en biedt een krachtige kwantitatieve analysemethode voor het beoordelen van behandelingseffecten naast ziekteprogressie.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Alle dierproeven werden goedgekeurd door het Animal Care and Use Committee van de Guangzhou Medical University. De experimenten werden uitgevoerd op 6-8 weken oude, 25-30 g mannelijke C57BL/6 muizen. Muizen werden gehuisvest onder een 12-uurs licht/donkercyclus (licht: 25 lux) met ad libitum toegang tot voedsel en water en werden willekeurig toegewezen aan controle- en BLM-groepen.

1. Unilaterale pulmonale intratracheale instillatie

  1. Verdoving C57BL/6 mannelijke muizen (6-8 weken oud, 25-30 g) met een intraperitoneale injectie van 1% pentobarbitalnatrium (50 mg/kg).
  2. Bewaak het anesthesieniveau door de ademhalingsfrequentie en de terugtrekkingsreflex van de ledematen te observeren.
  3. Zet de muis in rugligging vast op een plastic plank onder een hoek van 70°-90°, in bedwang gehouden door de snijtanden en ledematen.
  4. Gebruik een steriele tang met stompe uiteinden om de tong voorzichtig terug te trekken.
  5. Steek een op maat gemaakte 22 G stompe naald in de luchtpijp met behulp van een laryngoscoop voor kleine dieren om de epiglottis- en orofarynxstructuren te visualiseren. Draai het bord tegen de klok in tot -70° om de linker hoofdbronchiën evenwijdig aan de hoofdbronchiën uit te lijnen. Beweeg de naald vooruit totdat u weerstand voelt.
    OPMERKING: Meet de katheterlengte vooraf met behulp van een oefenmuis van vergelijkbare grootte om een optimale inbrenglengte te garanderen.
  6. Draai snel in een hoek van 30° en infuseren met 40 μL bleomycineoplossing (0,02 mg). Verwijder de naald.
  7. Houd de muis ten minste 30 seconden in positie om een goede distributie van het geneesmiddel te garanderen.
  8. Laat de muis liggend op een verwarmende deken liggend bijkomen.

2. Micro-computertomografie (micro-CT) scannen

OPMERKING: Muizen zijn gescand met behulp van het micro-CT-systeem volgens de instructies van de fabrikant.

  1. Voer een micro-CT-scan uit op muizen gedurende 3 weken na instillatie van bleomycine.
  2. Voeg een geschikte hoeveelheid isofluraan toe aan de verdamper van het gasanesthesieapparaat voor kleine dieren, zet de verdamper aan, stel de inductieconcentratie in op 3% en plaats de muizen in de inductiebox totdat ze de flip-flop-reflex verliezen en een langzame, diepe ademhaling vertonen.
  3. Haal de muizen uit de inductiebox en leg ze in rugligging op de scantafel, zodat de muizen hun ledematen gestrekt hebben en hun lichaam langs de middellijn is uitgelijnd.
  4. Stel de isofluraanonderhoudsconcentratie in de scantabel in op 1%.
  5. Stel de Micro-CT-scanmodus in: transversaal gezichtsveld 43 mm, resolutie 2K x 2K, pixelgrootte 0,042 mm, plakdikte 0,042 mm.
  6. Leg de muizen na het scannen op een verwarmende deken totdat ze wakker worden.

3. Micro-CT nabewerking: Unilaterale selectieve longsegmentatie en volumeanalyse

OPMERKING: Beeldverwerking en kwantitatieve analyse zijn uitgevoerd met behulp van de gratis, open-source software 3D Slicer (http://www.slicer.org), volgens de instructies van de fabrikant. Klinische Hounsfield Unit (HU)-bereiken voor het longvenster werden toegepast om HU-beelden te normaliseren, waarbij het longparenchym werd gesegmenteerd in normo-beluchte gebieden ([-1000, -350] HU) zoals eerder gerapporteerd 8,9,11. De procedure voor beeldverwerking wordt als volgt beschreven:

  1. Open de 3D-slicer. De operationele interface wordt geïllustreerd in figuur 1.
  2. Klik op Laden om beeldgegevens in DICOM-indeling te importeren. Axiale, coronale en sagittale beelden worden weergegeven in de hoofdinterface (Figuur 2).
  3. Pas de parameters aan die betrekking hebben op de sagittale weergave zoals weergegeven in afbeelding 3 (optioneel). (1: toon verborgen opties; 2: kies voor het hernoemen van het huidige volume; 3: voer een nieuwe naam in).
  4. Klik in de module Segmenteditor op Toevoegen om een segmentatie te maken voor selectieve longanalyse (rechterlong) (Afbeelding 4) (1: Volumes; 2: Segmenteditor; 3: Segment toevoegen; 4: Drempelwaarde instellen; 5: Drempelbereik aanpassen; 6: Gebruiken voor maskeren; 7: Bolpenseel instellen).
  5. Pas het drempelbereik aan op [-1000, -350] HU en schakel de optie Gebruiken voor maskering in.
  6. Gebruik het gereedschap Verf met een bolpenseel om de gewenste longgebieden te segmenteren.
  7. Selecteer de tool Eiland en kies Geselecteerd eiland behouden. Markeer de rechterlong en klik vervolgens op 3D weergeven om het 3D-model weer te geven in het visualisatievenster (Afbeelding 5) (1: Eilanden bewerken (verbonden componenten); 2: Kies 'Geselecteerd eiland behouden'; 3: 3D-model weergeven).
  8. Wijzig in het deelvenster Terminologie de kleur van het 3D-model in blauw (optioneel).
  9. Herhaal stap 3.4-3.6 voor de linkerlong. Verwerk de axiale thorax-CT-beelden laag voor laag om het beademde linkerlongvolume te berekenen en een 3D-model te maken (Figuur 6).
  10. Verander de kleur van het 3D-linkerlongmodel in geel (optioneel).
  11. Stel de troebelheid van de segmentatie van de rechterlong in op 0,2.
  12. Exporteer het 3D-model naar wens (Afbeelding 7).
  13. Maak schermafbeeldingen van de 3D-weergave of segment-afbeeldingen en sla ze op (Afbeelding 8) (1: Annotatieschermafbeelding; 2: Kies het formaat van de afbeelding; 3: Wijzig het opslagpad).
  14. Gebruik de module Segmentstatistiek om het longvolume (mm3) voor elk segment te berekenen en een kwantitatieve analyse van normo-beluchte gebieden uit te voeren (Figuur 9).

figure-protocol-1
Figuur 1: De interface van 3D Slicer software. De afbeelding geeft de belangrijkste operationele interface van de 3D Slicer-software weer. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.

figure-protocol-2
Figuur 2: CT-beelden van longfibrose geïnduceerd door unilaterale intratracheale instillatie bij muizen. Axiale, coronale en sagittale weergaven, samen met 3D-longreconstructie na instillatie van bleomycine. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.

figure-protocol-3
Afbeelding 3: Aanpassing van de parameter voor de sagittale weergave. De figuur illustreert de aanpassing van parameters, waardoor nauwkeurige visualisatie en analyse mogelijk zijn. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.

figure-protocol-4
Figuur 4: Segmentatie bewerken en parameteraanpassingen. De afbeelding toont het proces van segmentatiebewerking en de bijbehorende parameteraanpassingen. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.

figure-protocol-5
Figuur 5: 3D-segmentatie van de rechterlong. Het proces omvat drie opeenvolgende stappen: het bewerken van verbonden componenten voor longsegmentatie (stap 1), het selecteren van Geselecteerd eiland behouden om de rechterlong te isoleren (stap 2) en het klikken op 3D weergeven om het model in het visualisatievenster weer te geven (stap 3). Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.

figure-protocol-6
Figuur 6: 3D-reconstructie van de linkerlong op basis van micro-CT-analyse. Axiale thorax-CT-beelden werden laag voor laag verwerkt om beluchte gebieden te segmenteren, het geventileerde volume te kwantificeren en een 3D-model te reconstrueren. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.

figure-protocol-7
Figuur 7: 3D longreconstructie op basis van micro-CT analyse van beademd longvolume in een unilateraal longfibrosemodel. Gereconstrueerde modellen werden in gespecificeerde formaten geëxporteerd naar vooraf gedefinieerde mappen. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.

figure-protocol-8
Afbeelding 8: Handleiding voor het opslaan van afbeeldingen. De afbeelding geeft een overzicht van de opeenvolgende stappen voor het opslaan van afbeeldingen, beginnend met het starten van de opslagfunctie via het menu Annotation Screenshot tot het selecteren van formaten en het definiëren van opslagpaden. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.

figure-protocol-9
Figuur 9: Statistische analyse op basis van micro-CT in een unilateraal longfibrosemodel. Kwantitatieve gegevens afkomstig van normo-beluchte gebieden werden geanalyseerd. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.

4. Masson's trichoomkleuring

  1. Fixeer het longmonster een nacht met 4% paraformaldehyde bij kamertemperatuur (RT), dehydrateer met behulp van een graduele ethanolreeks en bedring in paraffine. Bereid plakjes met een dikte van 5 μm voor met een roterende microtoom.
  2. Voer de trichrome kleuring van Masson op de secties als volgt uit.
    1. Spoel de gedeparaffineerde en gerehydrateerde delen af in gedestilleerd water, gevolgd door een beitsbehandeling in voorverwarmde Bouin Fluid bij 56-60 °C gedurende 1 uur of een nacht bij RT.
    2. Vlek de secties na het wassen 10 minuten met Weigert's ijzerhematoxylineoplossing, spoel ze 10 minuten onder stromend warm kraanwater en dompel ze 10-15 minuten onder in Biebrich scharlakenzuurfuchsineoplossing.
    3. Bereik differentiatie met behulp van fosfomolybdisch-fosfotenzuuroplossing gedurende 10-15 minuten en controleer totdat collageenrijke gebieden overgaan van rood naar helder.
    4. Breng de dia's vervolgens 5-10 minuten direct over op een anilineblauwe oplossing, spoel ze af in gedestilleerd water en differentieer ze in 1% azijnzuuroplossing gedurende 2-5 minuten.
    5. Na dehydratatie door middel van graduele ethanol (95% tot absolute alcohol) en xyleenklaring, monteert u de secties met een harsachtig medium.

5. Masson's trichrome kleuring machine learning-analyse

  1. Beoordeel histopathologisch de analyse van de collageensamenstelling in controle- en met bleomycine behandelde longen met behulp van Masson's Trichrome-kleuring.
  2. Om waarnemer-afhankelijke vooroordelen te verminderen, verkrijgt u digitale beelden met hoge resolutie van gekleurde longsecties met behulp van een beeldscanner voor hele dia's.
  3. Analyseer vervolgens de collageengebieden kwantitatief met geautomatiseerde software orbit beeldanalyse 8,9,12. Het trainingsproces wordt hieronder kort beschreven.
    1. Definieer handmatig verschillende representatieve annotaties voor elke weefselcategorie (bijv. collageen, normaal weefsel en fibrotisch weefsel). Gebruik de geëxtraheerde pixelgewijze functies uit geannoteerde trainingsregio's om de trainingsset voor de ondersteuningsvectormachine (SVM) samen te stellen.
    2. Definieer voor met Masson gekleurde secties weefselclassificatie in drie categorieën: collageen, normaal weefsel en achtergrond.
      OPMERKING: Het machine learning-model ondergaat iteratieve training op hele dia's (WSI's) door middel van herhaalde annotatie en verfijning totdat door pathologen gevalideerde evaluaties de nauwkeurige weefselcategorisatie bevestigen. Zodra een bevredigende classificatienauwkeurigheid is bereikt, wordt het proces volledig geautomatiseerd: kenmerken worden uit elke pixel geëxtraheerd binnen geldige interessegebieden (ROI's), en de SVM voorspelt vervolgens de bijbehorende weefselcategorie met hoge precisie.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Resultaten

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Figuur 10A-D toont de resultaten van de veranderingen in het longvolume en de kleuringsanalyse.

Om de impact van bleomycine (BLM) op longweefsel te beoordelen, hebben we een vergelijkende analyse uitgevoerd van de longvolumes tussen met zoutoplossing behandelde groepen (Ctrl) en met BLM behandelde groepen met behulp van 3D-beeldvormingstechnieken. Het volume van de linkerlong is significant vermin...

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Discussie

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Longfibrose is een verwoestende ziekte die wordt gekenmerkt door de progressieve littekenvorming van longweefsel, wat leidt tot een afname van de longfunctie en uiteindelijk ademhalingsfalen1. Het longfibrose-muismodel, geïnduceerd door verschillende farmacologische middelen en toedieningsmethoden, is een essentieel hulpmiddel voor het begrijpen van ziekteprogressie en het evalueren van de werkzaamheid van potentiële therapieën, met name bij intratracheale instill...

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Openbaarmakingen

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

De auteurs verklaren geen belangenconflicten.

Dankbetuigingen

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Dit werk werd ondersteund door subsidies van de National Natural Science Foundation of China (82300092) en Independent Research of State Key Laboratory of Respiratory Diseases (SKLRD-Z-202302) en Funding for Innovation Capacity Building Project van Guangdong Provincial Research Institutes (KD032024001).

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Materialen

Lijst van materialen gebruikt in dit artikel
NaamBedrijfCatalogusnummerOpmerkingen
0.9% zoutoplossingHopebioHBPP008-100
22G stompe naaldBD383922
3D Slicer beeldbewerkingsplatform3D Slicer https://www.slicer.org/
BleomycineMCEHY-17565
IsofluraanRWDR510-22
Masson Stain KitYeasen60532ES58
Micro-CTPinsengSNC-100
OrbitOrbit Image analysishttps://www.orbit.bio/
Pentobarbital natriumSigmaP3761
Laryngoscoop voor kleine dierenYuyan InstrumentsCG-02M
SPSSIBMVersie 19.0 
Warme dekenLab Anim TechLAT-16-0323

Referenties

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Podolanczuk, A. J., et al. Idiopathic pulmonary fibrosis: state of the art for 2023. Eur Respir J. 61 (4), 2200957(2023).
  2. Raghu, G., Selman, M. Nintedanib and pirfenidone: new antifibrotic treatments indicated for idiopathic pulmonary fibrosis offer hopes and raises questions. Am J Respir Crit Care Med. 191 (3), 252-254 (2015).
  3. Moss, B. J., Ryter, S. W., Rosas, I. O. Pathogenic mechanisms underlying idiopathic pulmonary fibrosis. Annu Rev Pathol. 17, 515-546 (2022).
  4. Kolb, P., et al. The importance of interventional timing in the bleomycin model of pulmonary fibrosis. Eur Respir J. 55 (6), 1901105(2020).
  5. Jenkins, R. G., et al. An official American Thoracic Society workshop report: use of animal models for the preclinical assessment of potential therapies for pulmonary fibrosis. Am J Respir Cell Mol Biol. 56 (5), 667-679 (2017).
  6. Wu, Z., et al. Integrating network pharmacology, experimental validation and molecular docking to reveal the alleviation of Yinhuang granule on idiopathic pulmonary fibrosis. Phytomedicine. 128, 155368(2024).
  7. Liao, S., et al. Direct intrabronchial administration to improve the selective agent deposition within the mouse lung. J Vis Exp. (147), e59450(2019).
  8. Fu, Z., et al. Therapeutic effects of fatty acid binding protein 1 in mice with pulmonary fibrosis by regulating alveolar epithelial regeneration. BMJ Open Respir Res. 10 (1), e001568(2023).
  9. Song, S., et al. Intracellular hydroxyproline imprinting following resolution of bleomycin-induced pulmonary fibrosis. Eur Respir J. 59 (5), 2100864(2022).
  10. Pennati, F., et al. Micro-CT-derived ventilation biomarkers for the longitudinal assessment of pathology and response to therapy in a mouse model of lung fibrosis. Sci Rep. 13 (1), 4462(2023).
  11. Choi, E. J., et al. Serial micro-CT assessment of the therapeutic effects of rosiglitazone in a bleomycin-induced lung fibrosis mouse model. Korean J Radiol. 15 (4), 448-455 (2014).
  12. Yang, P., et al. Comprehensive analysis of fibroblast activation protein expression in interstitial lung diseases. Am J Respir Crit Care Med. 207 (2), 160-172 (2023).
  13. Liu, T., De Los, S. F., Phan, S. H. The bleomycin model of pulmonary fibrosis. Methods Mol Biol. 1627, 27-42 (2017).
  14. Ruscitti, F., et al. Longitudinal assessment of bleomycin-induced lung fibrosis by micro-CT correlates with histological evaluation in mice. Multidiscip Respir Med. 12, 8(2017).
  15. Vande, V. G., et al. Longitudinal micro-CT provides biomarkers of lung disease that can be used to assess the effect of therapy in preclinical mouse models, and reveal compensatory changes in lung volume. Dis Model Mech. 9 (1), 91-98 (2016).
  16. Buccardi, M., et al. A fully automated microCT deep learning approach for precision preclinical investigation of lung fibrosis progression and response to therapy. Respir Res. 24 (1), 126(2023).
  17. Ferrini, E., et al. A new anesthesia protocol enabling longitudinal lungfunction measurements in neonatal rabbits by microCT. Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 321 (6), L1206-L1214 (2021).
  18. Jensen, M., et al. 3D whole body preclinical microCT database of subcutaneous tumors in mice with annotations from 3 annotators. Sci Data. 11 (1), 1021(2024).
  19. Lai, R., et al. The longitudinal and regional analysis of bleomycininduced pulmonary fibrosis in mice by microcomputed tomography. Heliyon. 9 (5), e15681(2023).

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Herprints en machtigingen

Toestemming aanvragen om de tekst of afbeeldingen van dit JoVE-artikel te hergebruiken

Toestemming aanvragen

Trefwoorden

Micro CT beeldvormingunilaterale bleomycine3D SlicerlongsegmentatiecollageendepositieMassons trichroomgeventileerde longgebieden

Gerelateerde artikelen