Deze studie toonde aan dat gentiopicroside cholestatische leverbeschadiging kan behandelen door de productie en het metabolisme van galzuren en lipiden te beheersen en oxidatieve stress en ontstekingsreacties te voorkomen.
Een abonnement op JoVE is vereist om deze inhoud te bekijken. Log in of start vandaag met uw gratis proefperiode.
Onderzoeksartikel
Deze studie toonde aan dat gentiopicroside cholestatische leverbeschadiging kan behandelen door de productie en het metabolisme van galzuren en lipiden te beheersen en oxidatieve stress en ontstekingsreacties te voorkomen.
Van het primaire actieve bestanddeel van Swertia chirayita, gentiopicroside (GPS), is aangetoond dat het de lever beschermt in gevallen van cholestase. Om het beschermende mechanisme van GPS op cholestatische leverbeschadiging op te helderen, werden HepG2-cellen behandeld met chenodeoxycholzuur (CDCA) om de cholestase-omgeving in vitro te simuleren, en werd de CCK-8-methode gebruikt om het beschermende effect van GPS op HepG2-cellen te bepalen. Met behulp van een biologische kit werd de inhoud van intracellulaire TBA, T-CHO, TG, ALP, ALT, AST, GSH, IL-1β, IL-6, TNF-α, SOD en MDA gedetecteerd. Confocale lasermicroscopie werd gebruikt om het niveau van ROS te bevestigen. De expressies van HepG2-cellen van SHP-2, Tgr5, CYP7A1 en NTCP werden beoordeeld met behulp van immunofluorescentie en Western blot-analyse. Vervolgens werd de Autodock-software gebruikt om de moleculaire docking van de belangrijkste actieve ingrediënten te verifiëren. De bevindingen toonden aan dat GPS de schade die CDCA aan HepG2-cellen veroorzaakte, aanzienlijk voorkwam. Dit beschermende effect kan zijn bereikt door de productie en het metabolisme van galzuren en lipiden in de cel te beheersen en oxidatieve stress en ontstekingsreacties te voorkomen.
De metabolische plaats van het spijsverteringsstelsel van het lichaam is de lever. Galafscheiding is een belangrijk mechanisme in het vetkatabolismeproces van het hepatobiliaire systeem. De primaire bestanddelen van gal, galzuren, worden afgegeven door levercellen en zijn cruciaal voor het behoud van het evenwicht van het vetmetabolisme. Voor zowel gezonde personen als zieke gevallen zijn de fysiologische en pathologische processen van de lever afhankelijk van de balans van vrije en geconjugeerde galzuren in de lever. Als dit evenwicht wordt verstoord, zal de galzuurcirculatie niet normaal functioneren, wat kan leiden tot intrahepatis....
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Celcultuur en behandeling
HepG2-cellen en MEM-media werden gekocht bij een commerciële verkoper. HepG2-cellen werden gekweekt in MEM-media aangevuld met 10% FBS, 1% 100 E/ml penicilline en 100 E/ml streptomycine, bij 37 °C en 5% CO2 atmosfeer. Na celadhesie werden de kweekmedia vervangen. De cellen werden na 2-3 dagen in een verhouding van 1:3 gekweekt en ze werden in het experiment gebruikt zodra de celcultuur 80% samenvloeiing bereikte.
Test op de levensvatbaarheid van cellen
Op dag 1 werden cellen gezaaid op 2 x 104 HepG2-cellen (2 x 105<....
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
De concentratie van CDCA werd voor experimenten ingesteld op 0 μM, 20 μM, 40 μM, 60 μM, 80 μM en 100 μM. Wanneer de concentratie van CDCA 60 μM was, was de celactiviteit significant anders dan die van de controlegroep, en ten slotte werd 60 μM gebruikt als de concentratie van CDCA (Figuur 1A). De resultaten toonden aan dat er na incubatie gedurende 24 uur na toediening van het geneesmiddel geen significant verschil in celactiviteit was tussen elke groep en d.......
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
CLI is een leverziekte die wordt veroorzaakt door de obstructie van galvorming, secretie of uitscheiding. Het manifesteert zich klinisch als jeuk, osteoporose en ontwikkelt zich zelfs tot leverfibrose, cirrose en andere ziekten, die het leven en de gezondheid ernstig in gevaar brengen 36,37,38. UDCA wordt erkend als het meest gebruikte geneesmiddel bij de behandeling van CLI39<.......
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
De auteurs hebben niets te onthullen.
Dit werk wordt ondersteund door de Natural Science Foundation van de provincie Sichuan (2024NSFSC0697), Joint Innovation Fund Project van de Chengdu University of Traditional Chinese Medicine (LH202402015).
Bijdrage van de auteur:
Caitong Wu: Methodologie, formele analyse, datacuratie, het schrijven van het originele concept en schrijven en redigeren. Yang Xiao: Conceptualisering, onderzoek, visualisatie en validatie. Fuhan Fan: Validatie en bewerking. Zhangli Lei, Xianhua Zhou en Xianli Meng: Redactie en vertaling. Yong Zeng, Hou Ya en Peng Shen: conceptualisering, methodologie, validat....
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
| Naam | Bedrijf | Catalogusnummer | Opmerkingen |
|---|---|---|---|
| ALP | Nanjing Jiancheng Bioengineering Institute | A059-2-2 | |
| ALT | Nanjing Jiancheng Bioengineering Institute | C009-2-1 | |
| AST | Nanjing Jiancheng Bioengineering Institute | C010-2-1 | |
| BCA | Boster Biological Technology Co., Ltd | AR0146 | |
| CDCA | Chengdu Medesheng Technology Co., Ltd | 474-25-9 | |
| cell counting kit-8 | Boster Biological Technology Co., Ltd | AR1160-500 | |
| Cytochrome P450 7A1 Antibody | Abmart Shanghai Co.,Ltd. | TD2612S | |
| DAPI | Beyotime Biotechnology | C1005 | |
| DMSO | Boster Biological Technology Co., Ltd | PYG0040 | |
| Goat Anti-Rabbit IgG (H&L) | Chengdu Zen-Bioscience Co., Ltd. | 511202 | |
| Goat Anti-Rabbit IgG AF488 | Abmart Shanghai Co.,Ltd. | M21012M | |
| GPS | Chengdu Medesheng Technology Co., Ltd | RP210717 | |
| GSH | Nanjing Jiancheng Bioengineering Institute | A006-2-1 | |
| HepG2 cells | Procell Life Science & Technology Co., Ltd | CL-0103 | |
| HRP Goat Anti-Rabbit IgG | Wuhan ABclonal Biotechnology Co., Ltd. | AS014 | |
| IL-1β | Elabscience Biotechnology Co., Ltd | E-EL-H0149c | |
| IL-6 | Elabscience Biotechnology Co., Ltd | E-EL-H6156 | |
| MDA | Nanjing Jiancheng Bioengineering Institute | A003-1-2 | |
| MEM base medium | Procell Life Science & Technology Co., Ltd | PM150410 | |
| PBS | Boster Biological Technology Co., Ltd | PYG0021 | |
| Rapid Transfer Buffer (20×) | NCM Biotech | WB4600 | |
| RIPA | Boster Biological Technology Co., Ltd | BL651A | |
| ROS | Beyotime Biotechnology | S0033S | |
| SHP2 Rabbit pAb | Wuhan ABclonal Biotechnology Co., Ltd. | A12486 | |
| SLC10A1 Antibody | Abmart Shanghai Co.,Ltd. | PU276166S | |
| SOD | Nanjing Jiancheng Bioengineering Institute | A001-3-1 | |
| TBA | Nanjing Jiancheng Bioengineering Institute | E003-2-1 | |
| T-CHO | Nanjing Jiancheng Bioengineering Institute | A111-1-1 | |
| TG | Nanjing Jiancheng Bioengineering Institute | A110-1-1 | |
| TGR5 Polyclonal Antibody | ImmunoWay Biotechnology Company | YT4636 | |
| TNF-α | Elabscience Biotechnology Co., Ltd | E-EL-H0109c | |
| Trypsin solution (0.25%) | Yeasen Biotechnology (Shanghai) Co., Ltd | 40126ES60 | |
| UDCA | Chengdu Lemetian Medical Technology Co., Ltd | DSTDX007601 | |
| β-Actin Rabbit mAb | Wuhan ABclonal Biotechnology Co., Ltd. | AC026 |
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Dit artikel is gepubliceerd
Video binnenkort beschikbaar